乙型肝炎病毒X蛋白单克隆抗体的制备及肝癌组织中相应抗原…

应用基因工程技术制备的１７０００乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ蛋白（ＨＢｘＡｇ）免疫动，成功地备了抗－ＨＢｘ单克隆抗体，以此抗体对原发性肝癌（ＨＣＣ）组织，慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）肝组织行相应抗原检测，并同时进行乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃＡｇ）的检测。在ＨＣＣ标本中ＨＢｘＡｇ在癌内及癌周肝组织中的阳性率分别为５６％及４８％，ＨＢｓＡｇ为１６％及７４％。ＨＢｃＡｇ仅见于癌     

肝细胞癌c-fos的表达及其与乙型肝炎病毒的关系

目的 研究肝癌组织中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｃｏｆ ｍＲＮＡ的表达及其与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的关系。方法 采用免疫组化及原位杂交技术检测５９例肝细胞癌组织及５６例癌旁组织中ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ、ｃ－ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＡＮ的表达。结果 癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性率为８７．５％（４９／５６）。肝癌组织ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为５９．３％（３５／５９）。肝细胞癌组织、癌旁肝组织ｃ－ｆｏｓ蛋白 阳性率     

肝癌的病毒病因学研究

为了探讨了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ），丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肝细胞肝癌（ＨＣＣ）发生的关系及原癌基因ｒａｓ和肿瘤抑制基因ｐ５３在肝癌中的变化，我们利用免疫组人技术检测了福尔马林固定，石蜡包埋理肝癌组织内乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ），核心抗原（ＨＢｓＡｇ）的表达以及ｒａｓＰ２１，ｐ５３蛋白的过量表达，利用聚合物聚链式反应（ＰＣＲ）检测了肝癌及癌旁组织的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在２５例外检     

丙型肝炎病毒C33c抗原、核心抗原和HBxAg在人原发性肝内胆管细胞癌中的分布及意义

目的：研究丙型肝炎病毒Ｃ３３ｃ抗原及核心抗原在人肝内胆管细胞癌中的分布及意义。方法：以免疫组织化学方法检测ＨＣＶ两种抗原及ＨＢｘＡｇ在肝内胆管细胞癌及癌旁肝组织中定位及分布。结果：ＨＣＶＣ３３ｃ抗原位于癌细胞或肝细胞的胞浆内；ＨＣＶ核心抗原在癌组织主要呈核阳性，在癌旁肝以胞浆阳性为主。ＨＣＶＣ３３ｃ抗原在癌组织及癌旁肝的阳性率分别为６０％（２１／３５）及１００％（２１／２１），ＨＣＶ核心抗原在上述两种组织的阳性率分别为８７．８％（２９／３３）及６１．９％（１３／２１）；ＨＢｘＡｇ在两种组织中检出率分别为７４．３％（２６／３５）及７６．２％（１６／２１）．Ｃ３３ｃ及ＨＢｘＡｇ双阳性分别为４８．６％（１７／３５）及７６．２％（１６／２１）．结论：除ＨＢＶ感染外，ＨＣＶ感染在人肝内胆管细胞癌的发生中可能起重要作用     

乙型和丙型肝炎重叠感染患者肝组织免疫组织化学双标记研究

探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）重叠感染患者肝组织中病毒的复制状况和相互关系。方法采用免疫组织化学双标记技术，以抗－ＨＣＶＮＳ３、抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体和抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ多克隆抗体，检测２５例尸检肝组织中ＨＣＶＡｇ和ＨＢＶＡｇ的分布和表达。结果ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ同时阳性１１例，ＨＢｓＡｇ和ＮＳ５Ａｇ阳性１２例，ＨＢｃＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ及ＨＣＶＮＳ５Ａｇ阳性各１０例。几乎所有单标记染色阳性切片，其双标记染色也阳性。感染ＨＣＶ或ＨＢＶ的肝细胞各呈灶性、散在或弥散混杂分布，在重叠感染肝组织中，与ＨＢＶ复制有关的表达类型，如ＨＢｓＡｇ膜、浆型和ＨＢｃＡｇ浆型以及ＨＣＶＮＳ３Ａｇ和ＨＣＶＮＳ５Ａｇ的检出例数，同单纯感染组相比差异无显著意义（χ２＝０．１５４及０．１９８，Ｐ＞０．０５）。结论乙型和丙型肝炎病毒在重叠感染时，两种病毒在肝组织内可能不存在互相干扰和抑制。     

原发性肝癌患者肝组织中HCVRNA和HCV抗原的定位

分别用原位杂交过氧化物酶与抗氧化物酶复合物法检测了７３例肝细胞癌患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原以及乙型肝炎病毒的表面抗原和核心抗原。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．０％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有ＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测率分别为２６．０％     

肝细胞癌组织内HBxAg的表达及其与p21ras的关系

应用免疫组织化学技术ＡＢＣ与ＰＡＰ法检测６６例肝细胞癌（其中５７例含有癌周组织）与１５例肝硬化组织内ＨＢｘＡｇ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ及ｐ２１ｒａｓ的表达，分析了ＨＢｘＡｇ与ｐ２１的关系。结果：ＨＢｘＡｇ在癌周与癌组织内均有高频率表达，癌内ＨＢｘＡｇ阳性组ｐ２１的阳性率显著高于阴性组（Ｐ＜０．０１），但癌周组织ＨＢｘＡｇ阳性组与阴性组间ｐ２１阳性率无显著差异。提示：ＨＢｘＡｇ与肝细胞癌变有密切关系，在控制、调节ｒａｓ癌基因表达上起重要作用。     

成人原发性肾炎肾组织乙肝病毒抗原沉积的研究

探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染与成人原发性肾小球肾炎（肾炎）发病的联系。方法：用间接免疫荧光法检测１６９例成人原发性肾炎患者肾活检冰冻切片组织ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的沉积情况。按血清ＨＢＶ感染标志物检测分血清阳性和阴性两组进行分析。结果：肾组织ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的阳性率分别为１４．２％和１０．９％。ＨＢＶ抗原（ＨＢＡｇ）总阳性率为１５．４％（２６／１６９）。其中系膜毛细血管肾炎、膜性肾病和系统     

人原发性肝细胞癌地高辛素标记HBV DNA探针的原位杂交与C－myc和P_（53）癌基因表达相互关系的研究

取自肝癌高发区的４０例人原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）标本，应用地高辛素（Ｄｉｇ）标记ＨＢＶＤＮＡ探针作原位杂交，检测ＰＨＣ和癌周肝组织内ＨＢＶＤＮＡ的表达，并用光敏生物素Ｃ－ｍｙｃ癌基因探针原位杂交和用免疫组化检测ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ及Ｐ５３癌基因在ＰＨＣ和癌周肝组织内的表达。Ｄｉｇ－ＨＢＶＤＮＡ探针肝内总阳性率为８０％，在ＰＨＣ内为６５％，而癌周肝组织中为７３％。ＨＢＶ－ＤＮＡ定位于肝细胞或癌细胞的胞浆和胞核内，而ＨＢＶＤＮＡ阳性颗粒在胞浆内比胞核内多。ＨＢＶＤＮＡ阳性细胞癌周比癌内更多。结果表明，ＰＨＣ病例与ＨＢＶ存在关系密切；癌内ＨＢＶＤＮＡ大都属整合型，而癌周属游离型。研讨ＰＨＣ内ＨＢＶＤＮＡ的表达与ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ，和Ｐ５３及Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达相互关系及致癌作用。     

乙型肝炎病毒在成人膜性肾病中的致病作用

为了进一步了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）在成人膜性肾病（ＭＮ）发病中的作用。作者应用免疫组化方法对６７例ＭＮ，患者肾组织中的ＨＢＶ抗原进行了检测。年龄小于３０岁者２６例，３０～５０岁者３２例，大于５０岁者９例。肾组织中ＨＢＶ抗原检出率分别是７３．１％（１９／２６），７５％（２４／３２）和３３．３％（３／９）。５０岁以上ＭＮ患者肾组织中ＨＢＶ抗原检出率显著低于５０岁以下年龄组（Ｐ＜０．０５）。ＭＮ患者肾组织中以ＨＢｓＡｇ检出串最高，６７．２％（４５／６７），ＨＢｃＡｇ检出率２２．４％（１５／６７），ＨＢｅＡｇ仅１例阳性；ＨＢＶ抗原总阳性率６８．７％（４６／６７）。以３０例系膜增殖性肾炎（ＭｓＰＧＮ）为对照，ＨＢｓＡｇ检出率１０％（３／３０），ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ均为阴性。ＨＢＶ抗原总阳性率１０％（３／３０）。ＭＮ组肾组织内ＨＢＶ抗原检出率显著高于ＭｓＰＧＮ组（Ｐ＜０．０１）。本研究结果显示，ＨＢＶ抗原及其相应抗体形成的免疫复合物在膜性肾病，特别是中青年患者的发病机理中起着极其重要的作用，其中ＨＢｓＡｇ可能是最主要的致病抗原。     

原发性肝癌内HBV DNA及HBAg的分布与意义

采用原位分子杂交和免疫组化及双标记技术,对44例原发性肝细胞肝癌及痛旁肝组织进行了乙型肝炎病毒DNA及其表达产物x抗原、核心抗原检测。癌组织中HBV DNA、HBxAg、HBcAg检出率分别为70.5％、65.9％及20.5％;癌旁肝组织依次为76.5％、76.5％及29.4％。HBV DNA及HBxAg主要位于肝细胞浆中,在HBcAg阳性组中的检出率高于HBcAg阴性组(P<0.05)。9例枯否氏细胞浆有HBxAg检出。HBVDNA在癌及癌旁组织中的检出有“伴随现象”。HBcAg多位于核内,部分为核浆型,且总是伴随HBV DNA和(或)HBxAe检出,无一例单独检出HBcAg者。此外,HBxAg可由肝内游离型HBV DNA所表达;肝内核型或浆型HBcAg均可反映HBV的复制。因此,肝内HBxAg的检测可作为HBV感染的灵敏指标之一,进一步证实HBV感染与HCC的发生有密切关系。     

Distribution and significance of HBV DNA and HBAg in human primary hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis

ＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＨＢＶＤＮＡａｎｄＨＢＡｇｉｎｈｕｍａｎｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｌｉｖｅｒｃｉｒｒｈｏｓｉｓＨａｎＨｕｉｘｉａ（韩慧霞），ＷａｎｇＷｅｎｌｉａｎｇ（王...     

人原发性肝细胞癌及肝硬变内HBV DNA及HBAg的分布及意义

为了探讨ＨＢＶ与肝细胞癌的发病的关系，作者应用原位分子杂交，免疫组化及它们的双标记方法在４４例肝癌，１７例癌旁肝组织和４２例肝硬变的石蜡切片中检测了ＨＢＶ ＤＮＡ，ＨＢｘＡｇ。研究结果显示，ＨＢＶ ＤＮＡ，ＨＢｘＡｇ和ＨＢｃＡｇ在肝癌组织中的率分别为７０．５％，６５．９％和２０．５％，而在癌旁肝组织内检出率分别为７６．５％，７６．５％和２９．４％，４２例肝硬变组织中的检出率分别为８８．１％，...     

应用组织芯片技术研究肝癌与乙肝病毒感染的关系

目的　研究肝细胞性肝癌 (HCC)与乙肝病毒感染的关系。方法　制作包含 40例肝细胞性肝癌及相应的癌旁和非癌组织的组织芯片。以免疫组织化学方法 (SP法 )检测 40例肝癌组织及其相应的癌旁组织及非癌组织中的 HBs Ag和 HBc Ag表达情况。结果　 40例肝癌组织及其相应的癌旁组织和非癌组织中的 HBs Ag检出率分别为 7.5 %、40 %和 45 %;HBc Ag的检出率分别为 2 0 %、5 2 .5 %和 6 7.5 %;HCC肿瘤组织中的 HBs Ag和HBc Ag的表达率明显低于癌旁及非癌组织 (P<0 .0 1)。结论　 HCC的发生与 HBV感染有密切关系 ,随着 HCC的发展 ,HBV抗原的表达降低。组织芯片技术是可高效进行肿瘤分子病理研究的技术平台 ,能够在严格、均一的实验条件下 ,高通量、快速、平行地检测大批量组织样本中的一个或多个实验指标。     

乙肝病毒基因产物参与肝炎相关性肝癌的发生

目的:探讨乙肝病毒基因产物HBsAg,HBcAg,HBxAg在乙型肝炎相关性肝癌中的表达及其在肝细胞癌变中的作用。方法:采用组织芯片技术和免疫组织化学染色方法对152例乙型肝炎相关肝细胞肝癌组织、78例乙型肝炎后肝硬化组织中HBsAg,HBcAg,HBxAg的表达进行检测。结果:和乙型肝炎后肝硬化相比,在乙型肝炎相关性肝癌组织中HBsAg表达显著降低(P=0.000);HBcAg表达显著增高(P=0.000);HBxAg显著增高(P=0.005)。结论:乙肝病毒抗原成分HBcAg,HBxAg参与乙型肝炎相关性肝癌的发生。     

Relationship between hepatitis B virus associated primary hepatocellular carcinoma and alteration of tumor suppressor gene p53

ChronicinfectionofhepatitisBvirus(HBV)isoneoftheimportantfactorsrelatedwithprimaryhepatocellularcarcinoma(PHC).Yetthemecha-nlsmbywh1chHBVpartlcipatesinthedeveIop-mentofPHCremainstobeelucidated.Thoughthechangesofseveraltumorgeneswerethoughttobeinvolved1nthepathogenesisofPHC,itwasbe-Ilevedthatpo3playedakeyrolepartlcularlyinthemutatlonatcodon249ha'.However,verydlfferentresultshavebeenreportedamongPHCfromdiffer-entpopulationsandareasf'.'-.ltwasreportedthatpointmutationofp53geneatcodon249wa…     

乙型肝炎病毒相关性肝癌与p53基因变化的关系

目的：探讨与ＨＢＶ感染相关的肝癌其ｐ５３基因变化及意义，方法：收集１６例西安地区的肝癌及其旁肝组织，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测了组织中ＨＢＶＤＮＡ的状态，免疫组化确定ＨＢＶ的ＨＢｓＡｇ，ＨＢｘＡｇ和肿瘤抑制基因Ｐ５３蛋白的分布，采用ＰＣＲ扩增后直接ＤＮＡ序列分析，检测了ｐ５３基因第５～８外显子的基因序列。结果：１６例中１３例ＨＢＶＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性，１０例癌组织和１３例癌旁组织ＨＢｘ     

慢性乙型肝炎肝组织HBsAg和HBcAg的免疫组化检测及其意义

应用PAP和ABC法分别对54例慢性乙肝肝组织中HBaAg和HBcAg进行检测,分析了两种抗原在肝组织中的存在状态与肝脏病理变化及血清HBV复制指标间的关系。发现肝组织中HBV抗原检出率与肝炎病变程度呈负相关(P<0.05)。三种病理类型肝组织中,HBsAg均以胞浆型为主;膜型HBsAg主要见于CAH.ASH和CPH时,HBcAg以核型表达为主,面CAH时以浆膜型为主。膜型HBsAg和浆膜型HBcAg表达区易见到肝细胞坏死及炎性细胞浸润。还发现肝组织中HBcAg的检出与血清HBcAg和HBV-DNA密切相关(P<0.005)。上述结果提示:①肝细胞损伤可能并非HBV直接作用,而是机体针对HBV的免疫反应所致;膜型HBsAg和浆膜型HBcAg可能是肝细胞免疫损伤的靶抗原。②肝组织内HBcAg的存在是HBV复制标志。