急性白血病细胞bcl-2、Bax和Fas/Apo-1基因表达的研究

目的研究bcl-2、Bax、Fas/Apo-1基因在急性白血病(AL)细胞中的表达及其与AL的分型、临床特征、疗效及预后因素的关系.方法采用免疫组化方法检测54例初治AL骨髓细胞bcl-2、Bax、Fas/Apo-1蛋白表达情况.结果 AL骨髓细胞中bcl-2基因的表达显著高于正常对照组(P<0.05),而Bax、Fas/Apo-1基因的表达显著低于正常对照组(P<0.05).bcl-2、Bax、Fas/Apo-1基因表达在急性髓系白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)无显著差异;在AML亚型中,bcl-2在M4及M5中的表达高于M1、M2和M3(P<0.05);而Bax及Fas/Apo-1的表达在各亚型中无显著性差异(P>0.05).bcl-2的表达与初诊时的白细胞数呈正相关(r=0.44,P<0.05),与疗效呈负相关(r=-0.40,P<0.05),Bax的表达与骨髓白血病细胞数呈负相关(r=-0.39,P<0.05),与髓外浸润呈负相关(r=-0.45,P<0.05),急性淋巴细胞白血病中 Fas/Apo-1的表达与疗效呈正相关(r=0.34,P<0.05),与骨髓原始细胞数呈负相关(r=-0.71,P<0.05).结论 bcl-2、Bax、Fas/Apo-1基因的紊乱可能在AL的发病中起着重要作用,还与白血病的某些临床特征、疗效及预后因素密切相关.     

中国实验血液学杂志1998年第6卷主题索引

AAML-Eto融合基因 融合基因检测在AML-M_2与AML-M_3鉴别诊断中的价值及其临 床意义,(2):158axl基因 axl基因在骨髓增生异常综合征患者外周血细胞的表达,(1):63氨基甾体 新型氨基甾体类对粒系白血病HL-60细胞系的增殖抑制和分化 诱导的作用,(4):287 Bbcl-2基因 慢性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达与重排的研究,(1):45 RT-PCR检测bcl-2在急性髓细胞白血病的表达及其临床意义, (1):79 bcl-2基因和Fas基因与小儿急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的关 系及其临床意义,(2):129 反义bcl-2正义bcl-Xs逆转录病毒重组体的构建,(2):137bcl-Xs基因 反义bcl-2-正义bcl-Xs逆转录病毒重组体的构建,(2):137bcr-abl bcr-abl融合基因及其检测,(4):253BCR/ABL 融合蛋白     

RT-PCR检测bcl-2在急性髓细胞白血病的表达及其临床意义

白血病是造血系统的恶性肿瘤,造血干细胞增殖失控及正常凋亡机制的受抑或丧失在白血病的发生中起重要作用。白血病患者对多种药物耐受是其临床化疗失败的主要原因,除多药耐药基因mdr等作用外,阻止肿瘤免于经凋亡而致死亡能力的降低与临床MDR有密切关系。bcl-2是调控细胞凋亡的重要基因,在血细胞的发育、成熟和衰亡中有重要意义,并且参与了肿瘤的发生、发展和衍变过程。为了评估bcl-2在急性髓细胞白血病(AML)中治疗预测的作用,探讨其在临床化疗耐受的作用,本文采用半定量RT-PCR方法检测20例AML患者表达水平。     

bcl-2的表达与急性白血病化疗反应的关系

Sachs曾预言bcl-2基因表达可能与肿瘤细胞产生耐药性有关。为此,作者探讨了bcl-2基因表达与急性白血病化疗反应的关系。 病例资料 急性淋巴细胞白血病(ALL)28例,     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中凋亡相关基因表达的变化及硫酸镁与川芎嗪治疗对其的影响

目的研究凋亡相关基因Bax、bcl-2及FAS在妊娠期高血压疾病患者胎盘绒毛中的表达,以及硫酸镁与川芎嗪治疗后表达的变化,探讨硫酸镁与川芎嗪治疗妊娠期高血压疾病对凋亡相关基因表达的影响及疗效机制。方法采用免疫组织化学PAP法结合计算机显微图像分析,检测正常孕妇(15例)、妊娠期高血压疾病患者(19例)、硫酸镁治疗后患者(28例)和硫酸镁与川芎嗪治疗后患者(25例)的胎盘组织中Bax、bcl-2及FAS表达情况。结果胎盘绒毛中有Bax、bcl-2和FAS基因蛋白表达,Bax、bcl-2主要分布于合体滋养层细胞,FAS则主要分布于干绒毛的血管壁平滑肌细胞;子痫前期时Bax、bcl-2和FAS阳性反应平均灰度值分别为53.9±8.1、55.1±6.2和100.9±12.6,较正常妊娠组的42.3±5.7、31.7±3.8和59.9±6.5及同组妊娠期高血压的43.7±7.1、32.1±5.1和60.7±10.3明显增加(均为P<0.01);2组妊娠期高血压疾病治疗组Bax、bcl-2表达均无明显改变,但子痫前期硫酸镁与川芎嗪治疗组FAS阳性反应平均灰度值为82.3±10.1,较妊娠期高血压疾病组(100.9±12.6)和硫酸镁组(98.7±15.9)明显减弱(P<0.01)。结论胎盘组织中Bax、bcl-2及FAS在妊娠期高血压疾病,尤其子痫前期发病中可能起重要作用;硫酸镁与川芎嗪治疗能使胎盘绒毛FAS基因蛋白表达减弱,抑制胎盘绒毛的细胞凋亡,提高子宫-胎盘-胎儿血供。     

急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞检测及其对细胞凋亡的作用

目的研究CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在急性白血病患者外周血中的检测,并探讨其对细胞凋亡的作用。方法将65例急性白血病患者(包括急性淋巴细胞性白血病33例和急性髓系白血病32例)分为未缓解组(28例)和缓解组(37例),25例健康志愿者作为对照组。根据是否合并感染又分为合并感染组(39例)和未合并感染组(26例)。采用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3表达,并与正常对照组进行比较。同时,利用荧光定量PCR的方法的检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达。结果与正常对照相比,急性白血病患者(未缓解组和缓解组)外周血中CD4~+CD25~+Foxp3~+比例明显提高,且治疗缓解后CD4~+CD25~+Foxp3~+表达下调(P0.05)。凋亡相关基因Bcl-2表达上调,Bax、P53表达下调。结论急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞明显升高,并且,影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达,提示CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞可能通过细胞凋亡信号通路影响急性白血病的发展。     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/A02 细胞株耐药的影响

本研究探讨急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对K562/A02细胞耐药性的影响及其机制。从白血病患儿骨髓中分离、培养并鉴定MSC;建立K562/A02细胞株与MSC共培养的体系,应用AnnexinV-FITC检测一定浓度的阿霉素(ADM)对不同培养条件下K562/A02细胞凋亡的影响;RT-PCR检测K562/A02细胞中的凋亡基因家族中bcl-2和bax基因;荧光定量PCR检测多药耐药基因mdr1浓度。结果表明,单独培养组白血病细胞早期凋亡率为(8.38±0.29)%,而黏附培养组为(1.97±0.11)%,差异具有统计学意义(p<0.05)。相对于单独悬浮培养的K562/A02细胞,黏附共培养的K562/A02细胞bcl-2基因表达明显增强,bcl-2/bax比值显著增高;K562/A02单独悬浮培养组、黏附共培养组细胞中mdr1的水平比较无统计学差异(p>0.05)。结论:白血病患儿MSC能够使白血病细胞逃避药物的促凋亡作用,K562/A02对阿霉素产生耐药性可能与黏附共培养后bcl-2基因表达增强有关,而与其本身含有的mdr1基因无关。     

1997年第5卷主题索引

AAPC基因 瘤细胞纯度梯度体系及。AP(、,LOH模型的建立和意义,(1): 94 以PcR—RFLP分析检测髓系白血病人APC:基因的杂合性缺 失,(1):99APC-LOH模型 瘤细胞纯度梯度体系及AP(:乙OH模型的建立和意义,(1): 94 BBax基因 链亲和索胶体金原位杂交检测急性白血病细胞的B“基因 表达,(4):417bcl-2基因 骨髓增生异常综合征骨髓造血祖细胞凋亡与Fas,bcl-2' c-myc的表达及HGFs的影响,(2):179 bcl-2在HL一60细胞分化和凋亡过程中的表达,(4):372bcl-2/JN基因 人恶性淋巴瘤细胞系p53,p16与bcl一2/JH基因的研究, (3):253bcr/abl融合基因 …     

急性白血病患者bcl—2和bax基因表达的临床意义及其与mdr—1基因表达的关系

细胞凋亡受抑作为肿瘤细胞的耐药机制,是急性白血病(AL)预后不良的原因之一.bcl-2家族是目前最受重视的调控细胞凋亡的基因家族,本研究为探讨bcl-2和bax基因在急性白血病表达的意义,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定70例初治AL患者及20例正常人的bcl-2,bax,mdr-1基因mRNA水平的表达,用流式细胞术检测其蛋白表达.结果表明,bcl-2和bax基因在AL患者广泛表达,bcl-2 mRNA平均表达水平明显高于正常对照(1.46 vs 0.71,P＜0.05).bcl-2和bax基因表达及bax/bcl-2比值与AL患者的年龄、性别、血小板计数、血红蛋白水平、骨髓原始细胞百分率、FAB分型和S+G2M%均未发现相关.Bcl-2蛋白表达(34.6%vs 69.2%,P＜0.05),bax/bcl-2 mRNA比值(37.1%vs 82.9%,P＜0.01)决定AL对化疗的敏感性,与AL CR率密切相关.bax/bcl-2 mRNA比值还是影响总生存期的因素.bcl-2与bax基因表达和mdr-1表达两者无相关关系.     

慢性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达与重排的研究

人类恶性肿瘤常伴有非随机性染色体异常,并由于使调控细胞生长的基因表达失控而在肿瘤的发生中发挥十分关键的作用。bcl-2基因由于t(14,18)染色体易位而激活在低恶度的非霍奇金淋巴瘤的发生和演变中的作用已举世公认。类似的重排和非重排引起的bcl-2过度表达也见于慢性淋巴细胞白血病。我们应用免疫组化染色和聚合酶链反应检测了11例慢性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达和重排,结果发现所有病例均高度表达Bcl-2蛋白,1例有t(14,18)(q32,q21)染色体易位。结论提示慢性淋巴细胞白血病普遍存在bcl-2基因高表达,bcl-2基因在慢性淋巴细胞白血病的发生和发展中发挥着十分重要的作用。     

bcl-2小干扰RNA对HL-60/VCR细胞耐药性逆转的研究

为了探讨以bcl-2基因作为靶分子进行白血病多药耐药基因治疗的可行性,构建bcl-2基因的小干扰RNA载体并将其转导入HL-60/VCR细胞,在G418筛选后应用Western blot进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后生长速度和药物敏感性的变化;Western blot检测细胞转染前后凋亡相关蛋白Bax和耐药相关蛋白ZNRD1的表达变化.结果表明：成功构建了bcl-2的小干扰RNA载体并转染HL-60/VCR;经蛋白质水平检测证实成功建立了bcl-2低表达的白血病细胞模型;转染后的细胞对长春新碱和阿霉素的敏感性增强,且低表达耐药相关蛋白ZNRD1.结论：bcl-2小干扰RNA真核表达载体能在一定程度上逆转白血病细胞的耐药性.     

bcl-2基因在急性白血病细胞中的表达及其意义

目的 :探讨急性白血病 (AL)患者骨髓细胞中bcl- 2基因的表达及其与AL的分型、临床特征、疗效及预后因素的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测 5 4例初治AL骨髓细胞的bcl- 2基因的表达情况 ,分析其与FAB分型、临床特征、疗效及预后因素的关系。结果 :(1)AL骨髓细胞中bcl- 2基因的表达显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,bcl- 2基因表达在急性髓系白血病 (AML)与急性淋巴细胞白血病 (ALL)无显著差异 ;(2 )按FAB分型AML各亚型比较 :bcl- 2在M 4及M5中的表达高于M1、M2和M3(P <0 .0 5 ) ;bcl- 2的表达与初诊时的白细胞数呈正相关 (R =0 .4 4 ,P <0 .0 5 ) ,与疗效呈负相关 (R =- 0 .4 0 ,P<0 .0 5 )。结论 :bcl- 2基因在AL骨髓细胞中呈高表达 ,可作为AL疗效观察及预后判断的指标之一。     

IL-24体外诱导儿童急性白血病骨髓单个核细胞凋亡研究

本研究探讨IL-24对儿童急性白血病骨髓单个核细胞(BMMNC)凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。纳入本研究的确诊未治的儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)、儿童急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者各20例。取患者骨髓分离单个核细胞;用琼脂糖电泳方法检测BMMNC DNA;采用碘化丙锭染色流式细胞术和细胞核形态观察同时检测体外培养的急性白血病BMMNC增殖、分化过程中的凋亡状况;观察IL-24对它们的影响,并进行了定量分析。采用RT-PCR检测bcl-2及caspase-3 mRNA表达水平,观察IL-24对它们的影响。结果发现:IL-24可诱导体外培养的急性白血病BMMNC凋亡。在培养的48小时,可见到DNA出现梯形条带;IL-24 50 ng/ml用药组细胞凋亡程度较没加IL-24的对照组明显增加。IL-24可下调体外培养的急性白血病BMMNC bcl-2基因mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。结论:IL-24可诱导白血病BMMNC凋亡,其机制之一可能是下调bcl-2 mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。     

凋亡调控基因在婴幼儿白血病中的表达及预后研究

近年来，凋亡与疾病的关系日渐受到重视，多数学者认为细胞凋亡障碍可能参与恶性肿瘤的发生且影响其生物学行为。婴幼儿白血病是儿童急性白血病(AL)中比较特殊的类型．起病凶险，化疗效果差，预后不良。近年来随着化疗方案的不断改进，儿童AL的长期无病生存率有了显著的提高，但婴幼儿AL的疗效仍不理想。bcl-2是一种抗凋亡基因，高表达时可阻抑细胞凋亡的发生，为研究凋亡调控基因在婴幼儿白血病发病中作用。我们采用单克隆抗体荧光流式免疫学方法测定了20例婴幼儿白血病细胞bcl-2蛋白表达情况，初步探讨其对临床化疗、预后估计的价值。     

bcl—2反义寡核苷酸增强K562白血病细胞对As2O3药物敏感性

采用细胞培养法,免疫组化实验技术和流式细胞仪等项技术,研究了bcl-2基因反义核酸和砷剂单独及联合应用对K562细胞的生物效应,DNA及bcl-2蛋白的变化.结果显示,As2O3(2.0μmol/L)+bcl-2 ASODN(10.0μmol/L)联合作用比单用As2O3(2.0 μmo1/L)或bcl-2 ASODN(10.0μmol/L)显著增强诱导细胞凋亡的作用(P＜0.01);流式细胞仪检测显示,联合作用引起的bcl-2蛋白表达亦明显减少(P＜0.1).结论表明,bcl-2基因反义核酸能明显提高和显著增强K562白血病细胞对As2O3药物敏感性.     

缺血后适应对大鼠肾脏热缺血再灌注损伤凋亡相关基因bcl-2/bax表达的影响

目的探讨缺血后适应对大鼠肾脏热缺血再灌注损伤细胞凋亡相关基因bcl-2/bax表达的影响。方法将40只Wistar健康雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后适应组(IPo)和腺苷组(Ado组)4组。行右肾切除,左肾热缺血60min后再灌注24h建立大鼠肾脏急性热缺血再灌注损伤模型;C组仅右肾切除,左肾蒂游离;IPo组于再灌注前行6个10s无限制灌注加10s再缺血循环;Ado组于缺血前10min经静脉给予腺苷。采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)和免疫组化法检测各组肾脏组织中细胞凋亡相关基因bcl-2/bax表达水平。结果与C组相比,缺血60min再灌注24h可以导致肾脏组织中bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的相对丰度显著升高(P<0.05)。与IR组比较,经过后适应(Pos-Con)或腺苷(Ado)干预后bcl-2 mRNA表达水平升高更加显著,BaxmRNA表达水平显著降低(P<0.05),两种处理之间无显著差异(P>0.05)。比较各组bcl-2/Bax的比值,IR组较对照组显著降低(P<0.05),而Pos-Con和Ado干预后,与IR组比较bcl-2/Bax的比值显著升高(P均<0.05),两种处理之间无显著差异(P>0.05)。结论缺血再灌注可以上调大鼠肾脏促凋亡基因bax的表达,下调凋亡抑制基因bcl-2的表达,进而可能导致肾脏细胞过度凋亡;缺血后适应能够抑制促凋亡基因bax的过度上调,同时促进凋亡抑制基因bcl-2的表达,进而可能防止肾脏细胞过度凋亡。     

bcl-2在HL-60细胞分化和凋亡过程中的表达

细胞凋亡抑制基因bcl-2在髓系造血细胞中的表达与细胞分化程度有关。本研究证实全反式维甲酸(ATRA)可诱导HL-60细胞凋亡。流式细胞仪分析表明,在HL-60细胞分化凋亡过程中bcl-2表达逐渐下降,凋亡细胞bcl-2表达水平较低,而未凋亡细胞bcl-2仍维持在高水平。上述结果提示:经ATRA诱导分化成熟的HL-60细胞与正常粒细胞相似,最终走向凋亡;bcl-2表达降低可能对终末分化细胞凋亡有易化作用;未凋亡细胞bcl-2高表达可能是肿瘤细胞耐药和白血病复发的重要因素。     

中华眼镜蛇毒组分诱导人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞凋亡的研究

目的:探讨中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡及相关机制.方法:以NNAVC作用人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞,台盼蓝拒染法测定细胞毒性,流式细胞仪测细胞凋亡率,RT-PCR测细胞凋亡相关基因(Bax、Bak、Bcl-2)的表达.结果:NNAVC对KG1a细胞有显著的细胞毒性作用,能诱导KG1a细胞凋亡,促凋亡作用可能与Bcl-2表达下调和Bax表达上调有关.结论:NNAVC通过调节抗/促凋亡分子诱导KG1a细胞凋亡,提示NNAVC具有治疗复发难治性白血病的应用前景.     

Amll基因异常与儿童急性白血病相关研究进展

诸多研究发现细胞遗传学改变在急性白血病发生中起重要作用.其中以涉及amll基因的改变最为常见.amll基因为正常造血必需基因之一,在儿童急性白血病中约1/3以上的患儿可以检测到amll基因的异常,其中t(12;21)和t(4;21)主要见于儿童急性淋巴细胞白血病.期望通过对儿童急性白血病中amll基因易位的研究,能够揭示儿童急性白血病发生的机制,为儿童急性白血病的临床诊断治疗提供新的靶点,本文就amll基因的结构与功能,儿童急性淋巴细胞白血病中amll基因异常和儿童急性髓系白血病中amll基因异常等问题的研究进展作一综述.     

胃癌组织中bcl-2、Bax、p16和p53蛋白的表达和意义

目的探讨癌基因和抑癌基因产物bcl-2、Bax、p16、p53与胃癌发生的关系.方法用免疫组化法检测bcl-2、Bax、p16和p53产物在胃癌组织中的表达,取胃粘膜异型增生和肠上皮化生组织作为对照组.结果 bcl-2在胃癌和异型增生组织中的阳性率无显著性差异(P>0.05),但是显著高于肠上皮化生(P<0.01);Bax、p16、p53在胃癌、异型增生和肠上皮化生组织中的表达有显著性差异(P<0.01).结论癌基因bcl-2可能参与胃癌的早期发生,抑癌基因Bax对bcl-2的功能有对抗调节作用;突变的p53基因通过抑制细胞凋亡而参与胃癌的发生,p16基因可能参与细胞增殖的负调节.