辐射对豚鼠鼻黏膜组织结构及微血管的影响

目的：探讨辐射对豚鼠鼻黏膜结构及微血管的损伤。方法：选择健康豚鼠84只，随机分为对照组（12只）及照射组（72只）。均在同样条件下喂养。将照射组豚鼠置于直线加速器射线内照射，每周1次，每次照射5Gy，计3周，总剂量15Gy，建立辐射损伤动物模型。分别于照射后0．5、1.0、2．0、3．0、5．0、6．0个月处死动物12只，随机取6只做鼻腔黏膜微血管铸型，另6只做病理检查。对照组在假照射后6个月处死动物，随机各选6只分别做鼻黏膜微血管铸型检查和病理检查。结果：照射组豚鼠的鼻黏膜辐射后早期表现为急性炎症反应，黏膜大量坏死、脱落，电镜下见仅少部分黏膜表面还被覆着正常的纤毛结构。以后黏膜开始修复，至6个月时基本结束，但大部分黏膜失去了正常的纤毛柱状上皮结构特点，部分区域甚至代为组织转化的鳞状上皮；微血管铸型可见，早期改变为毛细血管扩张充血及血管内皮细胞肿胀，以后逐渐出现毛细血管的扭曲变形、闭塞及中断，毛细血管数量大量减少，致血液回流障碍，微静脉萎瘪。后期部分区域出现新生的毛细血管，但结构紊乱，不具备微循环的功能。结论：鼻黏膜的损伤、晚期的鳞状上皮组织转化以及鼻黏膜微循环的破坏是放疗后鼻腔功能障碍的病理学基础。     

实验性变应性鼻炎鼻黏膜组织重塑的特点

目的观察变应性鼻炎动物造模状态下鼻黏膜组织重塑的特点。方法Hartley系豚鼠24只,雄性,体重250~300g,随机分为4组,即对照组、短期(1周)抗原攻击组(实验1组)、抗原攻击8周组(实验2组)和抗原攻击12周组(实验3组),每组6只豚鼠。实验组动物采用腹腔注射卵清蛋白致敏后卵清蛋白鼻腔攻击1周,制成变应性鼻炎动物模型,长期抗原攻击组给予卵清蛋白鼻腔攻击分别8周(实验2组)和12周(实验3组)。组织标本石蜡包埋,采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)、阿辛蓝-过碘酸-希夫(alcian blue-periodic acid-Schiff,AB-PAS)和Masson三色胶原染色(Masson′s Trichrome,MT)法染色,计数鼻中隔黏膜中嗜酸粒细胞、上皮杯状细胞数量,半定量测量上皮细胞损伤及鼻中隔黏膜和鼻甲基底膜区及上皮下胶原含量。结果①对照组鼻黏膜未见明显嗜酸粒细胞浸润,实验组鼻黏膜可见大量嗜酸粒细胞浸润;②对照组和短期抗原攻击组黏膜上皮较完整(完整上皮分别占87.7%±11.1%,77.1%±7.1%;x-±s,下同),长期抗原攻击组鼻黏膜发生上皮细胞损伤(实验2组完整上皮占36.7%±16.9%,实验3组占37.9%±12.9%);③长期抗原攻击组鼻中隔黏膜杯状细胞明显高于对照组和短期抗原攻击组;④长期抗原攻击组鼻中隔黏膜及鼻甲基底膜增厚,黏膜内细胞外基质沉积。结论黏膜上皮细胞损伤、杯状细胞化生和细胞外基质沉积是变应性鼻炎中鼻黏膜组织重塑的特点。     

鼻腔应用类固醇激素对鼻黏膜辐射性损伤组织形态学变化的影响

目的：观察辐射后鼻腔应用类固醇激素对鼻黏膜辐射性损伤组织形态学变化的影响,探讨鼻腔应用类固醇激素在鼻黏膜辐射性损伤中的作用。方法：选用健康豚鼠50只,用医用直线加速器进行鼻部照射,照射剂量为5Gy,每周1次,共3周,在完成辐射后随机分为对照组及用药组,每组25只,用药组在照射完成后第2天开始鼻腔应用类固醇激素。各组分别于照射后1周及1、2、3、4个月各随机处死5只动物,光镜及电镜下观察鼻黏膜的病理学变化及显微图像学分析。结果：照射后喷药,豚鼠鼻黏膜早期炎症反应减轻,并随喷药时间延长,损伤的上皮细胞修复加快,4个月后纤毛覆盖率达72．9％,比单纯照射豚鼠鼻黏膜纤毛覆盖率50．2％明显升高,且黏膜下腺体萎缩减轻,表现出一定的分泌功能。结论：鼻腔应用类固醇激素减轻了鼻黏膜辐射性损伤,在鼻黏膜组织辐射性损伤中起到了一定的保护作用。     

吸入糖皮质激素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理改变影响的实验研究

目的 探讨吸人性糖皮质激素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜病理改变的影响.方法 选健康SD大鼠180只,应用随机数字表法完全随机分成正常对照组(A组,60只)和实验组(120只).首先对实验组大鼠予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)进行基础致敏、致敏加强、局部激发建立变应性鼻炎动物模型,然后再将实验组动物完全随机分为B、C二组,每组60只.B组继续予以等浓度OVA双侧鼻腔滴鼻,每周2次;C组在予以等浓度OVA双侧鼻腔滴鼻每周2次的同时,每天予以丙酸氟替卡松每侧鼻腔50μl/,次,喷鼻1次,A组则以等量生理盐水代替进行腹腔注射及滴鼻.分别于治疗后第1、2、4、8、12、及16周末从各组中随机挑选10只进行处死,其中1只行鼻黏膜微血管铸型,其余9只立即取鼻黏膜送病理检查,以观察鼻黏膜形态学改变、微血管铸型情况.结果 大鼠接受变应原激发后,鼻黏膜出现柱状上皮杯状细胞化生,部分细胞剥脱,固有层腺体增生肥大、嗜酸粒细胞为主的炎症细胞浸润及血管增多;电镜下见上皮层纤毛不同程度脱落,排列欠整齐,基底膜板层网状结构增厚,胶原沉积及纤维增生,微血管密度增加,血管迂曲,粗细不一,并交织成网状.B组由于持续变应原接触,鼻黏膜病变进一步加重;C组吸入糖皮质激素后可有效控制临床症状,但鼻黏膜仍有纤毛脱落,上皮细胞杯状细胞化生,腺体增生及炎性细胞浸润,基底膜增厚,胶原沉积及纤维增生,微血管密度增加.结论 变应性鼻炎可导致鼻黏膜发生病理改变,接触时间越长,病变越明显.糖皮质激素可较好地控制变应性鼻炎的症状,在一定程度上可减轻鼻黏膜的病理改变,但对已经发生不可逆性改变的黏膜结构无逆转或明显的修复作用.     

麻黄碱对鼻黏膜的影响及三磷酸腺苷对其治疗作用的探讨

目的:观察麻黄碱对健康Sprague-Dawley大鼠鼻黏膜形态、超微结构的影响,并探讨三磷酸腺苷(ATP)对它的干预作用。方法:健康Sprague-Dawley大鼠23只采用随机数字表法分为3组:对照组(A组),麻黄碱滴鼻组(B组),麻黄碱滴鼻加ATP腹腔注射组(C组)。于1、2、3、8周取鼻黏膜进行光镜和电镜观察。结果:B组用药第1、2、3周鼻黏膜的损害逐渐加重,3周后停药,第8周取材,观察损伤鼻黏膜形态没有恢复正常。C组用药第1周鼻黏膜几乎没有损伤,第2、3周鼻黏膜稍有损伤,3周后停用麻黄碱并续用ATP至第8周见损害鼻黏膜形态基本恢复正常。结论:麻黄碱可损伤健康Sprague-Dawley大鼠鼻黏膜,并随时间推迟而损伤程度加重,且损伤达到一定程度不可恢复;ATP可减轻麻黄碱对Sprague-Dawley大鼠鼻黏膜的损害,对麻黄碱引起的鼻黏膜损伤具有保护和治疗作用。     

变应性鼻炎鼻黏膜结构变化及微血管重塑实验研究

目的探讨持续暴露变应原大鼠鼻黏膜结构及微血管的改变。方法60只SD大鼠随机分为正常对照组（A组）和持续暴露变应原组（B组）以卵清白蛋白激发法制备变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）模型,每组大鼠各半,采用鼻黏膜组织HE染色法和鼻黏膜微血管铸型方法分别观察8、12、16周鼻黏膜组织病理学特征和微血管形态学改变。结果与A组相比,B组大鼠的鼻黏膜变应原暴露8周后表现为黏膜上皮大量脱落,杯状细胞化生明显,腺体分泌旺盛;微血管铸形观察可见微血管扩张、通透性增加明显,行经迂曲。12,16周表现为上皮细胞剥脱明显,上皮下纤维化,杯状细胞化生减少,血管增生,血管内皮细胞轻度肿胀,毛细血管增生明显,管腔内壁不规则,管壁纤维化、增厚;微血管铸型观察可见血管内皮细胞肿胀甚至萎缩,管腔内壁不规则,管壁纤维化,毛细血管增生明显。结论AR鼻黏膜早期炎性损伤、后期黏膜组织增生和纤维修复及微循环血管重塑是持续暴露变应原AR大鼠鼻黏膜的组织病理学基础。     

长期抗原刺激鼻致敏豚鼠模型的鼻黏膜细胞外基质变化

目的:观察抗原长期刺激变应性鼻炎豚鼠模型鼻黏膜细胞外基质(ECM)变化的特征。方法:Hart-ley豚鼠32只,随机分为4组(每组8只),即实验2 w组、实验6 w组、实验12 w组和对照组。卵清蛋白制备变应性鼻炎动物模型,抗原刺激分别持续2 w、6 w和12 w。在最后一次激发24 h后处死动物取鼻黏膜组织。鼻黏膜组织切片,采用苏木精-伊红染色计数嗜酸粒细胞数量、测量鼻黏膜上皮厚度;三色胶原染色法染色测定ECM胶原蓝染面积百分比;免疫组织化学法检测鼻黏膜组织转移生长因子-β1(TGF-β1)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的吸收度。结果:①各实验组鼻黏膜均有大量嗜酸粒细胞浸润,上皮增厚,与对照组比较差异有统计学意义。②实验2 w组、实验6 w组、实验12 w组和对照组鼻黏膜ECM胶原蓝染面积百分比分别为(18.6±12.0)%、(22.9±9.3)%、(21.7±1.3)%和(15.6±4.0)%;实验6 w组、实验12 w组ECM胶原蓝染面积百分比与对照组比较均差异有统计学意义(均P<0.01),但实验2 w组与对照组比较差异无统计学意义。③同对照组比较,各实验组TGF-β1吸收度增加,差异有统计学意义;Ⅰ、Ⅲ型胶原吸收度在各实验组都呈增加趋势。结论:随着抗原刺激延长,鼻黏膜慢性炎症导致与重塑相关的炎性因子表达增强,ECM胶原沉积明显。     

丙酸氟替卡松对变应性鼻炎鼻黏膜重塑动态影响的实验研究

目的:探讨变应性鼻炎(AR)实验动物模型鼻黏膜重塑的动态表现,及丙酸氟替卡松(FP)对重塑的影响。方法:选近交系健康SD大鼠120只,随机分为正常对照组(A组)、AR组(B组)和FP治疗组(C组),每组各40只。以OVA+Al(OH)3凝胶配制变应原建立实验模型,并对各组模型进行不同干预,分阶段取鼻黏膜进行苏木精-伊红染色及透射电镜切片制作,观察其鼻黏膜结构的动态变化情况。结果:A组鼻黏膜结构清晰,纤毛完整,未见炎性细胞浸润及基膜增厚、胶原沉积等。而B、C组鼻黏膜上皮及纤毛不完整,出现以嗜酸性细胞为主的炎性细胞浸润,基膜增厚,胶原沉积及少量纤维增生,但细胞间的结构尚未破坏。随着变应原的持续接触,B组鼻黏膜形态学改变随时间延长逐步加重,至上皮全层剥脱至基膜,细胞及组织结构明显破坏。C组在FP治疗后,鼻黏膜的形态学改变未进一步加重,但仍可见纤毛不同程度脱落,排列不齐,基膜增厚,胶原沉积及纤维增生等。结论:AR鼻黏膜存在重塑,且随着变应原的持续接触,重塑将进一步加重,最终发生不可逆性改变。FP可有效控制AR,减缓或一定程度逆转鼻黏膜重塑,而对于已发生的不可逆性改变并无明显逆转或修复作用。     

长期失神经支配人环杓后肌肌纤维化形态观察及TGF-β1表达研究

目的:探讨长期失神经环杓后肌肌肉形态学变化及纤维化相关因子TGF-β蛋白水平表达的变化,为临床开展晚期喉神经修复及时限的选择提供理论依据.方法:按神经损伤时限将喉返神经损伤患者的环杓后肌标本分为4组:6～12个月组(12例):>1～2年组(10例)、>2～3年组(8例)及>3年组(8例);正常对照组为正常肌肉(12例).通过Masson三色染色观察肌肉形态学变化,通过免疫组织化学荧光染色及图像分析、Western blot观察长期失神经后环杓后肌肌纤维化相关因子TGF-β1表达的时间、空间及强度的变化趋势.结果:Masson三色染色显示:随着失神经时限延长,肌纤维细胞逐渐萎缩,截面积减小,胶原纤维细胞逐渐增加,胶原纤维截面积增加.肌肉截面积/胶原截面积比率逐渐下降.失神经0.5～2年肌肉截面积/胶原截面积比率下降最为明显,但失神经>3年组肌肉相对截面积仍残留36%,为正常对照组的48%.免疫荧光染色显示:TGF-β1在失神经6～12个月组及>2～3年组肌细胞质有较高表达,>1～2年组表达最高,后逐渐下降,3年后基本无表达.失神经各组比较均差异有统计学意义(均P<0.01),失神经>3年组与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).TGF-β1的Western blot结果表明:6～12个月组为正常对照组的4.5倍,>1～2年组达到高峰,为正常对照组的11.4倍,随后缓慢下降;>2～3年组降为正常对照组的6倍;>3年组为正常对照组的1.2倍.结论:失神经2年内进行神经修复可能是阻止肌肉纤维化的最佳时期,但失神经3年后作神经修复仍有其肌肉形态学的基础.     

延期神经再支配对大鼠失神经面肌功能的影响

目的 研究不同时间延期神经再支配对大鼠失神经面肌功能恢复程度的影响.方法 150只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、面神经损伤8周组(n=10)、面神经损伤16周组(n=10)、延期8周神经修复组(n=60)和延期16周神经修复组(n=60).以缝线结扎左侧面神经制造面神经损伤模型,分别于结扎后8周和16周行神经减压即延期神经再支配.采用诱发肌电图检测面肌动作电位最大振幅和潜伏期;采用肌肉Masson染色和神经干甲苯胺蓝染色,观察单位面积内肌纤维数目和平均直径、面神经有髓纤维数目.结果 面神经损伤组动物可见左侧面肌瘫痪,未见自发性恢复.延期8周神经修复组术后16周面肌功能恢复良好,面肌动作电位最大振幅可恢复至正常水平的75.55%,单位面积内有髓纤维数目、肌纤维数目和平均直径分别为正常值的72.26%(P＜0.05)、95.2%(P＞0.05)和93.79%(P＞0.05).而延期16周神经修复组术后16周面肌功能恢复差,单位面积内有髓纤维数目、肌纤维数目和平均直径分别为正常值的36.65%(P＜0.05)、69.33%(P＜0.05)和72.77%(P＜0.05).结论 适时延期神经修复可较好恢复面肌功能,虽然晚期神经修复效果差,但仍可恢复部分肌张力.     

氨磷汀对早期中耳放射损伤防护作用的研究

目的探讨氨磷汀对早期中耳放射损伤的防护作用。方法将38只豚鼠分为A、B、C、D、E5组,其中E组为空白对照,A、C组为单纯照射,B、D组为照射加用氨磷汀。照射豚鼠以60钴γ射线照射右耳,3.0Gy/次,总剂量45Gy,每周5次。加用氨磷汀的豚鼠每次照射前30min腹腔内注射氨磷汀100mg/kg。分别于照射45Gy后第2天和第30天处死豚鼠,行光镜及扫描电镜检查,观察各组豚鼠照射侧中耳黏膜病理和超微结构改变。结果经45Gy射线照射后第2天,豚鼠中耳黏膜上皮增厚,炎性细胞浸润,纤毛倒伏、融合,渗出增多;照射后第30天中耳黏膜上皮纤毛脱落、减少,损伤加重;照射前应用氨磷汀的豚鼠中耳黏膜均未见明显损伤;未用药组较用药组中耳黏膜厚度及白细胞浸润数增高(均P<0.01)。结论射线可致中耳黏膜黏液纤毛输送系统功能受损,并随时间推移而加重;氨磷汀可以减轻中耳的早期放射损伤,可望用于临床。     

经鼻给药对鼻粘膜结构的影响

目的研究药物经鼻吸收时对鼻粘膜结构的影响。方法使用硫酸庆大霉素及胰岛素给家兔滴鼻,在用药后３、５、７ｄ和２周及停药后的１周及２周取鼻粘膜进行光学显微镜和透射显微镜观察。结果用药后３～７ｄ出现渐进性鼻粘膜损伤的改变,１周后部分区域上皮脱落,但基底膜完整。停药后１～２周内上皮细胞及纤毛迅速修复。结论鼻内给药是一种可行的有前途的给药途径。     

Influence of intranasal medication on the structure of the nasal mucosa]

OBJECTIVE: To study the pathological changes and reversibility of the nasal mucosa after drug administration. METHODS: Gentamicin and insulin were dropped into the nasal cavity of rabbits for 3, 5, 7 days to two weeks, after one and two weeks, the nasal mucosa was taken and observed under optical and electron microscopes. RESULTS: It was found that after 3-7 days of drugs administration, damages of the nasal mucosa gradually appeared, and became most serious after one week when the epithelia in some regions detached from basement membr theane. After stopping drug application, the ciliated epithelia restored quickly and completely, goblet cells reproduced and inflammatory reaction disappeared. CONCLUSION: The damages induced by drugs on nasal mucosa are reversible. The intranasal route of drug administration is feasible and promising.     

水温对大鼠鼻黏膜的影响

目的观察不同水温刺激后大鼠鼻黏膜的损伤及修复过程的形态学变化。方法144只大鼠随机分为37、50、70℃组,每组以相应温度的生理盐水滴在大鼠双侧鼻中隔黏膜（各0.05ml）30次,每分钟1次。每组分别在滴鼻的第15、30分钟以及滴鼻后第1、3、7、14、28、42天取刺激区鼻中隔黏膜行光镜和电镜下观察。结果与37℃比较,50、70℃组在滴鼻的第15、30分钟以及滴鼻后第1、3天,黏膜损伤明显,尤其70℃组在滴鼻后第3天的黏膜损伤最为严重。50℃组第7天渐恢复,第14天基本恢复,70℃组在第28天仅少数恢复,42天后仍未完全恢复。结论50、70℃水温均可损伤鼻黏膜,50℃组2周后可修复,70℃组预后较差。     

Effects of pingyangmycin on mucous membrane of respiratory tract and its prevention]

OBJECTIVE: To observe the effects of pingyangmycin(PYM) on the histomorphology and ultrastructure of airway mucosa from the healthy Wistar rats and explore the intervenient role of Vitamin E and Composite Salvia Miltiorrhiza (CSM) on these effects. METHODS: Thirty Wistar rats were divided randomly into four groups: Group A as control group (injection of N. S into peritoneal cavity); Group B received intracavitary injection of PYM; Group C received both intracavitary injection of PYM and tube feeding of Vitamin E; Group D received intracavitary injection of PYM and CSM. The nasal and tracheal mucosa were taken for light microscopy(LM), transmission electron microscopy(TEM) and scanning electron microscopy(SEM) at the 1st, 2nd, 4th and 6th week of the experiment. RESULTS: Edema and degeneration of epithelial cells manifested as expansion of endoplasmic reticula, swelling of mitochondria, disarrangement of mitochondrial crista, vesicula formation of mitochondria, reduction of mitochondria in part cells, mild expansion of perinuclear space and slight peripheral accumulation of nuclear chromatin could be seen in Group B at the end of the 1st week without necrosis or detachment of the cells. At the 2nd week, there were necrosis and exfoliation of epithelial cells, rupture of cell membrane, phenomena of outflow of mitochondria and endoplasmic reticula. The degree of cell damage became more seriously at the 4th week and was not recovered to normal condition even 2 weeks after stopping administration of PYM. The cell damages in Group C and D were significantly lighter than that in Group B and its occurrence were significantly postponed. The injured cells recovered definitely after stopping PYM administration and continuous application of Vitamin and CSM for another 2 weeks. CONCLUSIONS: (1) The nasal and tracheal mucosa of Wistar rats can be damaged by injection of PYM and the degree of damage which become more serious with the increase of dose. (2) Vitamin E and CSM can alleviate the damages of the respiratory mucosa from Wistar rats caused by PYM. Both drugs could be used to prevent respiratory tract mucosa from the damages induced by PYM in clinical.     

平阳霉素对呼吸道黏膜的影响及其预防探讨

目的　观察平阳霉素对健康Wistar大鼠鼻和气管黏膜组织形态、超微结构的影响并探讨维生素E(VitE)、复方丹参注射液对它的干预作用。方法　健康Wistar大鼠 3 0只采用随机数字表法分为 4组 ,甲组 :对照组 (腹腔注射 0 9%氯化钠溶液 ) ;乙组 :平阳霉素腹腔注射组 ,每次 1 0mg/kg体重每周 2次 ,共 4周 ;丙组 :平阳霉素腹腔注射 +VitE灌胃组 ;丁组 :平阳霉素腹腔注射 +复方丹参注射液腹腔注射组。于 1、2、4、6周取鼻和气管黏膜行光镜和电镜观察。结果　乙组在第 1周见细胞水肿、变性 ,表现为内质网扩张 ,线粒体肿胀 ,嵴排列紊乱 ,线粒体空泡化 ,部分细胞线粒体减少 ,核周间隙轻度扩大 ,染色质轻度边集等。第 2周见上皮细胞坏死、脱落 ,细胞膜破裂 ,线粒体、内质网等细胞器外溢。第 4周细胞受损伤程度更加重 ,停药 2周后仍呈较重损伤。丙、丁 2组均可见细胞受损伤程度明显减轻 ,且出现时间推迟 ,停用平阳霉素并续用VitE、复方丹参注射液 2周可见细胞无明显改变 ,与甲组相似。结论　平阳霉素可损伤健康Wistar大鼠鼻和气管黏膜 ,并随剂量增加而损伤程度加重 ;VitE、复方丹参注射液均可减轻平阳霉素对Wistar大鼠鼻和气管黏膜的损害 ,对平阳霉素的呼吸道黏膜损伤具有保护作用     

鼻内镜术中光和热对鼻黏膜的损伤

目的：探讨鼻内镜术中光和热对鼻黏膜的损伤。方法：应用透射电镜技术，观察正常和光照不同时间后的兔鼻中隔黏膜及其改变。结果：发现光照后纤毛分布不均，有粘连及脱落；随照射时间的延长，出现上皮细胞间距增大，纤毛分布稀疏、粗细不等，胞内线粒体肿胀、嵴消失，基质空泡化，上皮细胞核曲边，染色质呈块状分布、边集，细胞核接近细胞表面，且可见杯状细胞脱落。结论：鼻内镜术中光和热对鼻黏膜及黏液纤毛有损伤作用，鼻内镜手术应尽量缩短手术时间，尤其是连续照射时间。