一株低温脂肪酶产生菌的筛选鉴定与产酶发酵初探

从无锡惠山采集的土样中筛选得到一株产低温脂肪酶的细菌,经形态和16S rDNA序列鉴定,命名为Serratia marcescens SYBC Y-R.利用合成培养基初步确定摇瓶发酵产脂肪酶的最适碳源为乳糖(质量浓度2.5 g/L),最适氮源为氯化铵(质量浓度1.5 g/L),钙离子明显地促进了该菌发酵产脂肪酶.     

嗜盐嗜碱菌Alkalibacterium sp. F26产碱性果胶酶发酵条件的优化

对Alkalibacteriumsp.F26发酵产碱性果胶酶的培养基和培养条件进行了优化.考察了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂及起始pH、发酵时间、温度等发酵条件的影响.经单因素和响应面分析试验得到适宜的发酵培养基为(组分g/dL):葡萄糖0.95,蛋白胨1,NaCl 6.3,MgSO4.7H2O0.02,K2HPO4.3H2O 0.1,NaCO31,吐温-80 1;培养条件为:250 mL三角瓶装液量25 mL,35℃,起始pH值11.25,培养24 h.在此优化条件下培养,酶活达1 015 U/mL.     

木醋杆菌最佳发酵条件

通过试验筛选出木醋杆菌发酵产生纤维素的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母膏和蛋白胨,并通过正交试验确定出木醋杆菌发酵的最佳条件是:pH 5.0,温度30 ℃,葡萄糖1.5 g/dL,酵母膏0.5 g/dL,蛋白胨1 g/dL.乙醇、醋酸、乳酸对木醋杆菌生产纤维量都有增效作用,优化后的培养基添加0.4 g/dL醋酸,细菌纤维素产量为3.40 g/L.添加体积分数1%的乙醇,细菌纤维素产量为3.65 g/L.添加0.4 g/dL乳酸,细菌纤维素产量为3.54 g/L.     

L-丝氨酸产生菌的分离筛选及发酵条件

在含50mL／L的甲醇、5g／L的甘氨酸的基本培养基平板上，从土壤中分离出130多株细菌，测定了它们利用甘氨酸生产L-丝氨酸的能力，获得了一株产L-丝氨酸较好的菌株A3，L-丝氨酸产量最高为1．4g／L，分类学鉴定为微球菌科(Micrococcaceae)，对菌株A3利用甘氨酸发酵生产L-丝氨酸的发酵条件进行了初步研究，包括甘氨酸和甲醇添加量，不同碳源、氮源，初始pH值以及发酵时间对产酸的影响．结果表明，菌株A3在不添加甲醇、只以甘氨酸为惟一碳源的发酵培养基中也能产L-丝氨酸，培养基中较高质量浓度的甘氨酸存在对L-丝氨酸生产是必需的．添加葡萄糖、甘油等外源碳源对菌体生长有利但不利于L-丝氨酸的生产。     

毛云芝菌产漆酶液体培养条件的优化

探索了不同的培养条件下毛云芝菌产漆酶的情况,发现该菌漆酶属于组成型漆酶,其酶活力高,产酶周期短,酶的合成与菌体生长没有明显相关性;以漆酶的酶活为指标,采用正交试验设计方法对毛云芝菌液体培养的摇瓶生长条件进行了优化研究.结果表明:优化培养基的组成(质量分数)为麸皮3%,蛋白胨0.2%,牛肉膏0.3%,MgSO4·7H2O 0.05%, KH2PO4 0.3%; TE 6%(体积分数),VB1 20 mg/L;自来水,pH自然.该营养条件下的酶活为1 668 U/mL,约是优化前培养基酶活的16倍,为工业化生产提供了一定的理论依据.     

一株粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)产热凝胶的发酵条件

通过对一株粪产碱杆菌WX-C12(Alcaligenes     

褐环乳牛肝菌发酵条件的优化

研究了褐环乳牛肝菌(Suillus luteus)发酵的营养条件及环境条件.在单因素实验优化的基础上,进一步采用正交实验对麦芽汁、酵母膏、装液量和接种量进行了研究.单因素实验及正交实验优化后得到褐环乳牛肝菌液体发酵的适宜培养基组成为:麦芽汁270 mL/L,酵母膏6.7 g/L,KH2PO4 0.25 g/L、MgSO4·7H2O 0.3 g/L、CaCl2·2H2O 0.19 g/L、FeCl3 48 mg /L、柠檬酸0.1 g/L、VB1 2 mg/L.在装液量为100 mL/500 mL、接种体积分数10%,初始pH值5.5～6.5,转速150 r/min的条件下,最终菌体量达12.0 g/L,比优化前提高了40.19 %.在小型发酵罐上研究了pH和溶氧对菌体生长的影响,pH值恒定在5.5时要优于自然pH值下的情况,而逐渐提高转速使溶氧保持在20%以上要优于较高转速下的供氧模式.     

产脂肪酶菌Geotrichum candidum NS3的固定化及其稳定性

从南昌地区含油土样中,筛选到一株脂肪酶产生菌白地霉(Geotrichum candidum NS3).菌株摇瓶发酵的水解酶活为321 U/g干细胞,合成酶活为0.54 U/g干细胞.以聚氨酯泡沫为载体对菌株Geotrichum candidum NS3进行固定化培养和稳定性研究,结果显示,聚氨酯泡沫颗粒尺寸6 mm×6 mm×6 mm,密度27 kg/m3,摇瓶培养60 h,有73.8%的细胞进入聚氨酯泡沫中生长固定,载体固定细胞干重达到2.32 g/g载体.电镜图片显示白地霉(Geotrichum candidumNS3)在载体孔隙内和脊壁上缠绕充盈,生长良好,固定结构稳定.固定化细胞颗粒连续5批次催化反应,相对水解酶活保持率和固定细胞干重保持率分别达到63.1%和71%,具有良好的细胞固定稳定性和酶活保持率.     

赖氨酸摇瓶发酵条件的优化

针对赖氨酸发酵的工业化要求,以黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＷＳＨＬ１为产生菌进行了摇瓶条件下的赖氨酸发酵条件研究．通过正交实验得到了较佳氮源配比;经在发酵过程中添加几种氮源的试验,发现发酵中后期添加适量有机氮源有利于发酵;考察不同初始硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵的影响,确定了适合工业生产的浓度范围;采用分批补料培养方式,最终赖氨酸盐酸盐质量浓度为８５．５ｇ／Ｌ     

组成型纤维素酶高产菌的筛选及产酶条件优化

从富含植物纤维素的土样中筛选得到一株组成型纤维素酶产生茵LC-9,结合Biolog微生物自动鉴定仪和16S rDNA序列分析,该茵株鉴定为Bacillus subtilis.通过发酵与产酶条件优化,确定了菌株最佳培养条件.在优化条件下发酵35 h后,内切纤维素酶活力可达1 301.4U/ml,,木聚糖酶活力可达289.2 U/mL.该菌株产酶发酵周期短,无需纤维素类物质的诱导,推测为一株新型组成型多功能纤维素酶高产菌株.     

Thermobifida fusca WSH03-11突变株合成角质酶的发酵条件

以放线菌Thermobifida fusca WSH03—11——高产角质酶突变株为出发菌株，在摇瓶中考察了碳、氮源等条件以及接种量、装液量和初始pH值等环境条件对突变株细胞生长和产角质酶的影响。通过优化发酵条件，突变菌株的角质酶酶活达10．1U／mL，提高了15％。在此基础上，在5L发酵罐中进一步研究了碳源流加对突变株发酵产酶的影响，结果发现，分别在0、24、48h添加1％乙醇，角质酶酶活达到16．4U／mL，细胞干重（DCW）达到3．7g／L，而且发酵时间也由110h缩短到50h。     

耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件

利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明：在LB培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5h,最大产酶量达到72．9U／mL;在半合成培养基中,于30℃培养4h,再于42℃诱导培养6h,产酶量最高达到131U／mL。     

黄伞菌丝深层发酵的培养条件

采用摇瓶培养法对黄伞菌丝深层发酵培养条件进行了研究.通过正交试验初步确定黄伞菌丝深层发酵适宜的培养基组成为:葡萄糖3g/dL,牛肉膏1.5g/dL,K2HPO40.5g/dL,MgSO40.1g/dL.该菌株最适培养条件为:培养温度25℃,起始pH值5.0,接种体积分数15%,发酵周期10d.在优化的试验条件下,进行摇瓶发酵,菌丝干重达11.16g/L.     

提纯异麦芽低聚糖的酵母菌株筛选及发酵条件

酵母菌同化单糖的能力和速度高于低聚糖,因而可以消除异麦芽低聚糖产品中多余的葡萄糖.通过筛选驯化,得到较快发酵葡萄糖和麦芽糖的D酵母,并对该酵母的最适发酵条件和最佳培养基组成进行了研究,在优化培养基条件下,得到94.13%的高纯度异麦芽低聚糖.     

聚唾液酸的摇瓶工艺

研究了突变株JYL 11(Escherichiacoli)的摇瓶发酵工艺条件:在山梨醇40g/L,K2HPO420g/L,NH4Cl4g/L,MgSO40.9g/L,蛋白胨1.5g/L,起始pH值7.8,装液量35mL(250mL的三角瓶中),转速250r/min,培养温度37℃,接种量为4%(体积分数)的条件下,聚唾液酸产量达到3.5mg/mL,比优化前提高了1.0mg/mL,提高幅度为40%.