金纳米链与人喉癌Hep-2细胞共培养自由进出细胞的形式

背景：金纳米颗粒对肿瘤细胞具有杀伤效应。目的：观察金纳米链对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响。方法：首先运用葡萄糖体系合成法制备金纳米链溶胶,然后MTT法检测不同终浓度（10%,25%,50%,75%,95%）金纳米链溶胶对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响,并通过电镜观察金纳米链进出Hep-2细胞的过程。结果与结论：金纳米链在75%和95%高浓度时对Hep-2细胞增殖有一定的抑制,但并没有随着浓度的增加而加重,均属于一级范围,表明金纳米链对人喉癌Hep-2细胞无毒性。金纳米链在与Hep-2细胞共培养8h后即能以胞吞的方式进入细胞,48h后大部分出胞,能够自由进出细胞。     

金纳米链及抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链共轭物近红外热疗可启动细胞凋亡通路

背景:金纳米颗粒在近红外激光照射下对肿瘤细胞具有杀伤效应。目的:评价金纳米链及抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链共轭物近红外热疗对人喉癌Hep-2细胞的热杀伤作用并探讨其凋亡通路。方法:取生长良好的人喉鳞癌Hep-2细胞,分别应用金纳米链或抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链共轭物溶液进行干预,在此基础上应用8W/cm2近红外激光(808nm)照射6min,以单独应用1640培养液培养及单独给予近红外激光照射的细胞作对照。结果与结论:透射电镜观察发现,金纳米链热疗后Hep-2细胞有明显的损伤,抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链热疗后细胞的损伤程度最重。Westernblot检测显示,金纳米链热疗和抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链热疗后细胞热休克蛋白70和促凋亡蛋白Bax表达明显增高,而抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低。说明金纳米链及抗表皮生长因子受体抗体/金纳米链共轭物近红外热疗可通过启动细胞凋亡通路杀伤人喉癌Hep-2细胞。     

雷替曲塞联合X线照射对人喉癌细胞Hep-2的协同作用

目的:探讨雷替曲塞与X射线对人喉癌细胞Hep-2的协同作用及其潜在机制。方法:CCK-8法检测不同浓度雷替曲塞对Hep-2细胞活力的影响。将Hep-2细胞随机分为对照组、雷替曲塞组、照射组、雷替曲塞+照射组。单击多靶模型绘制细胞存活曲线,检测4组细胞存活情况及放射增敏比(sensitization enhancement ratio,SER);流式细胞仪检测4组Hep-2细胞凋亡情况和周期改变。结果:雷替曲塞能抑制Hep-2细胞活力,且呈剂量依赖性(P0.05)。单击多靶模型显示,雷替曲塞平均致死剂量下SER为1.272。雷替曲塞能显著增加细胞凋亡和G_2/M期阻滞(P0.05)。结论:雷替曲塞能协同X线对人喉癌细胞Hep-2的抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡和增加细胞G_2/M期阻滞有关。     

5-氟尿嘧啶-纳米金复合体抑制HepG2细胞的增殖

目的:5-氟尿嘧啶-纳米金复合体(5-fluorouraeil-gold nanoeonjugate,5-FU-GNP)的合成及其时HepG2细胞增殖抑制作用的观察.方法:采用化学合成法制备5-FU-GNP,并通过荧光淬灭实验和动态激光散射仪对其进行鉴定.细胞实验分为5-Fu处理组、5-FU-GNP处理组和空白对照组.将HepG2细胞种于放有盖玻片的6孔板.培养24 h后各组分别加入1.25 ms/mL的5-FU溶液、1.25 mg/mL的5-FU-GNP溶液和无血清培养液2 mL,继续培养24 h后固定,原子力显微镜(AFM)观察药物对HepG2细胞的增殖抑制作用;MTT比色法检测各组HepG2细胞增殖抑制率.结果:5-FU(2.5 ms/mL)的荧光强度为23 620.7±752.9,5-FU-GNP(2.5 mg/mL)荧光强度为1 909.0±283.9(P<0.01);GNP粒径为(13.20 ±1.15)nm,5-FU-GNP粒径为(21.67 ±3.64)nm(P<0.05).AFM观察到药物处理后HepG2细胞膜内陷,粗糙度增加,表面孔径增大,出现较大的孔洞,以5-FU-GNP处理组变化更为明显.MTT比色法结果显示5-FU-GNP处理组HepG2细胞增殖抑制率为(52.07±1.07)%,明显高于5-FU处理组:(36.78±3.24)%(P<0.01).结论:本实验成功合成了5-FU-GNP,原子力显微镜及MTT检测结果证实其较单纯5-FU对HepG2细胞有更强的增殖抑制作用.     

姜黄素诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨姜黄素对Hep-2（人喉癌细胞株）细胞诱导分化机制，为喉癌治疗提供理论依据。方法应用MTT（塞唑兰）比色法和流式细胞仪检测Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和凋亡率，并通过电子显微镜观察经姜黄素诱导分化后的亚细胞结构改变。结果姜黄素对Hep-2细胞增殖有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞仪分析，G1期细胞增多，S期细胞减少，C2／M期细胞相对增多，亚细胞结构、细胞空化，染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制Hep-2细胞增殖，阻止G1期细胞向S期的进程，促进Hep-2细胞凋亡。     

mTOR信号通路调控1,25二羟维生素D_3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖的研究

目的研究1,25二羟维生素D3抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖作用以及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法用不同剂量1,25二羟维生素D3(10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L)分别处理Hep-2细胞24、48、72h,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Hep-2细胞的增殖情况,并计算抑制率;采用流式细胞仪分析1,25二羟维生素D3对Hep-2细胞周期分布的影响,Western blot检测1,25二羟维生素D3对mTOR信号通路的影响。结果不同浓度1,25二羟维生素D3均可抑制Hep-2细胞增殖,改变细胞周期分布,使G0/G1期Hep-2细胞比例增高。1,25二羟维生素D3干预后Hep-2细胞TSC1、TSC2蛋白表达较对照组增高(P0.01),Rheb蛋白表达明显降低;mTOR蛋白及其磷酸化水平表达与对照组比较均降低(P0.01),mTOR蛋白磷酸化表达降低尤为明显(P0.01);4EBP-1蛋白表达较对照组增高(P0.01)。结论 1,25二羟维生素D3改变喉癌细胞Hep-2细胞周期分布,影响mTOR信号通路蛋白表达,从而抑制细胞增殖。     

纳米Ag-SiO2聚氨酯的体外细胞毒性评价

背景:为改善聚氨酯材料的抗菌性能,前期研究中合成了纳米Ag-SiO2聚氨酯材料。目的:比较7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料的体外细胞毒性。方法:将纳米Ag-SiO2与聚氨酯以熔融共混方式制备成含纳米Ag-SiO2,质量分数分别为0,0.5%,1.0%,1.5%,2.0%,2.5%,5.0%的聚氨酯材料。以上述7种聚氨酯材料浸提液、高密度聚乙烯浸提液(阴性对照)、0.1%苯酚液浸提液(阳性对照)分别培养L929细胞24,48,72h后,并设置试剂对照(含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基)和空白对照(不加细胞,只加含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基)。采用MTT比色法定量检测各组细胞相对增殖率,并进行毒性反应分级;同时在显微镜下观察细胞形态。结果与结论:7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料组、试剂对照组、阴性对照组细胞贴壁良好,形态正常,胞体丰满,胞质、核质分布均匀,细胞相对增殖率均大于80%,毒性反应分级均为1级,且随着纳米Ag-SiO2质量分数的降低,体外细胞毒性渐小、生物相容性更好。随培养时间延长,阳性对照组细胞相对增殖率逐渐降低,72h后细胞相对增殖率降至8.7%,与其他组比较差异有显著性意义(P<0.05),细胞萎缩、变圆、漂浮、片状脱落。表明7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料均具有良好的体外细胞相容性,毒性反应分级均为1级,符合医用材料体外实验要求。     

铁碳纳米粒介导顺铂对喉癌细胞敏感性的研究

背景：应用纳米技术对化疗药物进行靶向性改进是增加肿瘤对化疗药物敏感性的有效手段之一。目的：观察铁碳纳米粒搭载顺铂对喉癌Hep-2细胞的抑制作用及对细胞Caspase3,SurvivinmRNA表达的影响。方法：分别应用铁碳纳米粒和（或）顺铂的生理盐水分散液干预喉癌Hep-2细胞,以生理盐水干预的细胞作为对照。结果与结论：MTT检测结果显示,顺铂可明显抑制Hep-2细胞的生长,与铁碳纳米粒联合应用对Hep-2细胞的抑制作用更强;表现为细胞生长不贴壁,增殖缓慢,出现凋亡征象。RT-PCR结果显示,共培养5d,铁碳纳米粒和顺铂联合及顺铂单独处理的Hep-2细胞Caspase3mRNA水平明显增高,而SurvivinmRNA水平明显降低,以铁碳纳米粒和顺铂联合作用效果更明显,而单独应用铁碳纳米粒对Hep-2细胞无影响。提示铁碳纳米粒搭载顺铂能够增加喉癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性,提高药物化疗效果。     

苯乙酸钠联合热疗诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨苯乙酸钠（sodium phenylacetate,NaPA）联合热疗诱导人喉癌细胞株（Hep-2细胞）的增殖抑制率、细胞凋亡率及其对细胞周期进程的影响,旨在为喉癌的综合治疗提供理论依据。方法应用MTT比色法检测不同条件下对Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化,荧光显微镜检测Hep-2细胞的细胞凋亡率。结果单纯热疗组、NaPA组及联合组对Hep-2细胞的抑制率分别为24.8%,27.5%和45.3%,与对照组相比差异显著,P〈0.01;流式细胞仪结果显示G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,组间比较差异显著;荧光染色结果：单纯热疗组与NaPA组细胞凋亡率无差异,但联合组效果明显。结论 NaPA联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。     

纳米Ag-SiO_2聚氨酯的体外细胞毒性评价

背景：为改善聚氨酯材料的抗菌性能,前期研究中合成了纳米Ag-SiO2聚氨酯材料。目的：比较7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料的体外细胞毒性。方法：将纳米Ag-SiO2与聚氨酯以熔融共混方式制备成含纳米Ag-SiO2,质量分数分别为0,0.5%,1.0%,1.5%,2.0%,2.5%,5.0%的聚氨酯材料。以上述7种聚氨酯材料浸提液、高密度聚乙烯浸提液（阴性对照）、0.1%苯酚液浸提液（阳性对照）分别培养L929细胞24,48,72h后,并设置试剂对照（含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基）和空白对照（不加细胞,只加含体积分数10%胎牛血清的RPMI1640液体培养基）。采用MTT比色法定量检测各组细胞相对增殖率,并进行毒性反应分级;同时在显微镜下观察细胞形态。结果与结论：7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料组、试剂对照组、阴性对照组细胞贴壁良好,形态正常,胞体丰满,胞质、核质分布均匀,细胞相对增殖率均大于80%,毒性反应分级均为1级,且随着纳米Ag-SiO2质量分数的降低,体外细胞毒性渐小、生物相容性更好。随培养时间延长,阳性对照组细胞相对增殖率逐渐降低,72h后细胞相对增殖率降至8.7%,与其他组比较差异有显著性意义（P〈0.05）,细胞萎缩、变圆、漂浮、片状脱落。表明7种含不同质量分数纳米Ag-SiO2聚氨酯材料均具有良好的体外细胞相容性,毒性反应分级均为1级,符合医用材料体外实验要求。     

Apoptosis induced by an anti-epidermal growth factor receptor monoclonal antibody in a human colorectal carcinoma cell line and its delay by insulin.

Both EGF and insulin, or IGF, stimulate the growth of many cell types by activating receptors that contain tyrosine kinase activities. A monoclonal antibody (mAb 225) against the EGF receptor produced in this laboratory has been shown to competitively inhibit EGF binding and block activation of receptor tyrosine kinase. Here we report that a human colorectal carcinoma cell line, DiFi, which expresses high levels of EGF receptors on plasma membranes, can be induced to undergo G1 cell cycle arrest and programmed cell death (apoptosis) when cultured with mAb 225 at concentrations that saturate EGF receptors. Addition of IGF-1 or high concentrations of insulin can delay apoptosis induced by mAb 225, while the G1 arrest cannot be reversed by either IGF-1 or insulin. Insulin/IGF-1 cannot activate EGF receptor tyrosine kinase that has been inhibited by mAb 225. Moreover, an mAb against the IGF-1 receptor, which has little direct effect on DiFi cell growth, can block the capacity of insulin/IGF-1 to delay apoptosis induced by mAb 225, suggesting that the insulin/IGF-1-mediated delay of apoptosis is acting through the IGF-1 receptor. In contrast, insulin/IGF-1 cannot delay the apoptosis caused by the DNA damaging agent, cisplatin. The results indicate that EGF receptor activation is required both for cell cycle progression and for prevention of apoptosis in DiFi cells, and that a signal transduction pathway shared by receptors for insulin/IGF-1 and EGF may be involved in regulating apoptosis triggered by blockade of the EGF receptor.     

薤白挥发油诱导人胃癌细胞的凋亡

目的：分析中药薤白挥发油对人胃癌细胞的诱导凋亡作用及其途径，为胃癌患者康复期的中药辅助治疗提供理论依据。 方法：实验于2005—04／08在哈尔滨医科大学微生物教研室病毒实验室完成。①胃癌细胞SGC-7901的生长抑制实验：将对数生长期的胃癌细胞以每孔5&;#215;10^4加入培养板中，每孔体积100μL，4个实验孔加入不同浓度（依次为50，100，200，400mg／L）的薤白挥发油（由薤白的干燥鳞茎提取），以二甲基亚砜作为阴性对照。采用噻唑蓝比色法检测吸光度，细胞生长抑制率=（1-实验组吸光度）／对照组吸光度&;#215;100％。应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。②免疫细胞化学法检测p53，bcl-2蛋白表达：将对数生长的胃癌细胞SGC-7901以每孔2&;#215;10^5加入培养板，加入薤白挥发油（200mg／L）；在对照孔中加入等量的细胞培养液。应用免疫细胞化学法进行细胞凋亡的定性与定量指标测定。结果评估：p53免疫反应定位于细胞核，bcl-2免疫反应定位于胞质和胞膜，细胞染色呈棕褐色或棕黄色为阳性，连续观察5个高倍视野，计算阳性细胞百分率。 结果：①薤白挥发油50，100，200，400mg／L组SGC-7901细胞的生长抑制率分别为15．02％，32．33％，60．17％和93.41％；细胞凋亡率分别为10．03％，21．33％，47．65％和88．78％，均显著高于对照组（F=5．93，5．84，P（0．05）。②薤白挥发油组SGC-7901细胞中p53蛋白的阳性率显著高于对照组[（56．06&;#177;7．31）％，（10．23&;#177;5．19）％（F=5．63，P〈0．05）]。但两组bcl-2蛋白表达差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：薤白挥发油对人胃癌细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡来实现，且这种凋亡作用呈剂量依赖性，提升p53蛋白表达可能是诱发胃癌细胞凋亡的作用途径之一。     

薤白挥发油诱导人胃癌细胞的凋亡

目的:分析中药薤白挥发油对人胃癌细胞的诱导凋亡作用及其途径,为胃癌患者康复期的中药辅助治疗提供理论依据。方法:实验于2005-04/08在哈尔滨医科大学微生物教研室病毒实验室完成。①胃癌细胞SGC-7901的生长抑制实验:将对数生长期的胃癌细胞以每孔5×104加入培养板中,每孔体积100μL,4个实验孔加入不同浓度穴依次为50,100,200,400mg/L雪的薤白挥发油(由薤白的干燥鳞茎提取),以二甲基亚砜作为阴性对照。采用噻唑蓝比色法检测吸光度,细胞生长抑制率=穴1-实验组吸光度雪/对照组吸光度×100%。应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。②免疫细胞化学法检测p53,bcl-2蛋白表达:将对数生长的胃癌细胞SGC-7901以每孔2×105加入培养板,加入薤白挥发油(200mg/L);在对照孔中加入等量的细胞培养液。应用免疫细胞化学法进行细胞凋亡的定性与定量指标测定。结果评估:p53免疫反应定位于细胞核,bcl-2免疫反应定位于胞质和胞膜,细胞染色呈棕褐色或棕黄色为阳性,连续观察5个高倍视野,计算阳性细胞百分率。结果:①薤白挥发油50,100,200,400mg/L组SGC-7901细胞的生长抑制率分别为15.02%,32.33%,60.17%和93.41%;细胞凋亡率分别为10.03%,21.33%,47.65%和88.78%,均显著高于对照组(F=5.93,5.84,P<0.05)。②薤白挥发油组SGC-7901细胞中p53蛋白的阳性率显著高于对照组眼(56.06±7.31)%,(10.23±5.19)%(F=5.63,P<0.05)演。但两组bcl-2蛋白表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论:薤白挥发油对人胃癌细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡来实现,且这种凋亡作用呈剂量依赖性,提升p53蛋白表达可能是诱发胃癌细胞凋亡的作用途径之一。     

IMC-C225, an anti-epidermal growth factor receptor monoclonal antibody,for treatment of head and neck cancer

Squamous cell carcinoma (SCC) of the head and neck (H&N) remains a clinical challenge due to its high rate of locoregional disease recurrence. The importance of the epidermal growth factor receptor (EGFR) in the development and progression of many solid tumours (including SCC of the H&N) is well understood; increased expression is associated with enhanced tumour invasion, resistance to chemotherapy and decreased patient survival. Several approaches have been developed to achieve EGFR blockade as an anticancer treatment strategy, including an anti-EGFR monoclonal antibody (mAb), IMC-C225, which competetively binds to the extracellular receptor site to prevent binding by natural EGFR ligands (EGF and TGF-α). Preclinical studies evaluating this chimeric mAb in human cancer cell lines in vitro and human tumour xenografts in vivo have demonstrated its potent antitumour activity. The clinical efficacy of IMC-C225 appears to involve multiple anticancer mechanisms, including inhibition of cell cycle progression, induction of apoptosis, anti-angiogenesis, inhibition of metastasis and its ability to enhance the response to chemotherapy and radiation therapy. Phase I studies of IMC-C225 combined with chemotherapy or radiation for SCC of the H&N demonstrate excellent response rates in patients with recurrent or refractory disease. Phase II and III trials examining the efficacy and safety of these combinations are currently underway. To date, IMC-C225 has been well-tolerated, with skin rashes and allergic reactions being the most clinically important adverse events reported. IMC-C225 displays dose-dependent elimination characteristics and a half-life of approximately 7 days. Current recommendations for dosing include a 400 mg/m² loading dose, followed by weekly infusions of 250 mg/m².     

极低频磁场诱导人肝癌细胞的凋亡

背景：磁场能在体内或体外影响肿瘤细胞的生长与分裂，但目前尚无定论磁场能否在体外诱导人肝癌细胞的凋亡。目的：观察极低频磁场诱导人肝癌细胞SK-HEP-1凋亡的效果。设计：开放性实验。单位：上海交通大学生物技术研究所。材料：实验于2004-09／2005-01在上海交通大学生物技术研究所完成。人肝癌细胞SK-HEP-1购于上海中科院细胞库。方法：SK-HEP-1细胞以2.0&;#215;10^4L。接种，生长于含有体积分数为0．1的热灭活新生牛血清和2mmol／L L-谷氨酰胺的DMEM培养基中，50Hz，20mT磁场对人肝癌细胞SK-HEP-1连续作用8d；对照组细胞则在另一个培养箱中培养，除无磁场干预外，与磁场处理组细胞的生长条件完全一致。在细胞培养的第8天以DNA梯度电泳、Hoeehst33258染色和AO/EB双染色检测凋亡情况。主要观察指标：①有无DNA断裂后形成的梯度。②有无异常的细胞核。（3）凋亡细胞的比例。结果：（1）DNA梯度电泳检测细胞核间DNA裂解情况：SK-HEP-1细胞在极低频磁场处理8d后产生DNA片段条带，对照组中（无磁场处理）则未观察到此特征性DNA条带。②Hoeehst33258荧光染色细胞凋亡分析：Hoeehst33258染色被用来研究细胞中核的变化，在极低频磁场处理过的细胞中，存在许多包含有细胞核片段的凋亡小体，但在对照组中则几乎没有。同时，磁场处理的细胞观察到有细胞质皱缩现象，在某些细胞中，甚至细胞膜都不完整。③AO／EB双染细胞凋亡分析：极低频磁场处理后活细胞的比例（9．2％）与对照组（91．8％）相比极为低下，且伴有很高的细胞凋亡率（72.3％），对照组细胞凋亡率为4．2％，凋亡细胞中的大多数属于凋亡早期。磁场处理后坏死细胞的比例（18．5％）也比对照组（4％）要高。AO／EB双染结果显示AO/EB双染后细胞的不同形态，其中对照组的细胞呈亮绿色的完整圆球状，而磁场处理后的细胞则呈现出不规则的细胞形态且有凝集的细胞核。结论：50Hz，20mT极低频磁场能在体外诱导人肝癌细胞SK-HEP-1发生凋亡。     

极低频磁场诱导人肝癌细胞的凋亡

背景:磁场能在体内或体外影响肿瘤细胞的生长与分裂,但目前尚无定论磁场能否在体外诱导人肝癌细胞的凋亡。目的:观察极低频磁场诱导人肝癌细胞SK-HEP-1凋亡的效果。设计:开放性实验。单位:上海交通大学生物技术研究所。材料:实验于2004-09/2005-01在上海交通大学生物技术研究所完成。人肝癌细胞SK-HEP-1购于上海中科院细胞库。方法:SK-HEP-1细胞以2.0×104L-1接种,生长于含有体积分数为0.1的热灭活新生牛血清和2mmol/LL-谷氨酰胺的DMEM培养基中,50Hz,20mT磁场对人肝癌细胞SK-HEP-1连续作用8d;对照组细胞则在另一个培养箱中培养,除无磁场干预外,与磁场处理组细胞的生长条件完全一致。在细胞培养的第8天以DNA梯度电泳、Hoechst33258染色和AO/EB双染色检测凋亡情况。主要观察指标:①有无DNA断裂后形成的梯度。②有无异常的细胞核。③凋亡细胞的比例。结果:①DNA梯度电泳检测细胞核间DNA裂解情况:SK-HEP-1细胞在极低频磁场处理8d后产生DNA片段条带,对照组中(无磁场处理)则未观察到此特征性DNA条带。②Hoechst33258荧光染色细胞凋亡分析:Hoechst33258染色被用来研究细胞中核的变化,在极低频磁场处理过的细胞中,存在许多包含有细胞核片段的凋亡小体,但在对照组中则几乎没有。同时,磁场处理的细胞观察到有细胞质皱缩现象,在某些细胞中,甚至细胞膜都不完整。③AO/EB双染细胞凋亡分析:极低频磁场处理后活细胞的比例(9.2%)与对照组(91.8%)相比极为低下,且伴有很高的细胞凋亡率(72.3%),对照组细胞凋亡率为4.2%,凋亡细胞中的大多数属于凋亡早期。磁场处理后坏死细胞的比例(18.5%)也比对照组(4%)要高。AO/EB双染结果显示AO/EB双染后细胞的不同形态,其中对照组的细胞呈亮绿色的完整圆球状,而磁场处理后的细胞则呈现出不规则的细胞形态且有凝集的细胞核。结论:50Hz,20mT极低频磁场能在体外诱导人肝癌细胞SK-HEP-1发生凋亡。     

低频超声联合微泡造影剂诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡的实验研究

目的探讨低频超声联合微泡造影剂对人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡的影响。 方法将培养的人胆囊癌GBC-SD细胞分为4组,每组设5个复孔。其中空白对照组不进行任何处理;微泡组加200 μl的微泡造影剂混匀,使微泡浓度为20%,不进行超声辐照;低频超声组以超声辐照声强为0.45 W/cm²、超声脉冲波频率为1 MHz的低频超声连续波辐照,连续辐照30 s,不加造影剂;联合组加入200 μl的微泡造影剂,混匀后以1 MHz低频超声,连续波辐照30 s。各组以CCK-8法检测细胞增殖活性,并用流式细胞仪测定各组细胞的凋亡情况。 结果空白对照组、微泡组、低频超声组、联合组GBC-SD细胞增殖活性分别为0.9272±0.1173、1.0088±0.0628、0.2116±0.0101、0.1470±0.0029。联合组细胞增殖活性低于空白对照组、微泡组、低频超声组,差异均有统计学意义（t=14.846、30.637、13.661,P均<0.05）。各处理组间细胞凋亡率差异有统计学差异（F=2390.900,P<0.05）,联合组细胞凋亡率为0.682±0.022,显著高于空白对照组的0.073±0.005、微泡组的0.031±0.003、低频超声组的0.259±0.012,差异均有统计学意义（P均<0.05）。 结论低频超声联合微泡造影剂能降低体外培养的人胆囊癌GBC-SD细胞增殖活性,明显诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡。     

Expression of transforming growth factor alpha and epidermal growth factor receptor in human bladder cancer.

We analysed the expression of epidermal growth factor receptor (EGFr) and transforming growth factor alpha (TGF-alpha) in human bladder tumours. Tumour biopsies were obtained from 54 patients with primary bladder cancer (18 stage T1 and 36 stage T2-4). The protein and mRNA expression of EGFr and TGF-alpha were quantified by ELISA and competitive RT-PCR, respectively. The EGFr protein level was significantly increased in T2-4 tumours (0.44 x 10(-11); 0.0-27.5 x 10(-11) mol/g) compared with T1 tumours (0.0; 0.0-2.0 x 10(-11) mol/g) (median; range; 2p<0.01). The EGFr protein and mRNA level correlated (Spearman r=0.45, 2p<0.005, n=40). Co-expression of TGF-alpha protein and EGFr protein was significantly associated with muscle invasive tumours (T2-4) (chi-squared=7.9, df=3, p<0.05) and the TGF-alpha protein level correlated significantly with EGFr protein expression (Spearman r=0.56, 2p<0.0001, n=54). While tumour stage correlated with survival, no correlation was observed between survival and the expression of EGFr and/or TGF-alpha. In conclusion, human bladder tumours express both EGFr and TGF-alpha. The expression of EGFr and TGF-alpha are closely correlated, and the expression of EGFr and co-expression of EGFr and TGF-alpha correlate with tumour stage.