1-磷酸鞘氨醇受体的研究进展

1-磷酸鞘氨醇S1P(Sphingosine 1-phosphate,S1P)是调节细胞内外多种生物学功能的重要信号分子之一,作用于S1P受体后,在很多生理和病理过程中发挥重要的调节作用。Sphk-S1P-S1PR信号通路及其在炎症、肿瘤、动脉粥样硬化、自体免疫系统疾病、神经系统疾病等多种疾病中的作用已成为目前研究的热点之一。越来越多的S1P受体调节剂被研发。     

CYP1B1、NQO1基因多态性与肺癌易感性关系的研究

目的研究内蒙古地区蒙古族与汉族人群的CYP1B1和NQO1基因多态性及吸烟状况与肺癌易感性的关系。方法采用PCR-RFLP技术对CYP1B1基因L432V位点和NQO1基因C609T位点多态性进行检测。结果 (1)CYP1B1基因L432V位点基因型分布频率在蒙古族和汉族健康人群中差异无统计学意义(χ2=1.220,P> 0.05);NQO1基因C609T位点基因型分布频率在蒙古族和汉族健康人群中差异无统计学意义(χ2=0.221,P> 0.05)。(2)在蒙古族和汉族人群中,NQO1 C/T和T/T基因型有明显增加患肺癌风险性的作用(汉族人群OR:1.461,2.278,P <0.05;蒙古族人群OR:1.493,2.040,P <0.05),而CYP1B1 C/G和G/G基因型无明显增加患肺癌风险性的作用(汉族人群OR:1.271,1.614,P> 0.05;蒙古族人群OR:0.970,1.758,P> 0.05)。(3)在汉族人群中,携带CYP1B1 C/G+G/G基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.152,P <0.05);携带NQO1 C/C、C/T+T/T基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.172,2.613,P <0.05)。在蒙古族人群中,携带CYP1B1 C/C、C/G+G/G基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:1.409,1.765,P <0.05);携带NQO1 C/C、C/T+T/T基因型的吸烟者患肺癌的危险性高于携带C/C的非吸烟者(OR:2.479,2.729,P <0.05)。结论 (1)CYP1B1基因L432V位点基因型以及NQO1基因C609T位点基因型在内蒙古地区蒙古族和汉族健康人群中的分布不具有种族差异。(2)NQO1 C/T和T/T基因型显著增加内蒙古地区蒙古族和汉族患肺癌的易感性。(3)在蒙古族和汉族人群中,CYP1B1 C/G+G/G基因型以及NQO1 C/T+T/T基因型显著增加吸烟者患肺癌的易感性。     

海南州首例甲型H1N1流感病例的发现与处置

<正>2009年3月在墨西哥等国家发生的甲型H1N1流感疫情蔓延迅速,已成为全球高度关注的重大公共卫生事件。6月11日世界卫生组织将这次流感流行的警告级别提高到6级[1],2009年5月10日,四川省报告1例甲型H1N1流感疑似病例,被国家确诊为中国内地首例甲型H1N1流感病例[2],2009年9月5日青海省首次确诊为甲型H1N1流感病例[3],2009年9月24日,海南州首次确诊为甲型H1N1流感病例。     

Plk1在胰腺癌细胞中的表达及其临床意义

目的探讨胰腺癌细胞系中Plk1表达的意义。方法以胰腺癌细胞株(AsPC-1、PANC1、BxPC3)和正常胰腺细胞株(HPDE6C7,一种永生但非转化的胰腺上皮细胞来源的细胞株)为研究对象,应用RT-PCR检测Plk1 mRNA的表达,用Western blot检测Plk1蛋白的表达。结果 Plk1 mRNA和Plk1蛋白在胰腺癌细胞中均有高表达,而在正常胰腺细胞株中几乎不表达。结论 Plk1在胰腺癌细胞中的表达具有一定肿瘤特异性,有可能成为胰腺癌治疗的新靶标。     

焦磷酸测序技术检测SLCO1B1基因多态性方法的建立

目的:建立SLCO1B1A388G和T521C单核苷酸多态位点的焦磷酸测序方法,分析中国健康人群中分布频率。方法:制备300例健康人外周血gDNA,应用PyroMark ID焦磷酸测序仪进行多态位点分型分析。并通过重复性检验和毛细管电泳测序验证方法正确性。结果:建立了SL-CO1B1A388G和T521C多态性分析的焦磷酸测序新方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠。在300例标本中,388A、388G、521T、521C等位基因频率分别为28%、72%、89.5%和10.5%,符合Hardy-Weinberg平衡。结论:焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测SLCO1B1A388G和T521C单核苷酸多态性,特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要。     

6种药物对有机阴离子转运多肽OATP1B1及其基因多态性A388G、T521C转运作用的影响

目的 研究6种药物对有机阴离子转运多肽OATP1B1及其基因多态性A388G、T521C转运作用的影响。方法 体外培养稳定高表达OATP1B1和OATP1B1基因多态性A388G、T521C的人胚肾细胞（HEK293）株,高表达空白载体（Mock）的HEK293细胞为空白对照,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测各转运体细胞中mRNA表达;放射性标记化合物³Hestrone sulfate作为转运底物、利福平作为阳性抑制剂验证各高表达细胞的转运活性;测定30 μmol·L^-1的达比加群、辛伐他汀、替格瑞洛、卡培他滨、多西他赛、依那普利对各细胞³H-estrone sulfate摄入活性的抑制作用,并依据抑制试验结果,进一步测定辛伐他汀、替格瑞洛、多西他赛对转运体细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）。结果 HEK293细胞内导入的各种转运体基因都呈现良好的复制表达;OATP1B1、OATP1B1/A388G、OATP1B1/T521C对底物³H-estrone sulfate（5 μmol·L^-1）的转运活性分别为Mock细胞的39、49和48倍,30 μmol·L^-1利福平添加后,可将细胞的转运活性抑制到50%以下;辛伐他汀、替格瑞洛、多西他赛对OATP1B1的抑制作用较强,30 μmol·L^-1给药的转运活性分别为对照组的（40.09±1.95）%、（33.82±0.61）%、（45.08±0.22）%;辛伐他汀对OATP1B1、OATP1B1/A388G、OATP1B1/T521C的IC₅₀分别为14.2、＞100、＞100 μmol·L^-1,替格瑞洛的IC₅₀分别为19.1、68.4、＞100 μmol·L^-1,多西他赛的IC₅₀分别为17.6、22.9、19.3 μmol·L^-1。结论 OATP1B1基因多态性在一定程度上改变了抑制剂对转运体活性的影响程度。     

结肠癌组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达

目的 检测结肠癌组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达,探讨其临床病理意义.方法 应用免疫组化SP法分别检测49例结肠癌组织及49例配对远离结肠癌手术切缘的正常组织中KISS-1和KAI-1蛋白的表达.结果 结肠癌组织及配对正常组织中KISS-1蛋白阳性表达率分别为34.69%和87.75%,差异有统计学意义（P＜0.05）;KAI-1蛋白阳性表达率分别为32.65%和95.92%,差异有统计学意义（P＜0.05）;二者在结肠癌组织中的表达均与浸润深度及淋巴结转移相关,且二者的表达呈正相关关系.结论 KISS-1和KAI-1的表达与结肠癌的发生发展、浸润转移有关,联合检测二者结肠癌组织中的表达可为结肠癌早期诊断及治疗提供临床参考.     

影像检查在孕妇甲型H1N1流感重症肺炎中的诊断价值

甲型H1N1流感是一种急性呼吸道传染病,如果治疗不及时,部分患者病情可迅速发展,重症及危重症病例可并发严重肺炎,甚至死亡[1].高危人群包括妊娠期妇女.本文回顾性分析我院收治的15 例妊娠期甲型H1N1流感并发重症肺炎患者的胸部影像表现,以进一步探讨该类患者影像学特点.     

人谷胱甘肽S-转移酶P1基因及其人群多态性

人类细胞质谷胱甘肽Ｓ转移酶(ｈＧＳＴｓ)超基因家族主要包括4个家族:Ａ、Ｍ、Ｔ、Ｐ(按旧命名系统分别为α、μ、θ、π)[1],其中ＧＳＴＭ1以及ＧＳＴＴ1的人群多态性以及与疾病易感性关系的研究开展较早,也有了一定的积累[2～4]。ＧＳＴＰ1的人群多态性问题则是近年来才引起医学界的注意。ｈＧＳＴＰ1是ｈＧＳＴｓ家族中酸性同工酶Ｐ1(有些文献中命名为ＧＳＴπ)的编码基因。1989年Ｂｏａｒｄ等人分离了人类ＧＳＴＰ1基因的ｃＤＮＡ克隆,将其定位于染色体的11ｑ13,并首次报道了ＧＳＴＰ1基因的外显子5(ＩＣｅ105→Ｖａｌ)和外显子6(Ａｌａ…     

甲型H1N1流感临床治疗探讨

甲型H1N1流感又称为A（H1N1）型流感、人感染猪流感。2009年4月30日世界卫生组织、联合国粮农组织和世界动物卫生组织宣布,一致同意使用A（H1N1）型流感指代当时疫情,并不再使用“猪流感”一词。中国卫生部门则相继将原“人感染猪流感”改称为“甲型H1N1流感”。甲型H1N1流感的传播途径主要通过飞沫等经呼吸道传播,也可通过口腔、鼻腔、眼睛等处黏膜直接或间接接触传播。接触患者的呼吸道分泌物、体液和被病毒污染的物品亦可能造成传播。由于人群普遍易感,所以笔者就甲型H1N1流感临床治疗做一探讨。     

银杏叶中金松双黄酮的核磁共振谱分析

通过对银杏叶中金松双黄酮(Sciadopitysin)的~1H-NMR,NOEDS,~(13)C-NMR,DEPT及~1H-~1H COSY,~(13)C-~1H COSY和Long-range ~(13)C-~1H COSY谱的综合分析,确定了其结构和信号归属,为这一类双黄酮化合物的结构鉴定提供了进一步的依据。     

二苯乙烯苷预防性干预大鼠动脉硬化对其ICAM-1、VCAM-1及VEGF表达的影响

目的观察二苯乙烯苷(TSG)预防性给药对动脉粥样硬化大鼠主动脉ICAM-1、VCAM-1及VEGF表达的影响,探讨TSG抗动脉粥样硬化可能机制。方法SD大鼠随机分为6组,高脂饲料造模,同时预防性给予不同剂量TSG(30、60、120mg.kg-1.d-1)及辛伐他汀(2mg.kg-1.d-1),12wk后,测定血清总SOD活力和MDA含量,Westernblot观察各组大鼠主动脉ICAM-1、VCAM-1及VEGF的蛋白表达,RT-PCR分析ICAM-1和VCAM-1的基因表达,免疫组化观察VEGF表达。结果TSG能够明显提高大鼠血清总SOD活力,降低MDA水平,对动脉ICAM-1、VCAM-1及VEGF的表达均有明显抑制作用。结论TSG对实验性动脉粥样硬化大鼠动脉具有保护作用,其机制可能与其抗氧化作用、调节细胞因子分泌有关。     

三七接骨丸中三七的质量控制标准研究

目的建立三七接骨丸中三七的快速检测方法及含量测定方法。方法采用薄层色谱法快速检测三七接骨丸中的三七药材,采用HPLC法测定三七中主要成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1的含量：采用Hibar ODS C18（4.6×250mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,柱温30℃,检测波长203nm。结果人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1分别在0.01270mg·mL-1~0.4064mg·mL-1（r=0.9997）、0.01416mg·mL-1~0.4530mg·mL-1（r=0.9998）、0.0054mg·mL-1~0.1742mg·mL-1（r=0.9999）范围内线性关系良好,平均回收率分别为人参皂苷Rb195.41%（RSD=0.78%,n=6）、人参皂苷Rg195.32（RSD=0.39%,n=6）、三七皂苷R194.74%（RSD=0.82%,n=6）。结论该方法准确有效、重复性好,可作为三七接骨丸中三七的质量控制方法。     

HPLC法测定大鼠血清中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1的含量

目的 建立测定大鼠血清中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1含量的方法.方法 采用Kromasil 100-5C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙睛-0.2％磷酸水溶液,梯度洗脱;紫外检测波长203 nm,流速1 ml/min,柱温25℃.结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1均在0.2～5...     

HPLC-MS/MS测定绿豆中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1

目的建立绿豆中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的测定方法。方法样品经70%甲醇提取、HLB柱净化后,用高效液相色谱串联三重四极杆质谱进行分析测定。结果黄曲霉毒素G2、B2在0.75~30 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,黄曲霉毒素G1、B1在2.5~100 pg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r>0.999。回收率在61.5%~107.0%之间。结论本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于绿豆中黄曲霉毒素的测定。     

CAPD患者早期应用缬沙坦意义的初步探讨

目的：通过分析CAPD患者血中血浆C反应蛋白、血肌酐、尿素清除指数、24h尿量、糖化血红蛋白水平等指标间关系,探讨缬沙坦在CAPD早期应用的意义。方法：测定60例CAPD患者血浆C反应蛋白、血肌酐、尿素清除指数、24h尿量、糖化血红蛋白水平,分析缬沙坦组和对照组指标间的差异,并对比两组间心血管疾病发生率及糖化血红蛋白差异。结果：CAPD患者两组间各观察指标存在显著差异;缬沙坦组在心血管疾病发生率明显低于对照组,糖化血红蛋白水平明显低于对照组。结论：CAPD患者早期应用缬沙坦对于改善终末期肾病患者体内微炎症状态、保护残肾功能、稳定血糖代谢具有重要意义。     

HLA-DRBl等位基因多态性对乙型肝炎患者预后的影响

目的研究HLA-DRBl等位基因多态性与河南汉族乙型肝炎预后的相关性。方法以河南汉族慢性乙型肝炎、乙型肝炎病毒携带者、原发性肝癌、健康组对照组为研究对象,应用聚合酶链反应-序列特异性引物技术（PCR-SSP）对研究对象的HLA-DRB1等位基因多态性进行分析比较。结果 HLA-DRB1＊0701、1001、1201、1501在河南汉族慢性乙型肝炎组分布频率显著高于健康对照组（P〈0.05）,而HLA-DRB1＊1301（2）显著低于健康对照组（P〈0.05）;HLA-DRB1＊0701、1001、1201、1501在河南汉族慢性乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带者组分布频率差异无统计学意义（P〉0.05）;HLA-DRB1＊1501在原发性肝癌组分布频率显著高于健康对照组（P〈0.05）,RR=13.72。结论等位基因HLA-DRB1＊0701、1001、1201、1501是河南汉族慢性乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带者的易感基因,HLA-DRB1＊1501是原发性肝癌的易感基因,HLA-DRB1＊1301（2）是河南汉族乙型肝炎的保护性基因     

阻塞性睡眠呼吸暂停患者外周血内皮祖细胞及 促血管生成因子水平研究

摘要： 目的 观察阻塞性睡眠呼吸暂停 （OSA） 患者外周血内皮祖细胞 （EPC） 不同亚族和促血管生成因子水平的变化, 探讨不同程度 OSA 患者外周血 EPC 对血管修复的可能性。方法 选取 90 例 OSA 患者和 30 例健康志愿者 (对照组), 根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)将 90 例 OSA 患者均分为轻、 中、 重度 OSA 组。密度梯度离心法提取单个核细胞, 依据乙醛脱氢酶(ALDH)活性对 EPC 进行分选, 流式细胞仪联合 CD133、 CD34、 含激酶域插入片段受体 (PE-KDR)相应细胞表面标志物测定 CD133+ KDR+ EPC 及 CD133+ CD34+ EPC、 CD34+ KDR+ EPC、 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 的水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者外周血低氧诱导因子-1α(HIF-1α), 血管内皮生长因子(VEGF)及基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的水平。结果 对于外周血 CD133+ KDR+ EPC、 CD133+ CD34+ EPC、 CD34+ KDR+ EPC 水平, 重度 OSA 组>中度 OSA 组>轻度 OSA 组>对照组 （均 P < 0.05）; 轻、 中度 OSA 组的外周血 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 水平高于对照组, 重度 OSA 组低于其他 3 组 （均 P < 0.05）; 血清 HIF-1α、 VEGF 均是重度 OSA 组>中度 OSA 组>轻度 OSA 组>对照组, SDF-1α水平为重度 OSA 组<中度 OSA 组<轻度 OSA 组<对照组 （均 P < 0.05）。结论 OSA 患者可能都会诱导动员并招募大量无效 EPC, 其数量庞大, 但直接参与修复内皮的 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 并未增加, 尤其对于重度 OSA 患者甚至有可能减少, OSA 减弱了修复内皮的可能性, 加重了内皮损伤, 从而增加心血管事件的发生风险。     

自噬相关蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达及相关性研究

目的：探讨自噬相关蛋白Beclin1、Atg1、mTOR在不同分化程度肺鳞癌(SCC)和腺癌中的表达情况及其相关性。方法：采用免疫组织化学方法,检测82例肺癌组织及17例癌旁正常肺组织Beclin1、Atg1、mTOR的表达情况。结果：癌旁组织中Beclin1、Atg1阳性率高,而mTOR的阳性率较低;SCC和肺腺癌组织中,随分化程度的降低,Beclin1、Atg1呈递减趋势,而mTOR的阳性表达呈递增趋势。相关性分析显示,不同分化程度SCC中Beclin1与Atg1表达呈正相关（R=0.609,P<0.01）,Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（R=-0.617,-0.444,P<0.01）;不同分化程度肺腺癌中,Beclin1与Atg1表达呈正相关（R=0.458, P<0.01）,Beclin1、Atg1分别与mTOR呈负相关（R=-0.497,-0.541,P<0.01）。结论: mTOR随SCC和肺腺癌分化程度的降低,表达逐渐增高,而Beclin1、Atg1表达逐渐降低,提示SCC和肺腺癌的恶变程度与自噬有关。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在腺样囊性癌中的表达和相关性研究

目的研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度（MVD）在腺样囊性癌（ACC）中的表达和相关性,并探讨它们在腺样囊性癌侵袭和转移生物学行为的机理。方法应用免疫组化SP法,检测35例腺样囊性癌、13例多形性腺瘤和10例正常唾液腺组织中HIF-1α、VEGF的表达和MVD计数。结果HIF-1α、VEGF、MVD计数在正常唾液腺组织、多形性腺瘤、ACC中依次增加,组间差异具有统计学意义（P〈0.05） ACC中MVD计数随着HIF-1α、VEGF表达的增强而升高（P〈0.05） ACC中HIF-1α、VEGF的表达呈正相关,r=0.69,（P〈0.001）。结论HIF-1α、VEGF、MVD在ACC中的表达有相关性,HIF-1α通过影响肿瘤血管的生成,使ACC具有相应的侵袭和转移的生物学行为,HIF-1α、VEGF、MVD可以作为判断ACC侵袭、转移及预后的重要指标。