骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡和TNF-α关系的研究

目的：探讨骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞调亡特征以及与肿瘤坏死因子α(TNF—α)的关系。方法：分别采用形态学和dUTP末端缺口标记(TUNEL)方法检测骨髓细胞调亡；采用ELISA方法检测骨髓单个核细胞培养后上清液中TNF—α的浓度，并与缺铁性贫血(IDA)患者进行比较。结果：形态学方法检测骨髓单个核细胞培养后细胞调亡指数，MDS明显高于IDA(P＜o．01)，MDS各分型(RA／RAS、RAEB／RAEB—t)之间细胞调亡指数差异无显著性意义(P＞0．05)。同一个体TUNEL法测得的骨髓细胞调亡指数均高于形态学观测的结果。TUNEL检测MDS细胞调亡指数RA／RAS＞RAEB／RAEB—t，但差异无显著性意义(P＞0．05)。MDS骨髓单个核细胞上清中TNF-α浓度高于IDA组，差异有显著性意义(P＜0．05)；MDS各分型之间RA／RAS显著高于RAEB／RAEB—t(P＜0．05)。结论：MDS骨髓细胞确实凋亡过度，早期MDS重于晚期MDS，并与TNF—α呈线性关系；采用TUNEL法检测凋亡细胞较形态学方法敏感。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓不同细胞亚群凋亡的研究

目的:观察骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMNC)及不同细胞亚群凋亡情况。方法:应用流式细胞仪、CD45单抗、Annexin-V/PI检测15例MDS患者骨髓细胞凋亡情况。结果:MDS患者BMNC凋亡(5.57％)明显高于对照组(3.19％)(P<0.05),淋巴细胞(R_1)凋亡(20.82％)明显高于对照组(9.98％)(P<0.05),且各细胞亚群之间比较,淋巴细胞(R_1)凋亡明显高于原始/粒细胞群(R_2)(10.22％)和红细胞群(R_3)(6.66％),差异有显著性意义(P<0.05)。红系凋亡并不增加,与原始/粒细胞群比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:MDS患者骨髓淋巴细胞凋亡增加,且可能为CD4~+T细胞(Th),从而使T细胞亚群Th/Ts比例失调,造成免疫调节异常,提示这种异常在MDS发病过程中起重要作用。     

N-乙酰半胱氨酸在骨髓增生异常综合征中的抗凋亡作用

用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记术及碘化丙锭染色后流式细胞仪分析法,分别观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)0.1、0.3、0.5 mM在骨髓增生异常综合征(MDs)患者及正常人骨髓细胞体外培养的凋亡率.结果显示,NAC 0.1 mM对MDS患者及正常人的骨髓细胞凋亡率均无影响;0.3 mM只对MDS患者有影响,其凋亡率明显低于正常人(P<0.01);0.5 mM时MDS患者及正常人的凋亡率均明显降低(P均<0.01).提示NAC 0.3 mM对MDS患者的骨髓细胞有抗凋亡作用,且不影响正常细胞,可试用于MDS治疗.     

外周血及骨髓形态学在骨髓增生异常综合征诊断中的应用探讨

目的:探讨外周血常规、外周血涂片、骨髓细胞检查的形态学改变在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中的临床意义,以提高其诊断的准确性。方法:对19例MDS患者的血液学特征进行回顾性分析。结果:19例中,外周血常规全血细胞减少9例(47%),两系减少8例(44%)。分类可见有核红细胞9例(47%),原始细胞6例(31%),血小板减少12例(62%)。骨髓学检查:增生极度活跃至活跃16例(84%),增生减低3例(16%),1系~2系病态造血17例(89%)。结论:MDS形态学改变异常复杂,部分MDS患者无病态造血,诊断困难,尤其是低危组诊断标准变异大,因此结合血常规、外周血涂片检查、骨髓细胞形态学检查是其诊断和分型的重要依据。     

骨髓增生异常综合征骨髓切片中造血细胞凋亡的初步研究

目的 :观察骨髓增生异常综合征 (MDS)骨髓塑料包埋切片中原位细胞凋亡状况。方法 :用 DNA末端原标记 (ISEL)方法检测 33例 MDS患者骨髓塑料冷包埋切片中凋亡细胞 ,缺铁性贫血 15例作对照 ,并对 MDS之 ISEL 阳性细胞经常规染色光学显像镜分析细胞来源。结果 :33例 MDS的凋亡细胞平均为 (38.0 6± 2 4.6 1)个 /m m2 ,对照组为 (19.2± 7.98)个 /m m2 ,P <0 .0 1,差异有极显著性意义。 MDS中低危组 (RA+RAS)凋亡率(43.5 8± 39.40 )个 /mm2 较高危组 (RAEB+RAEB- T) (2 6 .0 4± 2 1.0 2 )个 /mm2 高 (P <0 .0 1) ,差异有极显著性意义。ISEL 阳性细胞主要来源于粒、红、巨三系造血细胞 ;分别占 38.45 % ,2 7.33% ,7.87%。结论 :MDS存在过度凋亡 ;MDS之 RA+RAS组凋亡高于 RAEB+RAEB- T组 ;凋亡细胞主要来源于三系造血细胞。     

补肾活血通络方治疗老年慢性再生障碍性贫血34例临床研究

目的观察补肾活血通络方治疗老年慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床疗效,探讨其作用机制。方法将67例老年CAA患者随机分为治疗组(34例)和对照组(33例)。治疗组用补肾活血通络方加常规西药治疗,对照组单用常规西药治疗。并分别于治疗前后采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法检测骨髓细胞凋亡状况。结果治疗组与对照组的基本治愈率、缓解率、总有效率分别为41.18%、23.52%、85.29%和21.21%、18.19%、60.61%。两组疗效比较差异有显著性(P<0.01)。治疗前两组骨髓细胞凋亡指数较健康对照组明显增高(P<0.01),治疗后治疗组骨髓细胞凋亡指数较治疗前明显减低(P<0.01),与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论补肾活血通络方治疗老年CAA疗效可靠、不良反应少。其作用机制可能是通过阻抑老年CAA患者骨髓造血细胞的过度凋亡,从而实现骨髓造血功能恢复重建。     

地西他滨4天方案治疗骨髓增生异常综合征的疗效及不良反应

目的:探讨地西他滨4d方案治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效及不良反应。方法:观察地西他滨4d方案(25~30mg·m-2·d-1静脉滴注,连用4d)治疗的12例MDS患者,评价其疗效及不良反应。结果:12例MDS患者完全缓解5例(41.67%),部分缓解3例(25.00%),总有效率为66.67%,中位无进展生存期为212(13~328)d,中位总生存期为255(13~963)d,主要不良反应有骨髓抑制、感染、胃肠道症状等。结论:地西他滨4d方案与3d、5d方案相比,治疗MDS的疗效确切,安全性好,应用方便,降低费用,值得进一步推广。     

恶性髓系血液病患者血管内皮生长因子表达的检测及分析

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者中血管生成的作用。方法2002-06～2004-01南华大学第一附属医院用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法检测初治20例AML及24例MDS患者骨髓单个核细胞培养上清VEGF的表达。结果AML患者骨髓细胞VEGF(412.30ng/L)均高于对照组(128.14ng/L),化疗后完全缓解组骨髓细胞VEGF明显下降(P<0.05),化疗后未缓解组的VEGF与治疗前比较无显著下降(P>0.05)。MDS高危型(RAEB或RAEBt)骨髓细胞VEGF与低危型(RA或RAS)及对照组相比明显升高(P<0.05)。其中RAEBt与AML患者相比差异无显著性(P>0.05)。结论AML及高危型MDS患者骨髓中存在血管新生,且VEGF在AML及MDS发病中起着重要作用,VEGF的表达与MDS病程进展有关。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓凋亡细胞类型及TRAIL表达水平研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞凋亡累及的细胞类型,以及其与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的关系。方法用流式细胞术检测骨髓有核细胞总凋亡率、CD3+、CD3+4细胞凋亡率和TRAIL表达水平,运用CellQuest及ModFit软件对所测得结果进行数据分析。结果MDS患者骨髓有核细胞总凋亡率为(17.39±10.17)%,CD+3、CD3+4细胞凋亡率分别为(20.41±11.61)%、(21.32±12.17)%,TRAIL表达水平为(7.55±3.10)%,均显著高于正常对照组[(5.88±1.38)%、(5.47±1.65)%、(4.92±2.11)%、(1.26±0.46%)],P<0.05。早期MDS有核细胞总凋亡率为(21.95±9.44)%、TRAIL表达水平为(9.00±2.47)%,均高于进展期[(8.26±2.27)%、(4.65±2.04)%],P<0.05。骨髓有核细胞总凋亡率与骨髓原始细胞数呈负相关(r=-0.65,P<0.05),与TRAIL表达水平呈正相关(r=0.85,P<0.05)。结论MDS存在过度凋亡,凋亡累及早期造血细胞和淋巴细胞;TRAIL可能是引起凋亡增加的原因之一。     

CAG方案治疗中高危骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的疗效观察

目的:观察阿糖胞苷、阿克拉霉素和粒细胞集落刺激因子联合方案(CAG方案)治疗中、高危骨髓增生异常综合征(MDS)和老年初治、难治、复发和继发于MDS的急性髓系白血病(AML)的临床疗效及不良反应。方法:应用CAG方案治疗MDS9例和AML23例,完成1个疗程后评估疗效,治疗失败患者则退出观察,有效者继续接受1个疗程治疗。结果:9例MDS临床均有效,其中完全缓解4例(44.4%)。部分缓解3例(33.3%),血液学进步伴骨髓缓解1例(11.1%),骨髓缓解1例(11.1%)。AML临床总有效13例(56.5%),其中完全缓解9例(39.1%),部分缓解4例(17.4%)。大部分患者出现了可以耐受的轻微不良反应,主要表现为骨髓抑制。结论:CAG治疗中、高危MDS和预后差的AML安全有效,长期疗效需进一步观察。