SMURF1对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞增殖影响的分子机制及其对乳腺癌患者预后的影响

目的探讨SMURF1对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞增殖的影响及其分子机制,进一步探讨其表达水平与乳腺癌患者预后的相关性.方法首先采用体外实验探索SMURF1同ERα表达的关系,与此同时收集湖北医药学院附属国药东风医院2012年2月至2018年3月肿瘤科收治的89例乳腺癌病例的临床及病理资料进行回顾性分析.长期对患者进行随访,确定SUMRF1在乳腺癌患者中的表达与预后的相关性.结果体外研究表明敲低SMURF1将减少ERα阳性细胞在体外和体内的增殖,SMURF1敲低显著降低乳腺癌细胞中ERα靶基因的表达.远期随访无复发或转移的乳腺癌患者组织中SMURF1蛋白质、SMURF1 mR-NA水平均低于有复发的患者;无复发或转移的乳腺癌患者组织中ERα蛋白质水平显著低于有复发或转移的乳腺癌患者,两组差异有统计学意义(t=18.361,P<0.01);乳腺癌复发患者组织中SMURF1 mRNA表达水平显著高于未复发患者组织,差异具有显著统计学意义(t=13.512,P<0.001)同时相关性分析表明,SMURF1蛋白质水平的表达同ERα蛋白质水平具有正相关性(r=1.356,P<0.001).结论SUMRF1的表达有可能影响ERα的信号途径,同时与乳腺癌患者的预后有一定的相关性,SUMRF1的表达水平低者的生存期限更长.SMURF1和ERα信号在支持乳腺癌生长方面可能具有调控作用.靶向SMURF1可能是ERα阳性乳腺癌治疗的一种有前途的策略.同时SMURF1未来有可能作为预测患者预后的有效临床指标.     

GPR30在雌激素促乳腺癌细胞迁移和侵袭中的作用机制研究

目的探讨G蛋白耦联受体30(GPR30)介导的雌激素非基因效应促乳腺癌细胞侵袭的作用及其机制。方法体外培养乳腺癌细胞株SK-BR-3(GPR30+,ERα-/ERβ-),分别给予不同浓度的17β-雌二醇(E2)和GPR30特异性激动剂(G1)处理不同时间,应用免疫印迹法观察黏着斑激酶(FAK)的磷酸化;转染GPR30 si RNA抑制GPR30表达后,采用Transwell侵袭小室法观察E2和G1对细胞迁移和侵袭的影响。结果与对照组比较,不同浓度的E2(10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)或G1(10-8、10-7、10-6 mol/L)处理SK-BR-3细胞20 min,均能促进FAK的磷酸化。转染GPR30 si RNA 48h抑制GPR30表达后,E2、G1促进FAK磷酸化的效果均明显减弱。E2、G1均可明显促进SK-BR-3细胞的侵袭。而转染si RNA GPR30抑制GPR30表达后,E2、和G1促进细胞侵袭的能力明显减弱。结论雌激素可通过作用于GPR30激活非基因效应诱导FAK的磷酸化,增加乳腺癌细胞的侵袭能力。     

婚姻状况对妇女乳腺癌ER、PR表达的影响

为了探讨精神压力能否通过神经内分泌机制促进乳腺癌的发生和发展,本文运用免疫组化技术,对比离婚妇女和现婚妇女乳腺癌的雌激素受体和孕激素受体的表达情况。结果发现,离婚组乳腺癌ＥＲ和ＰＲ表达率均高于现婚组。说明精神因素与ＥＲ表达之间存在着一定内在关系。     

细胞涂片检测乳腺癌雌激素受体的价值

应用免疫组化ABC法对30例乳腺癌染色检测雌激素受体的结果表明,针吸细胞涂片或印片阳性率为80%,冰冻切片的阳性率为86.7%,两者符合率93%;细胞涂片与组织切片的免疫组化染色积分呈正相关。(γ=0.77,P<0.01)。结果提示针吸细胞涂片或印片是一种可靠的检测雌激素状况的方法。     

原发性和转移性乳腺癌雌激素受体的基因突变及其表达变化

雌激素受体 (ＥＲ)是乳腺癌预后的重要指标 ,而且其状况与对内分泌治疗的反应情况相关联的。我们对原发性和转移性乳腺癌组织ＥＲ的表达和突变的状况进行了检测及比较 ,以探讨ＥＲ阳性乳腺癌中的ＥＲ基因变化 ,是否在转移癌中比在原发癌中的发生频率要高一些[1] 。一、材料和方法1 临床资料 :从 1997年～ 2 0 0 0年 6 0例乳腺癌中选取 34例ＥＲ阳性原发性和相配对的腋淋巴结转移性乳腺癌标本 ,均为我院外科手术切除标本 ,术前患者均未经任何治疗 ,所有病例经组织病理学证实均为浸润性导管癌 ,其淋巴结转移性癌的证实均以镜下观察到淋巴结内…     

前列腺组织中ERα、ERβ的表达及其意义

目的探讨雌激素及其受体ERα、ERβ与良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)、前列腺癌(prostate cancer,PCa)的关系。方法采用免疫组化SP法检测ERα和ERβ在20例正常前列腺(normal prostate,NP)、80例BPH及46例PCa标本中的表达。结果 ERα主要在前列腺组织间质细胞表达,上皮细胞中无表达,在NP中呈低表达,在BPH中高表达,而在PCa表达下降(P0.01);但ERα在PCa不同病理分级和临床分期中的表达强度差异无显著性(P0.05)。ERβ主要在前列腺组织上皮细胞表达,很少位于间质,在NP、BPH中高表达,而在PCa中表达下降甚至呈阴性(P0.01),ERβ表达与分化程度呈正相关(P0.01),且主要表达于A、B期组织中(P0.01)。结论 ERα主要在间质细胞表达,而ERβ主要在上皮细胞表达,提示雌激素对BPH及PCa的作用可能主要是通过ERβ途径发挥作用的。ERβ在PCa中的表达明显下降,提示其可能与PCa的发生、发展有关,推测PCa中大部分ERβ可能是更具有侵袭性的ERβ变异体,致使PCa恶性程度增加。     

原位杂交检测乳腺癌雌激素受体mRNA的表达

目的：检测乳腺癌组织中雌激素受体ｍＲＮＡ的表达状况。方法：采用地高辛配基标记探针的非同位素原位杂交技术检测了１５列乳腺癌组织冰冻切片。结果：蓝紫色的阳性染色颗粒位于癌细胞的胞浆及胞核，背景清晰。并且与葡萄糖包裹活性碳及免疫组化法检测雌激素受体的阳阴性符合率分别为９３．３％和１００％。结论：该方法是一特异、灵敏、简单易行的研究雌激素受体ｍＲＮＡ表达水平的有效手段。     

用改良LSAB法检测乳腺癌雌激素受体和孕激素受体

用改良ＬＳＡＢ法检测乳腺癌雌激素受体和孕激素受体唐建林，高东宸乳腺癌雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）检测已经成为估计乳腺癌预后和内分泌治疗效果的主要方法。我们的实验以结合于ＥＲ，ＰＲ上的内源性激素为检测目标，以抗激素抗体为第一抗体，采用ＬｓＡＢ...     

雌激素作用分子机制研究进展

雌激素在体内具有广泛的生物学活性。女性进入绝经期后 ,体内雌激素水平显著下降 ,出现与之相关的绝经期综合症 ,以及心血管疾病如冠心病、动脉粥样硬化和骨质疏松等。使用激素替代疗法能明显减少上述疾病的发生[1 ] 。本文重点在分子机制水平上对雌激素作用研究进展进行综述。     

雌激素对大鼠心脏雌激素受体α和β表达的影响

目的研究雌激素受体（ER）α和β在新生、成年和卵巢切除大鼠心脏的表达。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot方法,分析新生和成年大鼠心脏各部的ERα和βmRNA及ER蛋白质的表达,探讨不同剂量的17β雌二醇对卵巢切除大鼠心脏ERα和βmRNA、ER蛋白质的表达调控及对心房、心室重量和它们与体重比变化的影响。结果ERα mRNA在新生大鼠心脏各部表达较低,而成年大鼠心脏各部ERα mRNA的转录水平提高3～20倍,这种差别体现在ERα蛋白质的表达水平不同。反之新生大鼠心脏ERβ mRNA表达水平较高,而成年大鼠心脏ERβ mRNA的表达降低2～7倍。卵巢切除减少成年大鼠心房ERαmRNA和蛋白质的表达,减轻心房重量及心房／体重比;17肛雌二醇替代却能反转这些改变,同时随着血浆17β-雌二醇水平的增高,这种影响在一定程度上呈剂量依赖关系。卵巢切除和178一雌二醇替代并不改变心脏和心室／体重比,也不影响ERβ mRNA的表达。结论雌激素受体α和β在新生和成年大鼠心脏的表达存在差别,ERβ可能在大鼠心脏的发育过程中起重要作用,ERα足雌激素对成年大鼠心脏调控的优势受体;雌激素的主要靶器官是心房,且通过其受体的介导促进心房肌细胞的增生。     

人乳腺癌雌激素受体的免疫组织化学测定

一、材料和方法人乳腺癌标本由上海市房地产管理局职工医院、瑞金医院和市第九医院收集，贮于一SOC；6－7［3H］－E2购自中科院原子核研究所；DAB和兔一PAP－IgG均为Sigma公司产品；兔抗小鼠IgG和羊抗兔IgG均为上海生物制品研究所产品；抗人乳腺癌雌激素受体（ER）单抗（IH12）为本所研制[1]。PAP免疫级化法：将冻存的标本作厚SPin冰冻切片，室温放置10分钟，3．7％福马林固定15分钟，浸入甲醇和丙酮各3分钟，10％小牛血清封闭15分钟，分别滴加ER单抗（1H12腹水1：10）和无关腹水（阴性对照）、PBS（空白对照），湿盒内1小时…     

乳腺癌雌激素受体基因的突变与变异

多年来，雌激素受体（ＥＲ）被作为乳腺癌内分泌治疗和预后评估的一个重要指征。然而，异常的ＥＲ结构可能对于正确地评估ＥＲ状况显得尤为重要。因为虽然可以检测出异常结构ＥＲ的存在，但实际上它缺乏其功能，从而导致假阳性结果。同样，一些不能通过生化及免疫组化检测出来而实际上具有生物学活性的ＥＲ的存在也会导致假阴性结果。因此，探讨ＥＲ的突变和变异状况具有重要意义。例如，不需要配体就能传送雌激素信号的受体蛋白存在可能就会导致对内分泌治疗的抵抗；此外，功能不良的ＥＲ的突变也可能导致乳腺癌的预后不良。一、野生型雌激…     

雌激素受体α阴性乳腺癌雌激素受体α基因启动子区CpG岛甲基化和肼苯哒嗪去甲基化作用

目的 检测雌激素受体(ER)α阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞及ERα阴性乳腺癌组织中ERα基因启动子区CpG岛甲基化状态;探索肼苯哒嗪能否作为去甲基化药物恢复ERα基因表达。方法应用特异性聚合酶链反应(MSP)检测乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞和20例ERα阴性乳腺癌组织ERα基因3个启动子区A、B、CpG岛甲基化情况,肼苯哒嗪处理上述两种乳腺癌细胞,逆转录(RT)-PCR检测不同启动子调控下ERα基因异型体(isoform)ERα-A、ERα-B、ERα-C mRNA和ERα基因公共编码区mRNA表达。结果MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞启动子区ERα-A、ERα-B均存在CpG岛甲基化,ERα-C无甲基化,20例ERα阴性乳腺癌组织中,13例(65％)ERα-A、10例(50％)ERα-B CpG岛甲基化阳性。其中9例ERα-A、ERα-BCpG岛甲基化均阳性(45％),仅1例(5％)ERα-C存在CpG岛甲基化。肼苯哒嗪处理上述两种细胞后,检测到ERα-A、ERα-B mRNA和公共编码区mRNA表达。结论乳腺癌组织和细胞ERα基因表达沉默可能与ERα基因启动子区A、B甲基化有关,且肿瘤分期愈晚,甲基化程度愈高。肼苯哒嗪能作为去甲基化药物诱导ERα基因表达。     

MTA1在乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-435s细胞系的表达及与ERα甲基化的关系

目的用去甲基化药物5-Aza-d C处理雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)启动子甲基化的乳腺癌细胞系,探讨ERα启动子甲基化与MTA1在乳腺癌发生发展中的可能机制。方法用去甲基化药物5-Aza-d C逆转MDA-MB-231和MDA-MB-435s的ERα启动子甲基化,甲基化PCR验证其甲基化状态,用RT-PCR和Western blot研究去甲基化后MTA1 m RNA和蛋白表达情况,Transwell检测去甲基化后细胞侵袭能力的改变。结果在MDA-MB-231和MDA-MB-435s细胞系中,去甲基化药物5-Aza-d C逆转ERα启动子甲基化后,MTA1m RNA和蛋白表达水平下调,细胞侵袭能力下降。结论乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-435s中ERα甲基化与MTA1表达存在相关性。     

雌激素受体α 共激活子与乳腺癌

在乳腺癌发生发展过程中,雌激素受体（estrogen receptor α ,ERα）信号途径的活性增强,一个重要的原因是ERα共调节因子的变化。ERα共调节因子可分为共激活子和共抑制子。本文对ERα共激活子的种类、与ERα的结合方式、作用机制及其与乳腺癌的关系进行了综述。     

乳腺癌细胞雌激素受体的检测和雌孕激素对MCF—7细胞活性…

目的：探讨乳腺癌细胞雌激素受体（ＥＲ）的检测方法和雌孕激对ＭＣＦ－７乳腺癌细胞系活性的影响。方法：对２４例乳腺癌细胞悬液采用细胞酶联免疫吸附实验（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）和斑点酶联免疫吸附实验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测ＥＲ表达。并应用唑蓝（ＭＴＴ）比色法测定雌孕激素对ＭＣＦ－７细胞活性的作用。结果：⑴Ｃ－ＥＬＩＳＡ法实验组ＥＲ表达明显高于对照组，差异有显著性意义；Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测的１２例乳腺癌中，Ｅ