胃肠道类癌中p27kip1、PCNA表达及p16基因缺失

目的 :探讨 p2 7kip1 、PCNA及 p1 6与胃肠道类癌转移的关系。 方法 :采用免疫组化SABC法检测 2 5例胃肠道类癌组织中p2 7kip1 和PCNA蛋白表达 ,同时用PCR法检测 p1 6基因的缺失情况。 结果 :p2 7kip1 在胃肠道类癌阳性表达率为 64 % (1 6/ 2 5) ,PCNAⅠ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级表达率分别为 56 %、44 %。 2种蛋白阳性表达率与分化程度无相关性 (P >0 0 5) ,与淋巴结转移相关 (P <0 0 5)。p2 7kip1 与PCNA表达负相关。p1 6基因纯合性缺失率为 48% (1 2 / 2 5) ,其缺失率与类癌分化程度和淋巴结转移无关。结论 :p2 7kip1 低表达、PCNA高表达与胃肠道类癌转移有关 ,胃肠道 ;类癌的发生与p1 6基因缺失有关 ,但可能为早期分子事件。     

p27kip1、p16蛋白和增殖细胞核抗原在鼻咽癌中的表达及其意义

目的 研究p27^kip1、p16蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达,探讨它们之间的关系及其与．NPC生物学行为及预后的相关性。方法应用免疫组织化学EnVision两步法检测66例鼻咽非角化性癌(NKC)组织和25例鼻咽黏膜慢性炎症(NP)组织中p27^kip1、p16蛋白及PCNA表达水平。结果(1)．NKC组织中p27^kip1、p16阳性表达率分别为65％、68％;与NP组比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。(2)＜、p16蛋白在NKC中的表达与NKC颅神经侵犯及治疗后5年生存率有关(P＜0．05),与临床分期、淋巴结转移无关(P＞0．05);PCNA表达与．NKC临床分期及治疗后5年生存率有关(P＜0．05),与淋巴结转移、颅神经侵犯无关(P＞0．05)。(3)p27^kip1、p16及PCNA阳性表达之间有相关性(P＜0．05)。结论检测p27^kip1、p16蛋白及PCNA有助于综合评估NKC的预后。     

流式细胞术测定食管癌中PCNA、p27的表达

目的 探讨细胞周期调控蛋白PCNA、p27在食管癌中的表达以及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术定量检测65例食管鳞状细胞癌上PCNA、p27蛋白的表达强弱(用荧光指数FI表示)。结果 PCNA在低分化型(G3)鳞癌上的表达量明显高于分化型(G1，G2)鳞癌(P=0．0002)；p27在低分化型鳞癌上的表达量明显低于分化型鳞癌(P=0．0042)。PCNA与p27呈负相关。该两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。结论 PCNA、p27的表达强弱与食管癌的分化密切相关。     

卵巢上皮性肿瘤中Skp2、p27kipl、E-cad的表达

目的检测Skp2、p27kipl和E-cad在卵巢上皮性肿瘤中的表达情况及其相互关系。方法采用免疫组化SP法，检测99例卵巢上皮性肿瘤组织中Skp2、p27kipl及E-cad的表达。结果p27kipl在卵巢良性肿瘤、交界性肿瘤的表达率分别为76．5％、70．6％高于卵巢癌29．2％（P〈0．05），在早期癌中的表达高于晚期癌（P〈0．05）。Skp2在卵巢良性肿瘤、交界性肿瘤的表达率分别为0、23．5％，均低于卵巢癌50．8％（P〈0．05），在早期癌的表达低于晚期癌（P〈0．05）。卵巢癌中skp2表达与组织分化有关，在低分化癌的阳性表达率高于高分化癌（P〈0．05），在组织学类型方面，浆液性癌中skp2的阳性表达率高于非浆液性癌（P〈0．05）。E—cad在良性肿瘤、交界性肿瘤和卵巢癌表达率分别为88．2％、82．4％、55．4％，恶性组低于良性组（P〈0．05）。E—cad在早期癌的表达率高于晚期癌（P〈0．05）。Skp2表达与p27kipl表达呈负相关（P〈0．05），E-cad表达与p27kipl表达呈正相关（P〈0．05），而E-cad表达与Skp2表达则呈负相关（P〈0．05）。结论skp2过度表达与p27kipl表达减少可能与卵巢上皮性肿瘤的发生发展密切相关，而E-cad在晚期卵巢癌中表达降低可能反映了卵巢癌分化程度的降低。     

原发胃癌中p16和p15基因表达及甲基化异常

为检测胃癌组织中抑癌基因p16,p15及其启动子区甲基化状态和P16、P15蛋白表达情况。选择p16、p15基因及启动子区域，用PCR－SSCP、MSP（甲基化特异的PCR）和测序法对100例胃癌患者的癌组织、癌旁正常组织和5例正常组织进行检测，同时用免疫组化法检测了癌组织和正常对照组织的P16和P15的表达。结果发现癌组织p16和p15基因启动子区甲基化率显著高于癌旁正常组织和正常对照；胃癌组织中，71％的病例P16表达阴性，54％的病例具有p16基因启动子区的高甲基化，无突变和纯合缺失检出；11％的病例P15表达阴性，9％的病例具有p15基因启动子区的高甲基化，p15异常与低分化胃癌有关，p15基因内含子1和外显子1内各发现1例DNA序列改变；癌组织中p16和p15基因启动子区甲基化与其蛋白表达密切相关。结果显示p16基因启动子区域高甲基化是胃癌中p16基因失活的关键因素之一，并在胃癌的发生发展中发挥重要作用；p15基因启动子区域高甲基化在胃癌中起一定作用。     

胃肠道类癌中Ki-67、PCNA、Laminin的表达及意义

目的 研究胃肠道类癌Ki-67、PCNA、laminin(LN)的表达与侵袭性和增殖性的关系。方法 应用免疫组织化学S-P法检测36例胃肠道类癌组织中3种指标的表达。结果 36例胃肠道类癌组织中Ki～67、PCNA、LN阳性表达率分别为50．o％、55．5％、55．5％；随肿瘤分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移，各指标阳性表达率逐渐升高。结论 Ki-67、PC-NA可作为评估胃肠道类癌预后的指标。Ki-67比PCNA在评价胃肠道类癌增殖性方面更准确；PCNA免疫染色反应性较敏感，其类癌诊断的阳性标准应适当提高。LN的表达可预测胃肠道类癌组织的分化、浸润及转移能力。     

乳腺癌p糖蛋白和nm23蛋白免疫组化研究

目的：按摩乳腺癌患者的ｐ糖蛋白表达与生存率、ｎｍ２３抑制癌转移基因与淋巴结转移之间的关系。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法，观察随访１０年以上的乳腺癌组织中ｐ糖蛋白和ｎｍ２３蛋白的表达。结果：ｐ糖蛋白和ｎｍ２３的阳性表达率分别为３６．５０％和９５．１２％。ｐ糖蛋白的阳性表达率仅与乳腺癌患者生存率有关（Ｐ〈０．０１），１０年以上较低，而与乳腺癌组织学分型，组织学分级，临床分期、淋巴结转移等无明显相关（Ｐ〉     

大肠癌组织p14ARF与p53基因变异研究

目的：观察大肠癌组织p14ARF基因遗 传和表观遗传变化及p53基因突变状况，探讨两者改变的关系及p14ARF-p53通路功能 破坏在大肠癌发生中的作用。方法：应用PCR、直接测序、甲基化特异PC R和RT-PCR分别检测56例原发性大肠癌及相应癌旁正常组织p14ARF基因纯合性缺失、 突变、5′CpG岛甲基化、mRNA表达及p53基因突变状况。结果：①大肠 癌组织p14ARF总变异率为27% (15/56)，其中1例纯合性缺失，14例5′CpG岛甲基化,未见突变发生。②15例p14ARF基因变异的大肠癌组织其相应mRNA表达阴性（13例）或 低水平表达（2例），41例未发生基因变异的大肠癌组织和所有癌旁正常组织p14ARF mRNA均显示明显表达。③大肠癌组织p53突变率为48% (27/56)。④56例大肠癌组织中，12例 仅发生p14ARF变异，24例仅显示p53突变，3例同时有p14ARF 5′CpG岛甲基化 和p53突变，17例p14ARF和p53均无变异，p14ARF-p53通路总变异率为70%（39/ 56），p14ARF 5′CpG岛高甲基化与野生型p53状态有关（P＜0.05）。⑤低分化 腺癌组p14ARF变异率（44%，7/16）明显高于高中分化腺癌组（20%，8/40）（P＜ 0.05），但两组间p53突变率无显著差异（P＞0.05）。结论:①大肠癌p14ARF基因5′ CpG岛高甲基化是其表达失活的主要机制；②大肠癌p14 ARF基因高甲基化与p53基因突变可能是相互独立的事件，两者的失活可能各自出现于不同 的大肠癌亚组中；③p14ARF高甲基化或p53突变引起的p14ARF-p53通路功能 破坏在大肠癌的发生中具有重要作用。     

p21WAF1基因表达对人骨肉瘤预后的价值

目的 探讨骨肉瘤组织中p21^WAF1基因的表达与骨肉瘤生物学特性及预后的关系。方法 采用原位杂交及免疫组织化学（LSAB法）检测p21^WAF1mRNA及p21蛋白在45例骨肉瘤、10例骨纤维结构不良实体瘤组织标本的表达。结果 （1）p21蛋白阳性表达率在骨肉瘤中为17．7％（8／45）;（2）骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21蛋白阳性表达率之间的差异有统计学意义（40．0％,11．4％,X^2=4．34,P〈0．05）;（3）p21^WAF1mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为42．2％（19／45）,骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21^WAF1mRNA阳性表达率之间的差异有统计学意义（60．0％,37．1％,X^2=20．6,P〈0．01）;（4）p21^WAF1mRNA表达阳性者术后生存时间高于表达阴性者术后生存时间（P〈0．05）。结论 （1）随着骨肉瘤恶性度的升高,p21^WAF1基因mRNA及p21蛋白的表达下降。（2）p21WAF1基因mRNA在骨肉瘤中的表达对评价患者的预后有一定价值。     

食管鳞状细胞癌中p16基因甲基化及其表达

目的：探讨食管鳞状细胞癌p16／INK4基因启动子区高甲基化和p16、cyclinD1蛋白表达的意义。方法：用甲基化特异性PCR（MSP）法检测p16／INK4基因启动子区的高甲基化，用免疫组织化学方法检测p16、cyclind1蛋白的表达。结果：30例食管鳞状细胞癌中7例p16免疫组织化学阳性，15例cyclinD1阳性，组织学和统计学分析显示p16与cyclinD1的表达呈负相关。4例检出p16／INK4基因启动子区高甲基化，但与p16失表达无统计学意义。结论：（1）在食管鳞状细胞癌可检出p16／INK4基因启动子区的高甲基化，而甲基化不是引起p16失表达的主要原因。（2）p16与cyclinD1的表达呈负相关，提示细胞周期调控因子之间可能存在相互影响表达的反馈机制。     

p63蛋白在食管磷状细胞癌中的表达及意义

目的检测p63蛋白在食管癌组织中的表达情况,并探讨其与食管癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测p63蛋白在53例食管磷癌及癌旁组织中的表达情况。结果p63蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为71.7%（38/53）,而在癌旁食管组织中的阳性表达率为35.8%（19/53）,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。p63蛋白的表达与食管磷癌分化程度密切相关（P〈0.05）,其在低分化磷癌中的阳性表达率（89.5%）显著高于在高分化磷癌中的阳性表达率（46.2%）。p63蛋白的表达与食管磷癌的TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均无明显相关性（P〉0.05）。结论p63蛋白在食管磷癌组织中呈高表达,表明其可能参与食管磷癌的发生发展。     

胃腺癌组织中survivin、NF-κB p65和p27的表达及其相关性

目的 探讨survivin、NF-κB p65和p27在胃腺癌组织中的表达及其相关性研究.方法 用免疫组化SP法检测73例胃腺癌及20例正常胃黏膜组织中survivin、NF-κB p65和 p27的表达情况.结果 (1) survivin 和NF-κB p65在胃腺癌中蛋白表达阳性率分别为46.6%(34/73)和58.9%(43/73),明显高于它们在正常胃黏膜组织中的阳性表达率(0,0/20)和(20%,4/20)(P均＜0.01);p27在胃腺癌中蛋白表达阳性率为41.1%(30/73),明显低于它在正常胃黏膜组织中的阳性表达率(95.0%,19/20)(P＜0.01);(2) survivin与胃腺癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈正相关(P均＜0.05),而与组织分化程度无明显相关性(P＞0.05);NF-κB p65与胃腺癌分化程度呈负相关(P＜0.05),与胃腺癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈正相关(P均＜0.05);p27与胃腺癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈负相关(P均＜0.01),与组织分化程度无关(P＞0.05);(3)胃腺癌中survivin的阳性表达率与NF-κB p65的阳性表达率呈正相关(P＜0.05),而与p27的阳性表达率呈负相关(P＜0.05); NF-κB p65与p27的阳性表达率无相关性(P＞0.05).结论 survivin、NF-κB p65和p27基因在胃腺癌的发生发展中起着不同程度的作用;联合检测survivin、NF-κB p65和p27,有助于对胃腺癌恶性程度的判定及侵袭转移能力的评估,进而为胃腺癌的预后分析和临床治疗提供依据.     

c—erbB—2和p53基因表达与胃癌浸润转移的关系

目的：探讨胃癌组织中c-erbB-2和p53基因的表达与胃癌发生和浸润转移的关系。方法：应用荧光原位杂交技术对55例胃癌的常规石蜡标本进行检测,结果：c-erbB-2和p53基因表达的阳性率分别为36．6％和45．45％,其中在肠型和弥漫型胃癌中,c-erbB-2和p53阳性率分别为51．615和16．67％,p53阳性率分别为25．81％和70．83％,两种基因在两型间的差异有显著性意义（P＜0．05）,c-erbB-2和p53基因表达与胃的组织分级有关（分别为P＜0．05及P＜0．01）c-erbB-2和p53基因表达与胃癌的浸润深度有相关性（分别为P＜0．01及＜0．05）,c-erbB-2;基因表达与胃癌的淋巴结内转移有显著性意义（P＜0．05）,结论：c-rebB-2和p53基因有助于确定胃癌的生物学行为。     

PTEN/MMAC1蛋白在42例原发性肺癌中的表达研究

目的 研究抑癌基因PTEN／MMAC1在原发性肺癌中的表达状况及其临床意义。方法 应用SP免疫组织化学方法检测42例手术切除肺癌标本PTEN的表达。结果 （1）肺癌组PTEN蛋白表达总缺失率为40．48％，小细胞癌表达缺失率75．00％，鳞癌31．58％，腺癌33．33％。肺癌细胞的分化程度不同，其PTEN表达缺失存在明显差别，高分化和低分化肺癌PTEN表达缺失率分别为13．33％，72．73％（P＜0．01）；鳞癌高分化组缺失率为12．50％，低分化组缺失率为66．67％（P＜0．05）；腺癌高分化组缺失率为14．29％，低分化组缺失率为80．00％（P＜0．05）；本组有淋巴结转移组与无淋巴结转移组缺失率分别为66．67％，25．93％，两者之间有显著差异（P＜0．01），不同的临床分期间PTEN缺失率亦有显著的差别，Ⅲa期缺失率较高。生存时间≤12月，＜60月，＞12月，≥60月，PTEN蛋白缺失率分别为71．43％，25．00％，14．29％，三者之间差异显著（P＜0．05）。结论 肺癌PTEN／MMAC1在蛋白质水平的表达缺失可能有助于其预后的判断。     

喉癌p16、p15基因纯合性缺失的研究

目的 研究p16、p15基因缺失状态与喉癌发生、发展的关系。方法 提取喉癌新鲜组织中基因组DNA，采用聚合酶链反应技术，分别对80例喉癌进行p16基因第2外显子（p16E2）和67例喉癌进行p15基因第2外显子(p15E2）纯合性缺失研究。结果 检测p16E2弛合性缺失率为12.5%(10/80)，p15E2纯合性缺失率为11.94%（8／67），p16E2、p15E2共同缺失率为5.97%（4／67）。结论 p16E2和p15E2纯合缺失以及二者共同缺失与喉癌发生有相关性，可能在喉癌发生及恶性进展中起一定作用。     

p63基因在肺癌组织中的表达

目的研究肺鳞状细胞癌、腺癌、大细胞肺癌、小细胞肺癌以及淋巴结或肺内转移性肿瘤标本组织中p63基因的mRNA转录因子和蛋白表达水平,探讨p63基因表达与其定位在3q 27-q29区域改变的关系.方法采用cDNA微阵列技术同时检测72例不同病理组织学类型的原发性肺癌(包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、小细胞癌)和肺癌肺内转移及淋巴结转移灶内的p63基因mRNA水平.另外,利用组织芯片技术构建150例原发性肺癌石蜡包埋标本组织芯片,采用免疫组织化学LSAB法检测p63基因蛋白表达情况.同时应用比较基因组杂交(CGH)技术对70例原发性肺癌标本进行了3号染色体长臂改变的分析.结果p63mRNA转录因子在肺鳞状细胞癌标本表达明显增强,与腺癌、大细胞癌、小细胞癌相比增多10倍以上.肺癌转移灶内p63基因mRNA表达水平明显高于其相对应的原发性灶,差异有统计学意义(P＜0.001).免疫组织化学染色结果显示肺鳞状细胞癌阳性表达率为94.64%;腺癌是1.79%;4例大细胞肺癌中2例为阳性染色;但所有小细胞肺癌标本免疫组织化学染色均为阴性.pT1分期肺癌的p63基因蛋白表达阳性率与pT2分期肺癌相比有统计学差异(P＜0.05).比较基因组杂交结果发现肺鳞状细胞癌3号染色体长臂27-29区域有显著的扩增,腺癌表现为缺失.鳞状细胞癌p63基因的表达增强与3q27-q29区域的显著扩增有明显正相关性(P＜0.000 1),说明定位于3号染色体长臂27-29区域的p63基因的拷贝有明显的扩增.结论p63mRNA转录因子和蛋白在肺鳞状细胞癌较其他肿瘤表达显著增高,转移灶高于原发灶;肺鳞癌p63表达增强与3号染色体长臂3q27-q29区域的扩增显著相关.     

新疆地区贲门腺癌HPV、HP感染和p53异常改变的病理生物学意义

目的了解人乳头瘤病毒（HPV）、幽门螺杆菌（HP）感染及p53突变在新疆不同民族贲门癌发生、发展中的作用。方法应用PCR技术对90例贲门腺癌（包括哈族29例,维族30例,汉族31例;癌组织高、中、低不同分化程度分别有17、55、18例）及21例切缘正常组织进行HPV16／18和HP的检测,并用免疫组化LSAB法检测以上病例的p53异常表达;同时应用上述不同方法分别检测20例胃窦部腺癌HPV16／18、HP感染和p53的表达。结果HPV16／18和HP感染及t）53在新疆贲门腺癌患者中的阳性检出率分别为34．4％（31／90）,14．4％（13／90）和73．33％（66／90）,在切缘正常组织中的检出率分别为0、0、4．76％（1／21）;它们的阳性检出率在癌和非癌组织间差异均存在显著性（P〈0．05）;哈、维、汉各民族之间HPV16／18、HP及p53的阳性率的差异均无统计学意义（P〉0．05）;HPV16／18和HP感染阳性率与贲门腺癌病理分级及淋巴结转移无明显相关（P〉0．05）;p53的阳性表达与组织分级无关（P〉0．05）,而与淋巴结转移相关（P〈0．05）;贲门腺癌患者中p53与HPV16／18和HP的感染之间未发现相关关系（P〉0．05）。胃窦部腺癌患者中HPV16／18及HP阳性检出率分别为10％（2／20）、55％（11／20）与其在贲门腺癌的阳性检出率差异有显著性（P〈0．05）,胃窦部腺癌组织中p53的阳性检出率为80％（16／20）,与其在贲门腺癌的阳性检出率差异无显著性（P〉0．05）。结论（1）HPV16／18感染和p53的异常表达在贲门癌变过程中可能具有重要的作用,而HP感染与贲门癌的发生关系不大;胃窦部HPV16／18感染率较低,而HP感染检出率较高;（2）贲门癌组织中HPV16／18、HP感染和p53的异常表达与肿瘤病理分级和民族之间均无明显相关;p53的阳性表达与淋巴结转移相关;（3）p53的异常表达与HPV16／18或HP感染在胃贲门、幽门区腺癌的发生可能均有重要作用。     

胃癌中p16INK4a基因启动子高甲基化及其蛋白表达

目的探讨胃癌中p16^INK4a基因失活的主要分子机制及其与胃癌发生、发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR技术检测62例胃癌和癌旁组织及10例慢性胃炎黏膜p16^INK4a基因启动子区CpG岛甲基化状态,用免疫组化EnVision两步法检测p16^INK4a蛋白的表达。结果62例胃癌和癌旁组织p16^INK4a基因启动子高甲基化率分别为51．6％（32／62）和19.4％（12／62）,10例正常对照胃黏膜未发现高甲基化,胃癌组织p16^INK4a基因启动子高甲基化率高于癌旁组织和正常对照（P〈0．05）。58.1％（36／62）的胃癌组织p16^INK4a蛋白表达阴性,其中72.2％（26／36）的病例具有p16^INK4a基因启动子的高甲基化,p16^INK4a基因启动子的高甲基化与其蛋白失表达密切相关（P〈0.05）。结论胃癌中p16^INK4a基因启动子的高甲基化是p16^INK4a基因失活的主要机制,并可能是胃癌发生中的早期分子事件。     

p16与ER在乳腺癌中表达的相关性

目的 探讨p16基因表达与雌激素受体（ER）的相关性,分析其在ER阴性乳腺癌中的可能应用。方法 选取常州市第一人民医院2016年5月~2018年6月手术治疗的乳腺癌石蜡标本181例为研究对象,使用免疫组织化学（SP法）分别检测乳腺癌组织中ER和p16蛋白表达,分析乳腺癌组织中p16蛋白表达与ER的关系及其与不同亚型乳腺癌临床病理参数的关系。结果p16蛋白在ER阳性和ER阴性乳腺癌组织中阳性率分别为56.19%（59/105）、35.53%（27/76）,差异有统计学意义（P＜0.05）;ER阴性乳腺癌中,p16蛋白表达与患者的淋巴结转移数、临床分期均相关（P＜0.05）,与年龄、肿块大小及组织学分级无关（P＞0.05）。结论 p16蛋白表达的缺失可能主要出现在ER阴性乳腺癌中,上调抑癌基因p16的表达有可能作为ER阴性乳腺癌一个潜在的治疗靶点,p16蛋白表达的检测也有可能成为ER阴性乳腺癌患者预后评估的一个参考指标。     

口腔鳞癌组织中p15和p21的表达分析

目的 探讨p15和p21基因的蛋白产物在口腔鳞癌中的表达及意义。 方法 采用免疫组化P-V法检测108例口腔鳞癌和10例正常口腔黏膜组织中p15和p21蛋白的表达，并将结果与临床病理指标进行统计分析。 结果 口腔鳞癌组织中p15蛋白的阳性表达率低于正常口腔黏膜组织(P<0.05)，而p21蛋白的阳性表达率两组间无明显差异(P>0.05)；口腔鳞癌中，III、IV期口腔鳞癌p15蛋白的阳性表达率明显低于I、II期口腔鳞癌的表达率（P<0.01），无颈淋巴结转移组p15蛋白表达水平比有转移组高（P<0.05）；p21阳性表达率在不同性别组中的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论 p15蛋白的表达与口腔鳞癌的临床分期及淋巴结转移有关，p15蛋白表达水平可作为临床评估口腔鳞癌恶性程度、转移和预后的参考指标。