HPLC同时检测丹参提取物中5种水溶性和脂溶性成分含量

目的:建立丹参提取物中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸、丹参素及丹参酮ⅡA反相HPLC同步测定新方法.方法:选用Kromasil 100-5 C18(4.6 mm × 250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(含0.1％甲酸)为流动相梯度洗脱,流速1 mL· min-1,检测波长285 nm.结果:丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸、丹参素及丹参酮ⅡA分别在进样量范围内与峰面积线性关系良好,r＞0.999 5,仪器精密度和稳定性RSD均＜2％,成分的回收率在97％ ～ 103％(n=3).测定了其5批丹参提取物含量.结论:该方法快速、准确、重复性好,可同时定量丹参的5种水溶性及脂溶性成分.     

不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱测定及相关性研究

目的 分析不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的变化情况，研究丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量之间的相关性。方法 采用HPLC法测定不同产地丹参水溶性成分、脂溶性成分的指纹图谱以及主要成分的含量，运用SPSS统计软件分析丹参成分变化情况。结果 丹参脂溶性成分和水溶性成分指纹图谱随产地不同而变化，丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量高低无内在关系。结论 建议制订丹参丹酚酸类成分含量，作为适用于丹参类注射液用的丹参药材标准，以区别于供复方丹参片等制剂用的丹参。     

HPLC测定不同产地丹参药材中脂溶性成分

目的:研究不同产地丹参中二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA含量和测定方法.方法:用HPLC法测定,以1%醋酸甲醇溶液和1%醋酸水溶液为流动相作梯度洗脱,检测波长为280nm.结果:所测4种成分的平均回收率均大于97%,RSD小于1.2%,线性良好.结论:本分析方法稳定可靠,重现性好.     

HPLC同时测定丹参及其制剂中4种酚酸类成分的含量

 目的建立同时测定丹参药材及其制剂中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B4种酚酸类成分含量的RP-HPLC色谱法。方法色谱柱:InertsilC₈-3柱;流动相:乙腈-水-甲酸(24∶76∶0.4);流速:1.0mL·min^-1;检测波长:285nm。结果在此色谱条件下4种酚酸类成分可完全分离。丹参素、原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B的线性范围分别为:8～400(r=0.9998),4～200(r=0.9994),4～200(r=1.0000)和4～200mg·L^-1(r=1.0000)。4种成分在药材和制剂中的回收率均在98.5%101.0%,RSD(2.0%。结论该方法简便、准确、快速,可同时测定丹参药材及其制剂中4种酚酸类成分的含量。     

丹参药材水溶性成分含量的HPLC法分析

目的建立丹参药材水溶性成分中丹酚酸B、丹参素和原儿茶醛的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定，色谱柱为Kromosil C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相I：甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59），流动相Ⅱ：甲醇-冰醋酸-水（20：1：80）；流速：1．0mL／min；检测波长分别为286、280nm；柱温35℃。结果测定了10个不同产地的丹参药材，丹酚酸B含量在0.09％～6．81％之间，平均回收率为99.64％，RSD=1．09％；丹参素的含量在0．16％～0．68％之间，平均回收率为98.94％，RSD=1．49％；原儿茶醛的含量在0．01％～0.09％之间，平均回收率为98．96％，RSD=1．66％。结论本法简便、准确、重复性好，可作为丹参药材的含量测定标准。     

丹参脂溶性及水溶性成分集成提取工艺研究

目的优选丹参脂溶性及水溶性成分的集成提取工艺条件。方法采用正交设计法,以丹酚酸B、丹参酮IIA为测定指标,采用高效液相色谱法测定其含量,并以此为指标优选集成提取工艺条件。结果集成法可同时对丹参中脂溶性及水溶性成分进行提取。优选的提取工艺条件为：加8倍量70％乙醇,提取2次,每次1h。结论采用集成方法同时提取丹参水溶性及脂溶性部位,可省时、省工、节能,使丹参的提取工艺合理可行。     

HPLC法同时测定丹参药材中丹酚酸B、丹参酮ⅡA含量

目的：建立HPLC法同时测定丹参药材中丹酚酸B、丹参酮ⅡA含量的方法.方法：采用Waters C18 色谱柱（150mm×3.9mm,5μm）,以0.3%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,丹酚酸B、丹参酮ⅡA的检测波长分别为286nm、270nm.结果：丹酚酸B、丹参酮ⅡA分离良好,两成分质量浓度与峰面积在测定范围内线性关系良好,重现性好,平均加样回收率分别为100.54%和100.58%;8批不同产地丹参药材中丹酚酸B占药材量的平均含量为5.371 7%,丹参酮ⅡA占药材量的平均含量为0.403 2%.结论：本研究所建立的HPLC法稳定可靠,简便易行,可同时用于丹参中丹酚酸B、丹参酮ⅡA的测定,为丹参质量标准的提升提供了一定的理论依据.     

HPLC波长切换法同时测定丹参酚酸提取物中5种成分

目的建立高效液相色谱法测定丹参酚酸提取物中丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B。方法采用Phenomsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长为280 nm(0～50 min)、330 nm(50～68 min)、286nm(68～90 min),柱温30℃。结果丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的进样量分别在0.033 96～0.339 6μg、0.016 60～0.166 0μg、0.092 4～0.924μg、0.084 7～0.847μg、1.300～13.00μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)均在99.2%～100.2%,RSD均小于2.3%。7个来源的丹参酚酸提取物中5种物质的含有量有一定差异。结论本法快速、准确,重复性好,可更好地控制丹参酚酸提取物的质量。     

滇丹参及丹参中脂溶性成分含量的对比研究

目的:对不同来源滇丹参及丹参中脂溶性成分隐丹参酮(cryptotanshinone)、丹参酮Ⅰ(tanshinoneⅠ)、丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA)的含量进行对比研究,研究两者脂溶性成分的相关性。方法:采用RP-HPLC法,建立含量测定方法,测定两种药材中三种脂溶性成分的含量。结果:两种药材中脂溶性成分的含量存在着较大的差异,丹参中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA平均含量约为滇丹参的17倍、2倍、3倍。结论:滇丹参能否作为丹参的代用品还应作进一步研究。     

高效毛细管电泳法同时测定丹参饮片中5种酚酸类成分

 目的 建立高效毛细管电泳法同时测定丹参饮片中迷迭香酸、原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B、丹酚酸A含量的方法,同时考察丹参药材适宜干燥温度。方法 10 mmol·L^-1硼酸-12 mmol·L^-1磷酸二氢钠-10 mmol·L^-1SDS为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm,有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为18 kV,检测波长为206 nm,毛细管温度为20 ℃,压力进样:5 kPa×6 s。结果 5种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.999 0);干燥温度以100 ℃为宜。结论 该方法简单、准确,重复性较好,可用于丹参饮片的质量评价和控制。     

超高效液相色谱-质谱联用同时测定丹参中7种成分含量

目的:建立同时测定丹参中原儿茶醛,丹酚酸B,迷迭香酸,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA,隐丹参酮,二氢丹参酮7种成分含量的超高效液相色谱-质谱联用分析方法。方法:采用Hypersil Gold C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),以0.1%甲酸溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min~(-1),柱温30℃。采用电喷雾离子源(ESI),正负离子交替扫描模式,选择反应离子检测(SRM)。结果:7种成分在1~460μg·L~(-1)有良好的线性关系,平均回收率83.41%~116.05%,检测限0.046~0.5μg·L~(-1),RSD均4.7%。结论:该方法快捷、准确、重复性好、灵敏度高,可同时测定丹参药品中7种成分的含量,可用于丹参药材及其制剂的研究和质量控制。     

不同产地丹参药材红外光谱分析

目的:建立红外光谱技术,快速鉴别丹参药材产地及确定丹酚酸B含量高低。方法:采集来自4个产地的40批丹参药材的红外光谱信息,寻找可以反映产地特征的二阶导数红外光谱特征峰,以及可进行丹酚酸B快速定量的原谱特征峰。结果:不同产地丹参药材的二阶导数红外光谱特征吸收峰存在差异,可以反映丹参药材的不同产地;原谱1262cm-1峰的吸收峰高基本不受其他成分的影响,可以反映丹酚酸B含量且与液相色谱含量结果呈正相关,实现丹酚酸B的快速半定量。结论:建立的红外光谱技术可以为中成药生产过程中,投料丹参药材的快速评价提供一种新的备选方法。     

高效液相色谱手性流动相添加剂法测定富马酸(R，R)-戊乙奎醚中3个光学异构体杂质的含量

 目的 建立拆分富马酸(R,R)-戊乙奎醚与其3个光学异构体的高效液相色谱分离方法,控制光学纯度。方法 选用C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾（含0.6%三乙胺和0.015 mol·L^-1β-环糊精,pH为2.3）为流动相,柱温25 ℃,检测波长206 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果 3个光学异构体的检测灵敏度为9.0 ng,本方法可检出限量为0.09%的光学异构体杂质。结论 本法可有效分离富马酸(R,R)-戊乙奎醚及其3个光学异构体,可用于控制本品光学纯度。     

丹参作用于内皮素转换酶的活性成分虚拟筛选

目的： 采用虚拟筛选技术对丹参作用于内皮素转换酶（ECE-1）的活性成分进行筛选。 方法： 选用台湾中医药资料库收集的丹参化学成分为配体,选取ECE-1作为受体,通过Iscreen在线服务器虚拟筛选与ECE-1对接较好的丹参小分子成分,探讨丹参小分子与ECE-1的结合模式,采用Pymol对其复合体进行分子对接分析。 结果： 丹参酮Ⅱ_A作用ECE-1的文献1篇。在150个丹 参小分子成分中,丹酚酸D、迷迭香酸、丹参酸丙匹配打分较高,得分分别为-85.233,-84.195,-82.445。丹酚酸D与ECE-1 蛋白的Val565,Asn566,Ala567,His607,Glu667,Arg738形成氢键连接;迷迭香酸与Arg145,Val565,Glu608,Asp730,Arg738形成氢键连接;丹参酸丙与Val565,Asn566,Ala567,His607,Glu667,Arg738形成氢键连接。 结论： 丹参中的丹酚酸D、迷迭香酸、丹参酸丙可能是丹参作用于ECE-1的活性成分。     

Simultaneous Determination of Five Hydrophilic and Lipophilic Components from roots of Salvia miltiorrhiza by HPLC

Objective A reversed-phase HPLC method was established for the simultaneous determination of five hydrophilic and lipophilic components in the roots of Salvia miltiorrhiza. Methods Hydrophilic components including danshensu, protocatechuic aldehyde, and salvianolic acid B, and lipophilic components such as cryptotanshinone and tanshinone IIA, were successfully separated on a Waters Symmetry C18 reversephase column(250 mm × 4.6 mm, 5 μm), with acetonitrile-0.5% phosphoric acid(gradient elution) as mobile phase, the detection wavelength was set at 281 nm with flow rate of 1.0 m L/min, and the column temperature was maintained at 30 °C. Results The recovery of the method was in the range of 95.1%–102.5% and the precision was less than 3% for all five analytes. All the compounds showed good linearity(R2 0.9990) in a relatively wide concentration range. Therefore, this HPLC method demonstrated good reproducibility, stability, and accuracy in validation studies. Conclusion Simultaneous quantification of the multiple components by HPLC would be a better strategy for the quality evaluation on the roots of S. miltiorrhiza.     

丹参微乳液中丹参酮ⅡA的HPLC测定方法的建立

目的:建立丹参微乳液中丹参酮ⅡA的HPLC含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(80∶20)为流动相,流速为1 mL.min-1,检测波长为270 nm;柱温为35℃。结果:本方法线性范围(7.59~303.44)ng,r=1.0000,精密度RSD为0.58%(n=6),重复性RSD为0.87%(n=6),样品在16 h内稳定,平均加样回收率在97.20%~102.19%之间。结论:该方法简便、可靠、可用于丹参微乳液中丹参酮ⅡA的含量测定。     

均匀设计法优化丹参中4种活性成分的超声提取工艺

目的:优选丹参中迷迭香酸、隐丹参酮、丹酚酸B及丹参酮ⅡA共4种活性成分的超声提取工艺。方法:以迷迭香酸、隐丹参酮、丹酚酸B及丹参酮ⅡA提取量为指标,采用均匀设计考察乙醇体积分数、液料比、提取时间对丹参提取效率的影响,通过逐步非线性回归优选提取工艺条件。利用HPLC测定指标成分含量,流动相甲醇(A)-0.01%磷酸水(B)梯度洗脱(0~3 min,30%A;3~5 min,30%~40%A;5~13 min,40%A;13~20 min,40%~58%A;20~22 min,58%~75%A;22~24 min,75%A;24~50 min,75%~85%A),检测波长286 nm(迷迭香酸和丹酚酸B)和268 nm(隐丹参酮和丹参酮ⅡA)。结果:最佳超声提取工艺条件为乙醇体积分数75%,液料比200 mL·g-1,提取时间10 min;迷迭香酸、丹酚酸B、隐丹参酮及丹参酮ⅡA提取量分别为0.33,11.19,0.63,0.59 g·g-1,与2010年版《中国药典》中加热回流法相比,活性成分提取量无显著差异。结论:该超声提取工艺具有提取时间短、低毒、无污染等优点。     

渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究

目的 探讨丹参饮片中采用渗漉法提取脂溶性部位的最佳工艺条件.方法 以丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量为指标,采用L9(34)正交实验进行提取工艺全面优选,并用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定其含量.结果 最佳乙醇渗漉工艺为:药材粉碎至绿豆粒大,用15倍量95%乙醇冷浸24 h后,渗漉速度3 ml/min.结论 采用渗漉法提取丹参中脂溶性部位,操作简便,方法 可行,降低了生产成本,提高了药材利用率,使实验结果 具有实际应用价值.     

反相高效液相色谱法同时测定地黄中5种成分的含量

 目的 建立地黄药材中梓醇、益母草苷、腺苷、肉苁蓉苷A及毛蕊花糖苷等5种成分的含量测定方法。方法 采用HPLC,色谱柱为Grace Allitma C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-水为流动相,线性梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为203 nm,柱温为25 ℃。结果 梓醇、益母草苷、腺苷、肉苁蓉苷A和毛蕊花糖苷质量浓度分别在12.47~997.22、2.85~227.78、0.36~28.75、1.30~104.17、1.65~131.94 μg·mL^-1内呈良好线性关系,相关系数分别为0.999 7、1.000 0、0.999 9、0.999 9和0.999 7,平均回收率分别为99.7%（RSD=2.20%,n=9）、98.8 %（RSD=2.38%,n=9）、98.8%（RSD=3.10%,n=9）、99.1%（RSD=3.28%,n=9）和100.0%（RSD=2.10%,n=9）。结论 该方法简便、准确、重现性好,可用于地黄的质量控制。不同产地地黄药材中5种指标成分含量差异较大。