姜黄素对SiO_2诱导小鼠矽肺模型TNF-α、TGF-β1表达的影响

目的:研究姜黄素对SiO2所致小鼠矽肺模型血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法:将实验小鼠随机分为5组, 即假手术组、模型组、姜黄素干预组(高、中、低剂量).于姜黄素干预第14天、 42天后分别每组各处死6、 9只, 采用ELISA法测定肺组织和血清中TNF-α、 TGF-β1的含量.结果:模型组的肺组织炎症反应、纤维化程度较明显;与假手术组比较, 肺组织匀浆、血清中TGF-β1、 TNF-α含量均明显升高( P < 0.01).给予姜黄素干预后, 可以不同程度地降低肺组织匀浆及血清中TGF-β1、 TNF-α的含量( P <0.05), 同时纤维化程度减轻.结论:姜黄素能降低SiO2致小鼠矽肺模型肺组织和血清中TNF-α、 TGF-β1水平, 可能通过下调上述细胞因子水平而发挥抗肺纤维化作用.     

大豆皂甙对糖尿病大鼠血清及心肌组织IL-6和TNF-α表达的影响

目的:监测大豆皂甙对糖尿病大鼠血清及心肌组织IL-6和TNF-α表达的影响,探讨大豆皂甙对糖尿病大鼠心肌组织的保护机制.方法:以Wistar雄性大鼠为研究对象,将实验动物分为三组即对照组、糖尿病模型组(DM)和大豆皂甙给药组(SS),三组动物分别每日给予柠檬酸缓冲液、生理盐水、大豆皂甙(SS,10 mg/Kg)灌胃3个月,采用ELISA酶联免疫法检测血清及心肌组织IL-6和TNF-α的蛋白含量;采用流式细胞免疫学法检测心肌组织IL-6和TNF-α的百分率;采用HE染色检测心肌组织的病理改变;采用免疫组织化学法检测心肌组织IL-6和TNF-α的阳性表达强度.结果:与对照组相比较,ELISA和流式细胞免疫学检测均显示,糖尿病模型组血清及心肌组织IL-6和TNF-α的水平显著升高有统计学意义(P＜0.01);大豆皂甙给药组血清及心肌组织IL-6和TNF-α的水平略升高但无统计学意义(P＞0.01);免疫组化染色糖尿病模型组心肌组织IL-6和TNF-α的阳性强度明显高于大豆皂甙给药组和对照组有显著差异(P＜0.01).HE染色显示糖尿病模型组大鼠心肌排列紊乱、心肌间有大量炎细胞浸润.结论:大豆皂甙可减轻糖尿病大鼠心肌组织中炎症细胞因子IL-6和TNF-α的表达,从而起到保护心肌的作用.     

PI3K对心梗大鼠TNF-α表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂LY-294002对心梗大鼠心肌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法 45只SD大鼠,随机分为假手术组、心肌梗死组和PI3K抑制剂组。分别用Western blot和RT-PCR方法检测各组大鼠梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白和TNF-α mRNA表达变化。结果 心肌梗死组心肌梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白、TNF-α mRNA表达水平显著高于假手术组(p<0.05),PI3K抑制剂组心肌梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白、TNF-α mRNA表达水平则明显低于心肌梗死组(p<0.05)。结论 PI3K能够上调心肌梗死大鼠TNF-α的表达。     

雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织TNF-α与MCP-1表达的影响

目的观察雷公藤甲素对糖尿病肾病大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法选取50只雄性SD大鼠,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=20)及雷公藤甲素组(n=20)。模型组与雷公藤甲素组大鼠给予高糖高脂饮食,并以链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病肾病大鼠模型。8周后处死大鼠,检测相应生化指标并计算肾脏指数,免疫组织化学方法和Western blot方法检测TNF-α与MCP-1的蛋白表达。结果模型组大鼠肾脏指数、血糖、血肌酐和24 h尿蛋白较对照组显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠的各项指数显著降低,P0.05。与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织TNF-α与MCP-1的蛋白表达显著升高,P0.05;与模型组相比,雷公藤甲素组大鼠肾脏组织TNF-α与MCP-1的蛋白表达显著降低,P0.05。结论雷公藤甲素能降低糖尿病肾病大鼠肾组织TNF-α与MCP-1的水平,具有一定的肾保护作用。     

脂肪源性干细胞移植对糖尿病周围神经病大鼠坐骨神经TNF-α和MBP表达的影响

目的研究脂肪源性干细胞(ADSC)移植对糖尿病周围神经病(DPN)大鼠坐骨神经中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组和ADSC组。链脲佐菌素腹腔注射制备实验DPN大鼠模型,ADSC组尾静脉注射ADSC细胞悬液,造模后14 d检测各组血糖及坐骨神经传导速度,实时荧光定量PCR检测坐骨神经TNF-α和MBP mRNA表达。结果与正常组比较,模型组和ADSC组血糖显著增高,神经传导速度显著降低,坐骨神经TNF-α和MBP mRNA表达显著上调。与模型组比较,ADSC组神经传导速度显著增高,坐骨神经TNF-α和MBP mRNA表达显著下降。结论脂肪源性干细胞下调糖尿病周围神经病坐骨神经TNF-α和MBP mRNA表达。     

大鼠肾脏机械损伤早期TNF-α及其受体的表达

探讨外源性ADM对肾脏机械性损伤早期TNF-α及受体表达的影响.选健康成年普通级Wistar大鼠104只.随机分为四组:对照组8只、创伤组32只、创伤前注射ADM组32只、创伤后注射ADM组32只,后三组的动物分别于创伤后1、6、12和24 h各处死8只.采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型.ADM分别于创伤前或创伤后10 min采用腹腔注射法给药.实验动物采用快速心脏采血法处死.取下肾脏标本,10%甲醛固定.观察TNF-α、TNFR在组织中的表达规律.结果表明:单纯创伤组于创伤早期TNF-α表达高于正常对照组,外源性ADM早期(1 h和6 h点)可抑制,TNF-α(P<0.05).单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNFR表达低于正常对照组,外源性ADM(创伤前给药)早期(1 h和6 h点)可上调节TNFR(P<0.05).说明TNF-α在创伤早期即参与了肾组织炎症的急性期反应并加重损伤.TNFR对TNF-α具有动态调节作用.ADM能降低TNF-α的分泌.ADM在早期肾损伤过程中可以上调TNFR,与其相互协调,共同发挥对损伤器官的保护作用.     

生物材料对血管内皮细胞IL-8和TNF-α表达的影响

目的是研究不同生物材料对血管内皮细胞中细胞因子表达水平的影响，探讨与血栓形成有关的细胞因子mRNA表达变化与生物材料血液相容性之间的关联性。实验选择8％有机锡的聚氯乙烯为阳性对照，细胞培养用的聚苯乙烯为阴性对照，聚四氟乙烯、膨体聚四氟乙烯以及两种医用聚氨酯（PU-50和PU-60）作为实验材料，采用人脐静脉内皮细胞株ECV-304，通过细胞与不同材料的接触，运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法，测定内皮细胞中与凝血功能密切相关的两种重要的细胞因子：白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达水平。结果显示：与阴性材料相接触的内皮细胞其IL-8和TNF-α的表达均呈阴性，与阳性材料接触的细胞因子表达均呈强阳性，两种聚氨酯材料尽管在细胞生长、附着和形态变化等方面经肉眼观察未见明显差异，但是两者在细胞因子的表达上却出现显著的不同，其中PU-60组表达水平明显高于PU-50组；聚四氟乙烯和膨体聚四氟乙烯材料表现出程度不等的表达增强，前者比后者更明显。将IL-8和TNF-α在上述6种材料中的表达情况进行秩相关分析，得到相关系数为r=0.88571（P〈0.05）。由此提示：血管内皮细胞对不同生物材料刺激所产生的反应在细胞水平和分子水平上可出现不完全一致的现象，后者显然较前者更为灵敏，通过检测血管内皮细胞中IL-8和TNF-α的mRNA表达改变，在一定程度上可推测生物材料血液相容性的优劣。     

低分子肝素对肾病综合征大鼠TNF-α的影响

目的:探讨低分子肝素(LMWH)对肾病综合征(NS)大鼠肿瘤坏死因子- α(TNF-α)的影响及其对肾脏保护作用的可能机理.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、肾病综合征模型组、肾病综合征模型LMWH治疗组,分别于2、3、4周留取24h尿,测定尿蛋白,腹主动脉取血测定血清白蛋白,并离心沉淀备测TNF-α.结果:NS大鼠血清中TNF-α明显升高,且与24h尿蛋白呈显著正相关(P＜0.01).用LMWH治疗后血TNF-α浓度减低,24h尿蛋白减少,血清白蛋白升高.结论:LMWH可降低NS大鼠血TNF-α浓度,可能是其肾脏保护作用的机理之一.     

白杨素对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织TNF-α表达的影响

目的观察白杨素对脓毒症相关急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 72只Wistar大鼠随机分为正常对照组、脂多糖(LPS)组、白杨素低剂量组(C-L,10mg/kg)和白杨素高剂量组(C-H,30mg/kg),每组18只大鼠。各组大鼠进行右肺上叶切除,行病理组织学检查;中叶切除,进行肺组织湿/干重(W/D)的重量比。采用Western blot方法和Real-time-PCR方法分别检测肺组织TNF-α的蛋白和m RNA表达水平。结果 LPS诱导ALI组的W/D比值比正常对照组显著升高(<0.05),应用白杨素治疗后,W/D比值显著降低(<0.05)。ALI组大鼠光镜下可见肺泡壁增厚,肺水肿及肺泡塌陷,严重出血且有明显的炎性细胞浸润,经白杨素治疗后,炎性减轻。Western blot和Real-time-PCR检测结果显示,ALI组大鼠肺组织TNF-α蛋白和m RNA表达水平显著高于对照组(<0.05),而C-H和C-L组比ALI组明显减少(<0.05)。结论白杨素对ALI大鼠肺脏的保护作用可能与抑制炎症因子TNF-α的表达相关。     

LPS对大鼠雪旺氏细胞TNF-α合成和释放的影响

目的：探讨内毒素脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）的诱导作用对大鼠雪旺氏细胞肿瘤坏死因子α（tumor nec-rosis factor-α,TNF-α）的表达。方法：不同浓度,不同时间用LPS刺激雪旺氏细胞,用酶联免疫吸附实验（ELISA）分别检测细胞胞液和上清中分泌的TNF-α的表达量,同时用间接免疫荧光细胞化学染色检测TNF-α的细胞定位。结果：用LPS10μg/ml刺激后2小时能显著促进雪旺氏细胞浆内TNF-α的表达,同时也检测到培养液上清中有TNF-α的释放。结论：细菌的致病因子LPS的诱导确能促进雪旺氏细胞高效表达和分泌TNF-α,从而为雪旺氏细胞作为免疫活性细胞在周围神经系统中发挥免疫调节作用提供初步依据。     

姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,TNF-α和NMDA(N-甲基D-天冬氨酸)对大鼠海马脑片LTP产生明显的抑制作用(P0.05);而姜黄素可以部分拮抗TNF-α和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与对照组相比无显著差异(P0.05);TNF-α、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递没有显著影响。结论:姜黄素对TNF-α损伤的大鼠海马神经元有功能性保护作用,其机制可能是姜黄素部分拮抗TNF-α诱导的神经元细胞膜上的NMDA受体过度激活,维持神经元的长时程增强。     

卡托普利与洛伐他汀联用对阿霉素肾病大鼠血清TNF-α的影响

目的:探讨卡托普利与洛伐他汀联用对阿霉素肾病大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及保护肾脏作用的可能机理.方法:雄性SD大鼠150只,适应性喂养2周后,随机抽取18只为对照组(A组);另外132只制作阿霉素肾病模型,造模2周末,4只造模失败,8只死亡,120只造模成功的大鼠随机分为4组:B组为模型对照组(n=30),C为卡托普利治疗组(n=30),D组为洛伐他汀治疗组(n=30),E组为卡托普利和洛伐他汀联合治疗组(n=30).分别于2、4、6周末,遵循随机化原则,按n=6,分层抽取各组样本,收集24h尿液及血液标本待测.结果:和模型组比较,卡托普利组、洛伐他汀组及联合治疗组血清TNF-α及胆固醇、三酰甘油浓度均降低,蛋白尿减少,血清白蛋白浓度升高;两药联用疗效更为明显.结论:卡托普利与洛伐他汀联用可进一步降低血清TNF-α浓度,对阿霉素肾病大鼠具有添加的肾脏保护作用.     

地塞米松对宫内感染致胎鼠脑TNF-α表达及脑损伤的影响

目的:早产儿脑损伤有很高的发病率且愈后很差,目前认为宫内感染、炎症反应是导致早产儿脑损伤的重要因素。本研究通过给予孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)制作宫内感染的动物模型,探讨地塞米松(Dex)对早产儿脑损伤是否具有保护作用。方法:将孕18d孕鼠随机分为盐水对照组、LPS组和Dex干预组,分别腹腔注射药物。采用免疫组化法及RT-PCR法观察腹腔注药4h后胎鼠脑肿瘤坏死因子(TNF)表达的变化;采用原位末端标记法检测注药48h后LPS组、对照组及干预组胎脑细胞凋亡的变化。结果:Dex干预组胎脑TNF-α蛋白水平及mRNA表达较LPS组明显减弱(P0.05),且与Dex的剂量呈负相关。Dex干预组凋亡细胞与LPS组相比较明显减少(P0.01)。结论:宫内注射LPS可导致胎鼠脑损伤,地塞米松可能通过抑制胎脑TNF-α的表达,降低脑细胞凋亡,对宫内感染致脑损伤具有保护作用。     

TNF-α在强直性脊柱炎患者血清中的表达

肿瘤坏死因子一仅（TNF-α）是一种具有杀伤肿瘤细胞功能的促炎细胞因子,主要由活化的单核巨噬细胞产生,具有多种生物学功能,在炎症反应、免疫调节中起重要作用。在免疫病理发病机制的研究中发现,强直性脊柱炎（AS）的发病与促炎细胞因子表达的上调有关,其中较为重要并为多数学者所公认的细胞因子是TNF-α。     

姜黄素对放线菌素D/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制研究

目的:观察中药单体姜黄素对ActD/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法确定实验药物的最佳浓度;Hoechst33258荧光染色法观察PC12细胞的凋亡;JC-1荧光分子探针检测线粒体膜电位;Real Time PCR检测凋亡基因Bcl-2/Bax的表达。结果:ActD/TNF-α协同作用可导致PC12细胞的活力降低(P<0.05);出现核固缩、核碎裂现象的细胞增多,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞线粒体膜电位下降;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达降低(P<0.05)。经姜黄素(5μmol/L)处理后,PC12细胞的活力增强(P<0.05);细胞核固缩、核碎裂现象减少,细胞凋亡率下降(P<0.05);细胞线粒体膜电位上升;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达增强(P<0.05)。结论:姜黄素可拮抗ActD/TNF-α引起的PC12细胞凋亡,可能与升高线粒体膜电位,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

姜黄素对放线菌素D/TNF-α诱导的PC12细胞和大鼠海马神经元损伤的影响

目的: 探讨姜黄素对放线菌素D(ActD)/TNF-α诱导的PC12细胞和大鼠海马神经元凋亡的影响及其作用机制。方法: 将PC12细胞分为以下6组:对照组、TNF-α组、ActD组、姜黄素组、ActD/TNF-α组和姜黄素+ActD/TNF-α组。各组细胞培养24 h后进行下列处理:倒置荧光显微镜普通光观察各组细胞的形态变化;Annexin V/PI染色流式细胞术检测各组PC12细胞凋亡率; Fluo-3 AM染色流式细胞术测定细胞内Ca²⁺浓度。制备离体大鼠海马脑片,分组处理同PC12细胞,细胞外微电极记录技术观察各组海马脑片CA1区长时程增强(long-term potentiation,LTP)的变化情况。结果: 10 μg/L ActD和50 μg/L TNF-α协同处理可导致PC12细胞明显损伤,而5 μmol/L姜黄素则可以减轻这种损伤作用(P<0.05);ActD/TNF-α可诱导PC12细胞内Ca²⁺浓度升高,姜黄素可以通过降低胞内Ca²⁺浓度而减少ActD/TNF-α引起的细胞凋亡(P<0.05)。此外,LTP实验也证实ActD/TNF-α可以显著抑制大鼠海马脑片LTP的诱发,而姜黄素可以拮抗这种抑制作用,改善神经元突触可塑性(P<0.05)。结论: 姜黄素可以改善ActD/TNF-α引起的神经元损伤,其机制可能是通过降低细胞内Ca²⁺浓度,维持胞内钙稳态而发挥作用。     

肥胖2型糖尿病患者TNF-αG-308A基因多态性与肾病相关性研究

为探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)G-308A基因多态性与肥胖2型糖尿病患者肾病的关系.对香港新界地区388例2型糖尿病合并肾病患者及323例2型糖尿病无肾病患者,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测TNF-αG-308A的基因多态性,以病例-对照方法研究其与肥胖2型糖尿病患者发生肾病的相关性.结果表明:(1)在肥胖与非肥胖者以及合并糖尿病肾病和无肾病患者之间,TNF-α G-308A多态性的基因型和等位基因频率无显著性差异;(2)GG和GA/AA基因型携带者之间,体重指数和尿白蛋白/肌苷比(ACR)水平无显著性差异;(3)在GG基因型携带者中,肥胖者的ACR和血肌苷水平显著高于非肥胖者(P＜0.005);而在GA/AA基因型携带者中,肥胖与非肥胖者间无显著性差异(P＞0.05);(4)多元逻辑回归分析显示,肥胖的GG基因型携带者患糖尿病肾病的危险性比非肥胖的GA/AA基因型携带者增加2.4倍(95%CI:1.3～4.5,P＝0.007).因此,在2型糖尿病患者中,肥胖的GG基因型携带者糖尿病肾病的患病风险增大.     

抗TNF-α单克隆抗体对大鼠肝肺综合征的治疗作用

目的:探讨抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体(TNF-αmAb)对肝肺综合征(HPS)大鼠的治疗作用。方法:采用胆总管结扎(CBDL)建立大鼠HPS模型,将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组。模型组:分别于结扎后1、2、3、4及5周麻醉动物(每个时间点6只大鼠);干预组:于结扎后第2周,开始腹腔注射抗TNF-αmAb(0.1mg/kg.2d),干预后1、2、3及4周麻醉动物(每个时间点6只大鼠);假手术组(6只大鼠)与5周模型组动物同批麻醉,留取各组动物的肝组织,分别行HE和Masson染色后,观察肝组织病理变化。抽取动脉血进行血气分析,计算肺泡、动脉氧分压差的变化。抽取各组动物的静脉血并分离血清,检测肝功能、内毒素、TNF-α、NO的水平。结果:干预组肝组织的炎症和纤维化明显减轻,动脉血气分析显示干预组动脉-肺泡氧分压差明显减少(P0.05),肝功能、内毒素、TNF-α及NO的水平较模型组明显好转(P0.05)。结论:抗TNF-αmAb对HPS大鼠具有治疗作用。     

严重烫伤后大鼠外周血中性粒细胞和淋巴细胞TNF-α的表达

目的 :研究大鼠烫伤后外周血中性粒细胞和淋巴细胞的TNF αmRNA表达的动态变化 ,以了解严重烫伤对外周血中性粒细胞和淋巴细胞表达TNF α的影响。方法 :复制 30 %体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型 ;分离外周血中性粒细胞和淋巴细胞 ;提取总RNA ,采用RT PCR分析TNF αmRNA的表达。结果 :PMN中TNF αmRNA的表达在伤后的 6～ 2 4h内较伤前明显上调 ,而淋巴细胞在伤前未发现TNF αmRNA的明显表达 ,但伤后 3～ 4 8小时表达急剧上升 ;两者均于伤后 1 2h达高峰 ,以后缓慢下降 ,至 4 8h仍维持较高水平。结论 :大鼠烫伤早期外周血中性粒细胞…