钙阻滞剂对突触体钙进入和MK—801位点结合率的影响

钙阻滞剂具有多种类型,各类型对电压依赖性钙通道位点的作用是不完全相同的。近年报告,多种钙阻滞剂具有脑缺血、脑损伤的预防保护作用,这种作用是否与阻止Ca进入细胞内强度有关尚缺乏系统研究。为此,我们以小鼠大脑突触体制备,研究了二氢吡啶类(硝苯吡啶,Nitre)、苯烷胺类(维拉帕米,Ver)和苯噻氮 类(硫氮(艹卓)酮,Dil)三种钙阻滞剂对正常和高钾(70mmol/L)下突触体Ca进入及MK—801位点的影响,以期能发现某种内在的规律性。结果表明:1.三药对在正常K~+     

汉防己碱与1, 6-二磷酸果糖对兴奋性氨基酸所致突触体内游离钙浓度升高的影响

目的:研究汉防己碱(Tet)与1, 6-二磷酸果糖(FDP)对兴奋性氨基酸(EAA)诱导的突触体内游离钙浓度升高的影响。方法:制备大鼠脑突触体, 以荧光法测定突触体内游离钙浓度;加入谷氨酸(Glu, 100μmol·L^-1), 天冬氨酸(Asp, 100μmol·L^-1), N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA, 100μmol·L^-1)及Glu+Asp(50μmol·L^-1+50μmol·L^-1)后, 测定突触体内游离钙浓度的变化;提前给予Tet(10、30、60μmol·L^-1), FDP(15、30、75、150μmol·L^-1), MK-801(10、20μmol·L^-1)及Tet+FDP(10+15, 30+30μmol·L^-1)预孵, 再加入上述浓度的Glu、Asp、NMDA及Glu+Asp, 观察突触体内游离钙浓度的变化。结果:Glu、Asp、NMDA及Glu+Asp均呈剂量依赖性升高突触体内游离钙浓度, 提前给予不同浓度的Tet、FDP、MK-801及Tet+FDP, 均可使突触体内游离钙浓度呈剂量依赖性降低, 且以Tet+FDP的作用最明显。结论:Tet与FPD可显著抑制EAA诱导的突触体内游离钙浓度的升高, 这可能是二者保护缺血脑细胞的作用机制之一。Tet与FDP联合应用可能对缺血脑细胞有更强的保护作用。     

人参和三七总皂甙对突触体Ca~(2+)进入和MK—801位点的影响

人参(GS)和三七(PGS)总皂甙具有相似的化学组分,但由于各组分含量不同,因而具有不完全相同的药理作用。近年报告,GS和PGS具钙阻滞作用,其中某些组分尚具改善学习和记忆以及脑损伤和脑保护作用。这种作用是否与公认的脑保护剂MK—801作用相似尚无证明。     

缺血缺氧对神经细胞突触后电流的影响及其作用机制

神经细胞缺血缺氧后突触后电流的频率或幅度出现变化 ,提示氨基酸类神经递质释放的变化。急性缺血缺氧时 ,自发性兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流均受到抑制 ,诱发性兴奋性突触后电流幅度增高。长期慢性缺氧情况下 ,NMDA受体介导的兴奋性突触后电流受到抑制。缺氧预适应后 ,γ 氨基丁酸释放增加 ,谷氨酸释放减少。多次重复急性缺氧抑制诱发性兴奋性突触后电流的幅度 ,说明长期慢性缺氧及缺氧预适应启动神经细胞的保护机制。腺苷通过调节氨基酸递质的释放 ,对神经细胞具有明显的保护作用 ,但对于缺血缺氧所造成的损伤却未见修复作用。     

缺血—再灌注对大鼠心肌氨基酸的影响及牛磺酸的作用

心肌缺血—再灌注后可出现一系列损伤性变化,其中形态结构变化,各种酶与离子的改变都有深入的研究。本文利用大鼠离体心脏缺血—再灌注损伤模型,观察再灌注损伤后心肌中17种游离氨基酸的变     

黄芩甙预处理对缺血再灌注大鼠心功能和心肌细胞游离钙的影响

目的:观察黄芩甙预处理对缺血/再灌注(I/R)大鼠离体心功能和心肌细胞游离[Ca2+]i的影响,探讨其对心脏I/R损伤的保护作用及可能机制。方法:SD大鼠50只,摘取心脏后采用Langendorff心脏灌流系统分为五组进行实验,对照组采用正常Tyrode液灌流90min;I/R组先用正常Tyrode液灌流30min后,再行I/R各30min;三种浓度(10、20、40μmol/L)黄芪甙预处理组于停止灌注前,用正常Tyrode液灌流10min后再用不同浓度黄芩甙液灌流20min,最后行I/R各30min。观察各组心功能指标冠脉流量(CF)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室收缩压最大上升/下降速率(dp/dtmax和dp/dtmin);分离单个心肌细胞,检测心肌细胞内Ca2+荧光染色强度,计算[Ca2+]i。统计学分析各组各指标测值差异及其相关性。结果:方差分析显示,心功能指标和[Ca2+]i在各组大鼠之间差异有统计学意义(P0.01)。两两比较表明,I/R组各心功能指标明显低于对照组,[Ca2+]i高于对照组(P均0.01);3种浓度黄芩甙预处理后,心功能指标值明显升高,[Ca2+]i明显降低(P0.05,P0.01)。相关性分析表明,黄芩甙预处理浓度与心功能指标变化呈正相关,与[Ca2+]i变化呈负相关(P0.05,P0.01)。结论:黄芩甙预处理可显著改善I/R心肌的舒缩功能,其机制可能与黄芩甙降低I/R心肌细胞内游离[Ca2+]i有关。     

巴比妥对小鼠大脑皮层的[~3H]MK—801结合位点影响

兴奋性氨基酸(EAA)n—methyl—D—aspartate(NMDA)受体是一个受体—离子通道复合物,有多个不同活性区域调节点,其中拟精神药Phencyclidine(PCP)和thienycyclohexypiperidine(TCP)能与受体—离子通道内面特异位点结合,调节NMDA受体功能。Dizocilpine(MK—801)是非竞争性NMDA受体拮抗剂,亦能与PCP点结合而具抗惊厥作用和脑缺血保护作用。巴比妥     

汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳中毒的保护作用研究

为了研究汉防己碱和MK801对小鼠急性一氧化碳中毒是否有保护作用。方法:小鼠腹腔注射CO150ml/kg,间隔3-4h 1次。连续3次,汉防己碱(Tet)15mg/kg和MK801 2mg/kg在每次给予CO前30分钟腹腔注射;以CO中毒后小鼠被动回避性学习记忆能力改变,脑组织病理学和Ca2 -Mg2 -APTase     

MK—801对脑创伤大鼠部分脑区和垂体强啡肽A1—13含量的影响

为探讨兴奋剂性氨基酸（ＥＡＡ）ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ－８０１在脑创伤后脑水肿中的保护作用及其与内洙性强啡肽之间的关系，本研究利用放射免疫分析与脑水肿密度测定法，发现腹腔给予ＭＫ－８０１（１ｍｇ／ｋｇ）可以明显降低脑创伤后２４ｈ伤侧皮层与海马水肿，脑创伤后侧皮层与海马ｉｒ－ＤｙｎＡ１－１３含量明显降低（Ｐ〈０．０１），而给予ＭＫ－８０１后ｉｒ－ＤｙｎＡ１－１３，含量明显升高（Ｐ〈０．０１）。结果表明     

施万细胞和MK801对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响

目的　观察单独或联合应用施万细胞和MK80 1对大鼠脊髓半横切后受损伤的背核神经元存活及其表达NOS的影响。　方法　应用细胞培养、免疫组织化学、核荧光标记、荧光逆行追踪和酶组织化学等技术。　结果　T11脊髓半横切后 15d ,生理盐水对照组的L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数量比未损伤侧减少 ,其中胞体面积 >4 0 0 μm2 的神经元明显减少 ,而且部分存活的神经元NOS活性增高 ,背核面积及神经元胞体面积缩小。施万细胞组、MK80 1组、施万细胞与MK80 1联合组的L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数量则比术后同期对照大鼠增多 ,胞体面积 >4 0 0 μm2 神经元的存活数量显著增多。施万细胞与MK80 1联合组作用明显。MK80 1组存活的神经元中NOS活性明显减弱 ,且能阻止背核及其神经元胞体的面积的缩小。　结论　施万细胞与MK80 1均可促进轴突被切断的背核神经元的存活 ,两者有协同作用 ,且MK80 1还能防止背核及其神经元胞体缩小     

硝苯地平对缺血再灌注心肌保护作用的病理学研究

硝苯地平对缺血再灌注心肌保护作用的病理学研究林朝胜，王世贤，孙文利，董宝印关键词心肌，缺血再灌注，组织学，超微结构硝苯地平，兔中国图书分类号Ｒ５４２．２０２缺血再灌注（１－Ｒ）损伤可导致心律失常、心功能障碍、心肌结构损伤，研究其发生机理和防治是当前心...     

CGRP对大鼠缺血再灌注后海马内突触体素表达的影响

为了探讨降钙素基因相关肽 CGRP对大鼠脑缺血再灌注后突触体素 (synaptophysin,p38)表达的影响 ,我们采用暂时夹闭双侧颈总动脉法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,经右侧颈内动脉主入 CGRP,采用单克隆抗 p38抗体免疫组织化学染色及显微图像方法研究 CGRP对大鼠再灌注海马内 p38的影响。结果表明 :大鼠缺血再灌海马内 p38反应产物较正常组显著降低 (P <0 .0 1) ,而注射 CGRP组阳性产物明显高于缺血再灌注组 (P <0 .0 1)。这说明大鼠缺血再灌注 p38表达明显减少 ,而 CGRP可上调缺血再灌注 p38的表达。本文结果提示 :CGRP参与缺血神经元突触体素的调节 ,CGRP对缺血神经元有一定的修复作用。     

氯胺酮在大鼠脊髓背角胶状质内对突触前神经递质释放的影响

为探讨临床有效浓度的氯胺酮(ketamine,KTM)在脊髓背角胶状质(substansia gelatinosa,SG)内对突触前神经递质释放的影响及其作用机制,本研究应用红外可视神经组织薄片全细胞膜片钳记录方法,在电压钳模式下,观察了KTM对自发性抑制性和兴奋性突触后电流(spontaneous inhibitory and excitatory postsynaptic currents,sIPSCs and sEPSCs)的频率和幅值的影响。结果显示:(1)钳制电压在0mV时,在人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)中加入10-5mol/LAP-V和10-6mol/LCNQX,可记录到sIPSCs。将此时记录到的频率和幅值都作为前对照组的基础值(100%)。给予10-4mol/LKTM后,与前对照组相比,sIPSCs频率为127.93%±25.17%(P<0.05),幅值为104.78%±11.35%(P>0.05,n=7);(2)钳制电压为-70mV时,在ACSF中加入3×10-7mol/L士的宁和10-6mol/L荷包牡丹碱后,可观察到sEPSCs。加入10-4mol/LKTM后,与前对照组相比,sEPSCs的频率和幅值分别为97.89%±4.06%和101.63%±7.66%(P>0.05,n=8)。以上结果提示:(1)KTM增加了sIPSCs的频率,而对幅值没有明显影响,即KTM引起突触前抑制性神经递质的释放增加,而对突触后神经元的作用不明显;(2)KTM对sEPSCs的频率和幅值均未见明显影响,说明KTM在SG内对兴奋性神经递质的释放无显著影响。由此我们推测KTM在脊髓SG内主要通过增强抑制性信息传递发挥作用,KTM增强SG内突触前抑制性神经递质释放可能与其在脊髓背角发挥麻醉和镇痛作用有关。     

积雪草提取物对脾淋巴细胞细胞周期及细胞内游离钙的影响

目的: 观察积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞细胞周期及细胞内游离Ca²⁺的影响,并对其免疫调节作用机制进行初步探讨。方法: 采用乙醇浸提、极性萃取分离得到积雪草粗提物,利用Sephadex-LH20凝胶柱层析进一步分离纯化获得积雪草各组份提取物,通过观察各组份抑制1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基的抗氧化作用及对脾淋巴细胞增殖的影响,筛选出其活性成份。采用流式细胞术观察此活性成份对脾淋巴细胞细胞周期影响,并用Fluo-3/AM荧光探针结合流式细胞术分析积雪草提取物对脾淋巴细胞内游离Ca²⁺影响。结果: (1)获得进一步纯化并具有抗氧化活性的积雪草提取物D;(2)积雪草提取物D对脾淋巴细胞增殖抑制作用显著;(3)积雪草提取物D可降低脾淋巴细胞内游离Ca²⁺浓度,且呈量效关系;(4)积雪草提取物D能阻滞脾淋巴细胞进入S期和G₂/M期。结论: 积雪草提取物抑制小鼠脾淋巴细胞增殖,其作用机制可能是通过降低细胞内游离Ca²⁺浓度从而抑制脾淋巴细胞进入细胞分裂期而发挥作用。     

琥珀酸在海马CA1区对突触前GABA释放的影响

为了观察琥珀酸在大鼠海马CA1区对突触前GABA释放的影响,我们采用红外可视全细胞膜片钳技术记录了琥珀酸对γ-氨基丁酸(GABA)能自发性微小抑制性突触后电流(miniature inhibitory postsynaptic currents,mIPSCs)的作用。结果显示不同浓度的琥珀酸(10-6mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L和10-3mol/L)在海马CA1区均能以浓度依赖的方式增强GABA能mIPSCs的频率,而对其电流幅度没有影响。10-4mol/L琥珀酸组GABA能mIPSCs的频率为2.25±0.99Hz,与正常对照组相比有显著性差异(n=8,P<0.01),而其电流幅度为31.63±6.16pA,与正常对照组相比没有差异(n=8,P>0.05)。以上实验结果表明琥珀酸能通过增强突触前GABA的自发性释放,对海马CA1区神经元产生超极化作用,此作用可能是琥珀酸抑制癫痫形成的主要方式之一。     

阿片类物质对淋巴细胞内环磷酸腺苷及游离钙的影响

文本观察了几种阿片类物质对小鼠脾脏淋巴细胞内环磷酸腺苷,游离钙及钙调蛋白的影响。结果表明:吗啡、α-CAO、MENK、DADLE及强啡肽均降低小鼠脾脏淋巴细胞内环磷酸腺苷水平,升高淋巴细胞内游离钙浓度,增加淋巴细胞内钙调蛋白活性。预先给予纳洛酮能够阻断阿片类物质的作用。说明阿片类物质的作用是通过阿片受体介导的。     

运动对小脑皮质和脊髓分离突触体膜流动性和突触体内游离Ca~（2＋）的影响

采用超速离心技术分离制备突触体，结合ＤＰＨ荧光偏振方法和ｆｕｒａ－２荧光标记技术分析长期适量运动（跑转笼）对小脑皮质和脊髓分离突触体膜流动性、突触体内游离Ｃａ２＋的影响。以同龄对照组心重／体重比率均值的２倍标准差作为运动有效标准。结果显示，和５月龄鼠比较，１３月龄鼠小脑皮质和脊髓分离突触体膜流动性均无显著性差异，而经８个月运动训练后，突触体膜流动性升高（Ｐ＜０．０５）．在小脑去极化状态（高Ｋ＋）下，１３月龄鼠分离突触体游离Ｃａ２＋高于５月龄鼠（Ｐ＜０．０５），而静息状态下两者间无差异（Ｐ＞０．０５）．在脊髓静息和去极化状态下分离突触体游离Ｃａ２＋在两个年龄对照组间无差异（Ｐ＞０．０５）．经８个月运动训练后，小脑皮质和脊髓分离突触体在静息和去极化状态下的游离Ｃａ２＋均低于同龄对照组，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）．结果表明，从青年开始的长期适量运动对突触体膜功能和Ｃａ２＋调节系统具有一定的保护作用．     

神经降压素对大鼠脊髓背角胶状质内突触前神经递质释放的影响

目的:研究内源性神经肽神经降压素(neurotensin,NT)在脊髓背角胶状质(substantia gelatinosa,SG)内对突触前神经递质释放的影响。方法:采用全细胞电压膜片钳记录方法,在脊髓薄片上观察NT对SG内微小兴奋性突触后电流(mEPSCs)和微小抑制性突触后电流(mIPSCs)的频率和幅值的影响。结果:(1)灌流NT(2μmol/L)对SG内神经元mEPSCs的频率和幅值均无明显影响,说明NT不影响SG内兴奋性神经递质的释放;(2)灌流NT(2μmol/L)能增加SG内神经元mIPSCs的频率,但对幅值无明显影响,即NT可引起突触前抑制性神经递质的释放增加,但对突触后神经元无明显影响。结论:NT可通过增加SG内抑制性神经递质释放的途径抑制伤害性信息的传递,从而实现镇痛效应。     

异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠海马氨基酸递质水平变化及神经元凋亡的影响

目的： 观察异丙酚对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织氨基酸递质水平变化及神经元凋亡的影响。方法：雄性Wistar大鼠60只，随机等分为假手术（A）组、缺血再灌注对照（B）组和异丙酚处理（C）组，后者按异丙酚用量又分为50 mg/kg（C₁）、100 mg/kg（C₂）和150 mg/kg（C₃）3个亚组。全脑缺血10 min再灌注60 min时，各组断头处死大鼠6只，检测海马组织中氨基酸水平的变化；于再灌注72 h时，断头处死余下大鼠，用流式细胞仪检测海马组织神经细胞凋亡指数（AI），光镜检测海马CA1区神经元凋亡的密度。结果：与假手术组比较，各组海马组织谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）含量有不同程度的增高，γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（Gly）的含量有不同程度的降低(P<0.05或P<0.01)。异丙酚组海马组织Glu、Asp含量低于对照组，GABA、Gly的含量高于对照组（P<0.05或P<0.01）。再灌注72 h时，各组海马组织神经细胞AI有不同程度的增高，海马CA1区神经元凋亡密度明显增加。异丙酚组海马组织神经细胞凋亡数量明显减少。结论：异丙酚对脑缺血再灌注损伤的拮抗作用可能与其抑制兴奋性氨基酸的释放、降低抑制性氨基酸的耗竭、继而减少神经元的凋亡、提高神经元的存活数目有关。     

阿苯哒唑对鼠体内旋毛虫幼虫蛋白质、氨基酸及元素含量的影响

目的 :探讨阿苯哒唑对旋毛虫幼虫的驱虫机理。方法 :将感染旋毛虫的小鼠分为对照组和服用阿苯哒唑药物的实验组 ,分别对两组鼠肌肉中提取的旋毛虫幼虫进行了蛋白质、氨基酸及所含元素的检测。结果 :实验组和对照组氨基酸含量的变化表明 :用药前后小鼠的 18种氨基酸含量中 ,分别有 5种氨基酸的含量发生了显著性变化 ;实验组和对照组蛋白质含量的变化表明 :实验组蛋白质含量较对照组含量有明显减少 ;通过比较两组元素含量表明 :10种宏量及微量元素中有 8种元素含量有显著性变化。结论 :阿苯哒唑对鼠体内旋毛虫幼虫主要营养和能量来源的的蛋白质、氨基酸及元素含量有明显的影响 ,干扰虫体正常的代谢功能