耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染爆发流行的实验室调查

目的采用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mecA基因相关高变区(HVR)长度多态性分型了解MRSA的医院感染爆发流行情况。方法选取临床分离的38株MRSA菌株,采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增MRSA mecA基因HVR,据扩增片段大小差异进行基因分型。结果根据PCR产物片段大小,38株MRSA被分为A、B、C、D 4个基因型,其中C型23株(60.53%)、A型7株(18.42%)、B型3株(7.89%)、D型2株(5.26%)、未分型3株(7.89%)。C型在临床各科室均有分布,但主要集中于老干部科。MRSA呈严重且多重耐药,故首选抗菌药物为万古霉素、替加环素、奎奴普汀/达福普汀和替考拉宁。结论医院内存在着MRSA菌株的克隆传播,应加强检测,控制医院感染爆发流行。     

儿童烧伤患者感染MRSA的耐药性及分子流行病学研究

目的：调查儿童烧伤患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的耐药性及分子流行病学情况,为控制感染提供科学依据。方法通过PCR扩增mecA基因鉴定 MRSA菌株,K-B纸片法检测菌株耐药性,随机扩增多态性DNA（RAPD）对其进行同源性分析。结果从住院烧伤儿童临床标本分离得到的52株金黄色葡萄球菌中 MRSA占44．2％（23/52）,且对多种抗菌药物均耐药。23株MRSA经RAPD分析可分为4型,以Ⅱ型为主。结论儿童烧伤患者分离MRSA菌株具有多重耐药性,应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物进行治疗;RAPD技术能为控制感染提供分子流行病学依据。     

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的分析医院不同科室来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株基因分型同源性,为控制MRSA医院感染流行提供科学依据。方法使用细菌基因组重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)以及高级微生物基因分型系统(DiversiLab)细菌同源性分析技术对23株医院感染的MRSA进行基因分型。结果 23株MRSA分为4个基因型,A型、D型主要分布于急诊观察室,B型、C型主要分布于中医外科。结论中医外科存在以B型、C型基因型为流行株的MRSA医院感染爆发;REP-PCR技术和DiversiLab自动化细菌同源性分型技术可成为医院感染病原研究的有效手段。     

邯郸市乙型肝炎基因分型及其临床意义研究

目的研究不同类型乙型肝炎病毒（HBV）感染者中HBV基因型分布情况及其临床意义。方法应用基因型特异性引物聚合酶链反应法（PCR）,对180份HBV感染者血清进行基因型分型。结果180份标本中,162份（90％）可检出基因型,18份（10％）未检出基因型。162份HBV基因犁分布为：B基因型1例（0．6％）,C基因型159例（98．1％）,B＋C混合基因型2例（1．2％）,未检出A、D、E、F基因型。结论邯郸地区HBV感染者中,基因划分布较单一,C基因型占绝对优势,同时存在少量B基因型及B＋C混合基因犁,C基因型可能与较严重的肝脏病变有关。     

下呼吸道标本MRSA耐药性及分子流行病学研究

目的了解下呼吸道标本中MRSA的耐药性及分子流行病学特点。方法采用Kirby-Bauer纸片扩散法，对我院2005年12月至2006年12月下呼吸道标本分离的107株MRSA药敏结果进行分析；采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对其中32株MRSA进行同源性分析。结果107株MRSA对14种抗菌药物的药敏结果显示对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感；对奎奴普丁-达福普汀和利福平显示较好的敏感性，敏感率分别为93．5％、70．1％；其次为对氯霉素敏感率54．2％；对四环素、庆大霉素、克林霉素和左氧氟沙星等显示高度耐药或全耐药。PFGE分析表明32株MRSA分为4个PFGE组（A～D型），25株为A型，A型又包括A1、A2、和A33个亚型，其中以A1亚型为主，共17株，A2亚型1株，A3亚型7株，B型5株，C型1株，D型1株。结论我院在2005年12月到2006年12月ICU、结核5科有MRSA暴发流行，主要流行株为A1、A3亚型；这些MRSA菌株为多重耐药菌，应引起临床医师及感染控制部门高度重视。     

构建乙型肝炎病毒基因参照品判断基因分型的探讨

目的利用乙型肝炎病毒（HBV）基因参照品判断HBV基因分型。方法自行制备HBV—S区基因参照品A、B、C、D型并测序及比较同源性，利用限制性内切酶MboI、EarI酶切参照品和样品扩增产物，从而确定样品基因型。利用该方法对克拉玛依地区272例HBV—DNA阳性血清基因分型。结果测序证实，HBV基因参照品与39例GenBank序列同源性均在96％以上。272例样品成功分型241例（88．6％）。检出B、C、D型，未检测到A型。抽检12例测序同源性大于96％。结论依据基因参照品核酸碱基片段大小判断分型，简明直观，适用于大样本的筛检及临床应用。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及分子流行病学调查

目的了解MRSA的耐药性及分子流行病学特点。方法采用纸片扩散法检测住院患者分离的160株MRSA的耐药性;采用随机引物(AP)-PCR法对其中的36株MRSA作同源性分析。结果160株MRSA对万古霉素、替考拉宁和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为100%、100%和95%;对红霉素、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率分别为97.5%、87%和59%;左氧氟沙星的中介率为26%。36株MRSA的AP-PCR图谱有10种类型(A～J型),主要型别为A型12株、B型7株及C型6株,ICU的25株,分别为A型10株、B型6株、C型3株、D型3株及F、I、J各1株。结论医院获得性MRSA是多重耐药菌,ICU的MRSA菌株主要基因型为A、B型。     

应用多重聚合酶链反应对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行SCCmec基因分型

目的应用多重聚合酶链反应（PCR）对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及亚型进行分型。方法收集本院2005年2月至7月临床分离的112株金黄色葡萄球菌，应用PCR扩增mecA基因检测MRSA，用多重PCR检测MRSA的SCCmec的基因型及亚型。用全自动微生物分析仪进行药敏试验。结果72株金黄色葡萄球菌的mecA基因阳性，确定为MRSA，阳性率为64．3％（72／112）。SCCmecⅢ和SCCmecⅢA的阳性率分别为68．1％（49／72）和20．8％（15／72），H16和H56为SCCmecⅡ，H19为SCCmecⅣ，5株MRSA没有被分型。携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ或SCCmecⅢA的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ的菌株除对B内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌素敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ和SCCmecⅢA为主。多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型结果可靠，适合临床实验室。携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ或SCCmecⅢA的临床分离株耐药性严重。     

拉米夫定对前C区变异乙肝的治疗与乙肝病毒基因分型的研究

目的：探讨前C区变异的乙型肝炎患者基因型与拉米夫定疗效的关系。方法：随机选择80例HbeAg阴性、血清丙氨酸氨基转氨酶异常的慢性乙型病毒性肝炎患者，检测其HBV基因分型，并给予拉米夫定治疗。于治疗后第1，3，6，9，12个月分别检测患者肝功能及乙肝病毒定量变化，治疗9个月后再次检测乙肝病毒基因分型。结果：前C区变异乙型肝炎患者HBV基因分型：B型6．25％，C型26．25％，D型52．5％，E型8．75％，CD混合型5％，F型1．25％。HbeAg阴性乙型肝炎患者口服拉米夫定HBVYMDD突变株（YIDD／YVDD）多发生于HBV基因型D型、C型。前C区变异多发生于HBV基因型D型。结论：前C区变异多发生于HBV基因型D型，C型、D型对拉米夫定疗效依次降低。     

拉米夫定抗HBV疗效与其基因型的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型与拉米夫定抗HBV疗效的关系。方法；采用前瞻性和回顾性相结合的方法收集资料，患者口服拉米夫定100mg·d^-1治疗至少12个月，停药观察至少6个月。采用多引物对巢式PCR法检测HBV基因型，并对停药后HBVDNA阳性者用PCR-序列分析法检测病毒前C（PC）区和C区基本核心启动子（BCP）突变。结果：53例慢性HBV感染患者中C基因型占45．3％，B基因型41．5％，B＋C混合基因型为3．8％，未测出A、D、E、F型。B、C基因型患者的病毒学应答在服药6个月、服药12个月及停药时无统计学差异，停药6个月后的病毒学应答有统计学差异，B基因型优于C基因型。两组患者的PC变异率差异无统计学意义，但BCP变异率差异有统计学意义，C基因型更易发生BCP变异。结论：B基因型患者停药6个月后的持续病毒学应答优于C基因型，C基因型较B基因型更易发生BCP变异。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

金黄色葡菌萄球耐药性监测

目的：监测成都市4家三级甲等医院临床分离的金黄色葡萄球菌（金葡菌）耐药性。方法：用琼脂稀释法测定11种抗菌药物对282株金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）修正，并对菌株来源及科室分布进行分析。结果：282株金葡菌共筛出耐甲氧西林金葡菌（MRSA）94株，检出率为33.3％；甲氧西林 敏感金葡菌（MSSA）共188株。MSSA对青霉素和克拉霉素的耐药率分别为71.3％和54.8％，而对其抗菌药物敏感。MRSA对万古霉素、阿米卡星和利福平敏感性高（最强为万古霉素），而对其余多种抗菌药物耐药。MRSA来源最多为痰，其次为各种分泌物；科室分布依次为烧伤科、重症监护病房（ICU）、感染科等。结论：青霉素、大环内酯类药物不宜用于金葡菌感染。MRSA具有多重耐药性。MRSA感染首选糖肽类抗生素治疗。金葡菌是一种重要的病原菌，应长期进行耐药性监测，病室需做好消毒隔离。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及耐药性分析

目的探讨临床分离的346株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株的临床分布、SCCmec分型及其对常用抗菌药物的耐药情况。方法选择2014年1月至2015年1月该院分离的784例金黄色葡萄球菌(SA),采用PCR方法对其进行MRSA及MRSA SCCmec基因分型鉴定,并对其检出分布及耐药性进行分析。结果 784株SA中MRSA 346株(占44.13%),MRSA中来自痰液占43.06%,伤口分泌物占48.55%;MRSA对青霉素、左氧氟沙星、红霉素耐药性较高,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。MRSA经SCCmec分型,共发现SCCmecⅡ型130株,SCCmecⅢ型196株,SCCmecⅣ型11株,SCCmecV型9株。结论该院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主,MRSA对多种抗菌药物具有耐药作用,但对万古霉素、替考拉宁等敏感。     

2011年四川省肿瘤医院细菌耐药性监测

目的了解2011年四川省肿瘤医院临床分离株对常用抗菌药物的耐药性.方法采用 MIC 法对1582株临床分离株进行药敏试验.按美国临床实验室标准化协会2009版判读结果.结果1582株临床分离株中革兰阳性球菌占10.1%(160/1582),革兰阴性杆菌占89.9%(1422/1582).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR‐SA)的检出率占金黄色葡萄球菌的26.1%.葡萄球菌中甲氧西林耐药株对β‐内酰胺类抗菌药物和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,未发现万古霉素和利奈唑胺耐药株.肠球菌属中屎肠球菌对多数测试药物的耐药率高于粪肠球菌,出现1株耐万古霉素菌株,无利奈唑胺耐药株.革兰阴性肠杆菌中,大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs 株分别为66.5%和21.2%.产 ESBLs 菌株对大多β‐内酰胺类抗菌药物高度耐药.亚安培南对肠杆菌科细菌抗菌活性最强.出现了较多的多重耐药鲍曼不动杆菌.结论该院细菌耐药性较2010年有增长趋势,尤其出现了耐万古霉素的肠球菌且多重耐药鲍曼不动杆菌显著增多,应引起注意,并及早采取防控措施.     

新生儿呼吸道感染肺炎克雷伯菌随机扩增DNA多态性研究

目的建立肺炎克雷伯菌随机扩增DNA多态性（RAPD）基因分型的方法,并对新生儿病房呼吸道感染肺炎克雷伯菌进行分子流行病学分析。方法在对肺炎克雷伯菌进行RAPD反应体系优化的基础上,对我院新生儿病房下呼吸道分泌物分离获得的30株肺炎克雷伯菌,提取基因组DNA后进行RAPD分型,同时进行抗生素敏感性试验。结果30株肺炎克雷伯菌RAPD分型可分为14型,分型率100．0％;其中A型6株、B型4株、C型3株、D型3株、E型-H型各2株、I型-N型各1株。药敏结果显示分离菌株多重耐药情况严重,对第三代头孢菌素类抗生素耐药率高达50．0％-73．3％,但对亚胺培南仍高度敏感。结论RAPD可对肺炎克雷伯菌进行分子流行病学研究。新生儿病房内存在肺炎克雷伯菌流行株的交叉感染。     

Antimicrobial susceptibility and molecular characterization of community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infections are increasing. Since most published data are on nosocomial MRSA, our goal was to identify the antimicrobial susceptibility profile and resistance mechanisms of pretreatment MRSA isolates obtained from adult subjects participating in recent clinical treatment trials of community respiratory infections. Out of 465 S. aureus isolates, 43 were identified as MRSA. Antimicrobial susceptibility testing indicated susceptibility rates to: vancomycin (100%), gentamicin (86%), clindamycin (39%), quinolones (49%), and erythromycin (12%). Among our MRSA isolates, the MLS constitutive phenotype and ermA were more prevalent than the MLS inducible phenotype and ermC. No isolates had ermB or msrA. All ciprofloxacin resistant isolates had an amino acid change in GyrA and GrlA. The relatedness of our MRSA strains was assessed by ribotyping. Our results indicate that MRSA from adult subjects with community respiratory infections have similar antimicrobial susceptibility profiles and resistance mechanisms as nosocomial MRSA, and represent a genetically diverse group.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性研究

目的了解临床MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征。方法采用应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术对MRSA进行SCCmec基因分型;采用K-B纸片扩散法检测MRSA抗菌药物敏感性。结果 65株MRSA菌株中包括SCCmecⅢ型60株(92.31%),SCCmecⅣa型4株(6.15%),未分型1株(1.54%)。耐药性分析显示所有菌株对万古霉素、利奈唑烷、替考拉宁和奎奴普丁/达福普汀完全敏感,对氯霉素耐药率较低,各型别间无显著差异(P>0.05)。对其它非β-内酰胺类的抗菌药物,SCCmecⅢ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣa型,其中对加替沙星、庆大霉素,利福平,四环素的耐药率有显著差异(P<0.05)。结论 SCCmecIII型菌株为临床分离MRSA主要流行菌株,该型菌株对多种抗生素呈多重耐药。多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型适合临床实验室。     

宁夏地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的调查临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的染色体m ec基因盒（SCCm ec）分型及杀白细胞素（PVL）的pvl基因携带率,初步了解宁夏地区MRSA分子流行病学特点。方法对2005年9月至2008年1月从临床标本中分离的MRSA菌株进行pvl基因检测,并应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行SCCm ec分型。结果 88株MRSA菌株中pvl基因阳性菌株8株（9.1%）,SCCm ec分型结果为Ⅲ型86株（97.7%）、Ⅱ型2株（2.3%）。结论宁夏地区分离的MRSA菌株SCCm ec分型以Ⅲ型为主,SCCm ec分型是探索MRSA多重耐药性有效的分子生物学手段。