端粒酶RNA及其催化亚单位基因hTRT在睑板腺癌中的表达

目的 探讨端粒酶RNA(hTR)及端粒酶催化亚单位基因hTRT在睑板腺癌中的表达意义。 方法 用原位杂交法检测hTR及hTRT在55例睑板腺癌、12例霰粒肿、4例睑板腺腺瘤中的表达;用EnVision法对Ki-67进行免疫组织化学染色,其结果用计算机图像自动分析系统进行量化,把积分光密度值作为肿瘤增殖指数;用SAS统计软件包对影响睑板腺癌的危险因素(性别、年龄、病程长短、肿瘤大小、肿瘤分化程度等)进行分析,结合增殖指数,hTR、hTRT表达的半定量结果对影响睑板腺癌预后因素进行综合评估。 结果 hTR在睑板腺癌中的阳性表达率为84.45％,hTRT的阳性表达为51.8％,hTR及hTRT在睑板腺癌中的表达明显高于癌旁组织、霰粒肿、睑板腺腺瘤(P<0.01)。hTR与睑板腺癌的分化有关(r=0.455,P相似文献   

视网膜母细胞瘤增殖细胞核抗原表达的研究

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)中的表达及其与Rb病理类型和侵犯视神经情况的关系。方法 :用免疫组化技术检测PCNA在 3 7例Rb组织标本中的表达 ,并应用多功能真彩色病理图像分析系统 (CMIAS系列 )来分析PCNA染色的阳性细胞个数 ,采用积分光密度值定量分析其增殖指数 ,并将各指标进行SPSS统计软件相关性分析。结果 :本组 3 7例Rb标本中PCNA的阳性表达为 97 3 0 % ,而在 2例正常视网膜组织内 (对照组 )的表达均为阴性。PCNA的表达水平与Rb不同的分化、增殖程度有显著的统计学差异 (P <0 0 1) ,Rb侵犯视神经情况越严重、分化程度越差 ,PCNA的表达越强。结论 :Rb中PCNA的高表达可作为判断Rb恶性及其程度的新型标记物。PCNA与Rb分化类型、视神经侵犯情况密切相关 ,为PCNA表达水平反映Rb分化程度和增殖能力提供理论依据     

端粒酶在眼睑皮脂腺癌中表达的意义

目的　探讨端粒酶与端粒酶RNA(humantelomeraseRNA ,hTR)在睑板腺癌中的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。方法　用端粒酶重复扩增技术法检测 12例冰冻保存睑板腺癌组织标本中端粒酶活性 ;用原位杂交法检测 5 5例睑板腺癌石蜡切片中hTR的表达 ,并用免疫组化EnVision法检测肿瘤增殖指数Ki 6 7的表达。结果　 12例睑板腺癌组织标本中 ,端粒酶活性程度不同 ;hTR在睑板腺癌细胞内表达 ,其阳性表达率为 85 5 % (47/5 5 ) ,而癌旁组织中hTR表达阴性 ;hTR的表达水平随睑板腺癌分化程度的降低而呈上升的趋势 (χ2 =17 6 2 1,P <0 0 0 1) ;hTR表达与睑板腺癌肿瘤增殖指数Ki 6 7表达及睑板腺癌复发无关。结论　hTR在睑板腺癌变过程中具有调节作用 ,hTR阳性表达可作为判断睑板腺癌恶性程度的标记物。     

PTEN和p53在视网膜母细胞瘤中的表达及临床意义

目的检测视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)组织中PTEN基因和p53基因的蛋白表达水平并探讨二者在RB发生发展中的作用以及相关性。方法采用PV-9000免疫组织化学二步法,检测40例RB组织和16例正常视网膜组织中PTEN和p53蛋白的表达,统计分析不同临床和病理阶段RB表达PTEN和p53的差异及其相关性。结果(1)PTEN在正常视网膜组织中的阳性表达率为100%,显著高于RB55%(P<0.01);PTEN蛋白的阳性表达率与临床分期、病理分型以及是否伴有视神经浸润有关(P<0·05);与性别差异无关(P>0.05)。(2)p53在正常视网膜组织中不表达,在RB组织中阳性表达率为57.5%,差异有统计学意义(P<0·05);p53蛋白的阳性表达率与临床分期、病理分型以及是否伴有视神经浸润有关(P<0.05);与性别差异无关(P>0·05)。(3)PTEN和p53在RB中的蛋白表达呈负相关(r=-0.3710,P<0.05)。结论PTEN和p53可作为判断RB恶性程度和预后的指标。PTEN可作为RB早期诊断的分子标记物之一。     

视网膜母细胞瘤和正常视网膜组织中基质调控蛋白表达及其意义(英文)

目的:研究视网膜母细胞瘤(RB)和正常视网膜组织中EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2表达水平及其临床病理意义和相互联系。方法:收集30例RB眼球摘除手术标本和15例正常视网膜组织标本。常规制作石蜡包埋切片,EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2染色方法均为Envision免疫组织化学法。结果:RB组织中EMMPRIN、MMP1、MMP9表达阳性率均高于正常视网膜组织(P<0.01),TIMP2则低于正常视网膜组织(P<0.01)。临床分期I期、分化型、未侵犯视神经及生存期≥2aRB病例EMMPRIN、MMP1、MMP9表达阳性率低于临床分期III期、未分化型、侵犯视神经和生存<2a病例(P<0.05或P<0.01);分化型、未侵犯视神经及生存期≥2aRB病例TIMP2表达阳性率明显高于未分化型、侵犯视神经和生存<2a病例(P<0.05或P<0.01);RB中,EMMPRIN、MMP1、MMP9表达呈高度一致性(P<0.05),TIMP2与EMMPRIN、MMP1、MMP9表达水平呈高度不一致性(P<0.05)。结论:EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2的表达水平可能是反映RB进展、侵袭能力及预后的重要标记物,它们之间存在着内在的相互调控关系。     

MMP-9和NF-κB在视网膜母细胞瘤中的表达

目的：研究基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9 )和核转录因子-κB（nuclear factor of κB, NF-κB）在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma, RB)中的表达及与RB分化程度和视神经浸润的关系,探讨它们在RB浸润、转移过程中的作用。方法：应用MMP-9和NF-κB单克隆抗体,采用免疫组织化学方法,对47例RB患者石蜡包埋标本进行MMP-9和NF-κB表达的测定,数据进行统计学分析。结果： （1）47例RB中MMP-9阳性表达率为46.8%, 与RB的分化程度(P<0.05)及有无视神经浸润(P<0.05)相关。（2）NF-κB在RB组织中阳性表达率为63.8%,与RB的分化程度相关(P<0.05),与有无视神经浸润无相关性(P>0.05)。（3）RB中NF-κB的表达与 MMP-9的表达有相关性(P<0.05)。结论：RB组织中MMP-9高表达。 NF-κB在RB中被激活。RB中NF-κB表达与MMP-9表达相关,NF-κB激活后可能通过上调MMP-9的表达促进RB的浸润、转移。二者表达的检测可以作为反映RB浸润、转移潜能的生物学指标,有助于筛选转移高危病例。     

PAX6基因及其下游促分化基因在视网膜母细胞瘤分化过程中的作用

 目的 检测在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）中,眼发育调控基因PAX6及其下游促分化基因MATH5和BRN3b在蛋白水平的表达情况,从而探讨PAX6基因在RB分化过程中的作用。 设计 病例对照研究。研究对象 新鲜RB组织10例,正常视网膜组织10例。方法  实验组：RB组织;对照组：正常视网膜组织。采用WesternBlot法检测新鲜视网膜母细胞瘤组织和正常视网膜组织中Pax6、Math5、Brn3b蛋白质水平的表达情况并作比较。主要指标 Pax6、Math5、Brn3b蛋白质的表达水平。结果 本研究中RB组织和正常视网膜组织中均可检测出Pax6、Math5、Brn3b蛋白的表达。与正常视网膜组织相比较,RB组织中Pax6、Math5、Brn3b蛋白的表达水平增高（P均<0.001）;Math5与Pax6蛋白表达具有线性相关性（r=0.949, P<0.001）, Brn3b与Math5蛋白表达具有线性相关性（r=0.927, P<0.001）。结论 在RB组织中, PAX6基因上调下游促分化基因MATH5和BRN3b表达水平,促进RB组织的分化。     

视网膜母细胞瘤增殖细胞核抗原的免疫组织化学研究

目的：研究视网膜母细胞瘤(retinoblastoma，RB)细胞的增殖活性与RB组织学分型和浸润能力的关系。 方法：应用链霉亲和物素蛋白-生物素酶标免疫组织化学方法(LSAB法)对48例RB组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)的表达进行分析。 结果：12例分化型RB组织平均PCNA标记指数(labelling index，L1)明显低于36例未分化型(P<0.05)；22例视神经浸润组RB组织平均PCNA LI明显高于26例视神经未浸润(P<0.05)。表明PCNA LI与RB组织学分型及浸润能力相关。 结论：测定PCNALI对于判断RB的组织学特性和生物学行为具有一定意义。 （中华眼底病杂志，1997，13：10-11）     

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达

　　目的　观察基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系。方法　经病理检查确诊的40例RB眼球石蜡标本纳入研究。按照RB细胞中有无菊形团排列以及RB肿瘤细胞是否浸润视神经分为分化型、未分化型以及视神经浸润、视神经无浸润组。其中,分化型15例,未分化型25例;视神经浸润13例,视神经无浸润27例。采用免疫组织化学方法检测其MMP-2、MMP-9和VEGF的表达,对比分析MMP-2、MMP-9和VEGF表达与肿瘤病理组织分型和视神经是否侵润之间的关系。结果　40例RB中,MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为52.5%、57.5% 和72.5% 。未分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达均高于分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达,差异有统计学意义(χ²=9.037,9.253,8.095;P＜0.05);有视神经浸润的RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平均高于无视神经浸润RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平,差异有统计学意义(χ²=11.045,10.243,8.956;P＜0.05)。RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达呈正相关关系(r=0.126,0.314;P＜0.05)。结论　RB细胞内有MMP-2、MMP-9和VEGF的表达。MMP-2、MMP-9表达与VEGF表达存在相关性。MMP-2、MMP-9和VEGF的表达水平与视神经浸润存在密切的关系。       

Telomerase expression in uveal melanoma

BACKGROUND/AIMS: Accumulating evidence indicates that telomerase activity is repressed in normal human somatic cells but reactivated in cancers and immortal cells, suggesting that activation of telomerase activity has a role in carcinogenesis and immortalisation. To date, telomerase in uveal melanoma and, whether, it may have a role in the development or progression of these tumours has not been described. The expression patterns and the activity of telomerase were investigated in 14 uveal melanoma and these results were correlated with histological and immunohistological features of these tumours. METHODS: A modified PCR based telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay was used to demonstrate telomerase activity in 14 uveal melanomas. In addition, in situ hybridisation was used to demonstrate the expression pattern of the telomerase RNA component (hTR) at the single cell level in eight of these globes. RESULTS: The TRAP assay revealed moderate telomerase activity in all uveal melanomas examined. In situ hybridisation visualised a moderate to high upregulation of hTR in the melanoma cells but not in the admixed reactive cells. There was no correlation among tumour location, cell type, or growth fraction and the amount of telomerase activity. In addition, the cells of the germinative zone of the lens demonstrated a strong hTR expression. CONCLUSION: Telomerase activity is upregulated in uveal melanomas. The expression of hTR was located to the tumour cells and not the reactive tumour infiltrating cells. Strong telomerase expression was also demonstrated in cells of the germinative zone of the lens.     

8-溴-环腺苷酸对视网膜母细胞瘤细胞系端粒酶活性及动力学影响的研究

目的 探讨8-溴-环腺苷酸（8-Br-cAMP）对视网膜母细胞瘤（RB）细胞系端粒酶活性及细胞周期变化的影响。 方法 将培养的RB细胞系分为对照组及实验组（加8-Br-cAMP培养组），分别进行体外培养2 4、48、72 h后，以聚合酶链反应-酶标免疫吸附实验方法检测其端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期变化。 结果 各实验组RB细胞端粒酶活性与 对照组相比，差异均有显著性的意义（P<0.01）。8-Br-cAMP作用不同时间实验组的 端粒酶活 性吸光度[A，旧称光密度（OD）]值与作用时间之间，呈显著负相关（r=-0.778 9，F=33.936，P<0.01）。实验组细胞周期变化：G1期比率上升，S期比率下降。 结论 8-Br-cAMP可减弱RB细胞系端粒酶活性，影响其周期变化，抑制RB细胞系增生。 （中华眼底病杂志，2004，20：358-360）     

视网膜母细胞瘤裸小鼠移植瘤中nm23基因的 表达及意义

目的观察肿瘤转移抑制基因nm23的表达产物二磷酸核苷激酶（nucleoside diphosphat kinase,NDPK）在裸小鼠玻璃体腔视 网膜母细胞瘤（retinoblastoma, RB）移植瘤中的表达状态,探讨nm23基因的表达产物 NDPK（nm23/NDPK）与RB的发生发展及浸润生长的相关性。方法对20例裸小鼠玻璃体RB移植瘤进行nm23／NDPK表达的免疫组织化学染色,以正常视网膜组织标本作对照,比较RB移植瘤眼内生长期（Ⅰ～Ⅲ级）及蔓延、扩展浸润期（Ⅳ ～Ⅴ级）nm23／NDPK的表达情况。结果正常视网膜组织nm23蛋 白表达阴性。20例RB移植瘤nm23／NDPK表达阳性,阳性细胞数为48．73±2．37,阳性表达率为100%;眼内生长期（Ⅰ～Ⅲ级）与蔓延、扩展浸润期（Ⅳ～Ⅴ级）　nm23/NDPK阳性表 达细胞数差异无显著性的意义(P>0.05)。结论nm23基因不具有抑制RB移植瘤蔓延浸润的功能,而是在其发生发展过程中起一定作用。(中华眼底病杂志,2001,17:47-49)     

Retinoblastoma and tumor-suppressor gene therapy

Retinoblastoma as a genetic disease is a paradigm for tumor-suppressor gene theory. The RB gene is one of the best-studied tumor-suppressor genes with known key functions in controlling cell proliferation and differentiation. Reconstitution of RB function in RB-deficient tumor cells induces irreversible growth arrest (senescence) and inhibits telomerase activity, simultaneously correcting two of the four defined carcinogenic events in human cells. RB gene therapy has the advantage of selectively killing tumor cells without adverse side effects to normal somatic cells, and efficacy of the therapy has now been demonstrated in vitro and in immunocompetent mouse models. Most preclinical studies of RB gene therapy reported to date have used RB fragments with enhanced cell growth-suppressing function. The clinical success of RB gene therapy of retinoblastoma, however, requires more innovation in vector development.     

视网膜母细胞瘤细胞分化程度对扩散和 存活预后的影响

目的探讨视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）细胞分化程度对扩散和存活预后的影响。方法对156份RB眼球标本 进行组织病理学观察，根据肿瘤细胞分化程度将其分为分化型与未分化型，注意有无肿瘤细 胞的扩散，并统计两型发生扩散的比率。对随访到的82例RB患者进行死亡率统计。用检验的方法比较两型间死亡率和扩散发生率。记录扩散部位与死亡率之间的关系、死者生前眼球摘除术后平均存活时间。结果分化型RB　17例17只眼，发生肿瘤细胞局部扩散8只眼，占47.06%；未分化型137例139 只眼，发生局部扩散66只眼，占47.48%。两型间发生扩散的比率差异无显著性意义（P>0.05）。随访到的患者中，分化型RB死亡率27.27%，未分化型RB死亡率22.54%，二者比较差异亦无显著性意义（P>0.05）。眶内和巩膜侵犯者死亡率100%，视神经侵犯Ⅳ级者死亡率62.50%，葡萄膜侵犯者死亡率22.22% 。眼球摘除术后生存时间为5～41个月，平均21.92个月。结论分化型与未分化型RB的存活预后及局部扩散比率差异无显著性意义。发生扩散的RB，无论是分化型还是未分化型其预后均取决于扩散的程度以及是否进行积极治疗。(中华眼底病杂志,2001,17:18-20)     

视网膜母细胞瘤中Fas/Fas配体表达及 与凋亡的关系

目的观察视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, RB)　Fas/Fas 配 体 (Fas ligand ,FasL)表达及与凋亡的相关性。方法应用免疫组织化学染色法观察32例RB标本中 Fas/FasL的表达及分布,并对32例用光镜、其中4例用电镜及12例用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化脱氧尿苷三磷酸末端标记 (t erminal deoxynucleotidyl transferase mediated biotin dUTP nick end labeling, T UNEL)染色观察细胞凋亡,分析与Fas/FasL表达的关系。结果光镜下凋亡细胞主要位于RB退化区,电镜下可见染色质边集和凋亡小体等凋亡特征 ;TUNEL显示阳性标识主要位于RB退化区及死亡区。Fas及 FasL在所有RB中均呈阳性表达 。Fas和 FasL表达与凋亡指数 (apoptosis index, AI)呈正相关 (P<0．01 ,P<0．001)。结论凋亡在RB中普遍存在,可能是触发RB细胞死亡的 主要方式;Fas系统在RB的发生发展中起重要作用。Fas系统上调可能会诱导RB细胞凋亡。(中华眼底病杂志,2001,17:21-23)