腺病毒携带的人血管抑素基因抑制裸鼠卵巢癌生长的研究

目的研究腺病毒介导的人血管抑素基因对卵巢癌的治疗作用。方法建立人卵巢癌裸鼠动物模型,检测腺病毒介导的人血管抑素基因对肿瘤生长的抑制作用。结果人血管抑素基因可明显的抑制卵巢癌裸鼠移植瘤生长。结论腺病毒介导的人血管抑素基因在体内高效表达,并明显抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的肿瘤血管生成和肿瘤生长,为抗血管生成方法治疗卵巢癌的临床应用奠定了基础。     

基因转染内皮抑素与阿霉素协同作用对小鼠肝癌细胞的影响

目的 探讨内皮抑素作为一种抑制血管生成的蛋白,能否与阿霉素协同作用治疗肝细胞癌(HCC).方法 构建内皮抑素表达质粒和在BALB/c裸鼠皮下建立HepG2人肝细胞肝癌动物模型,用阿霉素和生长抑素表达质粒基因转染治疗.结果 构建的内皮抑素表达质粒在体内、外均可稳定表达.内皮抑素蛋白与阿霉素协同抑制肿瘤和血管内皮细胞的增殖.内皮抑素基因治疗及阿霉素均可抑制裸鼠皮下肿瘤的生长及新生血管的生成,并且呈现协同作用.内皮抑素基因转染下调了缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,而阿霉素仅能下调VEGF的表达.内皮抑素及阿霉素协同下调VEGF的表达.结论 内皮抑素及阿霉素联合作用对抑制HCC治疗有确切效果,内皮抑素可提高阿霉素对肝癌细胞生长的抑制.     

人内皮抑素基因的克隆与表达及其抑瘤作用的实验研究

目的 克隆人内皮抑素基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗裸鼠皮下人脑胶质瘤。方法 从人肝组织提取mRNA,用反转录聚合酶链反应技术克隆人内皮抑素基因,将其重组人pUC19,双氰末端终止法测定其核苷酸序列。构建非融合表达载体pDH-endo,使其在DH5α内经温度诱导表达,纯化该表达蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性。经荷瘤裸鼠皮下注射该蛋白治疗人脑胶质瘤。结果 成功获得551bp的人内皮抑素基因,测序正确。该诱导表达蛋白分子量为20000,具有抑制血管生成活性。该蛋白每天5、10或20mg/kg裸鼠皮下注射可抑制荷瘤裸鼠皮下人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长（抑瘤率分别为34．5％,76．1％和80．2％）。结论 人内皮抑素基因和表达和初步应用,为采用抗血管生成方法治疗脑胶质瘤等实体瘤研究奠定了实验基础。     

内皮抑素及其基因治疗肿瘤的新进展

1971年Ｆｏｌｋｍａｎ教授首次提出“肿瘤的生长依赖于血管生成 ,新血管的形成是体积 >1～ 2ｍｍ3 实体瘤生长和癌细胞转移的前提条件”。从此抑制肿瘤血管的生成成为肿瘤治疗学研究的新热点。 1997年Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ[1] 首次从鼠的血管内皮细胞瘤 (Ｅｏｍａ)培养液中提取出内皮抑素———一种新的血管生成抑制因子。经过 5年的实验动物研究和Ⅰ期临床试验证明 :内皮抑素能有效抑制血管内皮的增殖 ,促使肿瘤细胞的凋亡 ,抑制肿瘤的生长和转移 ,具有很强的抗肿瘤特性 ,而且无耐药性和毒副作用[1] 。本文就内皮抑素及其基因治疗肿瘤的研究应…     

血管内皮抑素对小鼠肺癌影响的研究

目的观察血管内皮抑素（Endostatin）对小鼠体内Lewis肺癌生长、血管生成及转移的影响。方法将荷Lew is肺癌的C57鼠进行不同剂量组的内皮抑素血管内皮抑素和顺铂干预,观察肿瘤生长、移植瘤及转移瘤体内的微血管密度（MVD）的表达及转移发生率,采用SPSS19.0进行统计学分析。结果血管内皮抑素对鼠Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用,并能显著下调移植瘤及转移瘤内微血管密度,减少肿瘤肺转移率,其作用程度与内皮抑素剂量呈现明显正相关,且血管内皮抑素中未见获得性耐药现象发生。结论血管内皮抑素可以通过下调肿瘤组织中的MVD,抑制肿瘤生长及减少转移的发生,不会诱发肿瘤对化疗药物的耐药现象发生,值得在抗癌治疗中使用。     

血管内皮抑素研究进展

1971年Folkman提出了一个里程碑式的假说——血管生成假说,即实体肿瘤的生长和转移依赖新生血管的形成。阻断血管生成能够有效抑制肿瘤生长。这一假说后被多方验证并得到公认,使抗血管生成成为肿瘤治疗领域的一条新的途径和手段。血管内皮抑素（ES）的发现与血管抑素的发现基于同一个现象——“原位肿瘤可以抑制转移灶形成”现象,     

重组小鼠血管抑素基因转染抗血管生成治疗胆囊癌的实验研究

目的:研究重组小鼠血管抑素基因真核表达质粒转染的胆囊癌细胞表达具有抑制血管内皮细胞生长活性的血管抑素蛋白,以及对裸鼠种植性胆囊癌生长的抑制作用. 方法:应用脂质体lipofectamine2000将重组小鼠血管抑素基因的真核表达质粒pcDNA3.1( )-angiostatin转染胆囊癌细胞株GBC-SD,G418抗性筛选;以Western blot检测血管抑素的表达,以血管内皮细胞增殖分析检测其生物学活性,接种裸鼠并比较肿瘤体积和肿瘤微血管密度(MVD). 结果:得到表达血管抑素的胆囊癌细胞克隆,其培养上清能有效抑制bFGF刺激的血管内皮细胞增殖(P＜0.01);血管抑素组裸鼠肿瘤体积小于野生细胞对照组(P＜0.01),免疫组化检测显示血管抑素组裸鼠肿瘤微血管密度(MVD)低于野生细胞对照组(P＜0.05). 结论:血管抑素基因转染对裸鼠种植性胆囊癌的生长有抑制作用,这是血管抑素组肿瘤组织内新生血管形成受到抑制而减少所致.     

血管内皮抑素基因和p53基因治疗肿瘤的研究进展

血管内皮细胞抑制素（血管内皮抑素）是近年发现的具有抑制新生血管形成作用的蛋白质，表现出强烈的抑瘤作用；p53是公认的抑癌基因。本文就两者的功能、应用等方面作一综述。     

应用重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗肾细胞癌

【目的】研究重组分泌型内皮抑素腺相关病毒（rAAV—Endostatin，rAAV—ES）的抗肿瘤血管生成及抑制肾细胞癌进展的作用。【方法】应用rAAV—ES转染肾癌细胞，ELISA法测定上清液中重组内皮抑素的浓度并检测其对血管内皮细胞趋化运动的抑制作用；建立裸鼠肿瘤模型，检测肾癌细胞被感染后的成瘤率及全身应用rAAV—ES后抑制肿瘤发展的作用及其毒副作用。【结果】RCC细胞感染rAAV—ES后上清液中重组内皮抑素浓度为52．67ng／ml，对血管内皮细胞趋化运动的抑制率为38．13％；转染rAAV—Es后的肾癌细胞成瘤率为对照组的60％，体内实验证实全身应用rAAV—ES后血清中内皮抑素长期高效表达，肿瘤生长速度减慢，瘤体微血管密度变低，心脑组织检查未见缺血和其他病理改变。【结论】rAAV—ES无毒副作用，可有效地抑制肿瘤的血管生成，从而抑制肾细胞癌的发生和发展。     

血管抑素抑制角膜新生血管

血管抑素（angiostatin，AS）是迄今发现的强的内源性血管生成抑制因子之一，它能特异性抑制内皮细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡，从而抑制新生血管的形成。其在肿瘤血管治疗方面已取得较好实验结论。由于角膜新生血管形成和肿瘤诱导的新生血管形成由相同的生长因子所驱动，正因为此可将其用于角膜新生血管的治疗。本文就血管抑素的分子结构、功能及其抑制角膜新生血管的机制进行综述。     

血管抑素与肿瘤的抗血管治疗

肿瘤的存活、生长和转移与血管生成密切相关。抑制肿瘤的血管生成 ,遏制肿瘤细胞生长 ,以达到治疗肿瘤的目的 ,是近年来肿瘤研究的方向之一。血管抑素 (ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ)是最近发现的血管生成抑制因子 ,通过强烈抑制肿瘤血管生成 ,对多种肿瘤具有抑制作用。本文对肿瘤血管生成的调节、血管抑素生物学特性及抗血管生成作用进行综述。1　肿瘤的血管生成及其调节新生血管生成是在已存在的血管中长出新生毛细血管。血管生成在正常情况下仅见于胚胎发育、生殖和伤口愈合过程中。然而 ,持续的血管生成见于某些病理情况如炎症和肿瘤。肿瘤的…     

人内皮抑素基因治疗卵巢癌裸鼠移植瘤的研究

目的探索人内皮抑素基因治疗人肿瘤的可行性：方法将人卵巢癌(SKOV3)瘤组织或其细胞移植于裸鼠皮下，建立成裸鼠移植瘤模型；用高保真PCR从含有人内皮抑素基因的重组质粒中扩增出与人生长激素信号肽序列融合的人内皮抑素编码区，将此基因克隆入pGEM-T载体中，经序列测定证明其序列的正确性；将此基因克隆入真核表达载体pcDNA3。经免疫荧光试验证明能在CPS-1细胞中表达。结果用重组质粒注射已形成移植瘤的裸鼠，能显著抑制移植瘤的生长；将基因注射与肿瘤移植同时进行，基因注射不仅能部分抑制移植瘤的形成，而且能抑制移植瘤的生长。结论本研究构建的分泌型表达人内皮抑素的重组质粒可以用于肿瘤的基因治疗研究。     

血管抑素基因对肿瘤治疗的研究进展

目的介绍血管抑制素在肿瘤治疗中的应用进展.方法复习国内外文献,从血管生成在肿瘤中的作用,血管抑制的生物效应、体内分布与生成以及抗肿瘤作用的研究进展等方面进行了较为详细的论述,并作了展望.结果血管抑制素基因对肿瘤的治疗是一种很有前途的抗肿瘤策略.结论研究一种高效稳定的血管抑素基运载系统是更好发扬其抗肿瘤作用的保证.     

内皮抑素基因抗肿瘤血管生成疗法研究进展

内皮抑素具有较强的抗肿瘤血管生成作用。文章就肿瘤血管的生成及调控l内皮抑素的基本结构、分布和激活、抗血管生成的优点及抗肿瘤血管生成疗法的研究进展作一综述。     

内皮抑素的研究现状及其进展

1997年O’ReiHy从鼠的血管内皮细胞瘤(EOMA)培养液提取出内皮抑素——一种新的血管生成抑制因子。经过7年的实验动物研究和Ⅰ期、Ⅱ期临床试验证明，内皮抑素能促使肿瘤细胞的凋亡，抑制肿瘤的生长和转移，具有很强的抗肿瘤特性。近年来，内皮抑素基因治疗与化学治疗、放射治疗、免疫疗法的联合疗法已经成功用于实验动物和临床试验研究，取得了可喜的进展。现就内皮抑素药理作用、作用机制、应用基础研究现状及其进展综述如下。     

重组腺病毒载体介导血管抑素基因治疗裸鼠卵巢癌的实验研究

目的 构建携带血管抑素(AG)基因K(1-3)重组复制缺陷型腺病毒表达载体,研究腺病毒介导的人血管抑素基因对卵巢癌的治疗作用.方法 (1)将人血管抑素K(1-3)cDNA插入穿梭载体pShuttle产生重组质粒pShttle-AG(K1-3),经双酶切与骨架载体pAdeno-X重组产生pAdeno-X-AG(K1-3),转染293细胞制备重组腺病毒.(2)建立人卵巢癌裸鼠动物模型,检测腺病毒介导的人血管抑素基因对肿瘤生长的抑制作用.结果 3个实验组中,Ad-AG(K1-3)组肿瘤的体积和重量显著小于PBS和Ad-LacZ组(P<0.01),而PBS和Ad-LacZ组之间肿瘤体积和重量差异无统计学意义(P>0.05).PBS组和Ad-LacZ组肿瘤组织中CD34及VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05),与对照组相比Ad-AG(K1-3)组中CD34及VEGF表达明显降低(P<0.01).结论 成功包装出重组腺病毒介导的人血管抑素基因在体内、体外均高效表达,并明显抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的肿瘤血管生成和肿瘤生长,为其治疗卵巢癌的临床应用奠定了基础.     

转人内皮抑素基因双歧杆菌液抑制血管生长的实验观察

目的：研究转人内皮抑素基因双歧杆菌液对血管生长的抑制作用，并观察其对动物移植性肝癌Heps的抑瘤作用。方法：以小鼠移植性肝癌Heps建立肿瘤模型；分别进行灌胃和尾静脉注射给药，同时用转人内皮抑素基因双歧杆菌液做鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验，在解剖显微镜下计数血管条数，用图像分析仪定量分析血管密度。实验动物处死后，称瘤重并计算抑瘤率。结果：转基因双歧杆菌液高、中、低3个剂量组的抑瘤率分别为49.78%、45.81%和30.41%；普通双歧杆菌组抑瘤率为10.9%，尾静脉注射转基因双歧杆菌组抑瘤率为58.3%；CAM实验显示转基因双歧杆菌液可明显抑制血管的生成。结论：转基因双歧杆菌有良好的抑制血管生长和抑制肿瘤生长的作用，且其作用有量效关系。     

内皮抑素在膀胱癌中的研究进展

随着肿瘤血管依赖学说的提出,发现了血管生成抑制物内皮抑素。近年来随着研究的深入,对内皮抑素的认识也逐渐增多,有些研究取得了重大成果。该文综述了内皮抑素的发现及其结构、其发挥抑制血管生成作用的机制、在膀胱癌中的表达情况、重组内皮抑素的构建及其在膀胱癌细胞水平、动物模型水平上的研究。深入了解内皮抑素对膀胱癌的作用及机制,为临床应用奠定基础,期待内皮抑素能在膀胱癌等肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

应用重组分泌型内皮抑素腺相关病毒治疗膀胱癌的实验研究

目的包装重组分泌型内皮抑素腺相关病毒（rAAV-ES）并研究其在体内外的抗肿瘤作用。方法采用质粒共转染方法包装rAAV—ES;转染（感染复数MOI=10^5）膀胱癌细胞（EJ）后,ELISA法测定上清液中重组内皮抑素的浓度并检测其对血管内皮细胞趋化运动的抑制作用;建立裸鼠肿瘤模型,检测EJ细胞被转染后的成瘤率及全身应用rAAV-ES后抑制肿瘤发展的作用及其毒副作用。结果成功包装具有生物活性的rAAV-ES,病毒滴度为1．0×10^12v·g／ml;转染EJ细胞后上清液中重组内皮抑素浓度为54．09ng／ml,对血管内皮细胞趋化运动的抑制率为37．45％;被rAAV-ES转染后EJ细胞的成瘤率仅为对照组的2／5,体内实验证实全身应用rAAV-ES后血清中内皮抑素长期高效表达（30～40ng／ml）,肿瘤生长速度慢（32d±9d）,瘤体微血管密度低[（8±3）条／0．739mm^2],与对照组比较,差异有统计学意义（均P〈0．05）,心脑组织学检查未见缺血和其他异常改变。结论rAAV-ES无毒副作用,可有效地抑制肿瘤的血管生成,从而抑制膀胱癌的发生、发展,其成功包装为原位基因治疗膀胱癌奠定了基础。     

内皮抑素在肿瘤治疗中的应用

抑制血管生成是治疗肿瘤的一种新方法,内皮抑素(endostatin,ES)是一种能强烈抑制血管形成的因子,可有效地抑制肿瘤细胞的生长和转移,因此成为肿瘤领域的研究热点。ES可用于肿瘤的抗血管生成治疗,与化疗、放疗、免疫治疗联合应用可显著增强其他抗肿瘤治疗的效应,并可减少其不良反应。文中就ES的作用机制及其在肿瘤治疗中的应用作一综述。