肌源干细胞注射治疗压力性尿失禁的研究进展

背景:注射疗法治疗压力性尿失禁是一种微创的治疗手段,但是由于既往注射材料的限制,可出现各种并发症,远期疗效差,寻找新的注射材料具有重大意义.目的:对压力性尿失禁应用肌源性干细胞治疗的研究进行回顾分析.方法:由第一作者检索2003/2010 PubMed数据库、Springer数据库及中国知网数据库关于肌源性干细胞用于压力性尿失禁治疗研究方面的文献,英文检索词为"stress urinary incontinence, muscle-derived stem cell",中文检索词为"压力性尿失禁,肌源干细胞",排除重复性研究,计算机初检得到40篇文献,根据纳入标准保留24篇进一步归纳总结.结果与结论:压力性尿失禁的治疗方式主要包括非手术治疗和手术治疗,其中手术治疗存在多种并发症甚至出现矫枉过正的风险,而注射疗法作为一种非手术治疗方式,具有操作简便,患者可接受性更高.肌源性干细胞注射后可在体内长期存活,并具有不被分解、不易迁移、低免疫原性的优点,在注射治疗压力性尿失禁方面具有广阔的前景.     

脂肪干细胞源性外泌体对瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响

目的 观察脂肪干细胞源性外泌体（ADSC-Exos）对瘢痕成纤维细胞生物学活性的调控作用。方法 将瘢痕成纤维细胞分为对照组、ADSC-Exos组。采用CCK-8法检测不同组别中瘢痕成纤维细胞的增殖情况;采用蛋白免疫印迹法检测纤维化指标的表达量;采用实时荧光定量-PCR检测纤维化相关基因mRNA的表达水平。结果 与对照组相比,在ADSC-Exos作用下,瘢痕成纤维细胞的增殖能力减弱,纤维化相关指标水平降低（P均<0.05）。瘢痕成纤维细胞在ADSC-Exos的作用下,Ⅰ、Ⅲ胶原及α-平滑肌肌动蛋白的mRNA表达下调（P均<0.05）。结论 ADSCExos能抑制瘢痕成纤维细胞的生物学活性。     

干细胞治疗压力性尿失禁的进展

压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)是指在逼尿肌没有收缩的情况下,由于腹内压的骤然增加而引起的不自主排尿的现象。目前SUI的治疗方法有很多,本文回顾了SUI的治疗历程,重点对干细胞治疗SUI的进展进行综述。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肌源性干细胞增殖的影响

背景:肌源性干细胞在体外培养过程中存在纯化、扩增、定向分化等难题,碱性成纤维细胞生长因子作为生物活性因子的一员,因其生物活性的多效性而备受关注.目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子对大鼠肌源性干细胞体外增殖的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-04/07在沈阳医学院完成.材料:健康雄性Wister大鼠5只,由沈阳医学院实验动物中心提供.碱性成纤维细胞生长因子为珠海生物制品有限公司产品.方法:无菌条件下取大鼠左前肢肱三头肌,采用酶消化法分离肌源性干细胞,应用密度梯度离心法和差速贴壁法进行纯化.取第2代肌源性干细胞,分别用终浓度为6.25,12.50,25.00,50.00,100.00μg/L碱性成纤维细胞生长因子进行干预;以单纯加入200 μL生长培养基作为空白对照组,以加入200μL生长培养基+肌源性干细胞作为阴性对照组.分别于培养24,48,72,96 h加入MTT溶液.主要观察指标:免疫细胞化学法鉴定大鼠肌源性干细胞,MTT比色法检测细胞增殖情况.结果:肌源性干细胞多呈Sca-1阳性反应,少数呈Desmin阳性反应.①不同浓度碱性成纤维细胞生长因子对肌源性干细胞的促增殖效应:与阴性对照组比较,各浓度碱性成纤维细胞生长因子组对肌源性干细胞均有明显的促增殖效应(P<0.05);浓度为6.25-50.00 μg/L时促增殖作用随其质量浓度升高而显著增强(P<0.01),至50.00 μg/L时其促增殖作用接近顶峰.②碱性成纤维细胞生长因子在不同培养时间点对肌源性干细胞的促增殖效应:随培养时间的延长肌源性干细胞明显增殖,与阴性对照组比较,碱性成纤维细胞生长因子组出现显著促增殖效应(P<0.01)的时间为培养96 h.结论:碱性成纤维细胞生长因子可促进体外培养的大鼠肌源性干细胞增殖,且呈浓度一时间依赖性增加,50.00 μg/L与96 h为较佳的体外培养质量浓度和时间.     

碱性成纤维细胞生长因子影响脂肪干细胞的血管内皮迁移

背景：良好血运机制的建立是工程化组织成功植入的关键。 目的：观察外源性碱性成纤维细胞生长因子对植入小鼠皮下的人脂肪来源干细胞-透明质酸钠复合物中人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移情况的影响。 方法：由吸脂术所得的脂肪组织中分离提取人脂肪来源干细胞进行培养传代,取第3代人脂肪来源干细胞进行cm-dil荧光标记后制成 5×10^9 L-1的细胞悬液,碱性成纤维细胞生长因子配成2 mg/L的工作液。将由0.25 mL透明质酸钠凝胶、0.2 mL细胞悬液和0.05 mL工作液/DMEM混合制成的碱性成纤维细胞生长因子组/对照组移植物分别植入小鼠背部左右两侧皮下作自身对照,6周后取材,行苏木精-伊红染色和免疫荧光标记血管内皮细胞进行观察分析。 结果与结论：植入处未出现结节、坏死及液化,取材时无凝胶残留。苏木精-伊红染色见标本性质多为脂肪组织及疏松结缔组织。荧光显微镜下仍可见标记人脂肪来源干细胞的cm-dil荧光,其与标记小鼠血管内皮的FITC荧光重合数碱性成纤维细胞生长因子组多于对照组（P〈0.05）。提示碱性成纤维细胞生长因子促进透明质酸钠支架中的人脂肪来源干细胞向血管内皮迁移、分化。     

大鼠脂肪源性干细胞的分离培养及鉴定

背景：脂肪源性干细胞在体外易于培养,增殖快,具有多向分化潜能。目的：构建一种体外分离培养SD大鼠脂肪源性干细胞的方法,并对其部分生物学特性与表型进行分析。方法：切取SD大鼠腹股沟脂肪垫,应用胶原酶Ⅰ消化,分离大鼠脂肪源性干细胞,进行体外培养、传代,倒置显微镜观察细胞的生长增殖及形态变化,诱导成骨、成脂,分别行碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色及油红O染色,绘制生长曲线及用流式细胞仪检测细胞表面标记。结果与结论：体外培养的脂肪源性干细胞呈梭形,增殖活跃,传代后形态均一,多次传代后细胞仍保持较强增殖能力,生长曲线呈＂S＂型。成骨诱导实验组碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色阳性;成脂诱导实验组油红O染色阳性;对照组均为阴性。细胞CD29,CD44,CD105表达阳性,CD31,CD45表达阴性。提示SD大鼠腹股沟脂肪垫分离的脂肪源性干细胞在体外易于分离培养和传代扩增,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,并表达间充质干细胞相关的表型。     

大鼠脂肪源性干细胞的分离培养及鉴定

背景:脂肪源性干细胞在体外易于培养,增殖快,具有多向分化潜能。目的:构建一种体外分离培养SD大鼠脂肪源性干细胞的方法,并对其部分生物学特性与表型进行分析。方法:切取SD大鼠腹股沟脂肪垫,应用胶原酶Ⅰ消化,分离大鼠脂肪源性干细胞,进行体外培养、传代,倒置显微镜观察细胞的生长增殖及形态变化,诱导成骨、成脂,分别行碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色及油红O染色,绘制生长曲线及用流式细胞仪检测细胞表面标记。结果与结论:体外培养的脂肪源性干细胞呈梭形,增殖活跃,传代后形态均一,多次传代后细胞仍保持较强增殖能力,生长曲线呈"S"型。成骨诱导实验组碱性磷酸酶、茜素红、von Kossa染色阳性;成脂诱导实验组油红O染色阳性;对照组均为阴性。细胞CD29,CD44,CD105表达阳性,CD31,CD45表达阴性。提示SD大鼠腹股沟脂肪垫分离的脂肪源性干细胞在体外易于分离培养和传代扩增,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,并表达间充质干细胞相关的表型。     

大鼠附睾脂肪垫脂肪源性干细胞的分离培养及分化潜能

背景:相对于骨髓基质干细胞,脂肪源性下细胞来源丰富,取材方便,干细胞丰度高,极易培养,具有多向分化潜能,有望成为组织工程、细胞治疗以及基因转染良好的源细胞,但目前对脂肪源性干细胞的研究尚处于初级阶段.目的:拟在体外分离培养大鼠脂肪源性干细胞,并探讨其分化潜能.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在南方医科大学组胚教研室和南方医院临床医学实验中心完成.材料:SPF级成年雄性SD大鼠1只,由南方医科大学实验动物中心提供.方法:无菌条件下切取大鼠双侧附睾尾脂肪垫,胶原酶消化法分离培养脂肪源性干细胞,胰蛋白酶消化法传代扩增.取第4代脂肪源性干细胞接种到96孔板,5×104个细胞/皿,待细胞贴壁后分成3组:成骨诱导组加入成骨培养基,成脂诱导组加入成脂培养基,对照组仍用基础培养基,培养14 d.主要观察指标:脂肪源性干细胞的形态变化、体外增殖能力、细胞免疫化学鉴定结果.脂肪源性干细胞成骨和成脂分化能力.结果:体外培养的脂肪源性干细胞易扩增,传代后以长梭形细胞为主,呈旋涡状排列,克隆样生长;经多次传代仍能保持较强的增殖能力,细胞生长曲线争"S"形;细胞表面标志CD44和CD49d呈阳性表达,CDl06呈阴性表达.脂肪源性干细胞经成骨诱导7 d后,碱性磷酸酶染色呈阳性;成脂诱导3 d后,油红O染色示胞浆内有脂滴出现;对照组细胞碱性磷酸酶染色呈阴性,无脂滴存在.结论:从大鼠附睾脂肪垫内分离的脂肪源性干细胞易于培养和传代扩增,在特殊条件下可分化为成骨细胞和脂肪细胞.     

改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞

背景:软骨组织工程是骨科研究的热点,在种子细胞的研究上由于软骨细胞存在老化现象更多的研究集中在干细胞向软骨细胞分化上.分化条件经历单细胞因子、联合细胞因子及贯续细胞因子的应用.目的:观察改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞的能力.设计、时间及地点;观察性实验,于2008-06/12在遵义医学院珠海校区中心实验室完成.I材料:SPF级健康SD大鼠5只,鼠龄18～22 d,体质量约25g,用于脂肪干细胞的培养基扩增.方法:在无菌条件下从SD大鼠腹股沟区取皮下脂肪组织约3 g,Ⅰ型胶原酶消化后,1 000 r/min离心10 min,待细胞长满瓶底80%时用2.5 g/L胰蛋白酶消化,按1:2或1:3比例传代培养.加入软骨诱导培养基14 d后阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测脂肪干细胞向软骨细胞的诱导分化.主要观察指标:流式细胞仪检测大鼠脂肪干细胞表面CD44、CD45和CD49d的表达.结果:SD大鼠脂肪组织分离培养出的细胞经流式细胞仪检测CD44、CD49d表达阳性,CD45表达阴性.加入软骨诱导培养基定向诱导72 h后,细胞生长缓慢,逐渐变成圆形,并渐渐有软骨结节形成;诱导分化2周后,阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性.结论:SD大鼠脂肪组织能够分离培养出脂肪干细胞,生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,能向软骨细胞分化.     

SPARC尿道吊带术治疗压力性尿失禁的护理

压力性尿失禁(以下简称FSUI)是一种虽不直接危及生命，但严重影响妇女生活质量的疾病。它是指腹压突然增加时(如咳嗽、打喷嚏、大笑、提重物或改变体位等)尿液从尿道不自主的溢出。PSUI约占整个尿失禁疾病的58％。长期以来，传统手术作为PSUI的主要治疗方法，疗效一直不够理想，尤其是术后并发症多。我科自2002年10月至2003年12月收治了35例此类患者，采用美国AMS生产的SPARC材料，实施了微创无张力吊带术，通过跟踪随访，疗效确切。现将本组患者的治疗护理体会介绍如下。     

The potential of muscle-derived stem cells for stress urinary incontinence

The suburethral sling procedures, such as transvaginal tape (TVT), have recently gained popularity for the treatment of stress urinary incontinence (SUI). This TVT procedure can reinforce the weakness of pelvic floor muscles but urethral sphincter deficiency remains. Adult stem cell injection therapy for SUI has recently been at the forefront of the repair of deficient urethral function. Muscle-derived stem cells and adipose-derived stem cells are regarded as candidates for the treatment of SUI because these stem cells can be easily obtained in large quantities under local anesthesia, they have the potential to undergo long-term proliferation, self-renewal and multipotent differentiation, and can serve as a vehicle of releasing neurotrophins, such as nerve growth factor, to repair the deficient urethra.     

The potential of muscle-derived stem cells for stress urinary incontinence

The suburethral sling procedures, such as transvaginal tape (TVT), have recently gained popularity for the treatment of stress urinary incontinence (SUI). This TVT procedure can reinforce the weakness of pelvic floor muscles but urethral sphincter deficiency remains. Adult stem cell injection therapy for SUI has recently been at the forefront of the repair of deficient urethral function. Muscle-derived stem cells and adipose-derived stem cells are regarded as candidates for the treatment of SUI because these stem cells can be easily obtained in large quantities under local anesthesia, they have the potential to undergo long-term proliferation, self-renewal and multipotent differentiation, and can serve as a vehicle of releasing neurotrophins, such as nerve growth factor, to repair the deficient urethra.     

Home treatment for women with stress urinary incontinence

Urinary incontinence is an unpleasant, unwanted and distressing problem that is common among women in the UK. A recent study (Hunskarr et al, 2004) estimated that 10 million women in the UK suffer with urinary incontinence. Stress urinary incontinence (SUI) is the most common form, affecting four million women. The International Continence Society defines SUI as 'the complaint of involuntary leakage [of urine] on effort or exertion, or on sneezing or coughing' (Abrams et al, 2002).     

抗病毒联合自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期乙肝肝硬化

目的 分析恩替卡韦联合自体骨髓干细胞移植对乙肝肝硬化患者的治疗作用.方法 选择乙肝肝硬化失代偿期患者78例.从患者髂后上棘抽取骨髓,体外分离纯化骨髓源性干细胞,经过股动脉穿刺植入肝脏.在术后2、4、8周复查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)及凝血酶原时间(PT)等相关实验室指标.结果 术后第4周和第8周,大多数患者的临床症状和体征得到明显改善,其中腹水减少或减轻者分别为68例和72例,乏力症状得到改善者分别为69例和75例,腹胀减轻者分别为69例和72例.干细胞移植后第4周,多项实验室指标出现显著变化,ALT、AST、TBIL明显下降,ALB、PT得到明显改善.结论 自体骨髓干细胞(BMSC)肝内移植是临床治疗失代偿期乙肝肝硬化的补充.     

脂肪干细胞及其移植治疗脑缺血的研究与应用

背景:研究表明,脂肪干细胞移植治疗动物脑缺血可改善其神经功能。目的:复习相关文献就脂肪干细胞的生物学特性、分化能力及其在脑缺血疾病中的应用研究作一综述。方法:应用计算机检索CNKI,PubMed数据库中2005/2010关于"脂肪干细胞及其移植治疗脑缺血的研究进展"的文章,以"脂肪干细胞,移植治疗,脑缺血"为检索词进行检索,选择内容为同脂肪干细胞及其在脑缺血治疗中的应用研究相关,同一领域文章则选择近3~5年内发表的文章或权威文章。初检到的中英文共152篇,根据纳入标准选择38篇进行综述。结果与结论:脂肪干细胞其具有取材方便、来源丰富、扩增迅速、无致瘤性、低免疫原性、无伦理约束等多种优势,临床前期实验已经证实,脂肪干细胞移植可改善神经功能紊乱,缩小脑梗死区域,可促进血管新生,改善病灶区血供,并表达神经特异性标志物。实验中脂肪干细胞的移植途径及时间都不同,实验结果都证实了神经功能的改善,但其具体的治疗机制尚不清楚,仍需要扩大对脂肪干细胞移植治疗脑缺血的临床前期研究数量,进一步完善其治疗机制。     

自体造血干细胞移植联合利妥昔单抗治疗非霍奇金淋巴瘤6例(英文)

背景:利妥昔单抗单用或联合CHOP方案化疗治疗CD20阳性非霍奇金淋巴瘤已取得较好疗效,非霍奇金淋巴瘤经自体造血干细胞移植治疗同样可以提高患者的疗效和生存率,而将两种方法联合的效果尚存在争论.目的:探讨自体造血干细胞移植联合利妥昔单抗对CD20阳性非霍奇金淋巴瘤的有效性.方法:对6例CD20阳性非霍奇金淋巴瘤Ⅳ期患者进行自体造血干细胞移植的同时,联合使用利妥昔单抗,分别于移植前给予2～4次,动员和预处理前后各2次,移植后每3个月维持治疗1次,利妥昔单抗用量为 375 mg/m~2静滴.结果与结论:平均采集单个核细胞数为5.13×10~(-8)/kg,CD34~+细胞数为4.75×10~(-6)/kg.6例患者自体造血干细胞移植后,造血功能均恢复顺利,中性粒细胞计数大于0.5×10~(-9)L~(-1)为移植后9～15 d,血小板计数大于20×10~(-9)L~(-1)为移植后12～19 d.6例患者在移植过程中均未发生出血性膀胱炎、间质性肺炎、巨细胞病毒感染和肝静脉阻塞等并发症.利妥昔单抗使用过程中,无发热、寒战、皮疹等不良反应发生.移植后6～32个月,患者均处于完全缓解状态.提示自体造血干细胞移植并利妥昔单抗治疗CD20阳性非霍奇金淋巴瘤是一种较好的方法,可维持治疗效果,有利于防止复发.     

Advances in stem cell therapy for male stress urinary incontinence

Introduction: Among the several options that have been proposed in recent years for the management of male stress urinary incontinence (SUI), stem cell therapy represents a new frontier in treatment. The aim of this paper is to update the current status of stem cell therapy in animal and human studies for the management of iatrogenic male SUI.

Areas covered: A literature review was conducted based on MEDLINE/PubMed searches for English articles using a combination of the following keywords: stem cell therapy, urinary incontinence, prostatectomy, regenerative medicine, mesenchymal stem cells.

Expert opinion: The few studies reported in the literature have demonstrated short-term safety and promising results of stem cell therapy in treating male SUI. However, many aspects need to be clarified before stem cell therapy can be introduced into daily urologic practice. In fact, important issues such as the limitations of these studies in terms of small sample sizes and short follow-ups, the incomplete knowledge of the mechanism of action of stem cells, the technical details regarding the delivery method and the best sources of stem cells, the safety risks regarding genomic or epigenetic changes and potential immune reactions in the longer term need to be identified in more stringent clinical trials.     

自体外周血干细胞移植联合开放截趾治疗糖尿病足的护理

总结11例糖尿病足坏疽患者行自体外周血干细胞移植联合开放截趾治疗的护理。认为重点是术前加强心理护理及正确实施自体外周血干细胞移植动员阶段的护理;术后密切观察病情变化,加强患肢血液循环监护,指导早期活动,预防出血、感染及下肢静脉血栓等并发症;出院时做好糖尿病足的自我管理及糖尿病知识的教育,是确保手术成功的关键。11例移植后6月,患肢创口全部愈合,无1例行小腿中下段截肢。     

Treatments for stress urinary incontinence

Stress urinary incontinence (SUI) is a common problem among women, particularly after childbearing. While it is not in itself life-threatening, it inevitably impairs quality of life, causing embarrassment and even social isolation--this is often both the reason that people with SUI seek medical help and the method of measuring the success of treatment. A range of treatment and management options is available for dealing with this distressing condition.