苦参碱对肝癌细胞HepG2增殖的影响及端粒酶活性调控的体外研究

[目的]探讨苦参碱（Ma)对肝癌细胞株HepG2增殖的影响及其端粒酶活性，端粒酶逆转录酶（hTERT)表达的调控作用。[方法]将不同浓度的Ma加入肝癌细胞株HepG2细胞，MTT试验测定用药后细胞存活率和增殖情况。同时以TRAP-ELISA方法检测其端粒酶活性；采用Lipofect脂质体转染法将携带hTERT启动子和报告基因的质粒转染至肝癌细胞株HepG2细胞，2h后加入不同浓度的Ma，孵育48h后，分别检测其报告基因萤虫素酶活性。[结果]500μg/ml以上浓度可抑制HepG2的生长；750μg/ml浓度的Ma可抑制端粒酶活性，并下调hTERT启动子的表达。[结论]Ma可抑制肝癌细胞株HepG2细胞增殖，同时可调控hTERT的表达并影响端粒酶活性。     

顺铂对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响

目的 观察顺铂(DDP)对人肺癌SPCA-1细胞端粒酶活性的影响。方法 不同浓度的DDP处理体外培养的人肺癌SPCA-1细胞72h，非放射性标记的改良TRAP法测定端粒酶活性，MTT法测定细胞增殖抑制，透射电镜、流式细胞仪观察细胞凋亡。结果 DDP可抑制SPCA-1细胞端粒酶活性，随DDP浓度增大，端粒酶活性抑制增强。MTT结果显示DDP抑制SPCA-1细胞增殖且抑制率有浓度依赖性。透射电镜可观察到典型的细胞凋亡形态学，流式细胞仪结果表明DDP诱导SPCA-1细胞凋亡在一定浓度范围内呈剂量依赖性。结论 端粒酶活性的抑制可能是DDP发挥抗肺癌活性的作用机制之一，端粒酶活性可作为评价DDP抗肺癌化疗效果的指标之一。     

肺癌端粒酶活性与临床相关性研究

最近研究表明,端粒酶活化是正常细胞向恶性细胞演化过程中一个至关重要的步骤。对大量不同组织来源恶性肿瘤的研究结果都显示在较高程度上表达端粒酶活性。因此,端粒酶活性有可能成为肿瘤恶性程度评价的一个普适性标志物。端粒酶与肿瘤临床相关性的研究表明,不同组织类...     

端粒酶活性在肺癌中的表达及临床意义

无限增殖是细胞癌变的重要生物学特征。有关资料表明[1] ,端粒及端粒酶与正常细胞生长调控及恶性肿瘤形成机制密切相关。肿瘤细胞由于端粒酶的激活维持了端粒的长度而获得永生 ,因此对组织或细胞内端粒酶活性的检测及其意义已日益受到临床的高度重视。本文采用端粒重复扩增方法 (ｔｅｌｏｍｅｒｉｃｒｅｐｅａｔａｍ ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｏｃｏｌＴＲＡＰ)对 2 7例肺癌组织及 2 7例癌旁组织进行端粒酶活性检测 ,并结合临床病理资料分析端粒酶活性在肺癌中的表达及临床意义 ,现将结果报告如下。材料与方法一、标本来源　收集 1999…     

冬凌草甲素对HL-60细胞的生长抑制作用及其对细胞端粒酶活性的调节

目的：探讨冬凌草甲素对HL-60细胞的生长抑制作用及其对细胞端粒酶活性的影响．方法：应用噻喳蓝(MTT)还原法检测细胞生长抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡及bcl-2基因的表达水平；应用端粒重复扩增(TRAP)法检测端粒酶活性。结果：5nmol／L～25nmol／L的冬凌草甲素可诱导细胞凋亡．抑制细胞增生。在细胞生长受抑制过程中．端粒酶活性及bcl-2表达水平显著下降。结论：冬凌草甲素可诱导急性白血病HL-60细胞凋亡、抑制细胞增生；其作用机制与端粒酶活性下降及bcl-2的表迭水平下调有关．其中bcl-2的表达水平可能起重要的调节作用。     

端粒酶抑制剂对肿瘤细胞及其端粒酶活性的影响

目的：探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法：选择人结肠癌细胞株ＨＣ８６９３、人肺癌细胞株Ａ５４９以及人肝癌细胞株Ｌ７４０２作为靶细胞,观察３’－叠氮－３’－脱氧胸腺核苷（ＡＺＴ）和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸（Ｓ－Ｏｌｉｇｏｓ）对上述几种肿瘤细胞株的作用,用ＭＴＴ试验测定细胞毒作用;＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验测定细胞增殖速度;用端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）半定量方法测定细胞增殖速度;用     

低表达DJ-1调控PI3K/AKT通路对肺癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨低表达DJ-1对肺癌细胞增殖凋亡及PI3K/AKT通路的影响。方法:采用Western blot检测肺癌细胞系中DJ-1蛋白的表达;以脂质体法转染干扰SK-MES-1细胞中DJ-1蛋白的表达后,MTT法检测细胞的增殖变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞中p-AKT和AKT蛋白的表达水平;将PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理SK-MES-1细胞48 h后,MTT法和流式细胞仪分别检测细胞的增殖和凋亡情况,Western blot检测细胞中p-AKT和AKT蛋白的表达。结果:与正常肺上皮BEAS-2B细胞相比,肺腺癌A549细胞和肺鳞癌SK-MES-1细胞中DJ-1蛋白的相对表达量均显著升高,且SK-MES-1细胞中DJ-1蛋白的表达量高于A549细胞,差异均有统计学意义（P＜0.05）。转染后siRNA DJ-1组细胞中DJ-1蛋白的表达量明显低于对照组（P＜0.05）;与对照组相比,转染24 h后siRNA DJ-1组细胞的吸光值（OD值）变化不显著（P＞0.05）,而转染48 h和72 h后细胞的OD值明显降低（P＜0.05）;转染48 h后,与对照组相比,siRNA DJ-1组细胞的凋亡率显著升高（P＜0.05）,p-AKT/AKT值显著降低（P＜0.05）。SK-MES-1细胞经抑制剂LY294002处理48 h后,细胞的增殖凋亡趋势与下调DJ-1表达的结果相一致。结论:DJ-1在肺癌细胞中高表达,下调其表达能够抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。     

核酶对食管癌EC9706细胞端粒酶活性及凋亡的影响

目的：观察针对人端粒酶RNA模板区的核酶对食管癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法：利用脂质体Lipofectamine介导，将已构建好的带有端粒酶核酶基因的重组质粒pBBS212Rz及空载质粒pBBS212转染食管癌EC9706细胞，采用TRAP—ELISA法检测端粒酶活性，用倒置相差显微镜及流式细胞仪观察细胞生长和凋亡情况。结果：重组质粒pBBS212Rz转染的食管癌EC9706细胞的端粒酶活性明显下降，细胞生长速度明显变慢，凋亡加速。结论：端粒酶核酶对食管癌细胞端粒酶活性和细胞生长有抑制作用，可望成为食管癌基因治疗的新方法。     

端粒、端粒长度、端粒酶活性与卵巢癌发生的关系

端粒长度、端粒酶活性与细胞无限增殖密切相关，已成为肿瘤学研究领域的一个热点。本文对端粒结构、端粒长度、端粒酶活性与卵巢癌发生的关系作一综述。     

三氧化二砷对人肺癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对人肺癌的潜在性治疗作用及可能的机制。方法 选用人肺癌细胞株ＧＬＣ－８３,运用细胞培养法、ＭＴＴ法、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞生长曲线、细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 三氧化二砷可明显抑制ＧＬＣ－８２细胞的增殖,其抑制作用具有时－效和量－效关系。当４．０μｍｏｌ／Ｌ三氧化二砷处理ＧＬＣ－８２细胞９６小时,增殖抑制率达８１．０５％,ＦＣＭ检测肿瘤细胞ＤＮＡ含量,观察到三氧化二砷ＧＬＣ－８２细胞周期阻滞于Ｇ２／Ｍ期,细胞周期进程变慢,同时出现剂量依赖性Ｇ１峰。结论 三氧化二砷能有效地抑制人肺癌细胞株ＧＬＣ－８２的增殖,其可能的机制与三氧化二砷使细胞阻滞于Ｇ２／Ｍ期并诱导其调亡有关。     

EMP INDUCES APOPTOSIS IN HUMAN LUNG CARCINOMA CELL LINE GLC-82

The possibility of health risks resulting from exposure to electric and magnetic fields provides a strong motivation to determine how such fields interact with cells. The short, intense electromagnetic pulse (EMP) produced by high-altitude nuclear explosions may radiate over many hundreds of miles. Basically, EMP consists of a pulse of radio-frequency waves with a nearly instantaneous rise in the electric and magnetic fields and a subsequent decline in the fields. EMP radiation may be repre…     

Induction of apoptosis by SeO<Subscript>2</Subscript> in human lung carcinoma cell line GLC-82

Objective:To investigate the effect of selenium dioxide(SeO2) on human pulmonary adenocarcinoma GLC-82 cell lines to reveal its probable mechanism and the relationship between apoptosis and SeO2. Methods: Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) method, flow cytometry (FCM), DNA agarose gel electrophoresis, light and electron microscope were used to study cell apoptosis in human pulmonary adenocarcinoma cell line GLC-82 treated by SeO2 at different concentrations (3, 10, 30μmol/L) and for different times (24, 48, and 72 h). Results: SeO2 significantly inhibited the proliferation and induced the cell apoptosis of GLC-82 at the different concentrations after treatment of 48h and 72 h. Conclusion: Selenium dioxide could inhibit the growth of lung cancer GLC-82 cells through inducing apoptosis. The effect of inhibition is dose-dependant and time-dependant.     

８-溴-７-甲氧基白杨素对人小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的　观察８-溴-７-甲氧基白杨素（ＢｒＭＣｈＲ）对人类小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）细胞株ＮＣＩ Ｈ４４６增殖和凋亡的影响。方法　体外培养ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞,ＭＴＴ比色法测定ＢｒＭＣｈＲ对ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞增殖的抑制作用,平皿克隆形成法测定ＢｒＭ ＣｈＲ对ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞集落形成的抑制作用;ＤＮＡ凝胶电泳观察ＢｒＭＣｈＲ诱导基因ＤＮＡ梯形条带,流式细胞术（ＦＣＭ）分析ＢｒＭＣｈＲ对ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞周期的影响。结果　ＭＴＴ法显示ＢｒＭＣｈＲ能明显抑制ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞增殖,且呈浓度依赖性;平皿克隆形成法结果显示ＢｒＭＣｈＲ能明显抑制ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞集落的形成;琼脂糖凝胶电泳检测呈现典型“梯形”ＤＮＡ条带;ＦＣＭ结果显示ＢｒＭＣｈＲ将ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞周期阻滞在Ｇ１期。结论　ＢｒＭＣｈＲ具有抑制ＮＣＩ-Ｈ４４６细胞增殖并诱导其凋亡的作用。     

大蒜素对结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖的影响

目的：观察大蒜素对结肠癌细胞ＬｏＶｏ生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ＬｏＶｏ细胞,倒置显微镜下观察ＬｏＶｏ细胞的形态学变化,采用ＭＴＴ法检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞增殖抑制能力,Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ ＦＩＴＣ标记流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞周期影响。结果：大蒜素可抑制人结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,２４、４８和７２ｈ大蒜素抑制ＬｏＶｏ细胞的ＩＣ５０分别为３２.２３、１０.７４和６.５８μｇ／ｍｌ;大蒜素能够诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡,作用２４ｈ其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用４８ｈ其诱导凋亡作用峰值浓度为８μｇ／ｍｌ,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用ＬｏＶｏ细胞２４ｈ后,大蒜素浓度低于４μｇ／ｍｌ时,ＬｏＶｏ细胞周期被阻滞于Ｇ２／Ｍ;     

Effect of SeO<Subscript>2</Subscript> on telomerase activity in human lung carcinoma cell line GLC-82

Objective: To observe the effect of inhibition of telomerase activity by selenium dioxide (SeO2) on lung carcinoma cell line GLC-82. Methods: TRAP-PCR-ELISA was used to study the changes of telomerase activity in human pulmonary adenocarcinoma cell line GLC-82 treated by SeO2 at the different concentrations (3, 10, 30 μmol/L) and for different times (24, 48, and 72 h). Results: SeO2 inhibited the telomerase activity of GLC-82 at the different concentrations after treatment of 24, 48 and 72 h. Conclusion: SeO2 inhibits from telomerase activity of human lung carcinoma line GLC-82. The effect of inhibition is dose-dependant and time-dependant.     

Genistein对人尿道鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察Genistein(GEN)对人尿道鳞癌细胞系HUS-98细胞增殖和凋亡的影响.方法MTT法检测细胞增殖,碘化丙啶(PI)和Annexin V-FITC双染色的流式细胞分析方法检测凋亡,台盼蓝拒染法测定淋巴细胞活力,免疫细胞化学检测雌激素受体(ER)蛋白的表达.结果低浓度(1×10-111～1×10-8mol/L)GEN促进HUS-98细胞的生长,处理3 d时,1×10-8mol/L组的细胞数比对照组的增加9%(P＜0.01);高浓度(1×10-7mol/L～5×10-4mol/L)GEN则浓度依赖性地引起HUS-98细胞数目逐日减少,但是除5×10-4mol/L外的其余浓度对正常淋巴细胞的生长没有影响.1×10-6mol/L GEN作用于HUS-98细胞24～48 h,凋亡细胞和坏死细胞的比率均增加,且有时间依赖性.HUS-98细胞表达ER蛋白.结论高浓度GEN具有抑制ER阳性的人尿道鳞癌细胞的生长和诱导凋亡及坏死的作用,为今后用于尿道鳞癌的治疗提供了实验依据.     

齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖、侵袭和诱导细胞凋亡的研究

 目的　研究齐墩果酸抗人肺癌细胞增殖、侵袭和诱导细胞凋亡的作用 ,并探讨其抗侵袭作用的机理。方法　用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、对重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及组织蛋白酶B活性测定观察齐墩果酸对PGCL3细胞侵袭能力的影响 ,用吖啶橙 -溴乙啶荧光双染法和TUNEL法检测细胞凋亡。结果　齐墩果酸可降低PGCL3细胞增殖能力并呈剂量依赖性 ,IC50 为 4 0 .71 μmol/L ;35 μmol/L和 4 5 μmol/L齐墩果酸均能抑制PGCL3细胞的侵袭能力 (P <0 .0 1 )且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上述浓度的该药物对细胞的运动、粘附及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用 (P <0 .0 5和P <0 .0 1 ) ;软琼脂集落形成率也显著降低 ;上述浓度的药物处理 4 8h均使PGCL3细胞凋亡率显著升高 (P <0 .0 1 )。结论　齐墩果酸有抗PGCL3人肺癌细胞增殖和侵袭作用 ,并有诱导PGCL3细胞凋亡的作用。其抗侵袭机理不是对侵袭的某一环节的阻断 ,而是对侵袭各个基本环节都有抑制作用     

miR-204对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨miR-204在人乳腺癌组织及MCF-7细胞中的表达水平及其对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法 提取癌症和肿瘤基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库中浸润性乳腺癌的miR-204相关数据进行汇总,转染miR-204过表达病毒,筛选稳定转染细胞株并通过RT-qPCR检测转染率,MTT法检测过表达miR-204后乳腺癌MCF-7细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 结果 miR-204在浸润性乳腺癌组织中的表达水平较癌旁组织明显下调（P＜0.001）,且与淋巴结转移和远处转移相关（P＜0.05）。过表达miR-204能够抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力（P＜0.05）;miR-204上调后,细胞凋亡率达到（34.7±1.9）%,细胞凋亡能力明显增强（P＜0.001）。结论 miR-204可抑制乳腺癌细胞增殖并介导细胞凋亡。