苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的作用。方法采用复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,测定各组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量,光镜下观察各组大鼠肝组织病理切片。结果模型组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著升高(P<0.01),丹参治疗组、苦碟子治疗组血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);光镜下模型组肝组织病理切片胶原纤维增生程度积分最高,在用药治疗的各组中,丹参治疗组、苦碟子治疗组积分均有所恢复。结论苦碟子注射液有一定程度的抗肝纤维化作用。     

芍药苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用和机制研究

目的探讨芍药苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用及机制。方法建立雄性SD大鼠放射性肝纤维化实验动物模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、芍药苷治疗组(20、40、80 mg·kg-1),每组10只。除正常对照组外,其余各组均制备成放射性肝纤维化模型,造模后各组每天给予相应药物灌胃。于照射后第26周末处死大鼠,检测大鼠血清中AST、ALT的活性,ELISA法测血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN含量;光镜下观察肝脏HE染色、MASSON染色病理改变;碱水法检测大鼠肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)含量,免疫组化法测肝脏组织TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肝脏损伤和胶原纤维增生明显,其血清中AST、ALT活性明显升高,血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN含量明显增加,大鼠肝脏组织中Hyp含量增加,另外大鼠肝脏组织中TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达增加。与模型组比较,芍药苷治疗组可明显抑制大鼠血清中AST、ALT活性的升高,降低血清中TGF-β1、HA、PC-Ⅲ、LN的含量,降低肝脏组织中Hyp含量,减轻肝脏损伤程度及胶原纤维增生程度;芍药苷治疗组可减少大鼠肝脏组织中TGF-β1和Smad3/4/7蛋白表达。结论芍药苷具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与其阻断TGF-β1/Smad信号传导通路有关。     

脂质过氧化对实验性肝纤维化的影响

目的:了解脂质过氧化对实验性肝纤维化的影响。方法:将36只雄性Wistar大鼠分为正常组(N组)、3、6、9周组(A、B、C组),用CCL_4及5％酒精诱导肝纤维化模型,分别在3、6、9周宰杀动物,观察三组肝组织病理改变及检测肝组织中丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量变化。结果:A组肝组织中MDA和HYP含量明显高于正常大鼠组(P<0.01)。随染毒时间延长,肝组织中MDA和HYP含量不断增加,三组间有显著性差异(P<0.01)。光镜下,A、B、C组肝组织呈现不同程度的肝纤维化,染毒时间越长纤维化程度越重。肝组织中HYP含量变化与MDA含量变化呈正相关,γ为0.80(P<0.01)。结论:CCL_4及低浓度酒精诱导的肝纤维化与肝脂质过氧化有关。     

慢性乙肝血清肝纤维化标志物检测临床意义

目的:评价血清肝纤维化标志物(透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层粘蛋白)在诊断慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者肝纤维化程度中的价值. 方法:应用放射免疫法检测111例慢性乙肝患者血清肝纤维化标志物:透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和层粘蛋白(LN);采取肝穿刺活检对肝组织进行病理诊断,判断肝组织纤维化程度,分析HA、PCⅢ、CⅣ和LN变化与患者病情及肝脏病变程度的关系. 结果:HA、PCⅢ和CⅣ异常率随肝炎发病程度及肝组织纤维化程度加重而显著升高,呈显著正相关;LN异常率与肝炎发病程度及肝组织纤维化程度无显著关系.双向有序列连表统计提示,血清肝纤维化标志物联合检测在肝组织纤维化程度判断中具有显著意义(χ2=14.277,P=0.002),血清肝纤维化标志物联合检测异常数量与肝组织纤维化程度为正相关(r=0.499,P=0.001). 结论:血清HA、PCⅢ、CⅣ联合检测可用于肝组织纤维化程度的判断.     

一氧化氮肝脏保护作用与氧自由基的关系

目的探讨内源性一氧化氮(NO)对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用及其与脂质过氧化的关系;方法以缺血再灌注制成大鼠模型,以工具药L-精氨酸(L-arg)为外源性NO的激动剂,观察内源性NO对肝脏损伤程度和脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)含量的影响;结果缺血再灌注可造成肝组织损伤,MDA含量增加,内源性NO水平降低,与对照组比较(P＜0.01).以L-arg激动内源性NO,可明显减轻肝组织损伤程度,同时MDA含量降低,NO水平升高,与IR组比较(P＜O.05);结论内源性NO具有肝脏保护作用,其保护机制可能与抗氧自由基有关.     

慢性乙型肝炎血清AFP与肝纤维化指标关系的临床探讨

有作发现肝组织中AFP的表达与肝纤维化程度正相关。为了探讨血清AFP与肝纤维化指标的关系，我们对251例血清AFP增高与正常慢性乙型肝炎(乙肝）患血清胶原1V(COIIV)、层粘蛋白（LN)、透明质酸(HA)含量进行了对比研究。结果显示，血清AFP增高与正常慢性乙肝患血清COIIV、LN、HA含量差别显(P<0.01)。现报告如下。     

舒肝安乐宁浸膏对肝纤维化大鼠肝脏组织的影响

目的研究舒肝安乐宁浸膏对实验性肝纤维化大鼠肝脏组织的影响,探讨其抗肝纤维化作用机理,为开发中药新药提供实验依据。方法皮下注射CCl4花生油溶液建立大鼠肝纤维化模型,以秋水仙碱为阳性对照,测定肝组织Hyp、MDA的含量和SOD、GSH—Px的活力,病理观察HE和Masson染色后的组织形态以及肝纤维化病变程度。结果舒肝安乐宁能明显降低肝组织中Hyp、MDA的含量,同时升高肝组织中SOD、GSH—Px的活力;病理组织形态学检查表明,舒肝安乐宁能明显减轻大鼠肝纤维化病变程度。结论舒肝安乐宁对CCl4造成的实验性肝纤维化大鼠具有一定的抗过氧化脂质、抗肝纤维化作用,以舒肝安乐宁高剂量组效果为佳。     

二咖啡酰奎宁酸对大鼠肝原代细胞保护作用的研究

目的　采用肝原代细胞培养及四氯化碳损伤法 ,观察 1 ,5 二 O 二咖啡酰奎宁酸对肝细胞的保护作用 ,并通过体外实验初步探讨二咖啡酰奎宁酸保护肝细胞的作用机制。方法　采用肝细胞消化酶两步灌注法 ,肝细胞消化液消化肝细胞 ,梯度离心分离肝细胞 ,细胞获得量为 (1 - 1 0 )× 1 0 7·ml-1 ,肝细胞活力在 90 %以上 ,以此为靶细胞。并利用四氯化碳损伤方法制造肝细胞损伤模型。分别采用3 H -胸腺嘧啶 (3 H -TdR) ,3 H -脯氨酸 (3 H -Pro)掺入 ,流式细胞术等方法 ,观察二咖啡酰奎宁酸对肝细胞的增殖、活力、凋亡及细胞周期等的影响 ,并测定天门冬氨酸转移酶活性。结果　二咖啡酰奎宁酸在 7.8～ 2 5 0mg·L-1浓度对肝细胞无明显毒性作用 ,能促进正常及四氯化碳损伤的肝细胞增殖及增强细胞活力 ,降低细胞上清的天门冬氨酸转移酶 (AST)活性 ,抑制四氯化碳引起的肝细胞凋亡以及改变受损细胞周期。结论　二咖啡酰奎宁酸具有显著的肝细胞保护作用 ,其作用机制为促进肝细胞的增殖及活力 ,抑制受损肝细胞的凋亡 ,并可明显降低天门冬氨酸转移酶水平     

NO在CCl4致大鼠肝纤维化中的氧化应激作用

目的探讨一氧化氮(NO)在CCl4致大鼠肝纤维化中的作用。方法Wistar大鼠34只,雄性,体重200~220g,用CCl4制造大鼠肝纤维化模型,另设正常对照组大鼠6只。HE染色、Massons染色,观察肝组织病理学改变;检测血清NO,肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果肝纤维化模型组大鼠第7周达到2期或3期肝纤维化,汇管区周围纤维隔形成并相互连接,部分纤维隔深入小叶内,小叶结构保留或紊乱,但无肝硬化,伴有中度脂肪变性及肝细胞空泡变性;血清NO水平明显增高(152·8±12·30μmol/Lvs.11·03±1·95μmol/L,P<0·05),肝组织MDA含量明显增高(2·11±0·26nmol/mgprotvs.0·73±0·13nmol/mgprot,P<0·05),SOD活性明显降低(44·96±5·36nU/mgprotvs.105·73±13·5nU/mgprot,P<0·05)。结论随着大鼠肝纤维化的形成,大鼠血清NO水平随之增高,进一步导致肝细胞炎症及损伤,促进了肝纤维化的形成。     

复方硫磺软肝丸抗慢性肝纤维化作用研究

目的探讨复方硫磺软肝丸对改良方法所致大鼠慢性肝纤维化模型的保肝及抗纤维化作用。方法采用配方饲料加腹腔注射CCl4橄榄油溶液的改良方法复制大鼠慢性肝纤维化模型。造模结束后,灌胃给药,每天2次,连续给药1 个月。末次给药后禁食12 h,留取大鼠血清及肝组织,检测血清中转氨酶（ALT、AST）指标、血清肝纤维化（HA、LN、Col-Ⅳ）指 标的变化,观察肝组织病理切片的变化。结果模型组大鼠有明显的肝损伤及肝纤维化病变;各给药组肝功能和肝纤维化程 度均有不同程度的改善,病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度较模型组明显减轻（P〈0.05）。结论复方硫磺软肝丸 对慢性肝纤维化大鼠有明显的保肝及抗肝纤维化作用。     

常压模拟高住低练对大鼠血清自由基及一氧化氮的影响

目的:探讨常压下模拟高住(海拔3000m)低练对大鼠血清自由基代谢及NO的影响.方法:40只雄性SD大鼠随机分为四组,分别为低住安静组、低住低练组、常压高住安静组和常压高住低练组,测定4周后的大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)变化.结果:4周常压模拟高住低练使大鼠血清SOD较低住低练组显著升高(P＜0.01);NO较常压高住安静组极显著升高(P＜0.01),与低住低练组相比无显著性差异;MDA较低住低练组极显著降低(P＜0.01).结论:4周常压模拟高住低练可以显著提高大鼠血清 SOD、NO活性,降低血清脂质过氧化物水平.     

氧化和抗氧化指标在大鼠高脂饮食所致脂肪肝中的动态变化

目的探讨氧应激和脂质过氧化在高脂饮食所致脂肪性肝炎形成中的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分为3组,每组10只。正常组普通饲料喂养;模型Ⅰ、Ⅱ组喂高脂饲料;12周末处死正常组、模型Ⅰ组大鼠;模型Ⅱ组大鼠继续喂养至16周末处死,测定血清转氨酶(ALT、AST),全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),肝匀浆丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,总抗氧化能力(T-AOC),一氧化氮(NO),诱导型一氧化氮合酶(iNOS),谷胱甘肽(GSH)水平,观察肝组织学改变。结果模型组大鼠12周出现单纯性脂肪肝,16周发展为脂肪性肝炎。与正常组比,模型组大鼠肝组织脂质过氧化产物MDA含量明显增多,而抗氧化物SOD,GSH,GSH-PX含量明显降低,且肝脏的脂肪变性严重程度随着高脂饮食喂养的时间延长而加剧。结论氧应激和脂质过氧化在肝组织脂肪变性后炎症的过程中发挥重要作用。     

力竭性游泳对小鼠脑、肝、肌组织自由基代谢和血清CK、LDH活性的影响

本文研究力竭性游泳对小鼠脑、肝、肌组织过氧化脂质（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）水平以及血清肌酸激酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的影响。结果表明：力竭性游泳后小鼠肌组织自由基生成增多，ＬＰＯ水平显著增加，导致肌细胞膜通透性改变，血清ＣＫ、ＬＤＨ活性明显升高，同一运动负荷对小鼠不同组织器官自由基代谢的影响不尽相同，以骨骼肌变化最为明显，肝脏次之，脑组织变化相对稳定。     

氧应激、脂质过氧化及肝细胞凋亡在非酒精性脂肪肝病中的作用

目的连续动态观察氧应激、脂质过氧化及凋亡肝细胞在非酒精性脂肪肝病（Non-alcoholic fatty liver dis-ease,NAFLD）大鼠模型中的表达情况,从而揭示其在非酒精性脂肪肝病发生及进展过程中的作用及几者的相互关系。方法取雄性SD大鼠40只随机分为2组：正常对照组10只,给予基础饲料;造模组3O只,给予88%基础饲料＋1O%猪油＋2%胆固醇,均正常饮水。对照组大鼠于8周后处死。造模组分别于8,12,16周处死,取肝组织标本,制备石蜡切片,行苏木精一伊红（HE）染色观察肝组织光镜下的病理改变,苦味酸染色观察肝脏纤维化程度;测定各组大鼠超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量;用TUNEL法检测肝细胞凋亡。采用多元线性回归分析评估氧应激、脂质过氧化及肝细胞凋亡在NAFLD中的作用及几者的相关性。P〈0.05有统计学意义。结果（1）随造模时间延长,造模组大鼠肝组织脂肪变、炎症程度逐渐加重,后期出现少数纤维化表现（P〈0.05）;（2）造模组大鼠血清SOD活性逐渐降低,MDA含量逐渐升高,且SOD活性与肝组织脂变、炎症程度呈负相关（r=-0.726,-0.828;P〈0.01）,而MDA含量与肝组织脂变、炎症和纤维化程度程度呈正相关（r=0.876,0.931,0.420;P〈0.01）;（3）实验大鼠肝细胞凋亡程度与肝组织脂变、炎症程度呈正相关,与纤维化程度相关（r=0.843,0.922,0.662;P〈0.01）;（4）氧应激、脂质过氧化程度与肝细胞凋亡程度亦存在明显相关性（r=-0.700,0.885;P〈0.01）。结论在非酒精性脂肪肝病大鼠模型中,氧应激、脂质过氧化及肝细胞凋亡程度与肝损伤程度密切相关;而且氧应激、脂质过氧化与肝细胞凋亡之间联系紧密且相关,氧应激、脂质过氧化可能是非酒精性脂肪肝病中诱导肝细胞凋亡的首要因素。     

The protective effects of N-acetyl-L-cysteine and epigallocatechin-3-gallate on electric field-induced hepatic oxidative stress

PURPOSE: To investigate the effects of 12 kV/m electric (E) field sourced by power lines on oxidative and nitrosative stress, and antioxidant status. Furthermore, the study aimed to examine the protective effects of N-Acetyl-L-cysteine (NAC) and epigallocatechin-gallate (EGCG) in the liver tissues of guinea pigs against the possible detriments of electromagnetic field exposure. MATERIALS AND METHODS: Guinea pigs were exposed to 50 Hz 12 kV/m E-field. NAC and EGCG were administered intraperitoneally. Malonedialdehyde (MDA), a product of lipid peroxidation (LPO), and nitric oxide derivatives (nitrate (NO(3)), nitrite (NO(2)), total level of nitric oxide (NO(x)) were estimated as biomarkers of oxidative and nitrosative stress, respectively. Superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), and myeloperoxidase (MPO) were evaluated as endogenous antioxidant enzymes in liver tissues of the guinea pigs. RESULTS: The results of our study indicated a significant increase in the levels of oxidant products (MDA, NO(3), NO(2), NO(x)), and a significant decrease in antioxidant enzyme (SOD, GSH-Px and MPO) activities. We also found that the individual or plus application of NAC and EGCG resulted in the reduction of oxidative stress prior to E field application. CONCLUSION: To conclude, extremely low frequency (ELF) electric field has potential harmful effects on the living organisms by enhancing the free radical production. NAC and EGCG might have hepatoprotective effects in ELF-E field induced oxidative and nitrosative stress.     

丹黄汤治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的观察中药丹黄汤(丹参、黄芪、大黄)抗慢性乙肝肝纤维化的疗效。方法将179名慢性乙肝患者随机分为4组:Ⅰ组50例;Ⅱ组49例,Ⅲ组40例,Ⅳ组40例。Ⅰ组服用丹黄汤;Ⅱ组肌注IFNα-2b;Ⅲ组服用复方丹参滴丸;Ⅳ组为对照组,按常规给予护肝降酶治疗。疗程均为3个月。常规检测肝功能,放射免疫方法检测透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)和层黏蛋白(LN)等血清肝纤维化指标,彩色多普勒检查肝脾形态、门静脉主干(Dpv)、脾静脉内径(Dsv)、门静脉血流速度(Vpv)和脾厚度(st)等肝纤维化相关血流动力学指标。结果治疗3月后,各组肝功能较治疗前均有明显改善,但治疗组与对照组比较无显著差别;各组血清纤维化指标(LN,PCⅢ,HA和Ⅳ-C)较治疗前均有显著下降,治疗组与对照组比较,有显著性差异(P<0.01),其中,Ⅰ组的作用优于Ⅱ,Ⅲ组(P<0.01),停药6月后仍优于Ⅲ组(P<0.01),对LN,HA和Ⅳ-C的作用优于Ⅱ组(P<0.05);彩色多普勒观察发现,各组对肝脾形态和肝纤维化相关血流动力学指标的作用较治疗前均有改善,Ⅰ组、Ⅱ组的效果相当,明显强于对照组(Ⅳ组),Ⅰ组对Dpv和st的作用强于Ⅲ组(P<0.05),停药6个月后,Ⅰ组药物对Dpv和Vpv的影响仍可保持。结论中药丹黄汤能有效地改善肝功能,减轻肝纤维化程度,且疗效稳定、持久。     

红景天黄芪合剂预防大鼠模拟高原缺氧脑损伤的作用

目的 观察红景天黄芪合剂对模拟高原缺氧脑损伤的保护作用并探讨其机理。方法 用成年SD大鼠随机分为常氧对照组,模拟高原缺氧组,红景天黄芪合剂预防组,后两组在密闭减压舱内,模拟海拔8000m维持7h,检测大鼠脑组织含水量、Na^＋,K^＋-ATP酶活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、脑组织和血清丙二醛（MDA）含量和乳酸含量。结果 脑含水量缺氧组较对照组显著增高,预防组较缺氧组明显下降。脑组织和血清MDA含量缺氧组明显高于对照组,预防组则显著降低。脑组织和血清乳酸含量缺氧组均显著升高,预防组较缺氧组明显下降。结论 红景天黄芪合剂可显著预防模拟高原缺氧的脑损伤作用,该作用与其对抗膜脂质过氧化作用,抑制脑组织和血清中乳酸堆积有一定关系。     

透明质酸、层粘连蛋白作为早期放射性肺损伤标志物的实验研究

目的 :探索透明质酸和层粘连蛋白对早期放射性肺损伤的诊断价值以及氟伐他汀对放射性肺损伤的治疗作用。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照组 (C组 )、单纯照射组 (R组 )和氟伐他汀防治组 (TG组 )。TG组于照射前一周开始服氟伐他汀2 0mg·kg- 1·d- 1,直至活杀。其他组灌服等容量生理盐水。R组和TG组以直线加速器全胸部照射 ,单次剂量 2 0Gy ,于照射后5、15、3 0、60d以硫喷妥钠 40mg·kg- 1腹腔内注射。麻醉后固定 ,抽取心脏血 3ml ,分离血清。用放射免疫法测透明质酸、层粘连蛋白含量 ,统计分析用重复测量多因素方差分析和t检验。结果 :透明质酸在R组于照射后 60d较C组显著升高 (P <0 .0 1) ,TG组较R组减低 (P <0 .0 5)。层粘连蛋白在R组 3 0、60d较C组升高 (P <0 .0 5) ,TG组在相应时间减低 (P <0 .0 5)。结论 :透明质酸可作为放射性肺炎治疗情况的监测指标 ,层粘连蛋白可以作为预测纤维组织增生的一个早期指标 ;氟伐他汀对放射性肺损伤有一定的防治作用 ,用药后透明质酸、层粘连蛋白增高均受抑制     

Induction of radical scavenging ability and suppression of lipid peroxidation in rat liver microsomes following whole-body, low-dose X-irradiation

PURPOSE: To investigate changes in radical scavenging ability and lipid peroxidation in liver microsomal membranes and cooperative suppression of lipid peroxidation by microsomal and cytosolic radical scavengers, 24 h after whole-body, low-dose X-irradiation of rats. MATERIALS AND METHODS: Male Wistar rats were irradiated with 1-50 cGy of X-rays. Liver microsomal radical scavenging ability was determined using the trapping ability of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), a stable free radical. Microsomal alpha-tocopherol (Vit.E) content was determined using an electrochemical detector. Microsomal glutathione peroxidase (GPx) activity was determined as the consuming rate of NADPH. Microsomal lipid peroxidation was determined by the thiobarbituric acid method. RESULTS: Low molecular weight radical scavenging ability of rat liver microsomes increased 24 h after whole-body, low-dose X-irradiation when alpha-tocopherol was included, showing a maximum level at 5-10 cGy. Microsomal GPx activity also increased 24 h after 5 cGy irradiation. The lipid peroxidation level in microsomes decreased, showing a maximal suppression at 5 cGy. High-dose irradiation-induced microsomal lipid peroxidation was strongly suppressed cooperatively by microsomal and cytosolic antioxidants induced by low-dose irradiation. CONCLUSION: Low doses of radiation induce increases in liver microsomal antioxidants, which in turn result in enhanced suppression of microsomal lipid peroxidation cooperatively with cytosolic antioxidants induced by low-dose irradiation.