β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1在涎腺多形性腺瘤及其恶变中表达的研究

目的：检测正常涎腺组织、多形性腺瘤（Pleomorphic adenoma,PA）和癌在多形性腺瘤中（Carcinoma in pleomorphic adenoma,CPA）β-连环蛋白（β—catenin）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达情况及其表达间的相关性,探讨β—catenin、Cyclin D1在涎腺多形性腺瘤发生、复发及恶变中可能的作用。方法：用免疫组化S-P法结合计算机图像分析技术检测15例正常涎腺组织、45例涎腺多形性腺瘤（腮腺、颌下腺、腭腺各15例）、16例癌在多形性腺瘤中β-catenin及Cyclin D1的表达情况;并对β-catenin、Cyclin D1在涎腺PA、CPA中的表达情况进行相关性分析。结果：β-catenin在15例正常涎腺组织中均呈正常表达（细胞膜着色）,而Cyclin D1表达均呈阴性;β—catenin在PA和CPA中呈异质性表达（细胞膜着色减弱或缺失,细胞浆或核出现染色颗粒）,表达率分别为35．6％、81．2％,Cyclin D1在PA和CPA中的表达率为51．1％、87．5％,β-catenin、Cyclin D1在PA、CPA的表达均有显著性差异（P〈0．01,P〈0．05）。β—catenin异常表达和Cyclin D1的过表达在涎腺PA、CPA中均有显著的正相关（r=-0．587,P〈0．05）。结论：涎腺PA、CPA中均存在β-catenin异常表达和Cyclin D1的过表达,且两者的表达呈正相关,提示Wnt（Wingless＆Int）信号通路异常激活,导致β—catenin胞浆累积,而β—catenin的异常表达激活Cyclin D1引起细胞增殖和分化失控,在涎腺PA及CPA发生中可能具有一定作用。     

COX-2、cyclinD1在多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤中的表达及意义

目的：研究COX-2、cyclinD1在正常腮腺组织、多形性腺瘤（PA）和癌在多形性腺瘤中（CPA）的表达及相关性,探讨其在肿瘤复发、恶变中的作用.方法：应用免疫组化S-P法检测11例正常腮腺组织,40例PA及12例CPA中的COX-2和cyclinD1表达.结果：COX-2在PA初发瘤、PA复发瘤及CPA中的阳性表达率分别为34.4%、75%、83.3%,显著高于正常腮腺组织的9.09%（P＜0.05）,彼此间有显著性差异（P＜0.05）;cyclinD1在正常腮腺组织、PA初发瘤、PA复发瘤及CPA中的阳性表达率分别为0、37.5%、50%、75%,PA和CPA间阳性表达率有显著性差异（P＜0.05）,PA复发瘤中阳性表达率高于PA初发瘤,但无显著性差异（P＞0.05）;COX-2与cyclinD1在PA和CPA中的表达分别有显著相关性（P＜0.05）.结论：COX-2、cyclinD1在PA、CPA中的过表达与肿瘤的复发、恶变有明显关系,二者在PA、CPA的发生发展中可能具有一定的作用.     

CD44v6与COX-2在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及临床意义

目的 探讨CD44v6与环氧合酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）的表达与腮腺多形性腺瘤复发和恶化的相关性。方法 采用免疫组织化学法检测19例正常腮腺组织、25例初发多形性腺瘤、15例第一次复发多形性腺瘤、15例第二次复发多形性腺瘤和13例癌在多形性腺瘤组织中CD44v6与COX-2的表达,采用SPSS 15.0软件包分析CD44v6与COX-2与腮腺多形性腺瘤复发和恶化的相关性。结果 正常腮腺组织、初发多形性腺瘤、第一次复发多形性腺瘤、第二次复发多形性腺瘤与癌在多形性腺瘤中CD44v6阳性表达率分别为5.26%、44.00%、60.00%、93.37%和100.00%,COX-2阳性表达率分别为10.53%、40.00%、63.33%、93.37%和100.00%,各组CD44v6和COX-2阳性表达强度比较,差异有统计学意义（P<0.05）。正常腮腺组织中CD44v6和COX-2阳性表达率和表达强度显著低于其他各组（P<0.05）,初发多形性腺瘤与第一次复发多形性腺瘤组织中CD44v6阳性表达率和表达强度比较均无统计学差异（P>0.05）,2组COX-2表达强度比较无统计学差异（P>0.05）,但COX-2阳性表达率差异显著（P<0.05）;第二次复发多形性腺瘤组织中,CD44v6阳性表达率和表达强度以及COX-2表达强度显著高于第一次复发多形性腺瘤（P<0.05）,但2组COX表达阳性率无显著差异（P>0.05）;第二次复发多形性腺瘤组织与癌在多形性腺瘤组织中,CD44v6和COX-2阳性表达率和表达强度无统计学差异（P>0.05）。结论 CD44v6和COX-2能够通过协同作用,共同促进多形性腺瘤发生、侵袭、复发和恶化。     

CD44v6在腮腺多形性腺瘤中的表达

初步研究CD44v6在腮腺多形性腺瘤中的表达情况及其与肿瘤复发的关系.采用免疫组织化学SP法对初次手术后复发,又再次入院行复发灶切除术的多形性腺瘤病例10 例2 次术后石蜡标本及10 例正常腮腺组织石蜡标本进行CD44v6检测,分析其与腮腺多形性腺瘤复发关系.结果表明CD44v6在肿瘤组织中的表达高于正常腮腺组织,在复发多形性腺瘤中呈现低表达.CD44v6的表达变异可能与腮腺多形性腺瘤的复发有关.     

基质金属蛋白酶-2、CD44v6在腮腺多形性腺瘤中的表达研究

目的:探讨基质金属蛋白酶 -2 (MMP2 )、CD44v6在腮腺多形性腺瘤中的表达及其与肿瘤复发的关系。方法:采用免疫组化S- P法检测5 0例初发腮腺多形性瘤(PA ) ,3 2例复发腮腺多形性腺瘤(CPA)及10例正常腮腺组织中CD44v6和MMP2的表达。结果:CD44v6在初发瘤、复发瘤及正常腮腺组织中阳性表达率分别为5 4.0 0 %、78.13 %、2 0 .0 0 % ,彼此间有显著性差异(P <0 .0 5 ) ;MMP2在初发瘤和复发瘤组织中阳性表达率分别为48.0 0 %、5 3 .13 % ,显著高于正常腮腺组织的10 .0 0 % (P <0 .0 5 ) ,而初发瘤和复发瘤间阳性表达率无显著性差异(P >0 .0 5 ) ;CD44v6与MMP2在初发瘤及复发瘤中的阳性表达分别有显著相关性(P <0 .0 5 )。结论:MMP2、CD 44v6在腮腺多形性腺瘤中的过度表达与肿瘤的复发有明显关系,肿瘤复发可能是其本身所固有的生物学特性。     

Cyclin D1在腮腺多形性腺瘤及瘤旁涎腺组织中的表达

目的:检测Cyclin D1在腮腺多形性腺瘤及瘤旁涎腺组织中mRNA和蛋白水平的表达,探讨其在腮腺多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:分别通过RT-PCR和Western blot方法检测Cyclin D1在原发腮腺多形性腺瘤与瘤旁涎腺组织中mRNA和蛋白水平的表达情况;另外采用免疫组化法检测Cyclin D1在原发腮腺多形性腺瘤以及瘤旁涎腺组织石蜡组织标本中蛋白水平的表达情况。结果:RT-PCR和Western blot检测结果显示,CyclinD1在组织标本中mRNA和蛋白水平不仅在于肿瘤组织中有较强的表达,而且瘤旁涎腺组织中Cyclin D1也有一定量的表达。免疫组化检测结果显示,Cyclin D1在腮腺多形性腺瘤组织中有较高的表达,而在瘤旁涎腺组织中未见明显表达。结论:Cyclin D1可能参与腮腺多形性腺瘤的发生发展,有助于为临床诊断治疗提供一定的参考依据。     

Ki-67在腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织中差异表达的研究

目的：通过检测Ki-67在腮腺多形性腺瘤及瘤旁组织（肿瘤外1.0cm）中的差异表达,探讨其作为界定多形性腺瘤安全切除边界指标的可行性。方法：采用Real-time PCR、RT-PCR和Western blot检测Ki-67在原发多形性腺瘤与瘤旁组织中mRNA和蛋白水平的表达情况;采用免疫组化检测原发腮腺多形性腺瘤石蜡组织标本中Ki-67蛋白的表达情况。结果：RT-PCR和Real-time PCR结果显示：Ki-67在瘤旁组织中的表达显著低于肿瘤组织中的表达;免疫组化和Western blot结果显示Ki-67在瘤旁组织中未见明显表达。结论：多形性腺瘤瘤旁组织中Ki-67的表达明显低于肿瘤组织,提示肿瘤外1.0cm为安全切除边界。     

MMP-9和VEGF在腮腺多形性腺瘤中的表达研究

目的 研究MMP-9和VEGF在腮腺多形性腺瘤中的表达情况及其与肿瘤良恶性的关系。方法 应用荧光实时定量PCR和Western blotting方法检测32对多形性腺瘤及其瘤旁组织中MMP-9和VEGF的表达。结果 32例多形性腺瘤中26例为良性,6例为恶性。MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白表达量在多形性腺瘤组织中高于瘤旁组织（P＜0.05）;在恶性多形性腺瘤组织中高于良性多形性腺瘤组织（P＜0.05）。结论 MMP-9和VEGF在腮腺多形性腺瘤中高表达,并且可能与腮腺多形性腺瘤的恶变相关;腮腺多形性腺瘤肿瘤外1 cm为安全切除界限。     

PCNA和P21在腮腺多形性腺瘤中的表达及二者的相关性研究

目的：探讨PCNA及P21蛋白在腮腺良、恶性多形性腺瘤中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化法检测PCNA和P21蛋白在瘤旁正常组织（对照组）、良性多形性腺瘤（ PA）、恶性多形性腺瘤（ MPA）中的表达。结果：与对照组相比,PCNA、P21的阳性表达在PA组和MPA组中差异均具有统计学意义（P＜0.01）。 PA组与MPA组相比较,PCNA阳性表达差异存在统计学意义（P＜0.05）;而P21阳性表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：PCNA可客观反映PA、MPA细胞的增殖特性,对判断肿瘤的分化和预后有一定作用。 P21蛋白的过度表达可能对PA、MPA的早期发生起重要作用。 PCNA及P21蛋白在PA、MPA中的阳性表达是一致的。     

PTEN基因在腮腺多形性腺瘤中的表达及意义

目的:探究PTEN基因在腮腺多形性腺瘤的发生中基因水平上的作用。方法:将手术切除并经病理检查确诊的腮腺多形性腺瘤、腮腺多形性腺瘤瘤旁1cm腺体组织和舌下腺组织(舌下腺结石摘除的腺体)标本各30例,采用免疫组化法分析各组之间PTEN表达水平的差异性。结果:PTEN在腮腺多形性腺瘤中表达的阳性率低于腮腺多形性腺瘤瘤旁1 cm腺体组织,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN在腮腺多形性腺瘤中表达的阳性率低于舌下腺组织,差异有统计学意义(P<0.05);腮腺多形性腺瘤瘤旁1 cm腺体组织与舌下腺组织两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTEN基因的阳性表达对腮腺多形性腺瘤的发生有抑制作用。     

Cyclin D1,Cyclin E,c-Myc在涎腺良恶性多形性腺瘤中的表达研究

目的：研究cyclin D1,cyclin E,c-myc在涎腺多形性腺瘤中的表达,与临床生物学特性和细胞增殖的关系以及对于涎腺多形性腺瘤病理学诊断的意义。方法：采用免疫组化方法检测30例良性多形性腺瘤,30例细胞丰富型多形性腺瘤和30例恶性多形性腺瘤中cyclin D1、cyclin E、c-myc蛋白的表达水平,并与30例癌旁正常涎腺组织中的表达对比。结果：cyclin D1、cyclin E和c-myc在恶性多形性腺瘤中的阳性表达率明显高于良性和细胞丰富型多形性腺瘤（P〈0.05）,而三者在良性多形性腺瘤中的阳性表达率与在细胞丰富型多形性腺瘤的阳性表达率无统计学差异。cyclin E、cyclin D1和c-myc蛋白的异常表达与患者性别、是否复发、发生部位、肿瘤的大小无关（P〈0.05）。在恶性肿瘤中,cyclin D1的异常表达与肿瘤的TNM分期相关（P〈0.05）,cyclin E蛋白的表达于肿瘤的浸润性相关（P〈0.05）。c-myc的过表达与cyclin D1和cyclin E的阳性表达呈正相关。结论：cyclin D1、cyclinE、c-myc共同参与调控细胞周期,可作为预测多形性腺瘤恶变和预后的分子生物学指标之一,是多形性腺瘤病理学分类的依据之一。     

Fas-FasL在腮腺多形性腺瘤及腺样囊性癌中的表达及意义

目的　观察Fas FasL系统在腮腺正常组织、多形性腺瘤及腺样囊性癌中的表达 ,并探讨其意义。方法　应用免疫组化及图像定量分析技术 ,检测 2 1例正常腮腺、3 5例腮腺多形性腺瘤、3 2例腮腺腺样囊性癌中Fas和FasL的表达 ,并进行统计学处理。结果　Fas及FasL在腺样囊性癌中呈阴性表达 ,且与组织学类型、病理分级无相关性 ;而在正常腮腺及腮腺多形性腺瘤中均有明显表达 ,但多形性腺瘤中Fas及FasL表达低于正常腮腺 ,其差异具有显著意义 (P <0 .0 1)。结论　Fas FasL系统的表达及介导的凋亡失调与腮腺多形性腺瘤和腺样囊性癌的发生、转归有重要关系     

两种腮腺肿瘤及瘤旁腺泡细胞增殖与细胞凋亡的比较研究

目的：探讨细胞增殖与细胞凋亡在腮腺多形性腺瘤warthin瘤及其瘤旁腺泡中的变化与作用。方法：取30例腮腺多形性腺瘤、26例腮腺Warthin瘤及其瘤旁腺泡作流式细胞术（flow cytometry,FCM）研究。以ModFit LT软件进行细胞增殖分析,以Sub—G1法检测凋亡率。结果：腮腺多形性腺瘤的增殖指数（PI）与凋亡率分别为14．30和13．41,属最高值,其次是Warthin瘤,PI为9．95,凋亡率为8．24,而多变形性腺瘤瘤旁腺泡PI为9．53,凋亡率为9．56,Warthin瘤瘤旁腺泡PI和凋亡率分别为8．66和6．67,接近正常腺泡的PI和凋亡率（8．01和6．63）。总体上具有统计学意义（P〈0．05）。结论：腮腺多形性腺瘤及瘤旁腺泡PI和凋亡率处于高值,提示其瘤旁腺泡可能处于“准新生物”状态,可能成为肿瘤复发的发源地,而腮腺Warthin瘤及瘤旁腺泡PI和凋亡率接近正常预示着该肿瘤切除后极少复发。     

利用基因芯片技术筛查腮腺多形性腺瘤差异表达基因的研究

目的:研究腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织中差异表达的基因。方法:分别从5例腮腺多形性腺瘤组织和与其相对应的瘤旁组织中提取总RNA并纯化为mRNA,两种不同组织的mRNA分别逆转录合成有荧光分子标记的探针,然后与Agilent人全基因组芯片进行杂交,杂交信号用Agilent扫描仪扫描,结果用ImgGene 3.0软件分析。结果:腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织有差异表达的基因447个,其中表达上调185个,下调262个。结论:运用基因表达谱芯片可以筛选出腮腺多形性腺瘤相关基因。     

腮腺复发性多形性腺瘤的临床分析--附22例报告

目的：探讨腮腺多形性腺瘤复发、恶变的原因及临床治疗方法。方法：对22例腮腺多形性腺瘤复发患者进行回顾性分析和追踪调查。结果：多数腮腺多形性腺瘤复发病例肿块呈多灶性（18／22），手术越简单其复发率越高，复发间期越短（P＜0．05）。22人中有7例发生恶变，占31．8％，恶变与初发年龄较大有关（P＜0．05），与手术次数关系不大。末次手术分别采用浅叶切除术，腮腺全切术、扩大切除术，对7例有恶变者于术后辅以放射治疗。术后平均追踪54月，除1例多形性腺瘤恶变者于术后30月时肿瘤复发外，其余均未见复发。结论：不恰当的手术方式是导致腮腺性多形性腺瘤复发的直接原因。     

颌下腺鳞癌在多形性腺瘤中1例报告

癌在多形性腺瘤中又称恶性混合瘤，其发病部位以腮腺最常见，癌变组织类型以腺癌、未分化癌，粘液表皮样癌多见，癌变成分为鳞癌较少见，我科收治一例颌下腺鳞癌在多形性腺瘤中病人，报告如下：     

bcl-2 mRNA的表达和细胞凋亡在良、恶性多形性腺瘤发生中的意义

目的研究bcl-2和细胞凋亡在多形性腺瘤(PA)和恶性多形性腺瘤(MPA)发生中的作用.方法选取PA30例,MPA10例和正常腮腺组织10例为研究对象,进行bcl-2原位杂交染色和细胞凋亡的TUNEL染色.用图像分析仪对bcl-2的染色结果进行定量分析,并计算细胞凋亡指数,最后进行统计学分析.结果bcl-2 mRNA染色的阳性信号主要表达在腺管样的上皮细胞中,正常组和PA组之间无显著性差异(P>0.05),正常组和MPA组、PA组和MPA组之间均有显著性差异(P<0.05).凋亡细胞散在分布于腺管样的上皮细胞中.PA组的凋亡指数明显高于MPA组(P<0.05).bcl-2的阳性表达强度与凋亡指数呈显著的负相关.结论bcl-2 的低表达和凋亡指数的降低与多形性腺瘤的发生及恶变密切相关.     

Gli2基因在涎腺多形性腺瘤中的表达及其意义

目的:探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤和正常涎腺组织中的表达水平及其在多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:收集20例腮腺多形性腺瘤组织和20例相对应的瘤旁正常腮腺组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Gli2基因mRNA的表达水平,分析其表达变化,并探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤发生发展中的作用及其临床应用价值。结果:与正常腮腺组织相比,多形性腺瘤组织中Gli2基因mRNA的表达水平升高。结论:多形性腺瘤中Gli2 mRNA的高表达可诱导肿瘤细胞持续增殖,提示Gli2基因可能在涎腺多形性腺瘤的发生发展中具有重要作用。     

谷胱甘肽过氧化物酶-3在腮腺多形性腺瘤中的表达及意义

目的 :研究谷胱甘肽过氧化物酶-3(glutathione peroxidase-3,GPX-3)基因及蛋白在腮腺良、恶性多形性腺瘤中的表达,以明确GPX-3与腮腺多形性腺瘤发生、发展的相关性,为临床预测腮腺多形性腺瘤的发生及恶变提供理论依据。方法:采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测30例腮腺多形性腺瘤,30例腮腺多形性腺瘤的瘤旁2 cm腺体组织,以及10例恶性腮腺多形性腺瘤中的GPX-3 mRNA及蛋白的表达,对其相对表达量进行统计学分析。结果:GPX-3 mRNA和蛋白在腮腺良、恶性多形性腺瘤中的表达明显低于瘤旁腺体组织,且在腮腺恶性多形性腺瘤中的表达最低,差异有统计学意义(P<0.01)。GPX-3在腮腺多形性腺瘤中的表达与患者的年龄、性别及肿瘤大小无关,差异无统计学意义(P>0.05),且GPX-3在腮腺多形性腺瘤中的表达与肿瘤TNM分期及恶性成分比例有关,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GPX-3在腮腺良性多形性腺瘤中低表达,且在腮腺恶性多形性腺瘤中的表达最低,提示GPX-3的低表达与腮腺多形性腺瘤的发生及恶变密切相关。     

腮腺多形性腺瘤手术切除方式的选择

目的：探讨腮腺多形性腺瘤手术方式的选择依据和原则。方法：运用免疫组织化学方法,测定并比较细胞增殖活性相关抗原Ki-67在腮腺多形性腺瘤腮腺浅叶切除术后未复发病例、复发前病例、复发后病例及腮腺低度恶性肿瘤病例术后石蜡标本中的阳性表达率。使用四川大学华西公共卫生学院研制的PEMS3.1统计软件对实验数据进行统计学处理。结果：Ki-67阳性表达率在腮腺低度恶性肿瘤组最高,其次为腮腺多形性腺瘤手术复发后组,再次为复发前组,未复发组最低;两两比较发现,复发前、后组Ki-67阳性表达率与未复发组比较均有显著差异（P〈0.05）;复发前、后组之间Ki-67无显著差异（P〉0.05）;复发后组与低度恶性腮腺肿瘤组之间Ki-67亦无显著差异（P〉0.05）;复发前组与低度恶性腮腺肿瘤组之间Ki-67则有显著差异（P〈0.05）。结论：腮腺多形性腺瘤手术复发前者Ki-67增殖活性高于未复发者,但与低度恶性腮腺肿瘤比较,其增殖活性明显不同,因此手术方式仍可选择腮腺部分切除术,但应结合其组织病理学和增殖活跃的特点,加强术后随访。