人脐血间充质干细胞脑内移植改善帕金森病大鼠行为缺陷的研究

背景：已有较多的研究证明脐血细胞能向神经元样细胞分化，且成功的运用脐血治疗脑卒中及其他神经系统疾病的研究已有报道，能否应用脐血干细胞治疗神经变性疾病尚未可知。目的：探讨应用人脐血间充质干细胞治疗大鼠帕金森病的可行性及其机制。设计：随机对照实验研究。地点和对象：健康Sprague-Dawley大鼠18只，清洁级，体质量220～260g。脐血标本取自郑州大学第三附属医院妇产科，每个标本60～120mL。干预：制备6-羟多巴胺帕金森病偏侧大鼠模型，随机分为3组：①对照组（n=6)。②PBS组(n=6)：在每只大鼠右侧纹状体移植10μL的PBS。③间充质干细胞组(n=6)：将3&;#215;10^6个用BrdU标记的脐血间充质干细胞植入大鼠右侧纹状体，4周后用阿朴吗啡诱发旋转试验并用免疫组织化学检测植入细胞的存活情况及纹状体酪氨酸羟化酶阳性细胞。主要观察指标：①移植前后各组大鼠旋转圈数。②免疫组织化学染色结果。结果：脐血间充质干细胞在体内存活，与对照组相比，间充质干细胞移植组阿朴吗啡诱发的旋转行为[每30钟大鼠旋转圈数为212&;#177;60比340&;#177;30]显著改善(P&;lt;0．05)，但右侧纹状体酪氨酸羟化酶阳性细胞数与对照组相比无显著性差异(P&;gt;0．05)。结论：人脐血间充质干细胞脑内移植能改善帕金森大鼠的行为缺陷，可作为治疗神经变性疾病的一种潜在细胞资源。     

脐血间充质干细胞移植后帕金森病大鼠纹状体内多巴胺含量的变化

背景:目前干细胞移植对帕金森病动物模型的研究多集中在骨髓间充质干细胞和胚胎干细胞方面,关于脐血间充质干细胞移植对帕金森病动物模型的研究相对较少,且未见测量脐血间充质干细胞移植前后多巴胺含量变化的报道.目的:观察脐血干细胞移植对帕金森病大鼠纹状体内多巴胺含量的影响.方法:帕金森病模型大鼠随机分成实验组和对照组.将第3代脐血间充质干细胞用Hoechst33258标记后植入实验组大鼠纹状体内,对照组注射磷酸盐缓冲溶液.移植后2,4,8周用免疫荧光双标法检测间充质干细胞的存活、迁移以及胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶、酪氨酸羟化酶和突触素的表达.移植后8周利用高效液相色谱-电化学检测仪检测纹状体多巴胺含量.结果与结论:脐血间充质干细胞移植后可在大鼠脑内存活,随时间延长迁移范围扩大,分布于纹状体、胼胝体和皮质;胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶、酪氨酸羟化酶都有表达,突触素无表达.多巴胺水平与对照组相比有明显提高 (P < 0.05).     

神经干细胞移植对帕金森病模型小鼠行为的影响

目的 评价神经干细胞移植对帕金森病(PD)模型小鼠行为缺陷的改善作用。方法 采用自发运动、Morris水迷宫和转杆实验对小鼠的行为进行评价。结果 与对照组相比，PD模型小鼠的自发运动次数明显减少，水迷宫寻台潜伏期延长，转杆时问缩短。经单侧和双侧纹状体神经干细胞移植后2周、4周和8周，PD模型小鼠的自发运动次数明显增加，水迷宫寻台时间显著缩短，转杆时间延长。结论 神经干细胞移植能够有效改善PD模型小鼠的行为缺陷。     

脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病30例

目的:观察脐血间充质干细胞移植治疗帕金森病患者神经功能的效果.方法:选择2008-01/12北京和众华信治疗中心收治的帕金森病患者30例,均经过英国皇家医师学会帕金森病诊断与管理指南的帕金森病诊断标准确诊,男19例,女11例,年龄45～66岁,平均年龄58岁,Hoehn-Yahr分级为Ⅱ～Ⅳ级,患者对治疗均签署知情同意书,治疗方案经医院医学伦理委员会批准.所有患者均住院治疗,第1周进行常规检查,30例患者血、尿、便常规、肝肾功能、多项肿瘤标记物、胸片等均正常.自第2周起患者应用脐带血间充质干细胞进行鞘内注射移植治疗,以第3,4腰椎间隙为穿刺点,缓慢注入地塞米松2 mg,取脐血间充质干细胞注射液5 mL(干细胞数500万),在10 min内缓慢注入蛛网膜下腔,1次/周,4次为1个疗程,共治疗1个疗程.采用帕金森病统一评分量表对患者移植前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重.结果:30例患者均进入结果分析,中途无脱落.与移植前比较,30例患者移植后3个月帕金森病统一评分量表分值均明显降低(P<0.01),患者震颤、强直、运动迟缓、姿势不稳等临床症状均得到明显改善,均未出现移植物抗宿主病.结论:脐血间充质干细胞移植可以一定程度地改善帕金森病患者的临床症状,提高患者生活质量.     

脐血干细胞移植研究进展

脐血干细胞移植研究进展陈一鸣综述吴祖泽郝玉书审校国际脐血移植登记处（ＩＣＢＴＲ）已收到２００多例接受脐血（ＣＢ）移植的报告，初步结果令人鼓舞［１］。许多国家开展了ＣＢ库的建立，以期有可能解决异基因骨髓移植（ａｌｏ－ＢＭＴ）遇到的一些难题［２］。１ＣＢ...     

酪氨酸羟化酶修饰人脐血间充质干细胞移植帕金森病大鼠纹状体内的多巴胺含量

背景：研究表明,干细胞治疗比药物治疗更接近于恢复患者的生理模式,细胞移植治疗已逐渐成为一种趋势。目的：观察酪氨酸羟化酶修饰的脐血间充质干细胞移植后帕金森病大鼠纹状体内多巴胺含量的变化。 方法：将酶切鉴定后的新构建质粒pEGFP-C2-TH经电穿孔法转染第3代脐血间充质干细胞,注射到帕金森病大鼠右侧脑室,对照组注入PBS。观察移植细胞在大鼠脑组织内的迁移情况,高效液相色谱仪检测大鼠纹状体内多巴胺的含量。 结果与结论：质粒pEGFP-C2-TH转染的脐血间充质干细胞移植后8周,细胞逐渐向脑室转移,12周时迁移至皮质,可表达酪氨酸羟化酶抗原,且实验组多巴胺含量明显高于对照组（P＜0.05）。结果表明酪氨酸羟化酶修饰的脐血间充质干细胞经脑室移植对帕金森病大鼠具有明显的治疗作用。     

TH基因修饰的神经干细胞脑内移植对帕金森病模型动物的旋转行为及神经生化的影响

背景：神经干细胞(neuronal stem cells，NSCs)能提供多巴胺能神经元来治疗帕金森病(Parldnson disease，PD)，但脑内移植NSCs治疗PD的疗效目前观察结果欠佳。研究显示酪氨酸羟化酶(tyrosine hydIDxylase，TH)基因脑内移植能缓解PD的症状，TH基因修饰的NSCs脑内移植可能使PD的治疗效果出现新的结局。目的：探讨TH基因修饰的NSCs脑内移植对PD模型动物旋转行为和神经生化的影响。设计：完全随机对照实验。地点和对象：本实验选择105只大鼠，在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室完成。干预：构建pN2ATH反转录病毒载体质粒，用PA317细胞包装，G418筛选阳性克隆，病毒上清感染NSCs，将NSCs和表达TH的NSCs植入PD大鼠皱状体内，测定移植后不同时间PD大鼠旋转行为改善以及多巴胺和3，4-二羟基苯乙酸(dihydroxy-phenyl acetlc acid，OOPAC)含量变化。主要观察指标：PD大鼠旋转行为改善以及多巴胺和DOPAC含量变化。结果：TH基因修饰的NSCs移植8周后能显降低PD大鼠旋转行为。增加纹状体多巴胺和DOPAC含量，疗效好于单纯NSCs移植组和对照组。结论：TH基因修饰的NSCs脑内移植能增加纹状体多巴胺和DOPAC含量，降低PD大鼠旋转行为，从而对PD大鼠有明显的治疗作用。     

神经干细胞移植对帕金森病鼠纹状体多巴胺含量的影响

目的 观察神经干细胞定向移植后对帕金森鼠纹状体多巴胺含量的影响，证实神经干细胞移植治疗的可行性。方法 建立帕金森病模型大鼠以及体外培养神经干细胞，然后将神经干细胞悬液立体定向移植到帕金森病模型鼠黑质纹状体区，测定纹状体的多巴胺含量，并与生理盐水组和非移植组相比。结果 神经干细胞移植后帕金森病模型鼠纹状体多巴胺含量(346&;#177;26)μg／g与生理盐水组(58&;#177;56)μg／g和非移植组(72&;#177;60)μg／g比较明显增多，经t检验差异有显著性意义(t=13．99，12．57，P&;lt;0．05)。结论 神经干细胞移植能减轻6-羟基多巴胺对黑质纹状体多巴胺能神经元的损伤。     

脐血造血干细胞移植成人的研究

自1989年Gluckman等首次成功地开展了世界上第一例脐血移植以来,已在世界各地进行了大约200例脐血移植。尽管HLA相合与不相合的脐血移植都取得了令人满意的结果,但以往报道的脐血移植都是在儿童身上进行的。由于单份脐血可采量有限,近年来人们一直在致力于脐血移植成人的可能性研究。最近,有3个研究组分别报道了4例脐血     

人脐血干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的功能评价

背景:在脊髓损伤模型的研究中,BBB评分系统和斜板试验均与脊髓损伤程度高度相关。目的:建立改进大鼠脊髓全横断模型,对比观察BBB评分和斜板试验在人脐血干细胞移植术后功能评价中的作用。设计、时间及地点:观察对比实验,于2007-04/2008-07在广东省组织构建与检测重点实验室完成。材料:脐血来自健康足月产妇。实验动物为SPF级健康成年雌性SD大鼠50只,随机分为假手术对照组(n=10)、磷酸盐注射组(n=20)、脐血干细胞移植组(n=20)。方法:分离和体外培养人脐血干细胞。在显微镜下纵行剖开SD大鼠硬脊膜囊后,于硬脊膜内、蛛网膜外将超薄刀片刀尖直抵椎体骨质,将蛛网膜、脊髓、两侧壁和腹侧的硬脊膜作为一个整体完全划断,制作大鼠脊髓全横断模型,假手术对照组仅打开椎板,脐血干细胞移植组大鼠于脊髓两断端分别显微注射人脐血干细胞悬液6×109~7×109L-1,磷酸盐注射组注射等量磷酸盐缓冲液。主要观察指标:术后12周内每2周分别应用BBB评分和斜板试验进行1次后肢运动功能评价。结果:假手术对照组后肢运动功能于手术前后无显著变化。从术后第2周开始,磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组逐渐恢复部分后肢运动功能,两组的BBB评分和斜板试验检测结果均表现出一致的增长趋势,呈线性正相关关系。从术后4周开始,BBB评分<13分的磷酸盐注射组和BBB评分≥13分的脐血干细胞移植组大鼠,在斜板试验中差异非常显著(P<0.01)。到术后第12周时,磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组斜板试验角度和恢复程度分别为34.25°和52.94%、53.85°和83.23%,并且脐血干细胞移植组高于磷酸盐注射组(P<0.01),而同期磷酸盐注射组和脐血干细胞移植组对应的BBB评分和恢复程度仅分别为8.15和38.81%、13.90和66.19%,可见两组斜板试验角度恢复程度亦明显高于其自身对应的BBB评分结果。结论:与BBB评分系统相比,斜板试验能更敏感地反映大鼠爪的功能恢复,但不能特异性地反映爪的精细运动。而作为主观评分体系的BBB评分系统,虽然特异性很高,但容易受主观因素的影响,敏感性较低。因此,联合应用BBB评分和斜板试验能更好地反映脊髓神经功能恢复情况。     

经Nurr1基因转染的骨髓间充质干细胞移植对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多种神经因子的影响

目的：观察对中脑腹侧多巴胺能神经元分化、成熟及存活起重要作用的Nurr1基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞脑内移植后，对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多巴胺、二羟苯乙酸及高香草酸含量比值的影响。方法：实验于2003-08／2004-12在中山大学附属第一医院神经病学国家重点实验室进行。取SD雄性大鼠，右侧中脑黑质致密区注入6-羟基多巴(2g／L)3μL制备帕金森病模型，4周后将69只成功帕金森病模型随机分为3组：①对照组24只：右侧纹状体尾状核头部注入生理盐水4．5μL。②骨髓间充质干细胞组24只：相同部位注入培养纯化的骨髓间充质干细胞4．5μL。③转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组21只：用脂质体转染法转染PcDNA3．1(+)-Nurr1入大鼠骨髓间充质干细胞并稳定表达，然后移植入模型大鼠脑内，部位和剂量与其他两组相同。观察各组大鼠旋转行为学变化，并用免疫组化、反转录-聚合酶链反应等方法检测移植细胞的Nurr1，DAT和酪氨酸羟化酶表达；利用高效液相色谱检测大鼠脑内多巴胺、二羟苯乙酸和高香草酸含量。结果：59只大鼠进入结果分析。①旋转行为学变化：与对照组相比，移植前1周无明显差异(P&;gt;0．05)，移植后2～8周，另2组大鼠旋转行为明显改善(P＜0．05)；转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组在移植后2～4周较骨髓间充质干细胞组轻(P＜0．05)，但至8周时两组无差异(P&;gt;0．05)，②Norr1及DAT和酪氨酸羟化酶阳性表达：免疫组化结果显示转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组移植区能够稳定表达Nurr1且少量细胞表达DAT，但未发现酪氨酸羟化酶阳性细胞，其他两组移植区未发现阳性细胞。③Nurr1及DAT和酪氨酸羟化酶mRNA表达：移植后2～8周，聚合酶链反应产物经电泳、3组大鼠术侧纹状体染色后均可见1030bp片段(DAT)，241bp片段(Nurr1)，438bp片段(β-actin)，但未发现酪氨酸羟化酶条带(647bp)。④脑内纹状体多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸术侧与健侧比值：移植后2，8周，两治疗组均较对照组增高(P＜0．05)，但8周时两治疗组比较无差异(P&;gt;0．05)。结论：转Nurr1基因大鼠骨髓间充质干细胞在帕金森病大鼠模型纹状体内可以存活(8周以上)，在该环境中Nurr1基因的过表达可以促进大鼠骨髓间充质干细胞的DAT基因表达，能显著改善帕金森病大鼠的旋转行为，并在一定时期内维持纹状体内相对较高的多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸水平。     

人脐血间充质干细胞脑内移植改善帕金森病大鼠行为缺陷的研究

背景已有较多的研究证明脐血细胞能向神经元样细胞分化,且成功的运用脐血治疗脑卒中及其他神经系统疾病的研究已有报道,能否应用脐血干细胞治疗神经变性疾病尚未可知.目的探讨应用人脐血间充质干细胞治疗大鼠帕金森病的可行性及其机制.设计随机对照实验研究.地点和对象健康Sprague-Dawley大鼠18只,清洁级,体质量220～260 g.脐血标本取自郑州大学第三附属医院妇产科,每个标本60～120 mL.干预制备6-羟多巴胺帕金森病偏侧大鼠模型,随机分为3组①对照组(n=6).②PBS组(n=6)在每只大鼠右侧纹状体移植10 μL的PBS.③间充质干细胞组(n=6)将3×106个用BrdU标记的脐血间充质干细胞植入大鼠右侧纹状体,4周后用阿朴吗啡诱发旋转试验并用免疫组织化学检测植入细胞的存活情况及纹状体酪氨酸羟化酶阳性细胞.主要观察指标①移植前后各组大鼠旋转圈数.②免疫组织化学染色结果.结果脐血间充质干细胞在体内存活,与对照组相比,间充质干细胞移植组阿朴吗啡诱发的旋转行为[每30钟大鼠旋转圈数为212±60比340±30]显著改善(P＜0.05),但右侧纹状体酪氨酸羟化酶阳性细胞数与对照组相比无显著性差异(P＞0.05).结论人脐血间充质干细胞脑内移植能改善帕金森大鼠的行为缺陷,可作为治疗神经变性疾病的一种潜在细胞资源.     

脐血造血干细胞移植与进展

脐血造血干细胞移植与进展５１０１２０中山医科大学孙逸仙纪念医院陈纯，黄绍良自１９７４年Ｋｎｕｄｔｚｏｎ提出胎盘血（下称脐血）是有希望的重建造血系统的于细胞来源以来，随着造血细胞培养和单克隆抗体检验技术的发展，国内外研究均表明脐血可作为一种极有潜力的造...     

不同部位脐血干细胞移植治疗糖尿病大鼠的效果研究

目的观察脐血干细胞在糖尿病大鼠的不同部位移植,对其血糖及胰岛素分泌的影响,找到一种较好的移植部位。方法将8周龄200 g左右的SD大鼠48只,采用注射链脲佐菌素(STZ)的方法建成糖尿病大鼠,然后将它们随机分为4组(每组12只):胰腺组:在大鼠的胰腺内注射脐血干细胞1×108个;胰背动脉组:向胰背动脉内注入脐血干细胞1×108个;腹腔组:在腹腔内多处注入脐血干细胞1×108个;对照组:腹腔内注射相同体积的PBS液。以上4组大鼠均培养观察4周。每天监测大鼠血糖,每周测血浆胰岛素水平。结果胰腺组及胰背动脉组在移植后第1周末,血糖较移植前降低,而胰岛素水平上升;第4周末,血糖逐渐降到正常水平,胰岛素也升到正常范围,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。而腹腔组大鼠仍维持高血糖状态,胰岛素水平无明显变化,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论将脐血干细胞在胰腺及胰背动脉等处进行移植,可以明显改善糖尿病大鼠的胰岛素水平,改善其血糖,优于腹腔内移植。     

脐血造血干细胞移植研究进展

脐血造血干细胞移植研究进展韩明哲综述严文伟审校骨髓移植是治疗恶性血液病、再生障碍性贫血、重症免疫缺陷病等血液系统疾病的最有效方法之一。由于受ＨＬＡ匹配的骨髓来源的限制，只有少数患者受益于骨髓移植治疗。自从１９７４年Ｋｎｕｄｔｚｏｎ等［１］发现脐血中富...     

颈动脉体球细胞移植对帕金森病大鼠神经递质和行为的影响

目的：探讨颈动脉体球细胞移植对帕金森病（PD）大鼠神经递质和行为的影响。方法：采用立体定位注射6－羟多巴胺（6－OHDA）制备偏侧PD大鼠模型，右侧纹状体内分别移植入自、异体颈动脉体和胚鼠中脑组织快，移植后2、4、8和12周进行阶梯实验和阿朴吗啡诱发大鼠的旋转实验，测定移植区多巴胺（DA）的含量改变。结果：与对照组比较，PD大鼠摄食行为和阿朴吗啡诱发的旋转行为明显改善达12周之久，DA水平升高显著（P＜0．01）且以自体颈动脉体移植组最佳。结论：脑内移植颈动脉体球细胞可明显改善PD大鼠的神经行为缺损，提高纹状体内DA含量，是一种有效治疗PD的方法。     

脐血干细胞移植治疗血红蛋白病

应用脐血干细胞移植能够使血红蛋白病患者重建骨髓并较少发生GVHD。移植适应症包括疾病晚期,符合骨髓移植标准并有HLA相容的兄妹供体。脐血干细胞移植的主要优点是能够跨越HLA障碍。应建立脐血库并从血红蛋白病高发群体及患者家族中收集脐血,使之成为HLA相容或不相容性脐血干细胞移植的来源。     

经Nurr1基因转染的骨髓间充质干细胞移植对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多种神经因子的影响

目的:观察对中脑腹侧多巴胺能神经元分化、成熟及存活起重要作用的Nurr1基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞脑内移植后,对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多巴胺、二羟苯乙酸及高香草酸含量比值的影响。方法:实验于2003-08/2004-12在中山大学附属第一医院神经病学国家重点实验室进行。取SD雄性大鼠,右侧中脑黑质致密区注入6-羟基多巴(2g/L)3μL制备帕金森病模型,4周后将69只成功帕金森病模型随机分为3组:①对照组24只:右侧纹状体尾状核头部注入生理盐水4.5μL。②骨髓间充质干细胞组24只:相同部位注入培养纯化的骨髓间充质干细胞4.5μL。③转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组21只:用脂质体转染法转染PcDNA3.1(+)-Nurr1入大鼠骨髓间充质干细胞并稳定表达,然后移植入模型大鼠脑内,部位和剂量与其他两组相同。观察各组大鼠旋转行为学变化,并用免疫组化、反转录-聚合酶链反应等方法检测移植细胞的Nurr1,DAT和酪氨酸羟化酶表达;利用高效液相色谱检测大鼠脑内多巴胺、二羟苯乙酸和高香草酸含量。结果:59只大鼠进入结果分析。①旋转行为学变化:与对照组相比,移植前1周无明显差异(P>0.05),移植后2～8周,另2组大鼠旋转行为明显改善(P<0.05);转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组在移植后2～4周较骨髓间充质干细胞组轻(P<0.05),但至8周时两组无差异(P>0.05)。②Nurr1及DAT和酪氨酸羟化酶阳性表达:免疫组化结果显示转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组移植区能够稳定表达Nurr1且少量细胞表达DAT,但未发现酪氨酸羟化酶阳性细胞,其他两组移植区未发现阳性细胞。③Nurr1及DAT和酪氨酸羟化酶mRNA表达:移植后2～8周,聚合酶链反应产物经电泳、3组大鼠术侧纹状体染色后均可见1030bp片段(DAT),241bp片段(Nurr1),438bp片段(β-actin),但未发现酪氨酸羟化酶条带(647bp)。④脑内纹状体多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸术侧与健侧比值:移植后2,8周,两治疗组均较对照组增高(P<0.05),但8周时两治疗组比较无差异(P>0.05)。结论:转Nurr1基因大鼠骨髓间充质干细胞在帕金森病大鼠模型纹状体内可以存活(8周以上),在该环境中Nurr1基因的过表达可以促进大鼠骨髓间充质干细胞的DAT基因表达,能显著改善帕金森病大鼠的旋转行为,并在一定时期内维持纹状体内相对较高的多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸水平。     

双份脐血造血干细胞移植的现状

异基因造血干细胞移植是治疗血液系统恶性及非恶性疾病的一种有效的根治方法。与骨髓和外周血干细胞移植相比,脐血干细胞移植以其来源丰富,取材方便,术后移植物抗宿主病发生率较低及程度较轻等优势而获得了越来越广泛的运用。但因单份脐血中所含有的有核细胞数较少等问题限制了脐血移植的适用范围。为此,人们尝试采用双份脐血造血干细胞移植。本文就其近年来的发展现状作一综述。     

脐血干细胞移植治疗血红蛋白病

应用脐血干细胞移植能够使血红蛋白病患者重建骨髓并较少发生ＧＶＨＤ。移植适应症包括疾病晚期，符合骨髓移植标准并有ＨＬＡ相容的供体。脐血干细胞移植的主要优点是能够跨越ＨＬＡ障碍。应建立脐血库并从血红蛋白病高发群体及患者家族中收集脐血，使之成为ＨＬＡ相容或不相容性脐血干细胞移植的来原。