非小细胞肺癌p16基因甲基化及缺失的研究

目的 研究p16基因在非小细胞肺癌组织中的甲基化和缺失情况，探讨其在肺癌诊断中的价值。方法 应用甲基化相关的PCR及双重PCR，检测50例肺癌组织和54例正常肺组织中p16基因第1外显子5′端启动子区域CpG岛甲基化及第2外显子缺失情况。结果 p16基因在非小细胞肺癌组织中甲基化率为32.0%(16/50)。缺失率为28.0%(14/50);54例正常肺组织甲基化率为3.7%(2/54)，缺失率为0，二组比较，甲基化率（Fisher's exact=0.000)及缺失率（Fisher's exact=0.000)均有显著性差异。结论 甲基化和缺失是非小细胞肺癌p16基因失活的主要形式，检测p16基因甲基化和缺失状态可能有助于肺癌的诊断。     

非小细胞肺癌病人血浆p16基因异常甲基化的检测

肺癌高死亡率的根本原因在于早期诊断的困难。现代分子肿瘤学的研究进展揭示了在肺支气管上皮癌变过程中发生的多种分子水平异常,使得我们有可能将外周血等容易取得的微创性样品中的分子病理学改变作为肺癌早期诊断的辅助指标。通过以往的研究我们发现,一条等位基因缺失而另一条等位基因异常高甲基化是肺癌组织中抑癌基因p16失活的重要机制之一。在这项研究中,我们利用从非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)病人外周血血浆中提取的DNA分析了P16基因的甲基化状态。采用改进的甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)的方法,95例NSCLC病人的血浆DNA被检测,其中肺鳞癌59例,肺腺癌36例。作为对照,75例相应的肿瘤组织被同时分析。结果显示,p16基因启动子区高甲基化状态的检出率在血浆中为72．6％（69／95）,而在相应的肺癌组织中为74．7％（56／75）。值得注意的是,血浆DNAp16基因异常甲基化只是从那些肿瘤组织DNA表现p16基因高甲基化的病例中被检出－二者存在极好的符合率。我们还发现,在Ⅰ期病人中,血浆p16基因异常高甲基化在肺鳞癌（82．4％）,比在肺腺癌（33．3％）中要高得多（P＜0．005）。从而提示,血浆p16基因异常甲基化有可能成为一项早期发现非小细胞肺癌（尤其是鳞癌）的、非常重要的分子病理学指标。而血浆DNA的MSP则是检测这一指标的敏感、可靠并且便于操作的技术之一,成为一种可以应用于人群筛查的方法。     

肺癌血清p16基因启动子畸变甲基化检测

[目的]检测肺癌患者血清DNA中p16基因启动子畸变甲基化,并探讨其在肺癌早期诊断和预后评价中的作用。[方法]收集新鲜的肺癌组织及其对应的血清标本69例,肺良性疾病患者标本25例,健康人血清标本10例。采用PCR技术分别检测肿瘤组织DNA和血清游离DNA中p16基因启动子畸变甲基化的状况。[结果]28.99%(20/69)肺癌组织出现p16高甲基化;出现高甲基化的组织标本相对应的20例血清中有15例(75%)出现p16基因高甲基化。肺良性疾病患者及正常人的血清、DNA中均未见p16基因高甲基化。血清p16基因高甲基化与肺癌TNM分期及分化程度密切相关(P<0.01或P<0.05)。[结论]非小细胞肺癌血清中p16基因甲基化状况的检测,可能有助于非小细胞肺癌的早期诊断或预后评估。     

非小细胞肺癌病人痰标本p16和MGMT基因的异常甲基化

痰脱落细胞学检查以其方例、无创的特点成为目前诊断肺癌的最基本手段之一,然而它的敏感性比较差。近年来分子肿瘤学的理论和技术进展为我们提供了利用分子病理学标志物发现早期肺癌的可能。研究表明,某些基因的异常甲基化是肺癌中常见的分子水平改变;其包括p16INK4a(p16)和O^6甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移酶（O^6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)。在这项研究中,我们从肺癌病人的痰标本脱落细胞中分离制备DNA,检测了p16和MGMT这两个基因的启动子区的甲基化状态。采用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP)的方法,我们对71例非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC)病的痰标本进行了分析。所有被检NSCLC病人均有明确的组织病理学诊断,其中,肺鳞癌39例,肺腺癌25例,腺鳞癌7例。这71例病人的痰标本仅有31例（43．6％）被细胞学检查诊断为癌。我们的分析资料显示：在71例痰标本中p16基因的高甲基化检出率为83．1％（59／71）,MGMT的高甲基化检出率为59．2％（42／71）。在被测痰细胞DNA中,这两个基因（其中一个或两者）的启动子区异常甲基化的综合检出率高达90．1％（64／71）;而且与相应肿瘤组织中这两个基因的甲基化状态存在很好的符合率。这项研究结果表明,利用MSP技术检查痰脱落细胞DNA中p16和MGMT两基因的异常甲基化是一项敏感、无创、易行的方法。它将有助于非小细胞肺癌早期发现,以及肺癌高危人群的筛查。     

中国非小细胞肺癌患者血清DAPK基因、p16基因启动子甲基化的分析

Objective： To evaluate the clinical significance of the aberrant methylation of DAPK gene and p16 gene in sera from 65 NSCLC patients from Nanjing General Hospital of Nanjing Command, China. Methods： A methylation-specific PCR （MSP） was performed for the detection of promoter hypermethylation of DAPK gene and p16 gene in blood DNA from 65 cases of NSCLC, and to analyze the relation of the aberrant methylation of DAPK gene and p16 gene and the clinicopathological data. Results： 30.8% （20/65） of the sera from 65 cases of NSCLC showed hypermethylation for DAPK promoter and 43.1% （28/65） the same for p16 promoter, whereas no methylated DAPK gene promoter and p16 gene promoter were found in sera from the patients with lung benign diseases and normal controls. Methylated DAPK gene promoter and p16 gene promoter in sera were not closely correlated with the pathological classification, stage, metastasis and differentiation in NSCLC. Conclusion： Detection of the aberrant methylation of DAPK gene and p16 gene in blood DNA from NSCLC patients might offer an effective means for the earlier auxiliary diagnosis of the malignancy.     

血浆p16基因甲基化联合p53抗体在非小细胞肺癌诊断中的价值

摘 要：［目的］ 探讨血浆p16基因甲基化联合p53抗体水平的检测对非小细胞肺癌早期诊断价值和临床意义。［方法］ 选择98例非小细胞肺癌患者为实验组,以60名健康者作对照,分别采用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测其血浆p16基因甲基化,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其血浆p53抗体。［结果］ 非小细胞肺癌组的p16基因甲基化率（χ2=45.709,P<0.001）、p53抗体表达量（Z=-5.786,P<0.001）、p53抗体定性阳性率（χ2=41.638,P<0.001）均高于健康对照组。p16基因甲基化和p53抗体表达及定性检测对非小细胞肺癌预测诊断的敏感度分别为70.41%和58.16%,特异性分别为85.00%和93.33%,正确指数为0.554和0.515。p16基因甲基化和p53抗体定量联合检测结果对非小细胞肺癌诊断的敏感度为82.56%,特异性为78.33%,正确指数为0.610。p16基因甲基化与p53抗体检测具有相关性（r=0.215,P=0.029）。［结论］ 非小细胞肺癌患者血浆中p16基因甲基化与p53抗体可以作为非小细胞肺癌预测诊断的肿瘤标志物,联合检测的预测敏感度高于单独检测。     

非小细胞肺癌p16基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）ｐ１６基因突变的情况,本研究应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中ｐ１６基因外显子２的突变情况,现将结果报告如下。１　材料与方法２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织及同一病例非肿瘤肺组织均为住院病例手术切除标本,并经病理证实。按常规方法提取ＤＮＡ。ＰＣＲ反应在ＰＥ９６００热循环仪中进行,扩增ｐ１６基因第２外显子,引物序列：　　ＰＳ１：５′－ＡＣＡＡＧＣＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＴＣＡＴＧＣ－３′ＰＳ２：５′－ＴＣＴＧＡＧＣＴＴＴＧＧＡＡＧＣＴＣＴＣＡＧ－３′循…     

p16基因产物在非小细胞肺癌表达及意义

目的　研究ｐ１６ 基因产物在ＮＳＣＬＣ癌组织的表达及其临床意义。　方法　用链霉抗生物素蛋白过氧化物酶连结法检测６４ 例ＮＳＣＬＣ患者肺癌组织及配对淋巴结标本ｐ１６ 蛋白表达。　结果　肺癌组织ｐ１６ 蛋白表达缺失率达４８８％ （３１／６４）,５１６ ％ 呈阳性表达（３３／６４） ,阳性表达中很可能存在突变蛋白。ｐ１６ 蛋白表达与ＮＳＣＬＣ的组织学类型、临床分期、细胞分化无相关性,与淋巴结转移关系密切。淋巴结转移组,肺癌组织ｐ１６ 蛋白表达高于淋巴结阴性组（ Ｐ＜ ００５） 。在转移淋巴结中,４２８６％ ｐ１６ 蛋白阳性。　结论　ｐ１６ 基因产物的异常表达与ＮＳＣＬＣ 的发生、发展关系密切,它在ＮＳＣＬＣ 中可能属于迟发事件。     

中国非小细胞肺癌患者血清DAPK基因、p16基因启动子甲基化的分析(英文)

目的分析65名中国南京军区南京总医院的非小细胞肺癌(NSCLC)住院患者血清中DAPK、p16启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义。方法运用甲基化特异性PCR技术,检测65例NSCLC患者血清DAPK、p16基因启动子区域甲基化的改变情况,并分析与临床病理资料的关系。结果 NSCLC患者血清DAPK基因甲基化检出率为30．8％(20/65),p16基因甲基化检出率为43．1％(28/65),而正常对照组和良性肺部疾病组血清未检出DAPK基因、p16基因甲基化,DAPK基因、p16基因甲基化检出率与NSCLC病理类型、分期及转移状态无明显关系。结论 DAPK基因、p16基因检出启动子区域异常甲基化是NSCLC早期辅助诊断的分子标志物之一。     

Ⅰ期非小细胞肺癌中p16基因及其产物的表达

Ｐ１６基因是一个新近发现的抑癌基因,其表达异常被认为与癌细胞的失控性增殖密切相关［１～３］。近年来,关于非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中Ｐ１６基因及其产物的异常表达,国内外均有报道［４～８］,但单独研究早期ＮＳＣＬＣ的文献报道极少。为此,作者应用免疫组织...     

人非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的研究

目的　探讨人类非小细胞肺癌组织中p1 6基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法　应用控制模板DNA量的银染PCR SSCP技术检测 40例非小细胞肺癌手术切除标本中p1 6基因第 2外显子。结果　 40例中有 1 3例发生纯合缺失 ,3例发生突变 ,缺失及突变率为 40 %。其缺失及突变率与肺癌的临床分期有密切关系 (P <0 .0 5)。结论　p1 6基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要作用。如     

The effects of CYPIA1 gene polymorphism and p16 gene methylation on the risk of lung cancer in a Chinese population

Objective： To investigate the relationship between the genetic polymorphism of CYP1A1 and the genetic susceptibility to lung cancer as well as to study the effects of the methyiation in p16 gene on the risk of lung cancer in a Chinese population. Methods： A case control study was conducted among 47 cases of lung cancer and 94 controls. The genetic polymorphism of CYP1A1 was tested with method of PCR-RFLP, and a methylation-specific PCR （MSP） was performed to detect p16 methylation. Results： It showed that there was no significant difference in frequencies of the genotypes of CYP1A1 between the two groups （P 〉 0.05）. Synergistic effects were not found between smoking and CYP1AI. Methylated p16 gene was found in 44.7% （21/47） of lung cancer tissues and in 17.0% （8/47） of normal lung tissues with significant difference （P 〈 0.05）. Conclusion： The genetic polymorphism of CYP1A1 does not increase the risk of lung cancer in a Chinese population. The methylation in p16 gene may be the most common mechanism to inactivate p16 gene in lung cancer, and is not significantly associated with genotype of CYP1A1,     

CYP1A1基因多态性与p16基因甲基化对中国人肺癌发病的影响

Objective:To investigate the relationship between the genetic polymorphism of CYP1A1 and the genetic susceptibility to lung cancer as well as to study the effects of the methylation in p16 gene on the risk of lung cancer in a Chinese population.Methods:A case control study was conducted among 47 cases of lung cancer and 94 controls.The genetic polymorphism of CYP1A1 was tested with method of PCR-RFLP,and a methylation-specific PCR(MSP)was performed to detect p16 methylation.Results:It showed that there was no significant difference in frequencies of the genotypes of CYP1A1 between the two groups(P>0.05).Synergistic effects were not found between smoking and CYP1A1.Methylated p16 gene was found in 44.7%(21/47)of lung cancer tissues and in 17.0%(8/47)of normal lung tissues with significant difference(P< 0.05).Conclusion:The genetic polymorphism of CYP1A1 does not increase the risk of lung cancer in a Chinese population. The methylation in p16 gene may be the most common mechanism to inactivate p16 gene in lung cancer,and is not significantly associated with genotype of CYP1A1.     

microRNA-143在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

目的:检测肺癌组织及其癌旁组织和正常肺组织中microRNA-143的表达差异,并探讨其可能存在的临床意义。方法:采用Real- time PCR检测来比较人的肺癌组织与相应癌旁组织及正常肺组织中microRNA-143的表达差异,比较microRNA-143基因的表达与患者病理参数的关系。结果:microRNA-143在肺癌组织中的表达低于对应的癌旁组织和正常肺组织（P＜0.05）,microRNA-143 的表达程度与患者的性别、年龄、肺癌的病理分型及有无淋巴结转移无关（P＞0.05）。结论:microRNA-143在肺癌组织中的表达下调,提示microRNA-143基因表达下调可能在肺癌的发生发展中起作用。     

射波刀在早期非小细胞肺癌的应用及影响疗效的因素

早期非小细胞肺癌(NSCLC)主要治疗方法是外科切除,放疗是不能耐受或拒绝手术NSCLC患者的另一选择。射波刀是近年来新出现的一种立体定向放射治疗技术,兼具放射外科和放射治疗两种功能。采用实时图像引导系统以及呼吸追踪系统,以其大剂量、高精度和周围受照射的正常组织或重要器官的范围小等优点,在治疗早期非小细胞肺癌(NSCLC)方面取得了与手术相似的疗效。但是对于早期NSCLC,尽管射波刀实施了有效的生物剂量,实时靶区追踪,但局部失效仍会发生。本文就射波刀在早期NSCLC治疗中的应用进行综述并进一步探讨相关的影响因素。     

非小细胞肺癌中 AKAP12基因的表达与甲基化研究

目的：探讨 AKAP12基因甲基化与非小细胞肺癌发生发展的关系。方法：采用实时荧光定量 PCR 检测43例非小细胞肺癌患者组织中 AKAP12基因 mRNA 的 RQ 值。应用 MSP 法检测其甲基化状态,分析 RQ值、甲基化状态与临床因素的关系。结果：非小细胞肺癌 AKAP12的 RQ 值与正常组织比较差异具有统计学意义。非小细胞肺癌 AKAP12甲基化阳性率与正常组织之间差异具有统计学意义。非小细胞肺癌组织中AKAP12 mRNA 的 RQ 值在病理分型、临床分期、分化程度方面差异具有显著性。AKAP12基因甲基化在病理分型及临床分期方面比较差异具有统计学意义。非小细胞肺癌组织中甲基化组的 mRNA RQ 值较非甲基化组低,差异具有统计学意义。结论：AKAP12基因甲基化与非小细胞肺癌的发生发展可能有关。     

甘氨双唑钠对局部晚期非小细胞肺癌放疗的增敏作用

目的:观察甘氨双唑钠(CMNa)配合放疗对局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和毒副反应。方法:65例Ⅲ期NSCLC患者随机分为二组:治疗组(放疗 CMNa)35例,放疗采用常规分割,原发灶及纵隔淋巴结剂量DT60Gy～66Gy/30f～33f/6w～7w。放疗同时使用CMNa每次800mg/m2,每周3次,从放疗开始连续使用至放疗结束;对照组30例只行放射治疗,剂量、分割方式同治疗组。治疗完成后评价疗效和不良反应。结果:治疗组总有效率(CR PR)74.3%,完全缓解率(CR)22.9%;对照组总有效率50.0%,完全缓解率10.0%,两组间总有效率有显著统计学差异(P=0.043)。中位生存期治疗组和对照组分别为13个月和11个月,1、2年生存率治疗组分别为60.0%、31.4%;对照组分别为50.0%、23.3%,两组间统计学差异无显著性(P>0.05)。毒副反应主要是放射性肺炎、放射性食管炎和骨髓抑制,两组间差异无显著性。结论:CMNa合并放疗可明显提高局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效,远期疗效略有提高,但无统计学差异。     

血浆Ras相关结构域家族基因1A和p16基因甲基化联合检测在非小细胞肺癌诊断中的意义

目前,提高肺癌患者生存率的关键措施是早期诊断,寻找与肺癌发生早期相关的分子标志物是肺癌早期诊断的有效方法。肺癌新型候选抑癌基因Ras相关结构域家族基因1A(ras association domain family gene 1A,RASSF1A)是从3p21.3克隆得到的,p16是多肿瘤抑制基因,两基因主要以     

平消胶囊配合化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的:观察平消胶囊配合化疗治疗非小细胞肺癌的疗效。方法:将73例患者随机分为两组:治疗组应用平消胶囊配合NP(NVB DDP)方案化疗,对照组单用NP方案化疗。结果:治疗组总有效率(PR CR)为45.9%,高于对照组总有效率41.7%,治疗组生活质量较对照组明显提高,不良反应明显减轻。结论:平消胶囊配合NP方案治疗非小细胞肺癌有较好的疗效,能够显著改善病人的生活质量,减轻化疗毒副反应。