白藜芦醇诱导白血病KG-1细胞凋亡及对其细胞周期的影响

目的：探讨白藜芦醇诱导人白血病细胞株KG-1细胞凋亡的作用。方法：以不同浓度的白藜芦醇作用KG-1细胞,用噻唑蓝（MTT）比色法分析细胞生长状态;透射电镜观察KG-1细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术（FMC）测定细胞凋亡率和细胞周期分布。结果：白藜芦醇可明显抑制KG-1细胞增殖（P〈0．05）,与对照组比较,白藜芦醇作用后,KG-1细胞发生S期阻滞（P〈0．01）,且细胞凋亡率增高（P〈0．01）。结论：白藜芦醇能明显抑制KG-1细胞增殖,使细胞周期阻滞在S期。并能进一步诱导其凋亡。     

瑞香素对SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2/Bax基因mRNA表达的影响

目的探讨瑞香素对SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2/Bax基因mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法 (1)流式细胞仪检测1.95～250μg/mL的瑞香素作用SMMC-7721细胞后与细胞对照组(等体积、细胞培养代替瑞香素)比较其对细胞周期和凋亡的影响;(2)荧光定量PCR检测瑞香素作用SMMC-7721细胞后与细胞对照组比较其Bcl-2、Bax mRNA表达的变化。结果 (1)流式细胞仪检测结果显示瑞香素在1.95～250μg/mL浓度范围可诱导SMMC-7721细胞凋亡,凋亡率为35.9%～77.57%;(2)瑞香素组细胞处于G2/M和S期的百分率高于细胞对照组;(3)瑞香素在1.95～250μg/mL浓度范围时与细胞对照组比较Bcl-2基因表达明显降低,而在31.25～250μg/mL浓度范围时Bax基因表达则明显升高。结论瑞香素在1.95～250μg/mL浓度范围对SMMC-7721细胞生长均有不同程度的抑制作用;其机制可能与诱导细胞G2/M和S期阻滞,下调凋亡抑制Bcl-2基因的表达和上调促进细胞凋亡Bax基因的表达有关。     

Bcl-2/Bax基因在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时的表达变化

目的观察辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时Bcl-2/Bax变化,探讨Bcl-2/Bax与细胞凋亡之间关系。方法 20μmol/L辛伐他汀处理K562细胞24、48和72h;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测细胞色素C,RT-PCR技术检测Bcl-2/Bax基因。结果 20μmol/L辛伐他汀作用K562细胞24、48和72h,细胞凋亡率变化分别是（6.1±0.4）%,（14.2±0.4）%,（30.7±0.6）%;胞浆内细胞色素C显著高于对照组（P〈0.05）;抑凋亡基因Bcl-2显著降低,促凋亡基因Bax显著升高（P〈0.05）。结论辛伐他汀能诱导K562细胞凋亡,Bcl-2/Bax比值降低可能是辛伐他汀诱导K562细胞凋亡机制之一。     

维拉帕米对肝星状细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究维拉帕米对人肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡的影响以及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达的变化.方法:CCK-8法检测不同浓度的维拉帕米处理48 h对HSCs细胞增殖的抑制作用;漉式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测HSCs细胞的凋亡率;免疫组化SABC法检测Bcl...     

三七总皂苷对肺纤维化小鼠细胞凋亡及Bax/Bcl-2表达的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对小鼠肺纤维化肺组织细胞凋亡及凋亡调控因子Bax/Bcl-2的影响。方法将90只C57BL/6雄性小鼠分为假手术组、模型组和PNS组,每组30只。除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴入盐酸博莱霉素(BLM),假手术组小鼠气管内一次性滴入等体积的生理盐水。各组动物于7、14、28d随机处死10只,取肺组织,检测肺组织细胞凋亡及Bax/Bcl-2的蛋白及基因表达水平。结果与相同时间点模型组相比,肺组织气道上皮细胞的凋亡明显减轻(P<0.01),Bax蛋白、Bcl-2蛋白、Bax mRNA及Bcl-2mRNA的表达明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论肺纤维化时肺实质细胞凋亡增多,PNS通过调节Bax/Bcl-2的表达来抑制肺组织气道上皮的凋亡可能是其防治肺纤维化的作用机制之一。     

胆红素对L-02细胞凋亡以及Bcl-2及Bax体外表达影响的研究

目的探讨胆红素对健康人肝细胞系L-02凋亡的影响及Bcl-2、Bax基因对凋亡过程的调节。方法将不同浓度的胆红素(终浓度分别为0、100、150、200、250、300mg/L)作用于体外培养的健康人肝细胞L-02,采用流式细胞仪和碘化丙啶(PI)双标等技术观察细胞的凋亡率和免疫组织化学方法检测细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 Bcl-2蛋白的表达,对照组为阴性表达,低浓度组弱阳性表达,高浓度组强阳性表达。Bax蛋白的表达,对照组可见表达,低浓度组表达增多,高浓度组明显增多,强阳性表达。表明Bcl-2蛋白表达越强,凋亡指数越少;Bax蛋白表达越强,凋亡指数越强。结论 Bcl-2、Bax蛋白均参与了胆红素所诱导的L-02细胞凋亡的调节,并在细胞凋亡的发生、发展中起重要作用。     

醋酸铅对小鼠胸腺细胞凋亡及Bax和Bcl-2基因表达的影响

目的探讨醋酸铅诱导小鼠胸腺细胞凋亡及对Bax和Bc l-2基因表达的影响。方法以3种不同浓度的醋酸铅灌胃饲养小鼠46 d后,取胸腺组织,用琼脂糖凝胶电泳法检测胸腺细胞凋亡情况,Western blot法检测胸腺组织中Bax和Bc l-2的表达情况。结果铅处理组小鼠胸腺细胞有被降解的凋亡带,并且降解条带的量随着染铅剂量的增加而增加;小鼠胸腺细胞Bax表达量均高于对照组,并且表达量随着染铅剂量增加而升高(P<0.05);而Bc l-2表达量均低于对照组,且表达量随着染铅剂量的增加而递减(P<0.05),Bc l-2/Bax表达比明显降低(P<0.01)。结论醋酸铅可诱发小鼠胸腺细胞凋亡,,促进胸腺细胞中Bax基因的表达,抑制Bc l-2基因的表达,降低Bc l-2/Bax表达比。     

龙葵碱调控 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达及 caspase-3 活性诱导HepG2 细胞凋亡的研究

目的 探讨龙葵碱诱导 HepG2 细胞凋亡的作用机制。方法 透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端检测法 (TUNEL 法) 检测 DNA 断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测 Bcl-2 与 Bax 蛋白表达,比色法检测 caspase-3 活性的变化。结果 在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态。TUNEL 法发现龙葵碱高、中、低剂量组 HepG2 细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光。流式细胞术分析表明 0.4、2、10 μmol/L 龙葵碱作用 HepG2 细胞 24 h 凋亡率分别为 4.0%、8.5%、20.1%。同时,龙葵碱升高 caspase-3 活性,下调 Bcl-2 蛋白表达,上调 Bax 蛋白表达。结论 龙葵碱通过降低 Bcl-2/Bax 的值,激活 caspase-3 酶活性诱导 HepG2 细胞凋亡。     

Emodin induces apoptosis and down-regulates Bcl-2/Bax in leukemia KG-1a cells

目的 本研究观察大黄素( emodin)对人急性髓系白血病KG-1a细胞的增殖及凋亡影响,探讨Bcl-2/Bax基因在其中的作用.方法 采用四唑蓝比色试验(MTT)检测大黄素对KG-1a细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)测定细胞周期变化与凋亡情况;RT-PCR法检测大黄素作用后细胞Bcl-2/Bax mRNA表达的变化.结果 大黄素能抑制KG-1a细胞的增殖,作用48 h的半数抑制浓度(IC50)约为171.8 μmol/L流式细胞仪分析出现典型的亚二倍体峰(凋亡峰),将细胞阻滞于G0/G1期,大黄素作用后KG-1a细胞Bcl-2基因表达下调,而Bax基因表达上调,并呈量效关系.结论 大黄素可诱导KG-1a细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2,上调Bax基因表达水平有关.     

熊果酸通过影响Bax 和Bcl-2的表达诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡

目的: 探讨中药成分熊果酸(ursolic acid, UA)诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析UA作用后的MCF-7细胞Bax, Bcl-2, cytochrome c蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制. 方法: 采用细胞培养技术,用0, 10, 30和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,用Ho染细胞,在荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态变化. 用0, 20和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,用PI染细胞,在流式细胞仪上测定细胞周期的变化. 用0和50 μmol/L的UA处理MCF-7细胞24 h,采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法检测Bax, Bcl-2, cytochrome c蛋白表达,在荧光显微镜下拍照,用QWin图像分析软件测定Bax, Bcl-2, cytochrome c荧光灰度值. 结果: 用0, 10, 30和50 μmol/L 的UA处理MCF-7细胞24 h,随着UA浓度增加,在荧光显微镜下出现凋亡细胞增多,细胞呈现典型的凋亡形态学特征,核质浓集和凋亡小体. 用0, 20和50 μmol/L 的UA处理MCF-7细胞24 h,流式细胞仪检测亚G1峰比例分别为0.05, 0.22, 0.43与对照组5 mL/L DMSO比较,50 μmol/L 的UA 使MCF-7细胞中的Bax灰度(59.3±7.8, 213.6±7.4, P<0.01)和cytochrome c灰度(88.2±6.9, 188.1±15.4, P<0.01)增加, Bax/ Bcl-2灰度比值升高(1.0±0.1, 2.4±0.4, P<0.01),Bcl-2灰度(58.1±6.1, 92.1±12.4, P<0.01)稍有增加. UA促进线粒体放释cytochrome c进入胞质. 结论: UA诱导MCF-7细胞凋亡,其机制涉及到Bax/ Bcl-2比值升高引起线粒体释放cytochrome c所依赖的凋亡调节信号通路. 表明治疗乳腺癌,UA可能是有效的中药成分.     

紫外线对人晶状体上皮细胞凋亡的诱导及Bcl-2,Bax基因的影响

目的:研究紫外线照射体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)对凋亡的诱导、凋亡调控基因(Bax,Bcl-2)表达的变化,探讨紫外线诱导HLEC凋亡的机制。方法:以实验室培养的HLEC细胞株为研究模型,采用同一紫外线光源对HLEC进行照射。按紫外线照射时间将HLEC分为0,5,10,15及30 min组。采用Annexin V+PI双染流式细胞计数对HLEC凋亡进行检测,用原位杂交的方法检测各组Bax,Bcl-2 mRNA的表达。结果:随紫外线照射时间的延长HLEC凋亡率增加,Bcl-2阳性细胞率逐渐降低;而Bax阳性细胞率逐渐增加。HLEC凋亡率与Bcl-2和Bax的比率呈负相关(r=-0.874,P<0.05)。结论:紫外线照射可诱导HLEC凋亡,Bax和Bcl-2可能参与了紫外线诱导的HLEC凋亡的基因调控过程。     

小檗碱对HeLa细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究小檗碱对人宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制.方法 采用MTT法观察小檗碱对HeLa细胞增殖的影响,DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测,用Western blotting方法检测凋亡过程中相关蛋白Bel-2和Bax表达的变化.结果 小檗碱在体外试验中能明显抑制HeLa细胞的增殖,在一定的时间、剂量范围内呈时间-剂量依赖关系.20、40 mg/L小檗碱作用48 h后,细胞DNA片段分析可看到凋亡时降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,各组的凋亡率分别是(16.7±2.8)%、(29.6±4.4)%,与对照组(1.9±0.6)%和5 mg/L小檗碱组(2.3±0.8)%相比差异显著(P＜0.01).在凋亡过程中,Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下凋.结论 小檗碱体外能抑制HeLa细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下调有关.     

大鼠急性脊髓损伤后神经细胞Bcl-2与Bax比值及细胞凋亡的关系

目的:观察大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后不同时间点脊髓神经细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达及神经细胞凋亡的情况. 方法:选取28只SD大鼠,分为对照组(4只)和损伤组(24只),损伤组再分为六个小组,每组4只. 对照组行开椎板术不压迫脊髓,损伤组开椎板压迫脊髓造成大鼠急性损伤模型,损伤组于伤后 4 h, 8 h, 1 d, 3 d, 7 d和14 d 6个时间点取材,做切片备用;免疫组织化学检测Bcl-2, Bax, TUNEL检测细胞凋亡,图像分析各时间段检测结果进行半定量分析;统计学分析各待检数据. 结果:大鼠ASCI后4 h即可见脊髓内TUNEL阳性细胞,8 h表达达高峰,此后表达量逐渐下降,14 d时仍可见少量阳性细胞;大鼠ASCI后凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax出现表达,1 d时达高峰,14 d时仍有表达. Bcl-2/Bax值4和8 h时较低以后逐渐增大到一定值,Bcl-2/Bax值越小凋亡的细胞越多. 结论:大鼠ASCI后脊髓内存在神经细胞凋亡,bcl-2和bax相关基因的表达与细胞凋亡数有相关性.     

苯扎贝特对ox-LDL诱导内皮细胞凋亡基因Bcl-2/Bax的影响

目的 观察苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bcl-2/Bax的影响. 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),根据实验要求分为正常对照组、ox-LDL组、低浓度苯扎贝特(50μmol/L)组、中浓度苯扎贝特(100 μmol/L)组、高浓度苯扎贝特(200μmol/L)组.RT-PCR观察各组凋亡基因Bcl-2、Bax及Bd-2/BaxmRNA的变化. 结果 与正常对照组比较,ox-LDL组凋亡基因Bcl-2表达下降(P<0.05),凋亡基因Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05);不同浓度苯扎贝特组与ox-LDL组比较,Bcl-2表达增加(P<0.05),Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2/Bax上调(P<0.05),且呈浓度效应依赖关系. 结论 ox-LDL可引起内皮细胞抗凋亡基因Bcl-2表达下调,凋亡基因Bax表达上调,Bcl-2和Bax比值下降,从而引起内皮细胞凋亡增加;苯扎贝特可通过上调Bcl-2与Bax的比值抑制ox-LDL引起的内皮细胞凋亡,起到抗动脉粥样硬化作用.     

低氧预适应对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 :探讨低氧预适应对大鼠大脑中动脉 (MCA)缺血再灌注神经细胞凋亡 ,Bcl 2、Bax的表达及行为学计分的影响。方法 :成年Wistar大鼠 75只 ,随机分为 3组 :假手术组 ,缺血再灌注组 (对照组 )和低氧预适应组。采用动脉线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,假手术组除不插线外 ,其余同缺血再灌注组 ,低氧预适应组在低氧预适应后 12h制作脑缺血再灌注模型 ,低氧预适应后在大鼠MCA缺血 3h再灌注 1h、6h、12h、2 4h、4 8h不同时间点 ,进行脑切片的TUNEL染色 ,Bcl 2、Bax的免疫组化检测及大鼠的行为学计分。结果 :低氧预适应大鼠的神经细胞凋亡、Bax的表达和行为学计分均较对照大鼠减少 ,Bcl 2的表达较对照组增高 ,差异均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :低氧预适应的脑保护及改善神经功能的作用与其抑制神经细胞的凋亡有关 ;而增加Bcl 2及减少Bax的表达 ,可能是实现保护作用、改善大鼠神经功能的机制之一。     

异丙酚对睾丸扭转/复位后生精细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨异丙酚对睾丸扭转/复位后睾丸细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法30只青春期Wistar大鼠随机等分为3组.组1为对照组(左侧睾丸扭转720°即刻复位);组2、3为睾丸扭转/复位模型组(左侧睾丸扭转720°、2h后复住).组3睾丸复位前5min静脉注射异丙酚20mg/kg,继之输入5%异丙酚50mg/(kg·h)1 h;组1、2以生理盐水代之.术后24 h取左侧睾丸标本分别以原位缺口末端标记法(TUNEL)及免疫组织化学法检测凋亡细胞和Bcl-2、Bax基因蛋白表达.结果与组1比较,组2睾丸生精细胞凋亡指数升高和Bax表达增强(P＜0.01),而睾丸细胞Bcl-2表达下降(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值降低,睾丸病理损害明显.与组2比较,组3睾丸上述改变明显减轻(P＜0.01).结论异丙酚通过调节Bcl-2及Bax蛋白表达抑制睾丸扭转/复住所诱导的生精细胞凋亡增加.     

球状脂联素对晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的蛋白表达影响

目的:研究球状脂联素(gAd)抑制晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的相关蛋白表达。方法:体外用AGEs培养HUVECs,经四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记法检测细胞凋亡,免疫印记法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:AGEs作用HUVECs,经MTT和流式细胞仪检测,细胞凋亡具有AGEs浓度依赖性。相同浓度AGEs作用HUVECs时,gAd预处理组与非预处理组比较,明显抑制HUVECs凋亡。免疫印记结果显示gAd预处理组与非预处理组比较,gAd可明显抑制Bax蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达。结论:gAd可通过激活Bcl-2、抑制Bax蛋白表达,拮抗AGEs诱导HUVECs凋亡。