更昔洛韦治疗特发性血小板减少性紫癜应用指征

目的探讨更昔洛韦(GCV)治疗人巨细胞病毒(HCMV)感染相关的特发性血小板减少性紫癜的(ITP)应用指征。方法选择血清HCMV DNA PCR和(或)HCMV IgM检测呈阳性ITP患儿46例,采用逆转聚合酶扩增反应(RT-PCR)检测巨核系祖细胞中HCMV晚期抗原mRNA,并行GCV治疗,判定其疗效及应用指征。结果46例血清HCMV-DNA PCR阳性和(或)血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,GCV治疗有效16例,mRNA阴性27例,GCV治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,有显著性差异(P<0.01)。结论HCMV感染的ITP患儿,若对常规治疗无效,应检测其巨核祖细胞内HCMV晚期抗原基因mRNA,阳性者是应用更昔洛韦的有效指征。     

特发性血小板减少性紫癜患儿骨髓巨细胞病毒抗原的检测及临床价值

目的探讨骨髓中人巨细胞病毒（HCMV）感染在小儿特发性血小板减少性紫癜（ITP）中的作用及机制。方法采用二步法免疫组化检测81例ITP患儿骨髓中HCMV早期抗原,并行外周血血小板计数及ELISA法检测血HCMV-IgM。结果ITP患儿骨髓HCMV阳性率（61.73%）明显高于血HCMV-IgM阳性率（20.99%）,P〈0.01;慢性ITP骨髓HCMV阳性率（92.31%）高于急性ITP（55.88%）,P〈0.05;慢性ITP血HCMV-IgM、IgG阳性率与急性ITP相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。骨髓HCMV阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）,骨髓巨核细胞数及产板型巨核细胞数与阴性组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;血HCMV-IgM阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;血HCMV-IgG阳性组的上述三项指标与阴性组相比,差异亦无统计学意义（P〉0.05）。骨髓HCMV阳性细胞数量分级与治疗前血小板计数之间无相关关系（P〉0.05）。结论HCMV感染在ITP中广泛存在,骨髓HCMV抗原的检测是评价ITP患儿HCMV感染的敏感、特异的指标;骨髓HCMV感染的ITP患儿存在病情加重、疗效不佳及慢性化的趋势;在骨髓HCMV致ITP的机制中,可能主要是影响外周免疫系统从而破坏成熟的血小板,而不是对血细胞生成的抑制。     

人巨细胞病毒对造血系统的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)对造血系统的影响及其机制。方法 采用造血祖细胞体外半固体培养技术,研究HCMV AD169株对粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFU—E)、多向造血祖细胞(CFU—Mix)及巨核系祖细胞(CFU-MK)集落生长的影响;分别用原位聚合酶链反应(IS-PCR)和聚合酶链反应(PCR)检测CFU-GM、CFU-Mix、CFU-MK及CFU-E集落细胞中的HCMV DNA;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CFU-E集落细胞中的晚期抗原(late antigen,LA)mRNA及CFU-MK集落细胞中的前早期抗原(immediate early antigen,IEA))mRNA;用免疫组化方法检测CFU—Mix集落细胞中HCMV早期蛋白P52。结果 HCMV AD169株在体外能明显抑制CFU—GM、CFU—E,CFU—Mix及CFU—MK的生长,抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;经IS-PCR或PCR检测发现病毒感染组CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK细胞中有HCMV DNA存在;RT—PCR检测发现病毒感染组CFU-MK细胞中有IEA mRNA的表达,而CFU-E细胞中的LA mRNA为阴性;免疫组化(IHC)检测发现病毒感染组CFU-Mix集落细胞中有HCMV P52的表达。结论 HCMV AD169可抑制CFU-GM,CFU-E,CFU-Mix及CFU-MK的分化和增殖;HCMV AD169对造血系统有直接损害作用。此作用可能是HCMV感染所致的粒细胞和血小板减少及贫血的原因之一。     

更昔洛韦对人巨细胞病毒感染的粒-单祖细胞体外增殖的影响

目的　探讨更昔洛韦对人巨细胞病毒 (HCMV)感染的粒 单祖细胞 (CFU GM )体外增殖的影响。方法　采用造血祖细胞体外培养技术 ,用更昔洛韦干预HCMV感染的CFU GM ,观察计数CFU GM的产率、大小、峰期及维持时间。结果　①更昔洛韦组集落产率明显高于病毒组 (P <0 0 1)。②更昔洛韦组大集落所占比例明显高于病毒组 (P <0 0 1)。③更昔洛韦组集落维持时间较病毒组延长。结论　在体外 ,更昔洛韦对HCMV感染的CFU GM的生长具有促进作用。     

人类细小病毒B19感染致特发性血小板减少性紫癜的发病机制

目的探讨人类细小病毒B19(HPVB19)感染对骨髓巨核祖细胞的影响。方法运用酶联免疫吸附试验检测HPVB19-IgM、PCR检测HPVB19VP独特区DNA。筛选出并HPVB19感染特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿。骨髓行巨核祖细胞体外培养,集落细胞计数。结果外周血HPVB19-DNA阳性及血清HPVB19IgM阳性ITP 31例患儿中,巨核祖细胞集落细胞形成减低,与正常对照组及非HPVB19感染组比较,差异有显著性。结论HPVB19可影响巨核祖细胞集落形成。     

更昔洛韦治疗异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的研究

目的　 研究更昔洛韦 (丽科伟 )对异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的临床疗效和不良反应 ,探讨预防巨细胞病毒相关性间质性肺炎的理想用药时机及方法。 方法 　 12例异基因脐血移植受者 ,在移植后出现CMV Ag阳性 ,即给予更昔洛韦治疗 ,诱导治疗 5mg/ (kg·次 ) ,IV ,q 12h ,用药 2周 ,维持治疗 5mg/ (kg·d) ,IV ,qd ,每周用药 5d ,疗程 2～ 3周。 结果 　对CMV Ag阴转比例 11/ 12 ;不良反应主要有胃肠不适、肝功能轻度异常 ,且不良反应均在停药后顺利恢复 ,无白细胞减少。 2例治疗前白细胞和血小板持续下降 ,在治疗后白细胞和血小板逐渐恢复正常。 结论 　更昔洛韦治疗异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的疗效肯定 ,不良反应轻微 ,可作为CMV IP的预防用药。     

人巨细胞病毒抑制粒-单及红系祖细胞的体外增殖及干预研究

探讨人巨细胞病毒 (HCMV)抑制脐血粒 -单系祖细胞的 (CFU GM)、红系爆式祖细胞 (BFU E)及红系祖细胞 (CFU E)的体外增殖和黄芪注射液与更昔洛韦(GCV)对此的干预作用 ,采用造血祖细胞体外培养、聚合酶链反应 (PCR)技术 ,培养、观察、计数CFU GM、BFU E及CFU E集落产率、抑制率、提高率 ,集落峰值时间和集落维持时间 ,并用PCR检测集落细胞内HCMV DNA。结果显示 :①HCMVAD169对CFU GM、BFU E及CFU E均有抑制作用 ,其抑制作用与HCMV浓度有关 ,高浓度 ( 1∶1 0 ,1 1 0 0 )感染组与对照组比较集落产率明显下降 (P <0 0 1 ) ,集落维持的时间明显缩短 (P <0 0 1 ) ,集落峰值时间无明显差异 (P >0 0 5) ,而低浓度组 ( 1∶1 0 0 0 )无此作用 ;②PCR检测发现在HCMV感染的造血祖细胞内存在HCMV DNA ;③在 1∶1 0感染组中 ,加入黄芪注射液与更昔洛韦后 ,HCMVAD169感染的CFU GM、BFU E及CFU E集落产率明显增加 (P <0 0 1 )。结论 :①造血祖细胞是HCMVAD169的宿主细胞之一 ,HCMVAD169能直接感染造血祖细胞 ;②在体外HCMVAD169对CFU GM、BFU E、CFU E的生长 ,集落形成有明显的抑制作用 ;③黄芪与更昔洛韦有抗HCMV作用 ,能促进受HCMV感染的造血祖细胞集落增殖     

血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的研究

研究人类巨细胞病毒（HCMV）感染与原发性血小板减少性紫癜（ITP）之间的关系，采用ACD抗凝外周血HCMV－DNA PCR以及非抗凝血清CMV－IgM、IgG ELISA方法，进行HCMV感染的检测。结果显示，ITP患儿组HCMV－DNA PCR阳性率为71．7％，体检儿童对照组为20．8％，P＜0．01，差异有显著性。ITP患儿组CMV－IgM阳性率为41．5％，CMV－IgG阳性率为75．5％，体检儿童对照组中未检出CMV－IgM阳性者，CMV－IgG阳性率为22．9％，P＜0．01差异有显著性。结论认为：HCMV感染与ITP密切相关，HCMV病毒是ITP致病病因中很重要的一个致病病毒，对ITP患者的实验室检测不仅需要血液学检测而且需要HCMV等病毒学检测，对HCMV活动性感染的ITP患者加用更昔洛韦，可能会很好地提高疗效。     

地骨髓转化生长因子-β1与巨核细胞转化生长因子-β1Ⅲ型受体变化在特发性血小板减少性紫癜发病中的意义

目的探讨骨髓转化生长因子-β（TGF-β1）及巨核细胞转化生长因子（TGF-β1）Ⅲ型受体（TGF-β1 RⅢ）变化在特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病中的意义。方法收集急性ITP 28例（AITP组）、慢性ITP 16例患儿（CITP组）和20例相对正常儿童骨髓；采用Percoll密度梯度及免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞；ABC-ELISA法检测TGF-β1水平；原位杂交法检测TGF-β1 RⅢ mRNA表达情况。结果AITP组与CITP组骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1 RⅢ mRNA表达均明显高于对照组（P〈0．05），且CITP组明显高于AITP组（P〈0．05）。结论检测ITP患儿骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1 RⅢ表达情况对于研究ITP发病机制及早期分型有重要参考价值。     

pp65抗原血症检测法监测婴儿巨细胞病毒肝炎的研究

目的探讨pp65抗原血症检测方法(AA)对婴儿巨细胞病毒(HCMV)肝炎临床应用价值。方法对2001年11月～2002年10月入院的76例婴儿肝炎患儿应用间接荧光染色法检测外周血pp65抗原血症,并与血清ELISA法检测HCMVIgM进行比较。对部分婴儿HCMV肝炎患儿应用更昔洛韦治疗后短期随访。结果76例中64例为HCMV肝炎。AA、ELISA法HCMV阳性检出率分别为92.2%(59/64例)、64.1%(41/64例)。抗原血症呈高水平、中水平者所占比例分别为81.4%(48/59例)、18.8%(11/59例),无低水平者。47例婴儿HCMV肝炎更昔洛韦治疗2周,治疗前、后抗原血症水平,经卡方检验,P<0.01。治疗后随访中肝功能正常与肝功能异常组,抗原血症水平经精确概率法检验,P<0.01。结论pp65抗原血症检测方法有助于监测婴儿巨细胞病毒肝炎的动态变化,指导治疗。     

婴儿期特发性血小板减少性紫癜与人巨细胞病毒感染的关系

目的探讨婴儿期特发性血小板减少性紫癜(ITP)与人巨细胞病毒(HCMV)感染及免疫功能的关系。方法对54例ITP患儿(病例组)及30例正常婴儿(对照组)采用酶联免疫吸附法(ELISA)行HCMV抗体检测,PCR法行HCMV DNA检测,并对病例组采用直接免疫荧光染色法行血T细胞亚群检测,比较两组差异。结果两组HCMV抗体、DNA阳性数比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。病例组HCMV-IgM阳性与阴性者T细胞亚群CD4 、CD8 及CD4 /CD8 比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。结论婴儿期HCMV感染可能为ITP发病的重要因素之一。免疫功能紊乱与ITP发生、发展密切相关。     

婴儿癫(癎)与人巨细胞病毒感染的关系

目的探讨婴儿癫癎与人巨细胞病毒(HCMV)感染的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法检测婴儿癫癎52例及健康儿童20例尿HCMV-DNA,比较HCMV阳性与HCMV阴性癫癎患儿头颅CT、脑干听觉诱发电位(BAEP)异常率。结果婴儿癫癎组HCMV-DNA检出率为59.62%(31例),对照组为30%(6例),二者比较有显著差异(P<0.05)。HCMV阳性癫癎组头颅CT、BAEP异常率(54.84%、25.81%)远高于HCMV阴性癫癎组(23.81%、4.76%)(Pa<0.05)。结论HCMV感染可能是婴儿癫癎的重要致病因子之一,其感染导致的脑组织损伤在婴儿癫癎的发生发展中可能起重要作用。     

血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的研究

研究人类巨细胞病毒 (HCMV)感染与原发性血小板减少性紫癜 (ITP)之间的关系 ,采用ACD抗凝外周血HCMV DNAPCR以及非抗凝血清CMV IgM、IgGELISA方法 ,进行HCMV感染的检测。结果显示 ,ITP患儿组HCMV DNAPCR阳性率为71 7% ,体检儿童对照组为 2 0 8% ,P <0 0 1 ,差异有显著性。ITP患儿组CMV IgM阳性率为 4 1 5% ,CMV IgG阳性率为 75 5% ,体检儿童对照组中未检出CMV IgM阳性者 ,CMV IgG阳性率为 2 2 9% ,P <0 0 1差异有显著性。结论认为 :HCMV感染与ITP密切相关 ,HCMV病毒是ITP致病病因中很重要的一个致病病毒 ,对ITP患者的实验室检测不仅需要血液学检测而且需要HCMV等病毒学检测 ,对HCMV活动性感染的ITP患者加用更昔洛韦 ,可能会很好地提高疗效。     

肾病综合征患儿巨细胞病毒感染的初步研究

目的：探讨肾病综合征(NS)与人巨细胞病毒活动性感染的关系。方法：用聚合酶链反应(PCR)技术和间接ELISA法检测36例NS患儿外周血白细胞中的HCMV-DNA及血浆中的HCMV-IgM。结果：36例NS活动期患儿HCMV-IgM阳性11例,阳性率30.5%,HCMV-DNA阳性14例,阳性率38.9%,与对照组阳性率(12.0%,4.0%)比较差异有显著性(P<0.01);HCMV-IgM和HCMV-DNA均为阳性的有8例,阳性率为22.2%,与对照组(4%)比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论：部分NS活动期患儿存在HCMV感染。     

三种血小板减少症患儿骨髓巨核细胞比较

目的　观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)、再生障碍性贫血(AA)及骨髓增生异常综合征(MDS)患儿骨髓巨核细胞(MK)形态与造血功能,分析不同血小板减少症发生的原因,以期对其进行早期鉴别诊断。方法　对 16例ITP、17例AA、16例MDS患儿,进行骨髓涂片CD41α免疫酶标染色检测;并采用血浆凝块法体外培养骨髓单个核细胞及免疫酶标法进行巨核细胞集落检测;分组进行统计学分析和比较。结果　ITP患儿小巨核细胞及I型淋巴样小巨核细胞检出率分别为 87%和 7%,与对照组比较差异无统计学意义;小巨核细胞总数及巨核细胞集落形成单位 (CFU MK)、爆式巨核细胞集落形成单位(BFU MK)分别为 602 /mm2、93个 /2×105 MNC和 6 5个 /2×105 MNC,高于对照组,前两者与对照组比较差异有统计学意义。AA患儿小巨核细胞检出率、计数及CFU MK与BFU MK的形成率分别为 43%、0 5 /mm2、0个 /2×105 MNC和 0个 /2×105 MNC,低于对照组,与对照组比较差异有统计学意义。MDS患儿小巨核细胞检出率 87%,与正常对照组比较差异无统计学意义,但总数及I型淋巴样小巨核细胞检出率分别为 37 /mm2、73%,高于对照组,差异有统计学意义;CFU MK形成率 3个 /2×105 MNC与对照组比较差异无统计学意义,与对照组 90%可信区间比较,有 63%的患儿CFU MK降低, 25%增高     

母乳喂养对人巨细胞病毒感染婴儿免疫功能的影响

目的 探究母乳喂养对人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染患儿免疫功能的影响。方法 回顾性分析2021年1月—2022年5月郑州大学附属儿童医院收治的135例喂养方式为母乳喂养的HCMV感染患儿的病例资料,根据母乳HCMV-DNA检测结果分为母乳阳性组(78例)和母乳阴性组(57例),再根据母乳HCMV-DNA载量中位数,将母乳阳性组患儿分为母乳高病毒载量亚组(39例)和母乳低病毒载量亚组(39例),分别比较母乳阳性组和母乳阴性组、母乳高病毒载量亚组和母乳低病毒载量亚组患儿外周血淋巴细胞亚群CD3⁺T、CD3⁺CD4⁺T、CD3⁺CD8⁺T、CD19⁺B百分率,CD4⁺T/CD8⁺T比值,IgG、IgM、IgA及尿液HCMV-DNA载量。结果 母乳阳性组和母乳阴性组、母乳高病毒载量亚组和母乳低病毒载量亚组患儿在CD3⁺T、CD3⁺CD4...     

儿童130例人巨细胞病毒感染的血液学有关表现

目的探讨儿童人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的血液学表现。方法回顾性分析130例人巨细胞病毒感染患儿的临床特征、血象、骨髓象和免疫学指标的变化及治疗和转归。结果130例中有64例出现外周血象的改变(49·2%)。其中贫血46例(35,4%),血小板减少35例(26·9%),粒细胞减少4例(3·1%),全血细胞减少5例(3·8%),外周血出现异型淋巴细胞11例(8·5%)。29例出现血液系统并发症(22·3%),包括传染性单核细胞增多综合征、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、病毒相关性噬血细胞综合征(VAHS)等。部分行免疫功能检查的患儿中,27·5%的病人存在体液免疫异常,71·4%存在细胞免疫异常。结论儿童是HCMV感染的易感人群。HCMV几乎可以感染人体所有组织,造血系统受累,可引起多种造血功能紊乱,甚至发生多种CMV感染相关性血液系统疾病。早期足疗程地应用更昔洛韦,配合对症、支持、免疫调节等综合治疗,可明显提高疗效。     

巨细胞病毒抑制多向祖细胞的增殖及干预研究

目的　在体外已证实人巨细胞病毒 (HCMV)能抑制骨髓造血祖细胞的增殖。该研究观察HCMV对脐血多向造血祖细胞 (CFU Mix)体外增殖的影响及黄芪和更昔洛韦 (GCV)对此的干预作用。方法　采用造血祖细胞体外培养技术 ,观察HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数、抑制率、提高率、集落峰值及集落维持时间 ;用聚合酶链反应 (PCR)技术检测集落细胞内HCMV AD1 69DNA。在 1∶1 0HCMV感染组中分别加入黄芪和 /或GCV ,观察黄芪和GCV干预HCMV AD1 69对CFU Mix增殖的抑制作用。结果　① 1∶1 0 ,1∶1 0 0 ,1∶1 0 0 0三种滴度HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数较对照组明显减少 (P <0 .0 5 ) ,集落数随病毒感染滴度的增高而减少 ,抑制率随病毒感染滴度的增高而逐渐增加 ;②各组集落峰值出现时间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但感染组集落维持时间明显短于对照组 (P <0 .0 1 ) ;③ 1∶1 0 ,1∶1 0 0 ,1∶1 0 0 0病毒感染组中检测到HCMV AD1 69DNA ;④ 1∶1 0感染组中加入黄芪和 /或GCV后 ,HCMV AD1 69感染的CFU Mix集落数明显高于未加药 1∶1 0感染组 (P <0 .0 5 )。结论　CFU Mix是HCMV的宿主细胞之一 ,HCMV能直接感染造血祖细胞 ;在体外HCMV AD1 69对CFU Mix生长和集落形成有明显抑制作用 ;黄芪和GCV有明显的抗HCMV作用 ,二者联