FHIT基因异常与消化道恶性肿瘤

目的探讨消化道恶性肿瘤细胞中三联脆组(fragile histidine triad,FHIT)基因的异常转录情况.方法应用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)对96例消化道恶性肿瘤(21例食管癌、43例胃癌和32例结肠癌)及相应的癌旁组织,18例正常组织FHIT基因cDNA片断进行扩增.结果在33.3%的食管癌组织,51.2%的胃癌组织和31.3%的结肠癌组织中检出异常FHIT转录,而在相应的食管、胃、结肠癌旁组织中FHIT异常转录检出率分别为4.8%、20.9%和9.4%,二者差异有显著性(P＜0.05);18例正常组织中未见FHIT异常转录.结论食管癌、胃癌和结肠癌组织FHIT基因的异常转录可能与消化道恶性肿瘤的发生、发展有关.     

肺癌前病变、肺癌中FHIT基因表达的临床研究

背景与目的FHIT基因为近年发现的新候选抑癌基因，位于3P14．2跨越FRA3B易脆点，在包括肺癌在内的人类多种肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察FHIT基因在人肺癌前病变、肺癌中表达情况，探讨FHIT基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测298例甲醛固定、石蜡包埋的标本（包括161例肺癌、51例肺癌前病变、30例正常肺组织、23例肺良性病变和33例肺癌转移淋巴结）中FHIT蛋白表达情况。结果FHIT蛋白在正常肺组织及肺良性病变组织中均无失表达；癌前病变组织及肺癌组织中失表达率分别为54．9％（28／51）和59．0％（95／161）：肺癌转移淋巴结组织中FHIT蛋白失表达率78．8％（26／33），各组问比较有显著性差异（P〈0．05）。肺癌组织中FHIT基因表达水平与肺癌组织学类型、肿瘤细胞分化程度、患者P-TNM分期、淋巴结转移程度存在相关性（P〈0．05）。FHIT蛋白失表达组肺癌患者的术后五年生存率显著低于表达组（P〈0．01）。吸烟组患者FHIT基因失表达率69．1％（94／136）显著高于无吸烟组49．5％（49／99）（P〈0．01）。结论FHIT蛋白失表达可能是肺癌发生过程中的早期分子事件，与肺癌的发生、发展及预后有关；吸烟导致FHIT蛋白表达下降可能是诱发肺癌的原因之一。     

FHIT基因与肺癌

肺癌中常发生３号染色体短臂的缺失,位于３ｐ１４．２的ＦＨＩＴ基因是一种新的候选肿瘤抑制基因,它在肺 生机制中起一定作用。本文就ＦＨＩＴ基因结构特征,失活特点及其与肺癌的关系做一综述。     

FHIT基因与肺癌

肺癌中常发生3号染色体短臂(3p)的缺失,位于3p 14.2的FHIT基因是一种新的候选肿瘤抑制基因,它在肺癌发生机制中起一定作用。本文就FHIT基因结构特征,失活特点及其与肺癌的关系做一综述。     

Syndecan-1蛋白及mRNA在肺鳞癌中的表达及意义

目的探讨Syndecan-1蛋白及mRNA在肺鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化催化放大法（CSA）及RT-PCR法检测Syndecan-1蛋白及mRNA在30例肺鳞癌组织、30例癌旁正常肺组织中的表达。结果 Syndecan-1蛋白及mRNA在肺鳞癌组织中表达低于癌旁正常肺组织（P〈0.05）。Syndecan-1蛋白及mRNA低表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移正相关（P〈0.05）,与年龄、性别及TNM分期无关（P〉0.05）。结论 Syndecan-1蛋白及mRNA在肺鳞癌中表达减低,并与肺鳞癌发生发展及浸润转移相关。     

FHIT基因与肝癌

1996年Ohta等利用外显子捕捉法在人类染色体3p14.2处确定了一个新的基因.该基因编码的蛋白质与具有组氨酸三联体结构的HIT(histidine triad)蛋白高度同源,又因为该基因跨越脆性位点,故命名为脆性组氨酸三联体(fragile histdinetraid,FHIT).近年来大量研究表明FHIT基因在人类许多恶性肿瘤组织以及多种恶性肿瘤细胞系中存在异常,尤其是在和环境中致癌因素关系密切的恶性肿瘤中异常率较高.     

采用人基因表达谱芯片筛选肺癌转移相关基因的初步研究

目的应用基因芯片技术分析人高、低转移肺巨细胞癌细胞株的基因差异表达谱，筛选与肺癌转移相关基因。方法提取人高转移肺巨细胞株95D和人低转移肺巨细胞株95C的mRNA，通过逆转录，制备分别用cy5-dUTP和cy3-dUTP进行标记的cDNA探针，并与芯片杂交。经过ScanArray3000扫描仪扫描，获取图象及对杂交信号进行数据分析，筛选出95D和95C细胞表达差异的基因谱，并对其中部分基因进行RT—PCR分析、验证。结果在所检测95C和95D细胞中，466条基因有表达差异，其中具有同-Genebank量的有108对，上调基因47对，下调基因61对。对其中KIAA1108、PGR1、JWA、S182、Jab1部分差异表达基因，经RT-PCR技术验证，结果与基因芯片基本符合。结论肺癌转移过程与多种基因作用有关，基因芯片技术可为肺癌转移相关基因的筛选，提供有效方法。     

乳腺癌FHIT基因微卫星不稳定性及其蛋白表达的研究

目的分析乳腺癌脆性三联组氨酸基因（FHIT）微卫星不稳定性发生情况及与FHIT蛋白表达缺失的关系,以探讨乳腺癌发生的机制。方法选取FHIT基因的D3S1234、D3S1300位点,采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染法,对66例乳腺癌患者肿瘤组织进行微卫星不稳定性（MSI）检测,用免疫组化方法检测FHIT蛋白的表达情况。结果30．3％（20／66）的乳腺癌组织至少在一个位点出现MSI;59．1％（39／66）的肿瘤组织发生FHIT蛋白表达缺失或明显下降,17例MSI（＋）病例发生FHIT蛋白低水平表达或缺失,MSI（＋）与FHIT蛋白表达缺失有相关性（P〈0．05）。FHIT蛋白表达缺失与肿瘤组织学分级有相关性（P〈0．05）。结论FHIT基因位点的微卫星不稳定性是FHIT蛋白表达下调的可能的分子机制之一,FHIT基因在乳腺癌的发生发展中起重要作用。     

以MAGE A1-A6亚型基因mRNA为特异标记检测肺癌细胞

目的 探讨肺癌患者痰液及外周血中黑色素瘤抗原基因(MAGE)A1-A6亚型 mRNA的表达及其对早期肺癌的诊断意义.方法应用巢式RT-PCR技术,对23例肺癌病人、8例肺良性病变者和10例健康人的痰液及外周血中MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA表达进行检测.结果 23例肺癌病人中7例检测到痰液脱落细胞中有MAGE A1-A6亚型基因mRNA表达,检出率30.4%(7/23);9例检测到外周血有表达,检出率39.1%(9/23);痰液和外周血肺癌细胞联合检出率为47.8%(11/23),大于痰液细胞学检查检出率17.4%(4/23)(P＜0.05).而肺良性病变者和健康人中均未检测到MAGE A1-A6亚型基因mRNA的表达.结论 MAGE A1-A6亚型基因的 mRNA可作为检测肺癌患者痰液和外周血癌细胞的标记物,两者联合检测有助于提高肺癌的检出率.     

控制正常细胞对肺癌细胞P^16基因缺失的污染的方法的建…

目的 建立一种能有效提高从混有正常细胞的肿瘤组织中检测Ｐ＾１６基因纯合缺失的灵敏度的方法，以及探讨该基因的状态与肺癌临床病理的关系。方法 将野生型ＤＮＡ与Ｐ＾１６基因纯合缺失的ＤＮＡ按一定比例混合，并将其有限稀释，以不同量的ＤＮＡ为模板，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增Ｐ＾１６基因第二外显子及内对照基因片断，在此基础上，以特定量肺癌ＤＮＡ为模板，用相同的ＰＣＲ条件对上述片断进行扩增，对扩增出的第二外显     

FHIT基因在肺癌中的缺失与HPV感染相关性的研究

目的　探讨肺癌发生的分子生物学机制 ;方法　采用逆转录 -巢式聚合酶链反应 (reverse- tape polymerase chainreaction)的方法对 4 2例肺癌及 10例正常肺组织中的 FHIT(Fragile histidine triad)基因的缺失情况进行检测 ,并用 PCR技术检测了肺癌组织中人乳头状瘤病毒 (human papilloma virus,HPV)的 DNA片段 ;结果　 6 6 .7% (2 8/ 4 3)肺癌组织中检测到 FHIT基因的缺失 ,而正常组织中未检测到 FHIT基因的缺失 ,二者差别有显著意义 (p<0 .0 1)。 4 2例肺癌组织中有 8例检测到 HPV的片段 ,阳性率为 19% (8/ 4 2 ) ,正常组织中未检测到 HPV的片段 ,且在 8例 HPV阳性的标本中均有 FHIT基因缺失。结论　 FHIT基因的缺失在肺癌的发生中起一定的作用 ;可与肺癌的不同病理分型、分化程度及临床分期无关 ;但与吸烟有一定的相关性 ;同时 HPV的感染与肺癌的发生有一定关系 ,且与 FHIT基因缺失呈正相关     

抑癌基因p73、FHIT和PTEN蛋白表达与中老年人肺癌发生、发展的相关性研究

目的探讨抑癌基因p73、FHIT和PTEN与中老年人肺癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化SABC法检测抑癌基因p73、FHIT和PTEN蛋白在65例中老年人肺癌组织中的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比,同时结合肺癌的分期及预后进行分析。结果肺癌组织中p73蛋白阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0.05),而正常肺组织和癌旁组织中FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于肺癌组织(P<0.05);Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于Ⅲ期和Ⅳ期(P<0.05);生存3年以上者肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于生存3年以下者(P<0.05)。结论p73基因表达可能参与了调控肺癌的发生过程,其存在并未阻止肺癌的进展,在肺癌中可能没有担当起主要的抑癌基因;肺癌组织中存在着FHIT和PTEN基因蛋白表达的显著缺失,FHIT和PTEN基因可能参与了调控肺癌的发生过程,在肺癌发生、发展中二者可能担当着重要抑癌基因的作用。p73、FHIT和PTEN基因蛋白表达缺失在中老年人肺癌的发生、发展中可能存在着普遍意义,三者可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的参考指标。     

FHIT基因在肺癌研究中的新进展

FHIT基因是近年来发现的基因,包括肺癌在内的多种肿瘤,特别是上皮性因环境致癌因素导致的肿瘤中常可检测出FHIT基因的纯合性和杂合性缺失,对研究肺癌特别是吸烟相关性肺癌的发生机制、早期诊断和治疗的探索提供了新的思路。它可能通过与P53无关的途径诱导凋亡,从而抑制肿瘤的发生。     

p73基因mRNA表达与老年人肺癌临床病理学特征及预后关系的探讨

目的 探讨p73基因与老年人肺癌发生、发展的关系。方法 采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测65例老年人肺癌组织中p73基因mRNA的表达，并与癌旁组织和正常肺组织对比，结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析；同时采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）技术检测肺癌与癌旁组织中p73基因的突变情况。结果 老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（78．5％）明显高于癌旁组织（18．5％）和正常肺组织（12．3％）（P〈0．05）；不同年龄组、不同类型和不同分化程度肺癌组织中p73基因mRNA的阳性表达率差异无显著性（P〉0．05）；Ⅰ期和Ⅱ期老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（90．7％）明显高于Ⅲ期和Ⅳ期（54．5％）（P〈0．05）；生存3年或以上的老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（91．7％）明显高于生存3年以下者（68．0％）（P〈0．05）。结论 p73基因表达可能参与了调控老年人肺癌发生的过程，但并不能阻止肺癌的进展，可能不是主要的抑癌基因；基因突变不是p73参与肺癌发生发展的主要形式；p73基因表达在各型肺癌发生、发展中可能具有普遍意义，可作为判断老年人肺癌生物学行为和预后的一个参考指标。     

cystatin B基因在人食管癌中的表达

目的：研究cystatinB基因在人食管癌中的表达状况。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测41对食管癌组织及配对食管癌旁黏膜和食管癌细胞系EC9706和肺癌细胞系GLC82中cystatinB基因的表达。结果：cystatinB基因在82．95（34／41例）食管癌组织中的表达水平,低于配对的食管癌旁黏膜,且与食管癌淋巴结转移显著相关（P＜0．05）。在食中细胞系EC9706有微弱表达,在肺癌细胞系GLC82未检测到表达。结论：cystatinB基因在人食管癌中表达显著下调且与淋巴结转移相关。     

黑龙江地区慢性阻塞性肺疾病与肿瘤坏死因子基因多态性的相关性研究

肿瘤坏死因子（TNF）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）的气道炎症和肺功能损害中起重要作用。已知肿瘤坏死因子α（TNF-α）和TNF-β存在单核苷酸多态性（SNP）TNF-α-308G/A和TNF-β＋252G/A，影响TNF在气道内的表达，因而可能是COPD发病的分子机制之一。我们的研究采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和等位基因特异性聚合酶链反应（AS-PCR）方法，分析黑龙江地区汉族COPD患者及健康人群的TNF基因多态性分布情况，探讨其多态性在COPD发病中的作用。     

Gli基因在胰腺癌中的表达变化及其临床意义

背景：研究发现Hedgehog信号通路的异常活化与胰腺癌发生密切相关，三种Gli核转录因子在Hedgehog信号通路中发挥不同的核转录效应。目的：探讨Gli基因在胰腺癌和正常胰腺组织中的表达水平及其临床意义。方法：收集24例胰腺癌组织和19例正常胰腺组织．以定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Gli mRNA的表达量，分析其表达变化，并探讨与相关临床参数的关系。结果：与正常胰腺组织相比，胰腺癌组织的三种GE基因mRNA表达量显著升高（P〈0．05），且Glil、Gli2 mRNA 表达量与Gli3 mRNA 表达量呈正相关。Gli2 mRNA高表达与淋巴结转移相关。结论：三种Gli基因与胰腺癌发生呈一定联系，且三者之间可能存在一定相互协同作用；将三者作为一个整体进行调控可更好地控制Hedzehoz信号通路。     

αB-crystallin基因在食管癌组织中的表达及其意义

目的 探讨αB-crystallin基因在食管癌组织中的表达及其与食管癌临床病理的关系.方法 采用RT-PCR方法检测食管癌组织及其正常组织黏膜中αB-crystallin基因的表达.结果 αB-crystallin基因在食管癌组织中表达阳性率明显高于正常组织黏膜,深层浸润者的表达阳性率明显高于浅层浸润者,较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P均＜0.05);αB-crystallin 基因表达与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P＞0.05).结论 αB-crystallln基因的高表达可能与食管癌的癌变及侵袭转移的发生有关.     

人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染肺腺癌细胞系的研究

目的获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因的人肺腺癌细胞系.方法通过基因重组法构建hRSV M2-1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A549细胞,经G418筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot进行验证.结果得到了约650bp的基因插入片段,DNA测序表明该基因高度保守.筛选出了稳定高量表达M2-1基因的PAa和A549细胞,并被证实有M2-1蛋白表达.结论获得了稳定表达hRSV M2-1蛋白的PAa和A549细胞株.     

肺癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白19mRNA水平与肿瘤分期、近期疗效及预后的关系

目的探讨肺癌患者治疗前后外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋向19（CKl9）mRNA的表达水平．及其与肿瘤分期、近期疗效、监测预后的关系。方法应用Taq Man定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测78例肺癌患者（鳞癌28例、腺癌40例、小细胞肺癌9例、大细胞肺癌1例）治疗前后、30例肺部良性疾病患者及30例健康对照者外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19（CK19）mRNA的水平；同时采用酶联免疫吸附测定法检测肺癌患者治疗前血清CEA和细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）水平。患者随访2年。结果肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA阳性率分别为69．2％（54／78）、62．8％（49／78）．显著高于肺部良性疾病患者及健康对照者，3者差异有统计学意义（χ^2值分别为37．65、41．54；27．41、30．84，p〈0．01）。鳞癌组CK19mRNA阳性率最高，腺癌组CEAmRNA阳性率晟高。不同分期患者问CEA、CK19mRNA阳性率差异无统计学意义（χ^2值分别为3．63、3．81）。肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA的阳性率显著高于血清CEA、CYFRA21—1水平；手术后CEA、CK19mRNA阳性率显著下降；化疗后阳性率下降不明显。化疗前CEAmRNA阳性患者的中位生存期明湿低于阴性患者（分别为8．5月、11．7月）、化疗前CK19mRNA阳性患者的中位生存期明显低于阴性患者（分别为8,9月、12．3月）：术前CEAmR—NA阳性患者肿瘤复发或转移率（29．4％）高于术前阴性患者（7．7％），术前CK19mRNA阳性患者肿瘤复发或转移率（18．8％）高于术前阴性患者（7．1％）。结论CEA、CK19mRNA对于检测肺癌患者肿瘤细胞微转移有一定的临床意义．有助于评估手术疗效及预测预后；CEA、CK19mRNA表达水平与肿瘤分期无关；CEA、CK19基因的检测敏感性优于蛋白水平的检测．可有助于肺癌的辅助诊断。