黄精中甾体皂苷的分离与结构鉴定

从黄精的乙醇提取物的正丁醇萃取相中分离到3个甾体皂苷,经1H-NMR13C-NMR、135DEPT测定分析,鉴定出这3个化合物分别是薯蓣皂苷元-3-0-β-D-吡喃葡萄糖基(1-3)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]β-D-吡喃葡萄糖苷,薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃葡萄糖苷,薯蓣皂苷元-3-O-α-L-,吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃葡萄糖苷.其中皂苷I和Ⅲ在黄精中为首次报道.     

法夫酵母低聚糖的结构分析

法夫酵母发酵生产的低聚糖经高效液相色谱分离纯化后经质谱和核磁共振分析,结果表明该低聚糖为相对分子质量504 000的β-D-呋喃果糖(2→6)-α-D-吡喃葡萄糖(2→1)-β-D-呋喃果糖,即新科斯糖.     

田菁的开发与利用——田肉粉的化学成分(Ⅱ)

研究了田菁种子炼胶后的副产物田肉粉的化学成分。从田肉粉中用层析等手段分得两个化合物,经元素分析与光谱分析(UV,IR,1~H-NMR,MS)确定其一为2-羟基-3-甲基-γ-吡喃酮,是一新的吡喃酮类化合物,其二为6-氨基-9-β-D-呋喃核糖嘌呤,是一已知的嘌呤衍生物,为首次从田菁属植物中分离得到。     

超滤分离癞葡萄水溶性降糖活性物质

采用超滤法从癞葡萄水提物中初步分离降血糖活性物质.考察了进料流量、操作压力、操作温度及料液质量浓度等工艺参数对超滤过程中膜通量的影响,并对超滤后两组分的相对分子质量分布及降血糖活性进行了测定.结果表明:用截留相对分子质量为10 000的中空纤维膜对癞葡萄水提物进行超滤分离的最适工艺条件为:进料流量200 L/h、温度25 ℃、压力0.10 MPa、料液质量浓度20 g/L.超滤有效地将癞葡萄水提物分成两个组分,其中相对质量较小的组分具有显著的降血糖活性,而相对质量较大的组分不具有降血糖活性.     

甘薯水溶性糖蛋白的分离纯化及结构初探

采用二乙基氨基纤维素DEAE-52和葡聚糖凝胶G100柱层析法,从甘薯中分离纯化甘薯糖蛋白,并对其结构进行了初步探讨.研究结果表明,糖蛋白纯品呈白色,易溶于水;蛋白质质量分数为61.2%,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对糖蛋白进行纯度鉴定,结果显示只有一条谱带.气相色谱分析表明甘薯糖蛋白中糖链部分含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖;红外光谱和β-消去反应表明:甘薯糖蛋白中含有α-糖苷键,糖苷键类型主要为吡喃型;糖与蛋白的肽链之间的连接点类型是O-糖肽键.     

黄精中乌苏酸型皂苷的分离与结构鉴定

采用乙醇提取方法,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,大孔树脂AB-8柱色谱及ODS、MCI柱色谱等方法从黄精中分离到2种乌苏酸型三萜皂苷,并通过核磁共振法鉴定结构为2β,3β(OH)2-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(积雪草苷)和2β,3β, 6β(OH)3-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(羟基积雪草苷).     

马尔尼菲青霉菌溶血磷脂酶基因的克隆、表达及纯化

目的 研究马尔尼菲青霉菌(PM)溶血磷脂酶(LysoPLs)基因的克隆、表达和纯化,为研究其致病机制奠定基础.方法 采用生物信息学方法,从PM酵母相全长 cDNA 文库中识别出PMLysoPLs基因的同源序列及其全长编码区.通过PCR方法 扩增PMLysoPLs基因的编码区序列,构建原核表达载体pET 30a(+)-PMLysoPLs,经DNA 序列测定鉴定其序列,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,重组产物采用His-镍蛋白纯化柱进行纯化.结果 PMLysoPLs基因长度为991 bp,其全长编码序列长度为732 bp,编码243个氨基酸,其编码蛋白理论分子量为26.8 kDa.重组表达载体经序列测定及酶切鉴定与理论推测结果 相符.经IPTG诱导,该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中得到高效的可溶性上清表达,纯化后的重组蛋白分子量为25~35 kDa,其单一蛋白纯度达95%以上.结论 本研究成功构建了PMLysoPLs基因的pET 30a(+)原核重组质粒,获得的可溶性重组蛋白表达效率高,可用于进一步研究PM溶血磷脂酶的功能.     

羊栖菜中褐藻酸钠的脱色纯化工艺及其结构成分研究

研究了羊栖菜中褐藻酸钠的脱色纯化工艺并测定了其组成与相对分子质量.结果表明褐藻酸钠脱色纯化的最佳工艺条件为3%(质量分数)甲醛溶液预浸泡,10%(质量分数)HCl溶液沉淀分离出褐藻胶,1 g/dL的Na2CO3溶液中和,10%(体积分数) NaClO溶液进行脱色.通过纯化工艺制得的褐藻酸钠的纯度为95.1%,褐藻酸钠分子中β-D-甘露糖醛酸与α-L-古罗糖醛酸的量的比值为0.75,平均聚合度DP为101,粘均相对分子质量为21 963.     

中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶

应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺，系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母（Kluyveromyces fragilis）β-D-半乳糖苷酶。K．fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K．fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA explorer 100中压液相色谱的Hiprep^R 16／10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26／60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化，酶的回收率为27％，纯化倍数为42。纯化的K．fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）上，呈现一条染色谱带，表明纯化的酶具有较高的纯度。K．fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60 000。     

顶青霉木聚糖酶的纯化与性质

从顶青霉(Pencillium corylophilum)P-3-31培养液中分离到3种木聚糖酶组分，分别称为PartA、PartB和PartC.PartB进一步纯化，经SDS-PAGE鉴定为单带，相对分子质量为24200；PartC进一步纯化，经SDS-PAGE鉴定也是单带，相对分子质量为48300.PartA和PartB的最适反应条件为pH4.0,45℃;PartC的最适反应条件为pH5.5,55℃.PartA和PartB对木聚糖以外的底物不能水解；PartC具有水解CMC的交叉活性和β-木糖苷酶活性，但不能将木二糖水解成木糖.3个纯化酶组分和粗酶对不同来源的木聚糖底物均表现出不同的活性.对于粗酶，若桦木木聚糖为底物的相对酶活为100%，则玉米芯木聚糖为底物的相对酶活为143%，蔗渣木聚糖为底物的相对酶活为124%.     

Prof. Dr. Dr. h.c. Rene J.A.M. van Dongen

Ohne Zusammenfassung     

The final F.F.A.R.A.C.S. examination.

The development of the Final Examination of Fellowship of the Faculty of Anaesthetists of the Royal Australasian College of Surgeons is described from its inception in 1956 to the present. A statistical analysis was made of the examinations in 1969 and 1970. The correlations between marks for essay questions, within the multiple choice examination and between clinical examinations were low, suggesting that the reliability of these tests was unsatisfactory. At this same time, applied anatomy was added to the subjects in this examination. The examination was restructured with more emphasis on the oral and multiple choice examination and the marking system was revised. Continuing analysis has shown higher correlations between and within most parts of the examination. The correlations for the essay marks have remained lower, but essays have been retained in an attempt to assess and encourage the skills involved. Feedback of teaching and learning information obtained from analysis of the examination is provided to Regional Education Officers and Supervisors of Training.