用酶标记葡萄球菌A蛋白检测疟疾抗体的研究

疟疾抗体的检测,自Kuvin(1962)首次用间接荧光抗体(IFA)法以来,应用较为广泛。黄志雄等(1981)用玻片免疫酶法(即本文HRP—马抗人法)检测疟疾抗体,认为该法具IFA法的优点,且不需荧光显微镜等特殊设备,标本又可长期保存。本文探讨了辣根过氧化物酶(HRP)标记葡萄球菌A蛋白(SPA)检测疟疾抗体的实验条件,建立了HRP—SPA染色法(简称HRP—SPA法)并与HRP—马抗人IgG染色法(简称HRP—马抗人法)及IFA法进行对比试验,结果如下。     

微量细胞病变中和实验在检测流行性出血热抗体中的应用研究

采用N-2羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸(HEPES)诱导的微量细胞病变中和实验(HEPES-MCPENT)检测流行性出血热病毒(EHFV)中和抗体国内已有报道[1],为了探索测定动物EHF抗体比较便利的方法以及EHF患者与健康人IFA抗体与中和抗体的关系,笔者使用该法对EHF患者、健康人及多种动物血清进行了检测并与免疫荧光法进行了比较,结果如下:     

用免疫吸附凝集试验检测肾综合征出血热病毒感染滴度

检测肾综合征出血热(HFRS)病毒感染滴度通常应用免疫荧光抗体(IFA)法,但该方法需要荧光显微镜,且在检测大量标本时,欲获得正确结果尚有困难。本文报道用免疫粘附血凝法(IAHA)检测 HFRS病毒感染滴度,并与 IFA 方法比较,提出了病毒接种于细胞后的最佳孵化时间;同时也用中和试验(NT)对一些 HFRS 病毒株抗原性作了比较。作者分别从日本东京湾新垦地的野鼠和引起札幌实验室 HFRS 爆发的鼠中分离到     

IFA、ELISA及RPHI三种方法检测流行性出血热抗体的结果分析

本文用免疫荧光测定(IFA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)及反向血凝抑制试验(RPHI)三种方法对89份流行性出血热(EHF)患者恢复期血清进行抗体检测,发现 IFA 和 ELISA 两法阳性检出率较高,两法测定结果无显著性差异,由于 ELISA 方法简单,操作方便,基层卫生防     

3种检测方法在出血热病原检测中的应用效果比较

目的探究3种检测方法在出血热病原检测中的实际应用效果,为出血热防控提供科学准确的检测数据。方法参照《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》中的检测方法,以免疫荧光法(IFA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对2018—2019年鞍山市国家级监测点采集的宿主动物标本进行检测。结果利用IFA法在400份鼠肺标本中共检出30份鼠肺抗原阳性,带毒率为7.5%;用ELISA法在400份鼠血标本中共检出41份鼠血总抗体阳性,鼠感染率为10.25%;用RT-PCR法检测400份鼠肺标本,检出22株出血热阳性,4份灰区,PCR法阳性率为5.5%;3种方法两两配对卡方检验,对IFA法和ELISA法结果进行比较,差异无统计学意义(χa^2=3.70,P>0.05),将PCR法分别与IFA法和ELISA法的结果比较,差异有统计学意义(χb^2=4.08,χc^2=12.96,P<0.05);对3种方法进行筛选试验,RT-PCR法灵敏度和特异度更高。结论 3种方法各有特点,IFA法适合初步筛查性工作,ELISA法检测时间较短,RT-PCR方法较为精准。     

应用SPA协同凝集试验早期快速诊断流行性出血热

本文以流行性出血热病人的恢复期血清作已知抗体敏化SPA,以病人尿液作未知抗原,进行协同凝集试验（SPA一COA）。经四年来临床观察及现场考核,现将结果报告如下。     

流型性出血热患者血清特异性IgG抗体调查

<正> 1978年以来,国内外相继分离出流行性出血热(EHF)病毒,并成功地建立了本病的实验技术——间接免疫荧光(IFA)方法。这为EHF的方法学研究和血清学研究奠定了基础。为了了解EHF患者血清特异性IgG抗体的动态变化,探讨其在早期诊断中的作用及其在免疫学上的意义,我们把1982年以来用IFA方法检测的449例EHF患者的血清学结果作一总结分析。现报告如下:     

HTNV重组核蛋白及其单抗建立HFRS-MacELISA试剂研究

[目的]利用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgM捕获ELISA诊断试剂.[方法]制备、纯化重组核蛋白抗原和抗核蛋白单抗并进行辣根过氧化物酶标记,在抗人μ链包被板中结合四甲基联苯胺一过氧化氢(TMB/H2O2)酶底物系统,从血清中检测肾综合征出血热早期特异性IgM抗体,并与免疫荧光抗体法(IFA)进行比较.[结果]检测用经典免疫荧光抗体法确认的42份阳性血清和42份阴性血清,结果2种试剂检测结果差异无统计学意义.[结论]用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgN捕获ELISA诊断试剂可用于肾综合征出血热的早期IgM抗体检测.     

免疫粘附血凝试验区别肾病综合征出血热的病原因子

用免疫荧光法检测肾病综合征出血热(HFRS)的血清学研究为时已久,但需具备荧光显微镜和对大量血清标本的检测,因而欲获得正确的结果尚存在某些困难。本文报道用免疫粘附血凝试验(IAHA)和补体结合试验(CF)检测与 HFRS 有关的人和鼠血清,其抗体滴度与 IFA 法的抗体滴度相关,提示 IAHA 和 CF 法同样适用于作HFRS 的血清学研究,更有意义的是 IAHA法还可区别不同型 HFRS 病毒抗体。     

双抗原夹心法ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用

目的建立一种敏感、特异的检测肾综合征出血热(HFRS)血清总抗体的双抗原夹心法ELISA。方法应用重组汉坦病毒(HV)NP抗原e1.3S作为包被抗原和e6-119-HRP作为酶标抗原建立双抗原夹心法ELISA,检测血清总抗体,并与间接免疫荧光法(IFA)相比较。结果共检测188份人血清和378份鼠血清标本,2种方法的总符合率为97.70%。以IFA为参照标准,双抗原夹心法ELISA的敏感性为97.54%,特异性为97.87%。结论双抗原夹心法ELISA检测HFRS血清总抗体具有很高的敏感性和特异性,适用于大规模的流行病学调查。     

疟疾免疫过氧化酶试验——一种检测恶性疟原虫抗体的敏感方法

目前,疟疾学家们最常使用的血清学检验方法有间接荧光抗体试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。最近的研究发现IFA抗体滴度与人群中的带虫率呈反比关系,这表明IFA可用于予测人群对疟疾的免疫力。但IFA的结果观察需用荧光显微镜,这限制了其广泛应用。本文报告一种酶酸检测方法,即用辣根过氧化酶(HRP)代替异硫氰酸荧光素(FITC)的免疫过氧化酶试验(MIA)。具体操作如下:     

登革病毒抗体检测方法的比较研究

[目的]针对目前实验室检测抗登革病毒IgG和IgM抗体的常规方法间接免疫荧光试验(IFA)操作烦琐,需要使用昂贵的荧光显微镜的缺点,研究1种简便、敏感、特异的检测登革病毒特异性IgG、IgM抗体的方法.[方法]分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫斑点试验(DIBA)、斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测44份可疑登革热患者血清抗登革病毒IgG抗体,与间接免疫荧光试验(IFA)作一致性检验,keppa统计量值分别为1.0938、1.1979、1.0557,表明实验结果重现性极好.分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、IgM抗体捕获酶联免疫吸附试验(MacELISA)、斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测44份可疑登革热患者血清抗登革病毒IgM抗体,与间接免疫荧光试验(IFA)作一致性检验,kappa统计量值分别为1.0537、1.0554、1.0552,表明实验结果重现性极好.     

间接荧光抗体检测人群疟疾结果与分析

间接荧光抗体(IFA)检测疟疾已广泛用于疟疾流行病学调查,我市自1979年开始对监测点人群、外出高疟区回归者、“四热”病人和7～12岁儿童用IFA作疟疾监测。10年来共制作滤纸干血滴27295人份。现报告如下:     

HFRS患者尿中病毒抗原检测的实验研究

目的建立和评价IEDA检测HFRS患者尿中病毒抗原的方法及敏感性和特异性。方法采用自行制备的免抗HFRSV多克隆抗体（Anti－HFRSVIgG）,运用免疫酶斑点法（IEDA）检测40例HFRS患者尿中的病毒抗原,同时采用传统的间接免疫荧光法（I－IFA）检测患者血清中抗流行性出血热病毒抗原的IgM型抗体（Anti－HFRSVIgM）作相关分析。结果应用IEDA检测尿中HFRS抗原的总阳性率为65％,早期（5日内）抗原检出率为83．33％,而应用I－IFA检测血清中Anti－HFRSVIgM阳性率为77．8％。结论IEDA与I－IFA检测的结果高度相关,且5病日内的早期诊断率为前者高于后者。     

HIV抗体的三种检测方法比较

目前,HIV抗体检测有多种方法,如：酶联免疫吸附试验(EusA)、凝集试验(agglutintiou assays)、颗粒吸附试验(PA)、斑点试验(dot blot assays)、免疫印迹试验(WB)、间接免疫荧光法(IFA)和免疫沉淀试验(RIPA)等。而我国在HIV抗体初筛检测中经常使用的检测方法主要是ELISA、PA和胶体金／硒快速检测方法。为了比较这3种不同原理的检测方法在检测HIV抗体中结果的一致性,为HIV感染的检测策略提供依据,我们采用4种HIV抗体检测试剂对270份血清样本进行了平行检测,现将结果报道如下。     

间接免疫荧光法与RT-PCR法检测鼠肺汉坦病毒带毒率

目的对间接免疫荧光法(IFA)和逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)两种检测鼠肺汉坦病毒(HV)的实验方法进行比较,为进一步完善出血热病毒实验室检测方案提供依据。方法采用IFA和RT-PCR对2018年收集的200份鼠肺进行HV检测、分型,统计鼠种和数量。结果锦州市鼠带汉坦病毒率2014年最高为5.42%(11/203),2010年最低为0.95%(1/105)。人间肾综合征出血热发病率2014年最高为6.77/10万,2010年最低为2.27/10万。鼠带毒指数与人间出血热发病率正相关(r=0.75,P0.05);IFA检测鼠肺HA抗原阳性率为2.00%(4/200);RT-PCR检测鼠肺HA核酸阳性率为4.00%(8/200),两种方法检测结果有统计学差异(χ~2=13.01,P0.01);锦州地区主要流行株为汉城(SEO)型HV。结论 RT-PCR检测鼠肺HV核酸的敏感性高于IFA检测鼠肺HV抗原的敏感性,可以推广应用RT-PCR检测鼠肺带毒率的实验室检测技术。     

日本国立卫生研究所肾综合征出血热研究现况

一、流行病学 1.日本人群中的血清流行病学采用肾综合征出血热病毒(HFRSV)SR-11株感染的Veto-E6细胞作为抗原,用间接免疫荧光抗体法(IFA),对以下人群进行了HFRS抗体验查。①正常人群:在1971年和1981年收集的正常人血清758份中,6份血清(0.79％)有1:16或更高的IFA抗体滴度。在此10年间隔时间中,没有阳性率的改变。     

肾综合征出血热酶标SPA组化法试剂盒简介

辣根过氧化物酶标记葡萄球菌甲蛋白(SPA)组化法,广泛适用于人和各种动物肾综合征出血热IgG抗体的检测。本法特异性和敏感性与间接免疫荧光方法相同,但不需要较贵的荧光显微镜,两三个小时即可出结果,操作简单,适于县级或县级以下卫生防疫机构和医院,对本病疫情血清学核实,临床血清学诊断、血清流行病学调查和健康人血清抗体、动物血清抗体监测等。     

新型压电石英晶体免疫传感器抗体固定方法的建立

目的探讨并建立一种高效免疫微阵列传感器抗体固定的方法.方法分别采用普通蛋白A(SPA)法与经巯基取代SPA(自组装SPA)法固定石英晶体微阵列上抗体,并用石英晶体微天平(QCM)分别检测其不同浓度抗体、抗原条件下发生抗原抗体反应,并对其抗体包被量、反应频率漂移、非特异性反应等多项指标进行统计学分析.结果与传统SPA法相比,自组装SPA具有抗体固定量大、反应速度快、频率下降明显、非特异性反应低等优点.结论自组装SPA法具有比普通SPA法包被一致性更高的优点,可以作为新一代免疫传感器的抗体固定方法.     

荧光SPA检测流行性出血热病人血清抗体的初步研究

自1976年朝鲜Lee等使用间接免疫荧光技术（IFAT）证明黑线姬鼠肺、肾组织内存在有出血热抗原以来,IFAT已被公认是检测流行性出血热（EHF）鼠肺抗原及血清抗体的成功方法。目前IFAT多用羊抗人IgG或IgM荧光血清,而使用荧光SPA较少。