p38丝裂原活化蛋白激酶信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用.方法选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的足月产妇54例为研究对象,其中36例为子痫前期患者,按病情分为子痫前期轻度组(20例)、子痫前期重度组(16例);同期足月择期剖宫产孕妇为对照组(18例).采用CD34标记血管内皮细胞,计数各组胎盘微血管密度(MVD);SP法检测磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)在胎盘组织中的定位;蛋白印迹法检测各组胎盘p38 MAPK及p-p38 MAPK的蛋白表达差异;双抗体夹心ELISA法检测各组血清中可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)及可溶性内皮糖蛋白(soluble endoglin,sEng)的水平.结果 (1)MVD:对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘MVD分别为103±3、81±5、63±4,各组间两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平:对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘组织p38 MAPK蛋白表达水平分别为0.84±0.05、0.90±0.14、0.86±0.18,各组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);p-p38 MAPK蛋白的表达水平分别为0.13±0.05、0.59±0.12和1.16±0.18,各组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)p-p38 MAPK蛋白的表达部位:p-p38 MAPK蛋白主要表达于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核、血管内皮细胞及少量间质细胞的胞核.(4)sFlt-1及sEng的水平:①对照组孕妇血清sFlt-1、sEng水平分别为(5.2±0.3)、(10.9-±0.4)μg/L;子痫前期轻度组分别为(12.5±1.2)、(20.4±5.3)μg/L;子痫前期重度组分别为(19.3±3.0)、(29.5±3.7)μg/L;各组sFlt-1、sEng水平两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);②p-p38 MAPK蛋白表达水平与血清sFlt-1、sEng水平的相关性:子痫前期重度组和子痫前期轻度组p-p38 MAPK蛋白表达水平与血清sFlt-1、sEng水平均呈明显正相关(r=0.68,P＜0.05;r=0.87,P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中p38 MAPK信号分子的显著活化,使血清中sFlt-l、sEng水平升高,损伤胎盘血管内皮细胞,导致胎盘MVD降低;p38 MAPK信号分子可能是子痫前期患者血管内皮细胞损伤的关键信号传导通路之一.

Abstract：

Objective To study expression and activation of p38 mitogen activated protein kinase (MAPK) in vascular endothelial cells dysfunction in preeclampsia. Methods From Sept. 2009 to Mar.2010, 54 pregnant women underwent deliveries in the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University were enrolled in this study, including 20 patients in mild preeclampsia group, 16 patients in severe preeclampsia group and 18 women with term cesarean section without perinatal complications as control group. Placental endothelial cells were labeled by CD34 to assay microvessel density (MVD) of each group. Immunohistochemical SP and western blot were used to detect localization and expression of p-p38 MAPK protein, respectively. The levels of sera soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1)and soluble endoglin(sEng) were measured by ELISA. Results ①The MVD of placenta were 103 ± 3 in control group, 81 ±5 in mild preeclampsia group and 63±4 in severe group, respectively, which showed statistical difference among each group (P＜0.05).②The expression of p38 MAPK protein were 0.84±0.05 in control group,0.90±0.14 in mild group and 0. 86 ±0.18 in severe group, which did not reach remarkable difference among each group (P＞0.05). The expression of p-p38 MAPK protein were 0.13±0.05 in control group,0.59±0.12 in mild group and 1.16±0.18 in severe group, which show statistical difference among each group(P＜0.05).(3) The localization of p-p38 was in trophoblast, endothelial cells and a few (5.2±0.3)and(10.9±0.4)μg/L in control group,(12.5±1.2) and (20.4±5.3)μg/L in mild group and (19.3±3.0) and (29. 5 ±3.7) μg/L in severe group. When drawing paired comparison in those p-p38 MAPK protein levels and the concentrations of serum sFlt-1, sEng in preeclampsia groups (r=0.68,P＜0.05;r=0.87,P＜0.05). Conclusions The remarkable activation of the p38 MAPK in the placenta of patients with preeclampsia induced the increased levels of sFlt-1 and sEng in maternal serum, which confer the injury of vascular endothelial cells that caused the significant decline of MVD in placentas. p38 MAPK signaling might be one of the key pathways in vascular endothelial cell dysfunction in preeclampsia.     

子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α基因的表达变化及其临床意义

目的 通过检测子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α(Gadd45α)基因的定位及表达变化,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的36例子痫前期孕妇为研究对象,按病情分为子痫前期轻度组(20例),子痫前期重度组(16例),另以同期择期行足月剖宫产术的18例健康孕妇为对照组.3组孕妇分娩后取胎盘组织标本,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的定位及分布,采用逆转录(RT)-PCR技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α mRNA表达水平,采用蛋白印迹(western blot)技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平.结果 (1)子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中均有Gadd45α蛋白表达,主要定位于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核中,血管内皮细胞及少量间质细胞胞核也可见阳性染色;对照组胎盘组织中阳性染色较弱,且仅见于胎盘滋养层细胞中,血管内皮细胞中未见阳性染色.(2)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45αmRNA表达水平分别为0.75±0.07及0.44±0.13,明显高于对照组的0.18±0.04,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);子痫前期重度组Gadd45α mRNA表达水平与子痫前期轻度组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).(3)子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45α蛋白表达水平分别为1.34±0.17及0.65±0.15,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组也明显高于对照组的0.22±0.11,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中Gadd45α mRNA和蛋白表达水平均明显高于健康孕妇,并且随子痫前期患者病情加重其表达上调;Gadd45α定位在与子痫前期发生密切相关的胎盘滋养层细胞中,Gadd45α基因可能参与了子痫前期的发生与发展.     

缺氧诱导因子1α及其靶基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及其靶基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(sFlt-1)基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法对20例重度子痫前期患者(子痫前期组)和15例正常妊娠妇女(对照组)的胎盘组织中的HIF-1α、VEGF、sFlt-1蛋白表达进行检测;同时应用RT- PCR技术对两组孕妇胎盘组织中HIF-1α、VEGF、sFlt-1 mRNA水平进行检测,并进行相关性分析。结果(1)子痫前期组HIF-1α蛋白表达(+++)者9例(45%,9/20),sFlt-1蛋白表达(+++)者11例(55%,11/20),对照组分别为2例(13%,2/15)和3例(20%,3/15),两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0．05);子痫前期组VEGF蛋白表达(+++)者3例(15%,3/20),明显低于对照组的7例(47%,7/15),两组比较,差异有统计学意义(P＜0．01)。(2)子痫前期组HIF-1αmRNA、sFlt-1 mRNA水平分别为0．604±0．013、0．898±0．041,对照组分别为0．208±0．007、0．559±0．244,两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0．05);子痫前期组VEGF mRNA表达水平虽高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0．05)。子痫前期组VEGF mRNA/sFlt-1 mRNA比值(0．439±0．009)低于对照组(0．824±0．011),两组比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。(3)子痫前期组HIF-1αmRNA的表达与sFlt-1 mRNA表达呈正相关(r=0．577,P＜0．05),与VEGF mRNA/sFlt-1 mRNA比值呈负相关(r= -0．376,P＜0．05)。结论HIF-1α在子痫前期患者胎盘组织中表达水平明显升高,主要是通过调节VEGF、sFlt-1基因的转录,而影响滋养细胞的浸润和胎盘血管重铸,参与子痫前期的发病。     

胎盘endoglin表达变化与重度子痫前期发病的关系

目的 探讨胎盘endoglin(Eng)表达的变化与重度子痫前期(severe preeclampsia,SPE)发病的关系. 方法 纳入2006年1月至2008年1月在北京大学第一医院分娩的SPE患者49例(SPE组),其中合并胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)9例,合并溶血、肝酶升高和血小板减少(hemolysis,elevated liver enzymes,and low platelets,HELLP)综合征6例,合并大量蛋白尿12例;正常妊娠40例(对照组).以免疫组织化学方法 定位和半定量检测2组孕妇胎盘中Eng的表达强度.统计学分析采用独立样本t检验. 结果 免疫组织化学染色显示Eng表达于胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞膜.SPE组胎盘Eng表达强度较对照组升高(0.1621±0.0029与0.1576±0.0038,t=-6.367,P＜0.05). SPE组中,合并FGR组和无FGR组(0.1611±0.0026与0.1623±0.0029,t=1.107,P＞0.05)、合并大量蛋白尿组和无大量蛋白尿组(0.1611±0.0032与0.1624±0.0027,t=1.350,P＞0.05)胎盘Eng表达强度差异无统计学意义;合并HELLP综合征组较无HELLP综合征组胎盘Eng表达强度降低(0.1595±0.0032与0.1625±0.0027,t=2.495,P=0.016). 结论 胎盘Eng表达强度升高可能与SPE的发病有一定关系.     

肿瘤坏死因子α调控MPO的分泌在子痫前期发病中的作用

子痫前期(PE)是引起全球孕产妇及新生儿发病率和死亡率升高的妊娠特发性疾病。目前其病因尚未完全明确,单一生物标志物也很难预测其变化。PE患者经积极治疗病情无好转或进行性恶化时,终止妊娠是其唯一有效的治疗措施。学者认为血管内皮细胞损伤是PE的主要发病机制。近年研究发现,PE患者血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的异常表达参与疾病的发生和发展。TNF-α与相关受体结合后,可活化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路导致下游靶蛋白髓过氧化物酶(MPO)水平上调。中性粒细胞过度活化后释放MPO,其表达水平增高是血管内皮细胞损伤的关键因素。综述TNF-α调控MPO的相关机制在PE发病中作用的研究进展。     

α7 nAChR和sFlt-1mRNA在重度子痫前期患者胎盘的表达

目的:检测α7烟碱乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotini cacetylcholine receptor,α7nAChR)和可溶性血管内皮生长因子受体-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)在重度子痫前期患者胎盘组织中mRNA的表达水平,探讨它们在子痫前期发生发展中的作用。方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测18例重度子痫前期患者和12例正常妊娠孕妇的胎盘。结果:(1)α7nAChR和sFlt-1mRNA在正常孕妇和重度子痫前期患者胎盘组织中均有表达。(2)重度子痫前期患者α7nAChR和sFlt-1mRNA的表达水平上调,且两者上升水平呈正相关。结论:胎盘组织中α7nAChR和sFlt-1mRNA的过度表达可能与子痫前期发病有关,参与了子痫前期的病理生理过程。     

可溶性VEGFR-1、PIGF、PP13对子痫前期的预测价值

子痫前期是严重威胁母婴健康的妊娠期疾病,病因复杂且具有多重性.目前临床上多是在患者出现临床症状后才开始进行一系列治疗,但此时母体及胎儿已受到不同程度的损害,往往母儿预后不佳.通过加强围产期监测,早于临床症状出现之前预测疾病的发生,筛查出高危患者,尽早干预,从而改善妊娠结局,具有重要的临床意义.综述可溶性血管内皮生长因子...     

胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1和凋亡相关基因的表达与子痫前期发病的关系

目的 探讨胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和凋亡相关基因easpase-3、Bax及bcl-2的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 选择2005年6月-2006年12月在中国医科大学附属盛京医院产科住院的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇40例为对照组.采用免疫组化、RT.PCR技术和蛋白印迹(western-blot)法检测两组孕妇不同孕周胎盘组织中LOX-1和caspase-3、Bax及bel-2的表达.结果 (1)子痫前期组20周+1～24周、24周+1～28周、28周+1-32周、32周+1～36周、36周+1～40周孕妇胎盘组织中LOX-1蛋白表达水平分别为20.1±1.8、25.6±1.3、32.8±1.6、34.3±1.5、39.9±1.2,对照组分别为11.2±0.6、18.5±1.6、26.1±1.8、28.3±1.6、32.3±1.6,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);子痫前期组孕妇胎盘组织中easpase-3蛋白表达水平分别为12.3±0.9、16.3 4-0.9、24.4±0.8、28.3±0.5、36.3±1.1,对照组分别为8.5±1.0、12.3±1.1、17.4±1.2、20.4±0.5、24.2±1.3,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组不同孕周孕妇胎盘组织中LOX-1、easpase-3及Bax mRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);bel-2 mRNA和蛋白的表达趋势与Bax表达结果相反.结论 LOX-1和caspase-3、Bax在子痫前期患者胎盘组织中表达上调,bcl-2表达下调,-与子痫前期发病有关.     

重度子痫前期患者胎盘组织中缺氧适应相关基因的表达及其临床意义

目的 探讨胎盘组织中缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶1(HPH1)和因子抑制缺氧诱导因子1(FIH-1)在重度子痫前期发病和疾病进展中的作用.方法 选择2006年7月至2007年7月在中国医科大学附属盛京医院妇产科住院选择剖宫产终止妊娠的重度子痫前期孕妇34例(重度子痫前期组)及正常晚期妊娠孕妇24例(对照组),采用RT-PCR和蛋白印迹法检测两组孕妇胎盘组织中的HPH1和FIH-1 mRNA及蛋白的表达,并与临床指标进行相关性分析.结果 (1)重度子痫前期组孕妇胎盘组织巾HPH1 mRNA及蛋白表达水平分别为0.40±0.04和59.5 ±3.4,显著低于对照组的0.84±0.12和71.6±1.7(P均<0.01);重度子痫前期组孕妇FIH-1 mRNA及蛋白表达水平分别为0.31±0.05和45.6±2.4,也显著低于对照组的0.43±0.04和54.9±2.1(P均<0.01).(2)重度子痫前期组孕妇胎盘组织中HPH1和FIH-1 mRNA及其蛋白表达水平与平均动脉压(MAP)均呈显著负相关关系,r均为-0.854(P均<0.01);与24 h尿蛋白定量均呈显著负相关关系,r均为-0.936(P均<0.01);与有无眼底动脉痉挛均呈显著负相关关系,r均为-0.854(P均<0.01).(3)两组58例孕妇胎盘组织中的HPH1 mRNA表达水平高于FIH-1 mRNA的表达,分别为0.58±0.27和0.39 ±0.10,两者呈正相关关系,,为0.686(P<0.01);HPH1蛋白表达水平高于FIH-1蛋白的表达水平,分别为64.5±6.7和49.4±5.2,两者也呈正相关关系,r为0.947(P<0.01).结论 HPHl和FIH-1的表达变化可能与蕈度子痫前期的发病及疾病进展相关.     

妊娠期高血压和子痫前期患者胎盘及子宫浅肌层中转化生长因子-β1、endoglin蛋白及mRNA表达水平

目的 研究妊娠期高血压和子痫前期患者胎盘组织和子宫浅肌层中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、endoglin(Eng)蛋白及mRNA表达水平及其相关性,探讨Eng与TGF-β1在妊娠期高血压和子痫前期发病中的作用. 方法 选取2009年4月至2010年4月在天津医科大学第二医院产科住院并分娩的孕妇共110例,其中妊娠期高血压组30例,轻度子痫前期组30例,重度子痫前期组30例,正常对照组20例.剖宫产时取胎盘及子宫浅肌层组织.采用Western印迹技术测定胎盘及子宫浅肌层中Eng、TGF-β1蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应技术检测各组孕妇胎盘及子宫浅肌层中Eng及TGF-β1 mRNA表达情况.多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用Student-Newman-Keuls检验;相关性用Pearson相关分析及直线回归分析.结果 在正常对照组、妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组,胎盘组织Eng蛋白表达水平分别为0.11±0.07、0.15±0.05、0.18±0.06和0.43±0.04,TGF-β1蛋白表达水平分别为0.11±0.02、0.26±0.05、0.27=0.03和0.88±0.09;子宫浅肌层中Eng蛋白表达水平分别为0.14±0.06、0.16±0.04、0.20±0.08和0.46±0.05,TGF-β1蛋白表达水平分别为0.15±0.03、0.29±0.06、0.31±0.04和0.91±0.08.在正常对照组、妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组,胎盘组织Eng mRNA表达水平分别为1.00、1.27±0.58、1.54±0.41和1.83±0.35,TGF-β1 mRNA表达水平分别为1.00、1.64±0.33、1.92±0.38和2.23±0.53;子宫浅肌层中Eng mRNA表达水平分别为1.00、1.32±0.46、1.59±0.37和1.93±0.52,TGF-β1 mRNA表达水平分别为1.00、1.71±0.45、1.91±0.51和2.37±0.46.随着病情的加重,2种因子蛋白和mRNA的表达均呈上升趋势,组间差异均有统计学意义(P均＜0.05).妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组孕妇胎盘中TGF-β1与Eng蛋白水平呈正相关(r值分别为0.57、0.61和0.60,P＜0.05);在子宫浅肌层中表达亦呈正相关(r值分别为0.59、0.62和0.61,P＜0.05). 结论 Eng及TGF-β1可能参与了妊娠期高血压和子痫前期的发生和发展.     

高迁移率族蛋白1及其受体晚期糖基化终末产物的表达与子痫前期发病的关系

目的 探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)及其受体晚期糖基化终末产物(RAGE)表达与子病前期发病的关系.方法 2006年3月至2007年3月中国医科大学附属盛京医院住院分娩的15例早发型子痫前期孕妇(早发型子痫前期组)、22例重度子痫前期孕妇(晚发型子痫前期组)、12例正常足月孕妇(正常对照组).采用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法检测3组孕妇胎盘组织中HMGB1和RAGE的蛋白定位及表达情况.结果 (1)HMGB1蛋白定位及分布:正常对照组孕妇胎盘组织中无或仅有极少量HMGB1弱阳性细胞,主要见于滋养细胞层、单核巨噬细胞、蜕膜细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞和绒毛间质细胞,HMGB1在胞质内呈弥漫性分布,并呈略高于背景的淡棕黄色;晚发型子痫前期组孕妇胎盘组织中HMGB1阳性细胞分布与正常对照组一致,但HMGB1阳性细胞数量明显增多,染色强度也明显增强;早发型子痫前期孕妇胎盘组织中HMGB1主要分布于细胞滋养细胞,细胞核内可见深棕色染色,核膜皱缩.(2)RAGE蛋白定位及分布:正常对照组孕妇胎盘组织中无或仅有极少量RAGE弱阳性细胞,RAGE主要见于合体滋养细胞、血管内皮细胞,细胞膜和(或)细胞质内呈略高于背景的淡棕黄色染色;晚发型子痫前期组孕妇RAGE阳性细胞分布与正常对照组一致,但RAGE阳性细胞数量明显增多,染色强度也明显增强;早发型子痫前期组孕妇RAGE主要见于滋养细胞层,细胞呈RAGE强阳性表达.(3)HMGB1蛋白阳性表达率:早发型子痫前期组为73%(11/15),晚发型子痫前期组为64%(14/22),两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);但两组均明显高于正常对照组的17%(2/12),差异有统计学意义(P<0.05).(4)RAGE蛋白阳性表达率:早发型子痫前期组为80%(12/15),晚发型子痫前期组为82%(18/22),两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);但两组均明显高于正常对照组的25%(3/12),差异有统计学意义(P<0.05).结论 子痫前期孕妇胎盘组织中的HMGB1和RAGE蛋白表达水平升高,可能是子痫前期发病的重要机制之一;HMGB1和RAGE在早发型和晚发型子痫前期孕妇胎盘组织中的表达部位不同,可能与不同临床类型的子痫前期发生有关.     

子痫前期滋养细胞sFlt-1和HIF-1α表达及细胞功能在低氧条件下的变化

目的探讨低氧对子痫前期滋养细胞中可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）和缺氧抑制因子-1α（HIF-1α）的表达及滋养细胞凋亡和侵袭能力的影响。方法取正常妊娠及子痫前期孕妇终止妊娠后的胎盘绒毛组织,分离培养滋养细胞。分为：对照组（正常孕妇）：21%O2浓度培养;子痫前期组：分别行21%O2浓度（21%O2组）和1%O2浓度（1%O2组）培养。采用细胞免疫荧光检测滋养细胞密度,实时定量-多聚酶链反应（real tima-PCR）和蛋白印记（Western Blot）法检测滋养细胞中sFlt-1和HIF-1αmRNA及蛋白的表达,TUNNEL法检测滋养细胞调亡,Transwell测定滋养细胞的侵袭能力。结果子痫前期21%O2组、1%O2组与对照组sFlt-1mRNA的表达分别为（2.87±1.94）ng/ml、（3.51±1.25）ng/ml和（1.93±0.77）ng/ml,HIF-1αmRNA的表达分别为（2.79±0.64）ng/ml、（1.77±0.23）ng/ml和（3.63±0.38）,三组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。21%O2组、1%O2组与对照组sFlt-1蛋白分别为（4.99±1.77）μg/ml、（7.02±1.23）μg/ml和（3.83±0.63）μg/ml,HIF-1α蛋白分别为（3.83±0.63）μg/ml、（3.06±0.25）μg/ml和（7.73±1.02）μg/ml,三组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。21%O2组、1%O2组与对照组72h滋养细胞凋亡分别为（15.81±3.93）个、（20.18±3.47）个和（6.64±1.37）个,侵袭数目分别为（10.05±1.92）个、（18.65±4.17）个和（2.22±0.43）个,三组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。结论子痫前期和正常妊娠孕妇滋养细胞均对低氧敏感,低氧对滋养细胞sFlt-1和HIF-1α的表达有影响,且低氧条件下促使滋养细胞凋亡及侵袭能力强化。     

子痫前期患者胎盘组织中转化生长因子β1、血管细胞黏附分子1及E选择素表达的研究

目的探讨子痫前期患者胎盘组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和E选择素(E-selectin)的表达变化及其意义。方法用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法,对20例正常孕妇(对照组)和40例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例、重度24例)的胎盘组织进行TGF-β1、VCAM-1和E-selectin定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析比较。结果(1)1FGF-β1在胎盘绒毛合体滋养细胞的表达,子痫前期组为70．7±0．5,对照组为70．3±0．6,两组比较,差异有统计学意义(P<0．05)。VCAM-1的表达,子痫前期组为82．5±0．5,对照组为82．8±0．3;E-selectin的表达,子痫前期组为53．5±0．5,对照组为53．8±0．4;两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0．05)。TGF-β1、VCAM-1、E-selectin在轻度子痫前期患者胎盘组织合体滋养细胞中的表达分别为70．6±0．6、82．4±0．6、53．4±0．5,在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达分别为70．8±0．4、82．6±0．5、53．6±0．5,轻度与重度子痫前期患者TGF-β1、VCAM-1、E- selectin表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0．05)。(2)E-selectin在胎盘绒毛毛细血管内皮细胞的表达,子痫前期组为63．0±0．5,对照组为62．6±0．4,两组比较,差异有统计学意义(P<0．05);轻度子痫前期患者为63．2±0．4、重度子痫前期为62．9±0．5,二者比较,差异无统计学意义(P> 0．05)。结论TGF-β1、VCAM-1和E-selectin在胎盘组织中的表达变化,在子痫前期发病中有重要作用。     

子痫前期患者胎盘组织中microRNA-205-5p的表达及其对血管内皮生长因子A的影响

目的 探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中microRNA-205-5p(miR-205-5p)的表达情况及其对血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的影响.方法 选取2017年12月至2019年6月于河北省人民医院产科住院行剖宫产分娩的PE患者52...     

巨噬细胞移动抑制因子与受体CD_(74)在胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与受体CD_(74)在胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 选取2008年3-11月在青岛大学医学院附属医院产科住院分娩的子痫前期孕产妇69例,其中轻度子痫前期孕产妇33例(轻度子痫前期组),重度子痫前期孕产妇36例(重度子痫前期组).另选取同期正常妊娠晚期孕产妇43例为对照组.采用免疫比浊法榆测3组孕产妇血中C反应蛋白水平;采用免疫组化链酶菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法榆测3组孕产妇胎枯组织中的MIF和CD_(74)的表达;采用逆转录(RT)PCR技术检测3组孕产妇胎盘组织中MIFmRNA和CD_(74)mRNA的表达.并对轻度及重度子痫前期组孕产妇血中C反应蛋白水平与胎盘组织中MIF mRNA及CD_(74) mRNA表达的相关性进行分析.结果 (1)3组孕产妇胎盘组织中均有MIF和CD_(74)的表达,并呈棕黄色染色,轻度及莆度子痫前期组孕产妇胎盘组织中MIF及CD_(74)的表达明显增强.(2)轻度子痫前期组孕产妇胎盘组织中MIF mRNA及CD_(74)mRNA表达水平分别为0.70±0.13及0.96±0.16;重度子痫前期组分别为0.88±0.12及1.08±0.15,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).对照组孕产妇胎盘组织中MIF mRNA及CD_(74)mRNA表达水平分别为0.67±0.11及0.83±0.14,明显低于轻度及重度子痫前期组,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(3)轻度及重度子痫前期组孕产妇血中C反应蛋白水平分别为(15.3±7.0)及(21.6±9.1)mg/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);对照组为(4.8±1.8)mg/L,明显低于轻度及重度子痫前期组,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).(4)轻度及重度子痫前期组孕产妇血中C反应蛋白水平与胎盘组织中MIF mRNA表达呈正相关关系(r=0.67,P<0.01);与胎盘组织中CD_(74)mRNA表达呈正相关火系(r=0.83,P<0.01).胎盘组织中MIF mRNA表达与CD_(74)mRNA表达呈正相关关系(r=0.93,P<0.01).结论 子痫前期患者胎盘组织中的MIF及其受体CD_(74)的过度表达,可上调血中炎性标志物C反应蛋白的水平,引起血管内皮损伤,从而参与子痫前期的发病.     

子痫前期患者滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶9表达的临床意义

目的探讨胎盘滋养细胞中KiSS-1基因及基质金属蛋白酶(MMP)9在子痫前期发病中的作用及其与新生儿预后的相关性。方法采用RT-PCR和western blot(蛋白印迹法)检测40例子痫前期患者(其中轻度15例、重度25例,子痫前期组)和20例正常足月正常妊娠妇女(正常妊娠组)胎盘滋养细胞中KiSS-1mRNA和MMP-9mRNA及其蛋白的表达,并与其临床症状及其新生儿围产结局进行相关性分析。结果(1)子痫前期组滋养细胞中KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平分别为1.73±0.24和(78.4±8.0)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为1.50±0.15和(72.4±6.9)μg/100μg总蛋白,重度患者为1.87±0.20和(83.5±3.6)μg/100μg总蛋白;均显著高于正常妊娠组的1.24±0.25和(63.4±2.7)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(2)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平分别为0.09±0.06和(9.6±4.3)μg/100μg总蛋白,其中轻度患者为0.11±0.08和(10.0±3.2)μg/100μg总蛋白,重度患者为0.07±0.05和(7.8±2.0)μg/100μg总蛋白;均显著低于正常妊娠组的0.17±0.10和(17.9±7.3)μg/100μg总蛋白(P<0.01)。(3)子痫前期组KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与中心动脉压(MAP)和24h尿蛋白定量呈正相关,r分别为0.610(P=0.023)、0.713(P=0.011)和0.397(P=0.003)、0.638(P=0.002);与有、无眼底动脉痉挛呈显著正相关,r分别为0.499(P=0.000)和0.511(P=0.000)。子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平则与MAP、24h尿蛋白定量及有、无眼底动脉痉挛呈显著负相关,r分别为0.561(P=0.042)、0.571(P=0.022)、0.275(P=0.039)、0.375(P=0.048)、0.346(P=0.001)、0.543(P=0.000)。(4)子痫前期组MMP-9mRNA及其蛋白表达水平与新生儿体重呈显著正相关,r分别为0.651(P=0.000)和0.544(P=0.004);KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平与其呈显著负相关,r分别为0.759(P=0.000)和0.865(P=0.000)。(5)随着新生儿窒息程度加重,MMP-9mRNA及其蛋白表达水平呈降低趋势,KiSS-1mRNA及其蛋白表达水平呈升高趋势(P均<0.05)。结论MMP-9和KiSS-1表达失衡在子痫前期发病中起重要作用,且与新生儿预后密切相关。     

外周血sFlt-1、PlGF、25-羟基维生素D、D-二聚体、vWF及P-选择素等指标预测子痫前期的价值

目的:分析可溶性血管内皮生长因子受体-1(s Flt-1)、胎盘生长因子(Pl GF)、25-羟基维生素D(25-OHVD)、D-二聚体、血管性假血友病因子(v WF)及P-选择素在子痫前期患者妊娠早期外周血中的表达,探讨其在子痫前期发生中的预测价值。方法:选择2013年1—12月在南方医科大学附属深圳妇幼保健院产科门诊进行产前检查的1 081例妊娠10~13~(+6)周的单胎孕妇作为研究对象,选取发生子痫前期者为病例组(50例),同期无妊娠并发症以及合并症的正常妊娠妇女352例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中s Flt-1、Pl GF、25-OH-VD、D-二聚体、v WF及P-选择素的浓度。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析这6个生化指标预测PE发生的敏感度和特异度。结果:1病例组外周血s Flt-1、D-二聚体、v WF及P-选择素平均值均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);外周血Pl GF及25-OH-VD平均值病例组均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);2ROC曲线结果显示,s Flt-1、Pl GF、25-OH-VD、D-二聚体、v WF及P-选择素的中位数倍数(Mo M)之和预测子痫前期,具有较高的敏感度(78%)和特异度(100%)。结论:妊娠早期联合检测外周血s Flt-1、Pl GF、25-OH-VD、D-二聚体、v WF及P-选择素多项生物学指标联合能提高子痫前期的预测价值。     

子痫前期患者血浆对人脐静脉内皮细胞生长活性及Edg4表达的影响

目的:探讨子痫前期患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生长活性的影响以及与溶血磷脂酸受体蛋白内皮分化基因-4(Edg4)的关系。方法:体外培养HU-VECs,取对数生长的细胞,分组实验:对照组,正常晚孕组,轻度子痫前期组,重度子痫前期组。用MTT比色法和流式细胞仪检测各组细胞增殖及凋亡情况,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞Edg4蛋白及mRNA表达水平。结果:(1)子痫前期组HUVECs增殖减少,细胞凋亡增加;各组间细胞增殖率及细胞凋亡率差异显著(P<0.05);(2)Edg4蛋白主要表达于HUVECs的细胞浆和细胞膜,子痫前期病情越重,其血浆诱导的HUVECs Edg4蛋白表达越强;(3)子痫前期组Edg4 mRNA表达明显升高,与对照组和正常晚孕组相比显著差异(P<0.05);重度子痫前期组Edg4 mRNA表达较轻度组显著升高(P<0.05)。结论:子痫前期患者血浆可诱导HUVECs Edg4蛋白表达增强,并抑制HUVECs细胞增殖,促进细胞凋亡,提示子痫前期患者溶血磷脂酸升高可能与血管内皮细胞功能异常有关。