小鼠重组Periostin对人牙周膜细胞粘附、伸展和移动的影响

目的：研究小鼠重组Periostin对人牙周膜细胞（PDL细胞）粘附、伸展及移动的影响。方法：采要用固相结合分析以及细胞机械创伤模型等细胞方法,观察PDL细胞在Periostin基质上的粘附率、伸展率及其定向移动的能力。结果：Periostin可促进PDL细胞的粘附、伸展和移动,当浓度在40mg/L时,作用最为显著（P＜0．01）,与纤维结合蛋白（FN0的作用相似。结论：小鼠重组Periostin可有效促进PDL细胞的附着、伸展及移动,但其作用的确切分子机制还需深入研究。     

Periostin对人牙周膜细胞在牙根片上附着和生长的影响

目的：研究小鼠重组Periostin对人牙周膜细胞（PDL细胞）在正常及病变牙根片上附着和增殖的影响。方法：将正常及病变根片分别用Periostin、FN和无血清DMEM处理后,观察PDL细胞在其上24h的附着量和72h增殖量,并在扫描电镜下观察其形态变化,结果：Periostin与阳性对照FN均可有效促进PDL细胞在政党及病变根面上的附着和增殖（P＜0．05－0．01）,二者促附着作用相近（P＞0．05）,但在促增殖方面,Periostin较FN作用明显弱（P＜0．05）。结论：小鼠重组Periostin对PLD细胞在正常及病变根片上的附着和增殖均有一定促进作用。     

小鼠重组OSF-2对人牙周膜细胞附着和伸展的影响

目的：观察小鼠重组牙周膜细胞特异性因子2（OSF-2）对牙周膜细胞附着和伸展的作用。方法：采用固相结合分析实验及四唑盐比色等细胞生物学技术,观察牙周膜细胞在OSF-2基质上的附着能力和伸展率。结果：牙周膜细胞在OSF-2基质上附着和伸展良好,当浓度在20ug／ml以上时,作用尤其显著（P〈0．01）,与在FN基质的生长结果相似。结论：小鼠重组OSF-2可有效促进牙周膜细胞的附着和伸展。     

Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞（PDL细胞）增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法。测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：Periostin仅在浓度为40μg/ml时,可显著促进PLD细胞的增殖（P＜0．01）,其余浓度则无作用,而其浓度在10μg/ml-80μg/ml范围中时,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平（P＜0．05）。结论：小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用,但其在这两方面的作用存在着异,对此还需深入研究。     

新型骨替代材料-介孔生物玻璃生物相容性的实验研究

目的：通过与成骨细胞的体外复合培养，探讨新型复合生物材料-介孔生物玻璃（mesoporous bioactive glass，MBG）的生物相容性，验证其作为人工骨替代材料的可行性。方法：采用酶消化法获得SD大鼠成骨细胞．分为实验组和对照组，实验组细胞和MBG复合培养，对照组细胞单独培养。比较2组成骨细胞增殖活力和碱性磷酸酶活性，并借助扫描电镜观察MBG和成骨细胞复合情况。结果：MBG和成骨细胞复合培养后，细胞增殖活力和碱性磷酸酶活性均强于对照组；扫描电镜观察：成骨细胞接种于MBG上1d时可见到细胞附着，4d时细胞呈多角形向四周伸展，并有基质分泌。结论：MBG具有良好的生物相容性．为一种前景良好的新型骨替代材料。     

新型钛铌锆锡合金表面成骨细胞附着研究

目的：研究新型钛铌锆锡合金（Ti-24Nb-4Zr-7．9Sn）的表面能大小以及对成骨细胞在其表面的附着及骨架蛋白actin、vinculin表达的影响。方法：以纯钛为对照，采用表面接触角测量的方法对合金的表面能进行研究。将原代培养的成骨细胞接种到合金表面，观察第30min，60min，120min细胞在合金表面的附着情况，采用荧光显微镜观察骨架蛋白actin、vinculin在合金表面的表达。结果：表面能测试结果显示合金的表面能（67．40mJ／m^2）略高于纯钛的表面能（62．43mJ／m^2）；成骨细胞在合金表面的附着情况与对照组间无显著性差异，骨架蛋白actin、vinculin染色显示细胞在合金表面伸展良好。结论：成骨细胞在新型钛铌锆锡合金表面附着良好，其和成骨细胞在纯钛表面的附着未见显著性差异。     

Periostin抗体的制备和Periostin组织表达特异性的研究

目的:制备抗Periostin抗体,并了解Periostin的组织表达特性。方法:以重组、纯化的小鼠Periostin为抗原,混入Freund完全佐剂充分乳化后,免疫新西兰大白兔;用双向免疫扩散试验检测抗体效价,将获得的多克隆抗血清初步纯化后,用Western blot和免疫组化检测小鼠Periostin的组织表达特异性。结果:Western blot显示Periostin在小鼠颅盖骨及牙周组织总蛋白中有特异性表达,而在肝、肾和脑组织总蛋白中没有表达。免疫组化检测,下颌骨表面骨膜和牙周膜组织中的Periostin染色呈强阳性,而在牙骨质、牙本质、牙槽骨和牙髓组织中则为阴性,并且它不是粘附于细胞表面,而是分布在由成骨细胞和牙周膜细胞分泌于其周围的细胞外基质中,牙槽骨中的骨细胞也不产生Periostin。结论:Periostin这种在有骨形成能力组织中的高表达,而在成熟骨组织中无表达的特点提示了其可能与矿化组织的早期形成有关。     

MinTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附影响的比较研究

目的：以胎牛血清（Fetal bovine serum,FBS）涂层为标准对照,研究minTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附的影响。方法：对商用纯钛进行minTBP-1-PRGDN双靶向融合多肽涂层,以无涂层的钛表面及胎牛血清涂层的钛表面分别作为空白对照和阳性对照,比较不同涂层处理对成骨细胞附着及伸展的影响。结果：成骨细胞粘附1h后,minTBP-1-PRGDN融合肽涂层的钛片上的细胞附着数量最多,FBS涂层表面次之,无涂层的钛片表面细胞数量最少、且与minTBP-1-PRGDN组比较有统计学差异（P〈0.05）;经形态计量学分析：FBS组细胞伸展面积最大,minTBP-1-PRGDN组次之,无涂层组细胞伸展最小。结论：minTBP-1-PRGDN融合肽涂层能提高成骨细胞在钛表面的附着和伸展能力。     

自组装多肽纳米支架对炎症刺激下成骨细胞迁移、增殖影响的研究

目的：通过改变氨基酸序列的方法,合成具有针对成骨细胞双重作用的多肽（RADA16-NBD）,并检测其对炎症刺激下成骨细胞迁移、增值能力的影响。方法：制备RADA16-NBD水凝胶并用扫描电镜观察其结构。同时在多肽水凝胶支架RADA16-NBD上接种炎症刺激下的成骨细胞,观察细胞粘附、伸展、迁移和增殖的情况。结果：炎症刺激下成骨细胞能够在RAD16-NBD水凝胶中粘附、伸展、迁移和增值,并对炎症刺激下成骨细胞的迁移、增殖能力都有较高的表达。结论：自组装多肽水凝胶能够支持炎症刺激下成骨细胞的粘附、伸展、迁移和增殖,显示其既具有成骨又能抑制炎症活化的双重功能,为应用于炎症性骨吸收特别是牙周炎引起的骨缺损的治疗开拓一条新的方向和思路。     

富血小板血浆和乏血小板血浆包被的屏障膜对成骨细胞附着的影响

目的：观察富血小板血浆（plateletrich plasma，PRP）和乏血小板血浆（platelet poor plasma，PPP）包被的屏障膜对人牙槽骨成骨细胞附着的影响。方法取第4代人牙槽骨成骨细胞用于实验。健康成人的全血经过两次离心得到PRP和PPP。将A膜（GoreTex-ePTFE^TM膜）、B膜（GoreTex-Resolut^TM膜）和C膜（Inion-GTR^TM膜）冲切成直径为3mm的圆片并固定于24孔培养板底，用盖玻片作为阳性对照，将包被液分为PRP、PPP、磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS）3个组，分别包被屏障膜或玻片（仅用磷酸盐）2h，将成骨细胞以5×10^7个／L每孔接种于屏障膜或玻片上并孵育24h使细胞附着。苏木素染色，光镜下观察并计数，扫描电镜观察成骨细胞附着膜上的形态。结果：PRP组包被的A、B、C膜上的细胞数分别为23、35和41；PPP组包被的A、B、C膜上的细胞数分别15、12和22；PBS包被的A、B、C膜上的细胞数分别为3、4和6。成骨细胞在PRP、PPP组的附着数量明显高于磷酸盐组（P〈0．05）；PRP组较PPP组的附着数量多（P〈0．05）；盖玻片上的附着数量显著多于3种屏障膜。3种屏障膜相比，B膜和C膜的成骨细胞附着量高于A膜（P〈0．05）。扫描电镜结果显示，PRP组屏障膜上成骨细胞呈梭形，贴壁好，膜表面可见血小板、交织成网状的纤维蛋白，细胞呈现复层生长；PPP组或磷酸盐组成骨细胞贴壁不完全，呈圆形。结论：PRP和PPP能促进成骨细胞在屏障膜上的附着数量；PRP能改善成骨细胞在屏障膜上的附着方式。     

口腔鳞状细胞癌组织中Periostin的表达及其在上皮间质转化中的作用

目的:观察Periostin在口腔鳞状细胞癌组织中的表达情况,及其在上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:用免疫组化法检测59例口腔鳞状细胞癌组织(实验组)和15例正常口腔黏膜组织(对照组)中Periostin、E-cadherin、Vimentin表达情况,分析Periostin与E-cadherin、Vimentin间相关关系。结果:59例口腔鳞状细胞癌组织中Periostin、E-cadherin、Vimentin阳性表达率分别为71.2%、52.5%、39.0%, Periostin表达与肿瘤TNM分期、分化程度、淋巴结转移密切相关(P＜0.05);且Periostin与E-cadherin表达降低和Vimentin表达上调间均存在相关性(P＜0.01)。结论:Periostin可能通过调控上皮间质转化促进口腔鳞状细胞癌侵袭转移。     

小鼠PeriostinC端编码区cDNA克隆及其序列分析

目的：从小鼠牙周膜组织中克隆PerostinC末端编码区基因。方法：用异硫氰酸胍一步法从昆明成年小鼠牙周膜组织中抽提总RNA,用Oligo(dt)作引物逆转录合成cDNA,然后利用PCR技术,从cDNA中扩增出小鼠PeriostinC末端编码区的基因自然（约940bp）,将所得基因片段插入p RSET-B载体,转化大肠杆菌DH5α后随机挑选数个克隆,提取质粒DNA,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果：重组质粒pRSET-B-Periostin的酶切图谱和序列分析结果与国外文献报道一致。结论：克隆到小鼠该蛋白C端编码区基因。     

亲水性纯钛表面对成骨细胞黏附行为的影响

目的:体外研究亲水性喷砂酸蚀钛表面对成骨细胞黏附、铺展行为和黏着斑激酶(FAK)表达的影响.方法:钛片表面分别采用大颗粒喷砂酸蚀表面处理(sandblasted,large-grit,acid-etched,SLA)及亲水性化学活化大颗粒喷砂酸蚀表面处理(chemically-modified hydrophilic SLA,modSLA),在其表面接种人成骨细胞,对细胞黏附率、细胞铺展情况以及黏着斑激酶(FAK)的表达进行检测.应用SAS6.0软件包对数据进行统计学分析.结果:成骨细胞在modSLA表面的早期黏附率(1h、3h)显著高于SLA表面(P<0.05);接种3h后,modSLA表面的成骨细胞呈现更多的肌动蛋白结构和明显的成骨细胞骨架结构,细胞铺展更加明显,modSLA组细胞形状因子均值显著低于SLA组(P<0.05);免疫荧光分析显示,6h modSLA表面细胞内FAK的荧光强度高于SLA组(P<0.05).结论:亲水性化学活化大颗粒喷砂酸蚀处理钛表面较大颗粒喷砂酸蚀处理钛表面能显著增强成骨细胞在材料表面的贴附,促进细胞骨架沿一定方向伸展,促进黏着斑激酶(FAK)的表达,从而增强细胞的黏附力.     

纯钛表面氨基化改性对细胞生长的影响

目的：采用射频低温等离子体,研究庚胺在不同模式下对纯钛表面改性后的理化特征及对不同细胞粘附的影响。方法：利用能谱仪表征不同处理表面的结构、化学成分。同时通过体外培养、细胞计数和荧光显微镜观察研究两种细胞在不同表面的粘附情况。结果：连续波偶连脉冲模式表面引入的氨基最多,成骨细胞在此组表面的粘附显著优于其他组,成纤维细胞则相反,在氨基改性表面早期的粘附明显少于未处理组。结论：等离子体活化的纯钛能影响不同细胞的生长,加速成骨细胞粘附及生长的同时,抑制成纤维细胞的早期贴附。     

Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞 (PDL细胞 )增殖及碱性磷酸酶 (ALP)活性的影响。方法 :采用MTT比色试验及酶动力学方法 ,测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果 :Periostin仅在浓度为 40 μg/ml时 ,可显著促进PDL细胞的增殖 (P <0 .0 1) ,其余浓度则无作用 ,而其浓度在 10 μg/ml～ 80 μg/ml范围中时 ,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平 (P <0 .0 5 )。结论 :小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用 ,但其在这两方面的作用存在差异 ,对此还需深入研究     

RGD肽修饰TiO2纳米管对成骨细胞黏附的影响

目的：评价RGD肽修饰的TiO2纳米管涂层对小鼠胚胎前成骨细胞MC3T3-E1早期生长粘附的影响。方法：利用化学偶联的方法在TiO2纳米管表面引入活性氨基,然后共价接枝RGDC多肽,采用SEM和荧光显微镜对纳米管改性后的形貌进行观察,并用SEM和活死细胞染色的技术观察MC3T3-E1细胞的早期黏附的细胞行为。结果：黏附肽修饰后的材料表面细胞早期黏附的数目更多,铺展的面积更大,丝足更多。结论：采用化学偶联活性RGD肽修饰可以提高TiO2纳米管对成骨细胞早期附着铺展作用。     

不同纳米颗粒二氧化钛的细胞相容性研究

目的:探索二氧化钛发挥最佳生物学效应的纳米晶尺寸。方法:采用MTT法观察成骨细胞在材料表面的增殖情况,细胞培养第5d时对碱性磷酸酶活性进行检测,并用SEM观察第3d时细胞在材料表面的附着形态。结果:成骨细胞在20nm组材料表面的细胞增殖数显著高于其它各组,并具有更好的细胞伸展形态;而200nm组材料碱性磷酸酶表达最高。结论:不同纳米尺寸二氧化钛的细胞相容性存在差别。