木糖和木糖醇SMB色谱分离过程建模与优化

利用模拟移动床 (SMB)连续色谱技术分离木糖醇母液中的木糖和木糖醇组分 .在平衡理论的框架下 ,提出了使用基于相应的真实移动床 (TMB)的简化数学模型研究各进料液和产品流出液的流量等操作参数的变化对SMB分离性能 (以纯度和收率作为性能指标 )影响的方法 ,并采用该方法进行了操作条件寻优仿真 ,取得了满意结果 .在实验室SMB分离设备上 ,基于此最佳操作条件所得到的木糖和木糖醇产品液纯度和收率均达到 1 0 0 % .     

雪里蕻腌菜特征风味物质的分离和鉴定

运用色-质(GC/MS)联用技术对雪里蕻腌菜的风味物质进行了研究，以期发现能显著影响其风味特性的关键性成分.首先，对雪里蕻腌菜卤汁的乙醚萃取浓缩液组分进行了鉴定，结果发现有机酸组分8个，醇类组分4个，腈类组分2个，酯类组分1个，芳香烃2个.经动态顶空吸附雪里蕻腌菜挥发性组分并进行组分离，在GC-MS图谱上进行组分的分离鉴定，其特征风味在碱性组分中嗅感强烈.雪里蕻腌菜挥发性成分经GC-MS检测解析为烃类、醇类、酯类、腈及杂环化合物，其中丁烯腈及苯并噻唑与雪里蕻腌菜特征风味形成密切相关.     

成人睾丸间质细胞的培养和鉴定

目的寻求一种有效的体外分离、纯化成人睾丸间质细胞的方法。方法利用4个梯度(60%、34%、26%、21%)的Percoll液分离、纯化成人睾丸间质细胞。对分离的细胞进行细胞学观察、锥虫蓝染色、3β羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)染色、分泌睾酮能力和绒毛膜促性腺激素(hCG)对分离睾丸间质细胞的作用等检测。结果通过该方法能够获得高纯度(>90%)的成人睾丸间质细胞,并通过上述实验检测证实分离、纯化的睾丸间质细胞有良好的分泌睾酮能力。结论采用该方法对成人睾丸间质细胞进行初步的分离和纯化是简单有效的。     

黄孢原毛平革菌产蛋白酶对过氧化物酶的影响

在培养黄孢原毛平革菌产生木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)过程中产生的胞外蛋白酶与LiP和MnP的快速失活有关.该蛋白酶在pH 7的条件下酶活很高,其主要作用是促进LiP和MnP的分解,而不是抑制它们的产生.HgCl2是蛋白酶的抑制剂,其抑制机理类似于HgCl2对蛋白酶K(PK)的抑制.添加HgCl2的发酵液能提高过氧化物酶的酶活和稳定性,最佳添加量为1 μmol/L,最佳添加时间在接种后第5天.     

限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究

目的探讨限制性显示(restriction display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性.方法用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA,所得的限制性内切酶片段与通用接头相连,通过10个选择性引物进行分组PCR,使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.对这些片段做分子克隆,并测序鉴定.结果由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段,平均每个亚型约22个.测序结果表明,属于HCV基因,可以作为HCV分型芯片的探针.结论RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段,适合于分型诊断基因芯片探针的收集.     

Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析

采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusficuum能同时产内切菊粉酶和外切菊粉酶 .     

问题奶粉事件中婴幼儿泌尿系统结石成分鉴定

目的 通过对婴幼儿泌尿系统结石的成分分析,探讨结石成因,以利于预防和治疗.方法 收集婴幼儿泌尿系统结石标本16例,均有同一品牌问题奶粉喂养史.结石组分用高效液相色谱分离制备,电喷雾质谱、电子轰击质谱和傅里叶变换红外光谱进行结构鉴定,并用高效液相色谱对结石中的主要组分进行定量测定.结果 通过分离和组分结构鉴定及定量测定.结石中的主要组分为三聚氰胺和尿酸,尿酸和三聚氰胺的比例约为2:1(摩尔比).结石中尿酸平均含量为(53.9±11.7)%,三聚氰胺为(23.2±5.7)%.结论 因食用问题奶粉而导致婴幼儿泌尿系统结石的主要原因是三聚氰胺与尿酸形成了不溶性盐而导致结石形成.     

红细胞生成素抑制C3a介导的肾小管上皮细胞间充质转分化

目的 观察红细胞生成素(EPO)对补体成分C3片段C3a介导的肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)的影响.方法 将人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为6组:对照组、EPO组、TGF-β组、TGF-β+EPO组、C3a组、EPO+C3a组,分别用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光方法检测HK-2细胞α-SMA、E-cadherin、C3的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组和EPO组比较,C3a或TGF-β干预HK2细胞后,αt-SMA mRNA和蛋白表达增强(均P＜0.05),E-cadherin mRNA和蛋白表达减少(均P＜ 0.05),补体C3 mRNA和蛋白表达增强(均P＜ 0.05);而同时给予EPO干预后,C3a或TGF-β的上述作用可被明显减弱(均P＜0.05).结论 EPO可抑制C3a介导的肾小管上皮细胞EMT.     

Rhizopus chinensis 12#发酵产生纤溶酶的分离提纯

分离自南方小酒药的华根霉12#(Rhizopuschinensis12#)以豆粕和麸皮为原料固体发酵可产生多种纤溶活性组分.采用饱和度40%～70%的硫酸铵溶液分步盐析、OctylSepharoseFastFlow疏水层析、Q SepharoseHighPerformance离子交换层析和SephacrylS 100凝胶层析方法对活性组分进行分离提纯,得到电泳纯的纤溶酶.SDS PAGE方法测定该酶相对分子质量为18000,凝胶过滤方法测定相对分子质量为16600,表明该酶由单亚基组成.     

反向聚合酶链反应检测肝细胞癌中乙型肝炎病毒DNA整合

目的应用反向聚合酶链反应(inverse polymerase chain reaction,IPCR)法检测肝细胞癌(HCC)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA整合.方法提取手术切除石蜡包埋人肝癌组织中DNA,根据IPCR原理,选用HBV DR1区无酶切位点的限制性内切酶酶切,通过连接反应形成环化DNA分子,以此作为模板进行PCR扩增得到已知序列的旁侧序列.琼脂糖凝胶电泳观察PCR扩增产物片段.结果 19例HCC标本中有14例检出整合型HBV DNA,2例同时存在游离型HBV DNA.结论 IPCR可以准确测定肝细胞中HBV DNA的整合.该方法为研究HBV DNA在肝细胞中的整合机制提供一简单、快速、经济途径.