基于UPLC-Q-TOF-MS的砂糖橘皮化学成分分析

目的:通过超高效液相色谱串联-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术对砂糖橘果皮化学成分进行快速分析和鉴定。方法:采用Aglient Zorbax Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱进行色谱分离,流速0.6 m L·min~(-1),柱温35℃,进样体积0.5μL。飞行时间质谱,采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下采集数据,质量扫描范围设置为m/z 100~1 000,运行时间24 min,使用质谱分析软件Peak view中的目标化合物筛查法,结合保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片鉴定和推测成分。结果:在所设定的LC-MS条件下,结合对照品及文献报道的质谱数据对砂糖橘果皮的甲醇提取液分析,共分离鉴定了31个成分,包括5个黄酮碳苷,6个黄酮氧苷,17个多甲氧基黄酮,1个生物碱和2个多酚类化合物。结论:研究中建立的检测方法简便、准确,为快速鉴定分析化学成分提供一种有效的分析方法,并比较全面地阐明了砂糖橘果皮化学组成,这为砂糖橘果皮成为供开发利用的柑橘资源提供科学依据。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS及谱效学的坤宁颗粒抗凝血活性质量标志物预测

目的：对坤宁颗粒发挥抗凝血活性的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对坤宁颗粒的化学成分进行分析,检测条件为Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相乙腈(A)-25 mmol·L^-1乙酸铵水溶液(B)梯度洗脱(0～5 min,5%～22%A;5～10 min,22%～30%A;10～15 min,30%～95%A;15～20 min,95%～5%A;20～30 min,5%A),流速0.2 m L·min^-1,柱温30℃,进样量1μL;电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测模式。通过网络药理学方法对化学成分的靶点与异常子宫出血(AUB)的靶点进行交互分析,利用网络拓扑分析筛选出关键成分;通过高效液相色谱法(HPLC)建立10批坤宁颗粒的指纹图谱,采用血液凝固法及纤维蛋白原平板法测定坤宁颗粒的抗凝血活性,建立其谱效关系;选择拓扑分析与谱效关系中共有的成分作为Q-Marker,并对其...     

基于谱效关系和网络药理学的淫羊藿抗骨质疏松物质基础及作用机制

目的:研究淫羊藿抗骨质疏松的物质基础并预测其作用机制.方法:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析14批淫羊藿的化学成分;以成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性为药效指标,采用偏最小二乘法回归分析(PLSR)建立UPLC-Q-TOF-MS/MS谱峰与ALP活性的谱效关系模型,筛选淫...     

基于HPLC指纹图谱的浙贝母质量评价

目的:建立浙贝母药材HPLC指纹图谱,为其质量控制提供比较全面的评价方法。方法:Welch Xtimate^TM C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-10 mmol·L^-1乙酸铵溶液(氨水调pH至10.0),梯度洗脱;流速0.8 mL·min^-1,柱温25℃,蒸发光散射检测器。利用化学计量学方法,包括相似度分析、聚类分析、主成分分析,对色谱数据进行分析。结果:该方法精密度、稳定性、重复性良好。测定了16批浙贝母药材,提取7个色谱峰作为指纹图谱共有峰,采用相似度评价、聚类分析和主成分分析等方法,对所收集的16批样品进行系统比较与归类,16批样品分为2类。结论:该法重复性好,简便可靠,可以为浙贝母的质量控制和评价提供依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析人参豆豉复合发酵物化学成分

该实验应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用对人参豆豉复合发酵物的化学成分进行分析鉴定,并探讨复合发酵对人参皂苷和大豆异黄酮等化学成分的转化规律.采用Waters Aequity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.7μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-0...     

基于谱效关联分析筛选竹叶椒挥发油抗菌质量标志物

目的建立基于谱效关联分析的竹叶椒挥发油抗菌质量标志物(quality marker,Q-Marker)的研究方法,为其质量控制提供参考依据。方法采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)建立竹叶椒挥发油指纹图谱,并进行不同产地竹叶椒相似度评价、聚类分析和主成分分析;考察不同产地竹叶椒挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、红色毛癣菌及须鲜毛癣菌的作用;采用灰色关联分析法探究竹叶椒挥发油中的化学成分与抗菌活性的相关性,筛选Q-Marker。结果 10批不同产地竹叶椒挥发油相似度良好,相似度均大于0.97。不同产地竹叶椒挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、红色毛癣菌和须鲜毛癣菌均具有抑制作用。灰色关联分析表明,柠檬烯与金黄色葡萄球菌关联度值较高,芳樟醇、侧伯酮与大肠杆菌、红色毛癣菌和须鲜毛癣菌关联度值较高。结论柠檬烯、芳樟醇和侧柏醇可作为竹叶椒挥发油抗菌的潜在Q-Marker。     

UPLC-Q-TOF-MS分析补肾强身片中化学成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对补肾强身片中的化学成分进行研究。方法:以Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 m L·min~(-1),柱温40℃,电喷雾离子源,正、负离子模式下采集数据。首先对有对照品的成分进行定性分析,对于多数没有对照品的成分,主要根据UPLC-Q-TOF-MS提供的准确相对分子质量和离子碎片信息并结合文献数据比对进行化学成分结构推测鉴定。结果:共鉴定了补肾强身片中50个化学成分,包括酚酸类19个、黄酮类25个、裂环环烯醚萜类4个、苯乙醇苷类1个、生物碱类1个,其中12个成分(原儿茶酸,红景天苷,原儿茶醛,绿原酸,金丝桃苷,异槲皮苷,特女贞苷,朝藿定C,淫羊藿苷,山柰酚,宝霍苷I,紫云英苷)通过与对照品比对进行定性分析。结论:UPLC-Q-TOF-MS可以简便、快速地对补肾强身片中化学成分定性分析,该研究丰富了补肾强身片中化学成分的信息,为补肾强身片药效物质基础研究、质量控制及其临床用药提供了参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的桑白皮大鼠体内入血成分研究

目的：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)初步分析大鼠口服给药桑白皮后的入血成分。方法：采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱;流速400μL/min;柱温40℃;进样量5μL。采用电喷雾离子源,正、负离子模式下采集一、二级质谱数据,利用自建二级质谱数据库及相应裂解规律匹配法,结合文献数据鉴定血清中化学成分。结果：在给药后的大鼠血清中分析表征出了10个化学成分,均为原型成分,依次为：3,4-二羟基苯甲醛、咖啡酸、2,4-二羟基苯甲酸、秦皮乙素、葛根素、7-羟基香豆素、壬二酸、桑色素、桑辛素P、6-姜酚。结论：血清中鉴定出的原型成分可能是桑白皮潜在的活性成分,为其药效物质基础研究提供了依据。     

“利咽”功效关联的金果榄质量标志物分析

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术、多元统计分析和网络药理学技术研究金果榄的“利咽”质量标志物（Q-Marker）。方法：首先采用UPLC-Q-TOF-MS技术辨识18批金果榄中的主要化学成分。在此基础上,一方面采用主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析筛选出造成组间差异的主要标志性成分;另一方面利用网络药理学技术预测潜在“利咽”成分,并对多元统计分析和网络分析所得化合物交集与核心靶点进行分子对接,验证质量标志物准确性。结果：UPLC-Q-TOF-MS共鉴定出金果榄中17个化合物,包括生物碱类、二萜内酯类、甾醇类等类型化合物。基于多元统计分析方法寻找到5个主要差异性成分,分别为非洲防己碱、药根碱、巴马汀、蝙蝠葛任碱和古伦宾。基于网络分析筛选出四氢巴马汀、巴马汀、蝙蝠葛任碱、去氧黄藤苦素、neoechinulin A、古伦宾共6个化合物为金果榄的潜在“利咽”成分;通过白细胞介素-6、表皮生长因子受体、前列腺素G/H合成酶2、基质金属蛋白酶-9和原癌基因酪氨酸蛋白激酶等关键靶点,以及乙型肝炎、甲型流感、人类嗜T细胞病毒感染、人巨细胞病毒感染和...     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的北青龙衣有效成分动态变化分析

采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析不同采集时期北青龙衣有效成分动态变化规律。用Marker View软件对6个采集时期18批样品测定数据进行主成分分析,差异性化合物通过Peakview 2.0/Masterview1.0软件,依据精确质量数和同位素峰度比确定分子式,再通过对照品及数据库的二级谱图比对、裂解规律分析,结合已有文献报道,确定结构式。结果表明不同采集期萘醌类有效成分含量发生了明显的变化,鉴定或推断了北青龙衣中38个萘醌类化合物结构,随着采收时间的变化大部分萘醌类成分含量逐渐下降。该方法快速、准确,为北青龙衣的化学成分鉴定与分析提供一种新的策略,为揭示不同生长期北青龙衣有效成分动态变化规律及确定其药材合理采收期提供基础资料。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS与化学模式识别研究厚朴温中汤合煎与单煎差异北大核心

目的:快速鉴定经典名方厚朴温中汤合煎与单煎的差异成分。方法:运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对厚朴温中汤10批合煎汤剂与10批单煎复合汤剂进行差异性成分鉴定。结果:以偏最小二乘法(OPLS-DA)分析结果VIP值大于2.5为依据从20批汤剂的差异性成分中共鉴定出41个化学成分。差异性成分多为黄酮类成分,主要来源于陈皮、甘草和木香。结论:厚朴温中汤合煎与单煎化学成分存在较大差异,主要差异性物质为黄酮类成分,文献研究表明部分差异特别显著的成分,例如橙皮苷、川陈皮素等是该方治疗胃肠疾病的有效成分。     

基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物研究

目的 建立基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物（Q-marker）研究方法,为其药效物质基础及质量控制研究提供依据。方法 采用超高效液相色谱法（UPLC）建立10批肉苁蓉指纹图谱。利用H₂O₂建立细胞氧化损伤模型,以活性氧自由基半数抑制率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量为药效指标测定肉苁蓉抗氧化能力。通过主成分分析、皮尔逊相关性分析和偏最小二乘法-回归分析共同构建谱效关系,并对筛选出的活性成分进行药效验证。结果 建立了肉苁蓉的UPLC指纹图谱,共确定了17个共有峰。基于谱效关联分析筛选出9个成分,活性成分验证结果显示京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、管花苷A具有抗氧化活性且呈浓度依赖性。结论 基于谱效关系探讨了肉苁蓉的Q-marker,为其药效物质基础及质量标准提升提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的“略麻1号”茎秆与块茎化学成分分析

目的 对“略麻1号”茎秆与块茎化学成分进行比较研究。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）,Xbridge BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^–1;扫描方式采用正、负离子Full-ddMS²模式下采集数据;结合对照品、相关文献及质谱裂解规律对样品中成分的二级质谱数据进行分析。结果 从“略麻1号”茎秆中共鉴定出153个化合物,包括酚类20个、有机酸类46个、黄酮类11个、氨基酸类12个、生物碱类14个、其他类50个;从“略麻1号”块茎中共鉴定出126个化合物,包括酚类21个、有机酸类36个、氨基酸类13个、生物碱类11个、其他类45个。结论 “略麻1号”茎秆和块茎在物质基础上差异较大,在开发应用中应予以区别,茎秆具有较高的开发应用价值。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和GC-MS技术结合网络药理学探究辣木叶治疗便秘的作用机制

目的和方法：应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS）和气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）技术对4个品种辣木叶（传统印度种YD,印度种的改良种PKM1,PKM1的改良种PKM2,红河一号品种HH）中的化学成分进行定性分析,结合网络药理学手段研探究辣木叶治疗便秘的潜在分子机制和物质基础。结果 UPLC-Q-TOF-MS法采用正负离子扫描模式,根据精确相对分子质量数据和一级、二级质谱碎片离子,结合对照品信息和文献数据从4种辣木叶中共鉴定20个非挥发性共有成分;采用GC-MS法将色谱峰信息与NIST Version 1.7谱库进行检索对比,4种辣木叶中共鉴定出19个挥发性共有成分。通过SwissTargetPrediction数据库和SEA数据库对辣木叶鉴定出的共有成分靶点进行预测,整合、去重后共得到674个化学成分靶点;利用GeneCards数据库检索便秘“constipation”关键词,得到1 086个便秘相关的靶点;通过Venny平台将化学成分靶点和便秘靶点映射后得到88个交集靶点,并绘制韦恩图。利用STRING数据库和Cytoscape软件绘制蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络图;通过Metascape平台进行辣木叶治疗便秘进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析,结果表明辣木叶治疗便秘可能与5-羟色胺能突触通路、晚期糖基化产物/糖基化终末产物受体（AGE/RAGE）信号通路和癌症通路等通路有关;同时利用Cytoscape软件绘制“成分-靶点-通路”图,推测辣木叶治疗便秘的关键成分为腺苷、紫云英苷、香叶基丙酮、2-甲基-3-辛酮、棕榈酸和油酸酰胺;关键靶点可能为肿瘤坏死因子（TNF）、前列腺素内过氧化物合酶2（PTGS2）、白细胞介素-6（IL-6）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、肾上腺素能受体基因α 2A（ADRA2A）,进一步通过The Human Protein Atlas数据库推测这5个靶点在结肠、小肠、直肠等多组织中均有分布。结论 该研究较全面地阐明4个品种辣木叶中的挥发性和非挥发性化分,明确了辣木叶通过减轻炎症状态、促进肠道运动和分泌肠液等作用而治疗便秘,可为辣木叶的进一步质量评价与临床研究提供参考。     

基于液质联用技术与网络药理学的生姜质量标志物研究

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术和网络药理学对生姜的质量标志物（Q-Marker）进行预测分析。方法：采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术在正、负离子模式下对生姜中化学成分进行定性分析;运用网络药理学分析生姜传统功效的现代药理作用机制从而初步探索生姜的Q-Marker,并利用分子对接技术验证活性成分与靶点蛋白的结合活性。结果：通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术共分析得到生姜中48种化学成分,筛选后得到活性成分33个,以这33个活性成分为Q-Marker候选成分做网络药理学分析,获得靶点基因508个,作用于157条信号通路,如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路、大鼠肉瘤蛋白（Ras）信号通路等。该实验初步探究了8-姜酮（8-gingerone）、6-姜烯酚（6-shogaol）、8-姜酚（8-gingerol）、四氢姜黄素（Tetrahydrocurcumin）、1-脱氢-8-姜二酮（1-dehydro-8-gingerdione）和（E）-4-（3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl）-2-methoxy phenol等6个化合物发挥药效的作用机制并预测为生姜的Q-Marker。结论：本研究初步预测了生姜传统功效的Q-Marker。     

基于UPLC-Q-TOF-MS 技术快速分析裂叶独活中香豆素类成分

目的以超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用（UHPLC-Q-TOF/MS）技术建立裂叶独活中香豆素 类化学成分的快速定性分析方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18 色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）; 以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱;流速：0.25 mL·min-1;柱温：40 ℃;进样量：2 μL。 采用电喷雾离子源正离子TOF MS 全扫结合IDA-MS2 扫描模式收集样品质谱数据。应用PeakView 软件中Xic Manager、Formula Finder 等模块分析计算,并根据对照品裂解规律、相关文献和各色谱峰的二级碎片离子,鉴 定裂叶独活中香豆素类化合物。结果从裂叶独活中共鉴定出34 个香豆素类化合物,其中29 个为该植物相关 文献的首次报道。结论裂叶独活中不同类型香豆素具有独特的裂解规律。所建立的裂叶独活香豆素类化学成 分定性分析的方法准确、可靠、高效,适用于香豆素类成分快速鉴定,可为裂叶独活成分及其药效物质基础研 究提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的刺五加叶血清药物化学初步研究

目的对刺五加Acanthopanax senticosus叶进行血清药物化学初步研究。方法大鼠ig给予刺五加叶提取液,采集含药血清。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,通过比较相同色谱、质谱条件下刺五加叶提取物、空白血清及给药血清图谱,并利用Peakview和MetabolitePilot数据处理软件,根据质谱所提供的保留时间、精确相对分子质量及二级质谱裂解碎片来鉴定和推测其血中移行成分。结果刺五加叶提取液ig给药后从血清中检测出19个入血成分,其中9个为原型成分,10个为代谢产物。结论初步确定了刺五加叶的入血成分,为阐明其药效物质基础提供依据。     

UPLC-Q-TOF-MS/MS 技术分析参苓白术散化学成分及入血 成分

目的 研究参苓白术散的化学成分及大鼠灌胃给药参苓白术散后大鼠血浆中的化学成分。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术,通过Peak View 1.2和Chem Draw软件,根据保留时间、相对分子质量及二级离子碎片,结合对照品及文献数据,对参苓白术散的化学成分及入血成分进行鉴别。结果 从参苓白术散中鉴定出104个化学成分,主要为黄酮类和有机酸类成分;在灌胃后大鼠血浆中鉴定出27个入血成分,包括11个原型成分和16个代谢产物,主要的代谢途径为Ⅱ相代谢途径。结论 该研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术快速分析了参苓白术散的化学成分及入血成分,可为阐明参苓白术散的药效物质基础及其作用机制提供参考。     

UPLC-Q-TOF-MS分析芍药汤水煎液化学成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)研究芍药汤水煎液主要化学成分。方法:采用Waters ACQUITY UPLC CSH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),柱温25℃,流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL·min^-1;飞行时间质谱采用正、负离子扫描模式。通过对比对照品和文献报道的质谱数据,分析保留时间、精确分子离子峰和二级质谱裂解碎片,对芍药汤水煎液主要化学成分进行定性分析。结果:从芍药汤水煎液中鉴定出33个成分,其中7个萜类化合物、3个蒽醌类化合物、10个黄酮类化合物、8个生物碱类化合物。结论:初步明确了芍药汤水煎液中的化学成分,为其药效物质基础研究提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术研究炮制前后何首乌化学成分变化

目的 利用代谢组学分析方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。方法 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)方法,通过主成分分析和偏最小二乘判别分析等方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。结果 市售生首乌和制首乌化学成分差异较大,共鉴别45个差异化学成分,主要为蒽醌、二苯乙烯和鞣质等。结论 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术从整体角度分析了市售生首乌和制首乌的化学成分差异,为其炮制机理的阐释和临床应用奠定基础。