JAM-C在小鼠急性坏死性胰腺炎模型不同组织中的表达

目的:研究连接黏附分子C(JAM-C)在小鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)模型胰腺、肾脏和肺脏组织中的表达.方法:采用雨蛙素和脂多糖联合腹腔注射的方法建立小鼠ANP模型.模型组(ANP组)小鼠腹腔内注射雨蛙素(50 μg/kg),连续6次,每次间隔1 h,在末次注射雨蛙素后,即向小鼠腹腔内注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg);对照组小鼠腹腔内注射等体积生理盐水.在末次注射3 h后,用眼球取血法收集血液,检测血清淀粉酶,并取胰腺、肾脏、肺脏组织,通过Western blot印迹杂交法检测JAM-C在这些组织上的表达.结果:JAM-C在ANP组的胰腺、肺脏和肾脏上均有着高表达,大于生理盐水对照组3倍以上(0.608±0.133 vs 0.176±0.024,0.718± 0.148 vs 0.160±0.027,0.654±0.085 vs 0.166±0.039,均P<0.05).结论:在小鼠ANP模型中,JAM-C在胰腺、肾脏和肺脏上的表达均明显增高,提示JAM-C在ANP发病过程中起到重要的作用.     

左旋盐酸精氨酸腹腔注射建立轻、重两种急性胰腺炎模型

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是发生于胰腺的炎症性疾病,建立合适的动物模型有助于其研究.目前较多采用逆行胆胰管注射法制备急性坏死性胰腺炎(ANP)模型和腹腔注射雨蛙素制备急性水肿性胰腺炎(AEP)模型.本文采用不同浓度的左旋盐酸精氨酸腹腔注射建立两种AP模型,现报告如下.     

牛磺胆酸钠诱导的急性坏死性胰腺炎大鼠基因表达谱变化

基因芯片技术是高通量的差异基因表达研究手段.通过杂交后的生物信息学分析有助于全面了解复杂基因和信号转导通路在急性坏死性胰腺炎(ANP)中的作用.因此,利用全基因组表达谱方法分析ANP基因的变化较单个基因的研究具有理论上的优势.李磊等[1]曾报道,腹腔注射雨蛙肽诱导的急性水肿性胰腺炎(AEP)基因表达谱的变化,但尚未见类似临床重症急性胰腺炎(SAP)的ANP模型的胰腺组织基因表达谱的报道.故本实验观察ANP大鼠胰腺组织基因表达谱的变化.     

植物乳杆菌WCFS1对急性坏死性胰腺炎小鼠胰腺及回肠损伤的影响

目的探讨益生菌植物乳杆菌WCFS1(LP)灌胃对急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠胰腺及回肠损伤的影响。方法 24只健康雄性小鼠应用广谱抗生素持续灌胃3周以建立肠道无菌鼠, 然后随机分为正常对照组(CON组)、ANP模型组(ANP组)、LP灌胃组(LP组)和LP灌胃后再诱导ANP组(LP+ANP组), 每组6只。LP组与LP+ANP组给予1×109 CFU/ml、0.2 ml/d的LP灌胃1周, CON组与ANP组以0.2 ml/d无菌磷酸盐缓冲液灌胃1周。采用雨蛙肽(100 μg/kg)腹腔注射10次, 每次间隔1 h, 第10次注射时腹腔加注脂多糖5 mg/kg的方法构建ANP小鼠模型, 2 h后处死小鼠。采用荧光定量PCR法检测小鼠粪便及回肠黏膜中LP数量;取胰腺和回肠组织行病理学检查, 观察组织的炎症程度, 并行病理学评分;采用酶动力化学法检测血清淀粉酶水平, ELISA法检测血清炎症因子水平及肠通透性指标;荧光定量PCR法检测胰腺与回肠组织炎症因子的表达;免疫荧光组织化学法检测回肠紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1表达量。结果 LP灌胃后小鼠粪便及回肠黏膜...     

人重组血管生成素-1对小鼠急性胰腺炎的治疗作用及机制

目的观察血管生成素-1(Ang-1)对小鼠急性胰腺炎(AP)的治疗作用,并探讨其作用机制。方法BALB/c小鼠54只,随机分为对照组、AP组、Ang-1治疗组(各18只)。AP组:腹腔注射雨蛙素50μg/kg,1次/h,共7次,制成AP模型;Ang-1治疗组:同法制作AP模型,之后腹腔注射100μg/kg的Ang-1;对照组:腹腔注射等量生理盐水。上述各组小鼠在作相应处理后分别于9、18、24 h各取6只,摘眼球取血处死,取胰腺组织观察其病理变化并评分(Schmidt法),检测小鼠血清淀粉酶(AMY)、TNF-α、IL-6。结果 AP组胰腺组织病理学评分及血清AMY、TNF-α、IL-6水平较对照组明显升高(P均<0.01),Ang-1治疗组胰腺组织病理学评分及血清AMY、TNF-α、IL-6水平较AP组下降(P均<0.05)。结论 Ang-1可明显减轻雨蛙素诱导的小鼠AP的炎症反应及胰腺损伤,其作用机制与降低炎症因子TNF-α、IL-6的水平有关。     

雨蛙肽引起的鼠急性坏死性胰腺炎:丙谷胺、Benzotript和胰泌素的保护作用

急性坏死性胰腺炎炎症和坏死过程的起动机制仍不清楚,治疗上除支持疗法外亦无其它有效方法.本文描述在用雨蛙肽引起大鼠急性坏死性胰腺炎后的生化和组织结构改变的消退过程,并比较胰泌素与两种CCK受体拮抗剂,丙谷胺和benzotriPt的保护作用.材料和方法:实验用大鼠15只禁食16～18小时后,每小时接受不同剂量的雨蛙肽(5～200μg/kg)皮下或腹腔内注射共7次,对照组注射0.9%氯化钠,于首次注射后9小时全部杀死.在研究胰腺炎时间过程和药物保护作用的实验中,用雨蛙肽50μg/kg腹腔内注射共7次.杀死鼠的时间同前.每次给予雨蛙肽前半小时,皮下注射不同剂量的丙谷胺或benzotript或胰泌素.另作下述实验:1.首次雨蛙肽注射后12小时杀死动物,观察丙谷胺或胰泌素的作用.2.研究在第三次注射雨蛙肽后给予丙谷胺或benzotript 4次的作用.3.研究丙谷胺或胰泌素对小剂量雨蛙肽引起的胰腺炎的作用.对部分鼠进行较长时间的实验观察.结果:皮下或腹腔内注射大剂量雨蛙肽可引起血清     

脂多糖诱导实验性急性水肿性胰腺炎演变为急性坏死性胰腺炎的基因表达谱变化

背景：既往对急性坏死性胰腺炎（ANP）的研究一般仅限于个别炎症相关基因的阐明,其发展过程中的基因表达谱变化尚未明确。目的：应用基因芯片技术分析脂多糖（LPS）诱导小鼠实验性急性水肿性胰腺炎（AEP）演变为ANP的基因表达谱变化,探讨该过程的基因变化机制。方法：分别以腹腔内注射雨蛙肽和雨蛙肽＋LPS诱导小鼠AEP和ANP模型,组织病理学检查鉴定建模是否成功。以Affymetrix小鼠寡核苷酸芯片检测AEP组和ANP组血白细胞基因表达谱,筛选差异表达基因。结果：ANP组/AEP组表达显著上调的基因包括转录因子、信号转导、炎症反应、黏附分子、急性反应蛋白、蛋白酶、细胞凋亡、氧自由基代谢等基因;表达显著下调的基因包括信号转导、黏附分子、细胞凋亡、防御反应、转录因子、代谢酶等基因。结论：AEP演变为ANP的基因变化模式可能为LPS等炎症信号激活酪氨酸蛋白激酶（TPK）信号通路和G蛋白介导的信号转导途径,活化C/EBPβ、Klf5等转录因子,从而促发Tnf、Il1b、Icam1等相关基因表达。     

Necrostatin-1对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎的保护作用

目的观察Necrostatin-1(Nec-1)对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎(AP)的影响。方法 C57BL/6小鼠予以50μg/kg的雨蛙肽腹腔注射7次,间隔1 h,建立AP模型。于第1次雨蛙肽注射后3 h、6 h、9 h和12 h,取出胰腺组织,HE染色。Western blot检测RIP1和RIP3蛋白的表达;C57BL/6小鼠随机分为:Control组、Vehicle组、Nec-1组和Nec-1i组,予以50μg/kg的雨蛙肽腹腔注射10次,间隔1 h,第1次雨蛙肽注射2 h前,腹腔注射Nec-1(1 mg/kg,每6 h 1次)、Nec-1i或等体积溶剂和空白对照。于第1次雨蛙肽注射后12 h、18 h和24 h,收集血清和胰腺组织。检测血清淀粉酶和脂肪酶。HE染色评估胰腺损伤程度。Real-time RT-PCR检测胰腺组织IL-1β和TNF-αmRNA的表达。结果 RIP1和RIP3蛋白在雨蛙肽诱导的AP中逐渐升高,且与胰腺腺泡细胞的坏死呈正相关;应用Nec-1后,与Vehicle组和Nec-1i组比较,于12 h、18 h和24 h,小鼠血清淀粉酶和脂肪酶水平明显降低,胰腺组织病理评分也明显减少,同时胰腺组织中IL-1β和TNF-αmRNA的水平也明显降低。结论 Nec-1对实验性胰腺炎具有明显的保护作用;程序性坏死可能促进了急性胰腺炎的损伤。     

雨蛙素诱导大鼠急性胰腺炎高相关性肠道共生菌的变化

目的 探讨雨蛙素诱导的大鼠急性胰腺炎肠道菌群的影响,挖掘与其发生高度相关的肠道共生菌。方法 将雄性Sprague Dawley大鼠随机分为造模组(AP组)和对照组(Control组)。通过腹腔注射雨蛙素构建大鼠急性胰腺炎模型,收集血清标本检测血清淀粉酶、脂肪酶。收集胰腺组织,采用HE染色法观察胰腺组织病理变化。收集大鼠粪便,借助16S rRNA测序技术研究两组大鼠肠道微生物菌群的变化,并通过与大鼠生理指标表型进行关联分析进而挖掘肠道共生菌。结果 雨蛙素诱导的急性胰腺炎可显著升高大鼠血清淀粉酶和脂肪酶活力(P<0.01),降低胰腺干湿比(P<0.01),造成胰腺组织结构弥漫性破坏;16S rRNA测序结果显示,两组间肠道菌群存在差异,其中急性胰腺炎组肠道菌群多样性显著降低,属水平上以埃希氏-志贺氏菌属、拟杆菌属和肠球菌属为主要优势属。结论 雨蛙素诱导的大鼠急性胰腺炎引起肠道菌群的多样性、丰富度和均匀度降低及物种组成发生显著改变。     

髓样细胞表达的激发受体-1在急性坏死性胰腺炎小鼠中的表达

目的 检测急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠外周血及胰腺组织中髓样细胞表达的激发受体-1(TREM-1)的表达,探讨其在ANP发生、发展中的作用.方法 50只雄性昆明小鼠按随机表法分为对照组,ANP 24、48、72、96 h组.以腹腔注射20%L-精氨酸4 mg/g体重、间隔1 h重复一次的方法制备ANP模型.对照组腹腔注射等容积生理盐水.取血检测淀粉酶、肌酐和谷丙转氨酶含量;取胰腺组织行病理学检查并评分;采用实时定量PCR法检测外周血白细胞TREM-1 mRNA的表达;免疫组化法检测胰腺组织TREM-1蛋白表达.结果 ANP 24 h组小鼠血清淀粉酶、肌酐、谷丙转氨酶水平为(9439±1273)U/L、(84.8±75.9)μmol/L、(158.1±122.1)U/L,均较对照组的(2412±297)U/L、(29.2±19.1)μmol/L、(41.4±7.9)U/L显著升高.ANP组胰腺组织的病理评分随着时间推移而增加.ANP 24、48、72、96 h组的TREM-1 mRNA相对表达量分别为15.55、30.36、15.77、28.32,ANP 48 h组的表达量显著高于其他时间点组(P值均<0.01),而胰腺组织TREM-1蛋白表达随胰腺炎的病程进展无显著变化.结论 TREM-1可能还通过促发其他炎症因子参与ANP的进展过程.     

外源性IL-10对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺及肝组织STAT3表达的影响

目的:探讨外源性人重组白介素10(IL-10)在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺及肝组织中对信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达的影响.方法:92只健康SD♂大鼠随机分为正常对照组(C组,n=24)、ANP组(A组,n=36)和IL-10后干预组(Ⅰ组,n=32).采用腹腔注射左旋精氨酸(L-arginine)...     

单核细胞趋化蛋白1在重症急性胰腺炎相关肺损伤中的作用

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在急性坏死性胰腺炎(ANP)早期并发急性肺损伤(ALI)发病机制中的作用.方法 按数字表法将40只SD大鼠随机分为对照组和ANP 3、6、12 h组,每组10只.采用15%左旋盐酸精氨酸2.0 mg/g体重腹腔注射方法制作大鼠ANP模型,观察胰腺及肺组织病理学改变,检测肺湿/干重比,RT-PCR检测肺组织MCP-1 mRNA的表达.结果 腹腔注射左旋盐酸精氨酸后大鼠胰腺发生出血、坏死,符合ANP病理改变.ANP组肺组织明显水肿,3、6、12 h的病理评分分别为3.75±0.58、5.50±0.63、5.86±0.54;肺湿/干重比为4.85±0.38、4.97±0.47、5.03±0.46;肺组织MCP-1 mRNA表达量为0.36±0.08、0.56±0.15、0.72±0.21.均较对照组的0.12±0.05、4.32±0.33、0.21±0.05显著升高(P＜0.05或＜0.01),且MCP-1 mRNA表达与肺湿/干重比及肺组织损害程度均呈正相关(r=0.75,r=0.89,P＜0.05).结论 ANP早期肺组织MCP-1 mRNA表达上调,并在ANP并发的ALI中发挥重要作用.     

Prophylactic but not therapeutic activity of a monoclonal antibody that neutralizes the binding of VEGF-B to VEGFR-1 in a murine collagen-induced arthritis model

OBJECTIVE: To assess the therapeutic potential of a mAb that neutralizes the binding of VEGF-B to VEGFR-1, to inhibit the pathogenesis of CIA in mice. METHODS: CIA was induced in C57BL6/J and DBA-1 mice by intradermal injection of chick collagen type II (CII) in adjuvant. A neutralizing VEGF-B mAb or an isotype control mAb was then administered by intraperitoneal injection twice weekly beginning either post CII booster injection but prior to or immediately following clinical disease diagnosis. RESULTS: Neutralizing VEGF-B mAb inhibited the development of CIA in C57BL6/J mice in a dose-dependent manner when administered following the CII booster injection, but prior to clinical disease diagnosis. This result was also confirmed in DBA-1 strain mice. In contrast, the neutralizing VEGF-B mAb had no measurable effect on disease severity or progression when treatment commenced from the day of clinical disease diagnosis. CONCLUSIONS: Treatment with an mAb that neutralizes the binding of VEGF-B to VEGFR-1 exhibits prophylactic but not therapeutic actions in a mouse model of RA. These data indicate that while VEGF-B/VEGFR-1 signalling is involved in the early development of arthritis it may not be required for maintenance or progression of established disease.     

氨基胍和泰能对急性坏死性胰腺炎肠道细菌易位的影响

目的 观察氨基胍和泰能对ANP大鼠肠道细菌易位的影响,探讨其防治胰腺感染的效果.方法 50只SD大鼠随机数字法分为对照组、ANP组、氨基胍组、泰能组和氨基胍+泰能组(联合组),各10只.采用胰腺实质均匀注射5%牛黄胆酸钠的方法制作ANP模型,氨基胍组于制模后30min腹腔注射氨基胍100 mg/kg体重;泰能组于制模后6 h腹腔注射泰能60 mg/kg体重;联合组注射2种药.制模后48 h处死大鼠,检测血清淀粉酶和D-乳酸、胰腺组织MPO水平,观察胰腺病理变化,采集胰腺、肝脏、血液、肠系膜淋巴结、腹水行细菌培养.结果 (1)氨基胍组和联合组血清淀粉酶分别为(1173.30±199.73)U/L、(1075.00±200.40)U/L,血清D-乳酸分别为(7.17±1.25)μg/ml、(6.98±1.06)μg/ml,胰腺MPO分别为(0.80±0.07)U/g湿片、(0.78±0.08)U/g湿片,细菌培养平均阳性率分别为20%、16%.较ANP组血清淀粉酶(2234.60±692.06)U/L、血清D-乳酸(12.41±1.78)μg/ml、胰腺MPO(1.59±0.20)U/g湿片、细菌培养平均阳性率60%均有显著改善(P＜0.05);(2)泰能组胰腺MPO为(0.80±0.06)U/g湿片、细菌培养平均阳性率为18%,也较ANP组显著改善(P＜0.05).但泰能组的血清淀粉酶和D-乳酸与ANP组比较无统计学差异;(3)ANP组胰腺实质有片状坏死、间质充血、大量白细胞浸润,而氨基胍组、泰能组、联合组胰腺组织无明显白细胞浸润.结论 氨基胍和泰能能减少ANP大鼠肠道细菌易位,减少SAP胰腺继发感染.     

Effects of Chai-Qin-Cheng-Qi Decoction on cefotaxime in rats with acute necrotizing pancreatitis

AIM： To investigate the effect of Chai-Qin-Cheng-Qi Decoction （CQCQD） on cefotaxime （CTX） concentration in pancreas of rats with acute necrotizing pancreatitis （ANP）. METHODS： Sixty healthy male Sprague-Dawley rats were divided randomly into an ANP group （ANP model ＋ CTX, n = 20）, treatment group （ANP model ＋ CTX ＋ CQCQD, n = 20） and control group （normal rats ＋ CTX, n = 20）. ANP models were induced by retrograde intraductal injection of 3.5% sodium taurocholate （1 mL/kg）, and the control group was injected intraductally with normal saline. All rats were injected introperitoneally with 0.42 g/kg CTX （at 12-h intervals for a continuous 72 h） at 6 h after intraductal injection. Meanwhile, the treatment group received CQCQD （20 mL/kg） intragastrically at 8-h intervals, and the ANP and control group were treated intragastrically with normal saline. At 15 min after the last CTX injection, blood and pancreas samples were collected for the determination of CTX concentration using validated high-performance liquid chromatography. Pathological changes and wet-to-dry-weight （W/D） ratio of pancreatic tissue were examined. RESULTS： Serum CTX concentrations in three groups were not significantly different. Pancreatic CTX concentration and penetration ratio were lower in ANP group vs control group （4.4 ± 0.6 μg/mL vs 18.6±1.7μg/mL, P = 0.000; 5% vs 19%, P = 0.000）, but significantly higher in treatment group vs ANP group （6.4 ± 1.7 μg/mL vs 4.4 ± 0.6 μg/mL, P = 0.020; 7% vs 5%, P = 0.048）. The histological scores and W/D ratio were significantly decreased in treatment group vs ANP and control group. CONCLUSION： CQCQD might have a promotive effect on CTX concentration in pancreatic tissues of rats with ANP.     

Monoclonal antibody 12D5 inhibits eosinophil infiltration in the brain of Angiostrongylus cantonensis-infected BALB/c mice

Each of BALB/c mice was infected with 50 Angiostrongylus cantonensis larvae. One group of mice received an intraperitoneal injection of 50 μg 12D5 monoclonal antibody (mAb) against a 98 kDa antigen of adult worms at 10 days post-infection (dpi), with a booster injection of 25 μg at 12 dpi. Five mice from each group were sacrificed at 14 dpi for pathological examination and RNA extraction. The infiltration of eosinophils and severity of eosinophilic meningitis were reduced in 12D5 mAb-treated mice compared with the infected mice without 12D5 treatment. The levels of eotaxin mRNA expression in spleen significantly increased and the expression of the Th2-type cytokine IL-5 significantly decreased. However, the expression of IL-4 was not changed. 12D5 mAb can observably enhance the survival rate of infected mice and reduce symptoms of angiostrongyliasis. A. cantonensis infection is a major cause of eosinophilic meningoencephalitis. The results of this study could be helpful for the development of treatment of human angiostrongylosis.     

一氧化氮在伴高脂血症急性出血坏死性胰腺炎大鼠胰腺及肾损害中的作用

目的:探讨一氧化氮(NO)含量变化对伴高脂血症急性出血坏死性胰腺炎(ANPl大鼠胰腺、肾损害的作用和对肾小球足细胞的影响.方法:♂SD大鼠30只,高脂饲料喂养4 wk建立大鼠高脂血症模型,将大鼠随机等分为3组;A组即高脂血症+ANP;B组即高脂血症+ANP+L-精氨酸(L-arg);C组即高脂血症+ANP+L-硝基精氨...     

Ligustrazine alleviates acute renal injury in a rat model of acute necrotizing pancreatitis

INTRODUCTIONAcute pancreatitis complicated by multiple organ dysfunctions is still a life-threatening disease[1,2], although the precise mechanism by which such local inflammation in the pancreas progresses to systemic illness is still unclear. Recently, …     

发酵支原体和梨支原体感染致死小鼠胸腺细胞的损伤及其Bax/Bcl-2表达

目的：探讨发酵支原体(Mf)和梨支原体(Mpi)感染致死小鼠胸腺细胞的损伤及其Bax/Bcl-2的表达。方法：清洁级ICR小鼠47只,随机分为免疫抑制组（n=35）和非免疫抑制组(n=12),隔日腹腔注射环磷酰胺（50mg/kg?d）五次制成免疫抑制模型。免疫抑制组分为Mf感染组、Mpi感染组和生理盐水（NS）对照组,分别腹腔注射0.3mL Mf和Mpi 标准菌株（6×108-9 /mL）及NS;非免疫抑制组取正常小鼠腹腔注射同等剂量的Mf。计算各组小鼠死亡率,取其血清进行支原体分离培养,电镜观察小鼠胸腺细胞超微结构,免疫组织化学法分析小鼠胸腺Bax/Bcl-2的表达。结果：Mf和Mpi感染免疫抑制组死亡率与NS组及非免疫抑制Mf组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;感染组相应支原体培养阳性;超微结构观察表明,Mf和Mpi感染组胸腺细胞凋亡显著;同时免疫组化结果分析显示Mf和Mpi感染组胸腺Bax/Bcl-2的表达较对照组有显著提高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：发酵支原体和梨支原体感染可诱导小鼠胸腺细胞的凋亡,并促进小鼠胸腺组织中Bax的表达。     

Preventive effect of tetramethylpyrazine on intestinal mucosal injury in rats with acute necrotizing pancreatitis

INTRODUCTION Acute pancreatitis (AP) is often complicated by intestinal injury. However, its pathogenesis remains unclear. As we know, AP involves a complex array of mediators initiating and amplifying the systemic inflammatory response and therefore lead…