嗅三针疗法对AD大鼠海马ChAT和SOD活性的影响

目的探讨嗅三针疗法对AD大鼠海马胆碱乙酰化酶（CHAT）与SOD的影响作用。方法成年SD雄性大鼠40只,体重（290±10）g。随机分为正常对照组、AD模型组、AD嗅神经切断模型组、嗅三针组,每组10只。制作AD大鼠模型和AD并嗅神经切断大鼠模型,通过嗅三针电刺激,测试大鼠水迷宫学习记忆能力并测定海马ChAT和SOD活性。结摹定位航行试验显示,平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组明显短于AD模型组（P〈0．01）;嗅三针组明显短于AD模型组（P〈0．01）;AD模型组与AD嗅神经切断模型组相比较,其差异无显著性意义（P〉0．05）。海马ChAT与SOD检测显示：与正常对照组比较,AD模型组海马ChAT和SOD活性明显降低（P〈0．01）;与AD模型组比较,嗅三针组海马ChAT和SOD活性显著增高（P〈0．01）;AD模型组与AD嗅神经切断模型组相比较,海马ChAT和SOD活性变化差异无显著性意义（P〉0．05）;结论嗅三针疗法能够显著增强AD大鼠学习记忆功能,同时提高海马ChAT和SOD的活性,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

Tau 蛋白过度磷酸化和β淀粉样蛋白对阿尔茨海默病发生的影响

近年来有关阿尔茨海默病发病机制研究主要有两大学说,tau 蛋白学说和β淀粉样蛋白学说,本文总结了有关 tau 蛋白和β淀粉样蛋白的作用机理,并讨论二者相互作用对阿尔茨海默病发病的影响。     

不同程度嗅球切除对小鼠认知功能、内嗅皮质、海马体积及神经病理的影响

目的:探讨不同程度嗅球切除对小鼠认知功能、内嗅皮质、海马体积及神经病理的影响.方法:选取健康雄性昆明小鼠60只,按随机数字表法分为假手术组、不完全切除组、完全切除组,各20只.脑立体定位后,完全切除组在前囟前3.4 mm垂直插入刀片切断嗅束,不完全切除组在前囟前4 mm以同样方式切断嗅球.假手术组只开窗、不切除嗅球.在...     

远志对阿尔茨海默病大鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响

目的:研究远志对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠模型海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响。方法:将32只雄性健康Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,远志1组,远志2组。用脑立体定位技术给大鼠海马注射Aβ1-40与apoE4的混悬液构建AD模型。将大鼠断头取脑,分离海马,采用免疫组化染色法检测大鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的情况。结果:①与对照组比较,模型组、远志1组、2组磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显降低(P<0.01)。②与模型组比较,远志1组、2组磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显升高(P<0.01)。远志2组与远志1组比较,磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显升高(P<0.01)。结论:远志对可溶性Aβ1-40与apoE4联合注射所致AD大鼠模型海马CA1区神经细胞内Tau蛋白过度磷酸化有明显的改善作用。     

嗅三针对阿尔茨海默病患者血清ET及CGRP的影响

目的探索嗅三针对于阿尔茨海默病患者血清内皮素（ET）、降钙素基因相关肽（CGRP）的影响。方法60例阿尔茨海默病患者随机分为两组。观测组用嗅三针刺激法,对照组用药物疗法。分别于治疗前后进行血清ET、CGRP测定,同时进行长谷川痴呆修改量表（HDS）、简易智力状态检查表（MMSE）评分。结果治疗前后两组血清ET、CGRP含量,HDS、MMSE评分改变均有极显著性差异（P〈0．01）;治疗前后两组血清ET、CGRP含量,HDS、MMSE评分差值之差异无显著性意义（P〉0．05）。观测组和对照组总有效率分别为80．00％和76．67％,两组疗效比较差异无显著性意义（P〉0．05）。结论嗅三针刺激法对于阿尔茨海默病患者具有确切疗效,并且使得血清ET降低、CGRP上升,提示嗅三针对阿尔茨海默病的治疗机理与改善血液循环密切相关。     

阿尔茨海默病发病机制中Aβ和Tau蛋白磷酸化的关系

阿尔茨海默病（Alzheimer＇s Disease,AD）是一种以进行性认知功能减退包括记忆障碍和痴呆为特征的神经变性疾病,主要的病理特征包括：神经细胞外以β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）沉积为核心形成的老年斑（senile plaque,SP）,细胞内以超磷酸化的Tau蛋白为核心形成的神经原纤维缠结（neurofibrillary tangle,NFT）及神经细胞丢失等。     

针刺嗅三针对帕金森病小鼠嗅球病理及黑质TH表达的影响

目的 观察"嗅三针"干预脂多糖(LPS)经鼻诱导的帕金森病小鼠行为学、嗅球病理改变以及酪氨酸羟化酶(TH)在黑质中的表达,阐明针刺"嗅三针"对帕金森病早期的干预效应是通过改善大鼠嗅觉障碍而发挥作用.方法 取C57BL/6雄性小鼠40只,随机分为空白组(Sham),帕金森模型组(Model),帕金森模型+嗅三针干预组(XSZ),左旋多巴组(L-DOPA),每组10只.除空白组外,其余各组均用经鼻灌注LPS的方法建立帕金森模型,造模同时进行电针干预10 d,用HE染色法观察嗅球病理变化以及免疫组织化学法测定组织中TH的表达水平.结果 嗅三针有保护帕金森模型嗅球病理改变的作用,也可以显著提高黑质TH的表达水平(P<0.05),与左旋多巴组疗效相当.结论 "嗅三针"干预可以改善LPS诱导的小鼠帕金森病行为学及病理学改变,其机制可能与降低TH在小鼠大脑黑质的表达有关.     

嗅三针对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马ET和CGRP含量的影响

目的探讨嗅三针对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆功能及海马ET和CGRP含量的影响。方法成年SD雄性大鼠随机分为正常对照组、VD模型组、VD嗅球损毁模型组和嗅三针组,每组10只。四血管阻断法制作大鼠VD模型,手术电凝法制作大鼠嗅球损毁模型,采用嗅三针电刺激方法对VD嗅球损毁模型组和嗅三针组进行治疗,42d后测试大鼠水迷宫学习记忆能力并测定海马ET和CGRP含量。结果与嗅三针组比较,VD模型组和VD嗅球损毁模型组大鼠平均逃避潜伏期和平均游泳路程均延长,差异有统计学意义（P〈0.01）;与VD模型组和VD嗅球损毁模型组比较,嗅三针组大鼠海马ET含量降低,CGRP含量升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）;以上各项指标,VD模型组与VD嗅球损毁模型组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论嗅三针能增强血管性痴呆大鼠学习记忆功能、并且能够降低海马ET的含量同时提高海马CGRP的含量,其治疗效应的发挥与嗅觉传导通路密切相关。     

心脑宁胶囊对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区Aβ和Tau蛋白表达的影响

目的：观察心脑宁胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能及海马区β淀粉样蛋白（β-amyloid peptide, Aβ）和Tau蛋白表达情况的影响,探讨心脑宁胶囊的脑保护作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD动物模型,设立假手术组、模型组、心脑宁胶囊治疗组（心脑宁组）。以Morris水迷宫试验检测大鼠的逃避潜伏期以评价认知功能,采用免疫组化法测定大鼠海马区Aβ和Tau蛋白的表达。结果术后各时间点模型组与假手术组相比,大鼠的逃避潜伏期延长（P<0.01）,Aβ和Tau蛋白表达明显增加（P<0.01）;心脑宁组与模型组相比大鼠的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,Aβ和Tau蛋白表达减少（P<0.01）。结论 VD大鼠海马区Aβ和Tau蛋白表达增加,给予心脑宁胶囊治疗后,海马区Aβ和Tau蛋白的表达减少,在一定程度上改善了VD大鼠的认知功能障碍。     

七氟醚对老龄大鼠海马Tau蛋白磷酸化及认知功能的影响

目的研究七氟醚对老龄大鼠海马组织Tau蛋白磷酸化及认知功能的影响。方法将40只20月龄的老龄SD大鼠按随机数字表法分为5组:七氟醚Ⅰa组(SⅠa组)、七氟醚Ⅰb组(SⅠb组)、七氟醚Ⅱa组(SⅡa组)、七氟醚Ⅱb组(SⅡb组)和对照组(C组),每组8只。SⅠa、SⅠb组用1.5%七氟醚分别麻醉2、12h,SⅡa、SⅡb组用3%七氟醚分别麻醉2、12h,C组暴露于纯氧中2h。于麻醉前及麻醉后行Morris水迷宫测试大鼠的认知功能;而后取海马脑组织,HE染色观察细胞核形态的改变,放免法测定脑组织内的GSK-3β和PKA激酶的浓度,免疫印记法测定海马区Tau蛋白的磷酸化水平。结果 SⅠb、SⅡb组麻醉后潜伏期均较麻醉前及SⅠa、SⅡa、C组麻醉后明显延长(P<0.05),SⅡb组麻醉后潜伏期较SⅠb组延长更为显著(P<0.05)。SⅠa、SⅡa、SⅠb、SⅡb组GSK-3β和PKA激酶水平均较C组显著上升(P<0.05);其中SⅠb组显著高于SⅠa组,SⅡb组显著高于SⅡa组,SⅡb组显著高于SⅠb组,SⅡa组显著高于SⅠa组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SⅡa、SⅠb、SⅡb组Tau-pSer396磷酸化水平均较C组显著上升(P<0.05);其中SⅠb组显著高于SⅠa组,SⅡb组显著高于SⅡa组,SⅡb组显著高于SⅠb组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SⅠa、SⅡa、SⅠb、SⅡb组Tau-pSer262磷酸化水平均较C组显著上升(P<0.05);其中SⅠb组显著高于SⅠa组,SⅡb组显著高于SⅡa组,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组海马区细胞形态及分布正常;七氟醚各组可见细胞间隙增宽,细胞数目减少,其中SⅠb、SⅡb组部分细胞出现形态学改变,胞核固缩、浓染甚至破裂。结论七氟醚可通过激活GSK-3β和PKA激酶,使老龄大鼠Tau蛋白(Tau-pSer396、Tau-pSer262)产生一定程度的磷酸化,改变脑细胞的形态,对其认知功能发生一定的影响。     

姜黄素对海马内注射Aβ1-42后大鼠认知功能的影响

目的 探讨姜黄素(curcumin)对Aβ1-42诱导的老年痴呆(Alzheimer's disease,AD)大鼠认知功能的影响及意义.方法 将SD大鼠随机分为AD大鼠模型,假手术组及姜黄素组,将Aβ1-42微量注射至大鼠右侧海马,制作AD大鼠模型,一个月后进行定位航行和空间探索水迷宫试验,分别检测大鼠的学习和记忆能力;姜黄素干预组于AD建模后24 h给予300mg/(kg·d)二甲基亚砜(DMSO)溶解的姜黄素,连续腹腔注射5d;一个月后进行定位航行和空间探索水迷宫试验分别检测各组的学习和记忆能力.结果 与假手术组相比,AD模型组大鼠显示学习、记忆能力显著下降(P=0.013);与AD模型组分别对比,姜黄素干预后大鼠空间学习记忆能力明显改善(P=0.021).结论 姜黄素有改善Aβ1-42诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍的作用.     

蜂毒明肽对阿尔茨海默病小鼠认知功能的影响

目的观察蜂毒明肽对阿尔茨海默病（AD）小鼠认知功能的影响。方法 10周龄昆明种雌性小鼠60只,随机分成6组,每组10只,分别为正常对照组、假手术组、AD模型组、蜂毒明肽低剂量组、蜂毒明肽中剂量组、蜂毒明肽高剂量组。正常对照组不做任何处理,假手术组小鼠侧脑室注射生理盐水。采用侧脑室注射β-淀粉样肽25-35（β-amyloid protein,Aβ25-35）法构建AD小鼠模型。造模14 d后,蜂毒明肽干预的各组小鼠分别腹腔注射不同剂量的蜂毒明肽,连续5 d。Morris水迷宫测试认知功能,免疫组化染色观察海马CA1区Aβ25-35的表达。结果与正常对照组相比,蜂毒明肽各组和AD模型组小鼠逃避潜伏期时间较长,目标象限停留时间较短,穿越平台次数降低,海马CA1区Aβ25-35阳性表达增强（P均〈0.05）,而假手术组无统计学差异（P均〉0.05）。蜂毒明肽中、高剂量组小鼠与AD模型组小鼠相比,前者逃避潜伏期有所缩短,目标象限停留时间增加,穿越平台次数有所增多,海马CA1区Aβ25-35阳性表达有所减低（P均〈0.05）。结论蜂毒明肽能提高AD小鼠认知功能,减少海马CA1区Aβ25-35的表达。     

海马芳香化酶的学习、记忆和认知功能与阿尔茨海默病

海马的功能,一直是人们研究的重点。一般认为,海马跟许多高级神经活动、植物神经功能、行为反应有关。但是,备受学者们关注的则是海马对学习记忆和衰老的影响。在研究中,发现芳香化酶不仅存在于胎盘、性腺、脂肪组织、皮肤及乳腺癌、子宫内膜瘤等病理组织中,还广泛存在于脑组织中,且在海马中也有较高表达。脑组织内的芳香化酶催化雄激素产生的雌激素可影响脑的发育和再生,调节神经内分泌和生殖功能。各种原因导致海马损伤、芳香化酶表达的减少,导致脑局部雌激素水平降低,可引起精神神经症状的出现、学习认知障碍,以及阿尔茨海默病发病率的增加。     

缓激肽对β-淀粉样蛋白所致阿尔茨海默病动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察缓激肽(BK)对β-淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 随机选取20只健康Wister大鼠,进行水迷宫训练后分为4组,在大鼠双侧海马背侧细胞带分别注入蒸馏水5 μl(DW组),BK2.5 μl、DW2.5 μl(BK组),Aβ2.5 μl、DW2.5 μl(Aβ组),Aβ2.5 μl、BK2.5 μl(Aβ+BK组).2周后观察各组大鼠海马、皮层区的磷酸化Tau阳性细胞数.结果 Aβ+BK组海马CA1、CA4区及皮层区磷酸化Tau蛋白免疫阳性细胞积分光密度值明显高于其他各组.结论 Aβ与BK同时注入大鼠海马可产生协同作用,引起Tau蛋白更明显的磷酸化,提示可以用此方法 建立AD动物模型.     

电针对阿尔茨海默病大鼠认知功能及海马Nogo-A、NgR表达的影响

目的:了解电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠认知功能及海马区Nogo-A、NgR表达的影响。方法:双侧海马注射Aβ1-40制备大鼠AD模型,1周后加电针治疗,第5周行水迷宫实验评价大鼠认知功能,并用Western Blot方法检测海马区Nogo-A、NgR表达的变化。结果:水迷宫实验中逃避潜伏期在AD组大鼠较假手术组显著延长(P<0.05),而AD+电针组较AD组显著缩短(P<0.05)。原平台所在象限的游泳时间占总时间的比值AD组大鼠显著低于假手术组(P<0.05),而AD+电针组则显著高于AD组(P<0.05)。Western Blot实验显示:AD组大鼠较假手术组Nogo-A表达增高,NgR表达降低,AD+电针组大鼠较AD组Nogo-A表达则相对下调,NgR表达相对上调。结论:AD大鼠海马区Nogo-A表达增高,NgR表达降低,可能与AD的病理改变有一定联系。电针治疗能明显改善AD大鼠的认知功能,上调NgR表达可能是其机制之一。     

嗅三针对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马ChAT AchE活性的影响

目的：探讨嗅三针对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马ChAT、AchE活性的影响作用。方法：成年SD雄性大鼠40只,体重（300±20）g。随机分为正常对照组、VD模型组、VD嗅球损毁模型组、嗅三针组,每组10只。制作VD大鼠模型和VD并损毁嗅球大鼠模型,通过嗅三针电刺激方法,测试大鼠水迷宫学习记忆能力及海马胆碱乙酰化酶（ChAT）、乙酰胆碱酯酶（AchE）活性。结果：水迷宫定位航行试验显示,平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,VD模型组明显长于正常对照组（P〈0.01）;嗅三针组明显短于VD模型组和VD嗅球损毁模型组（P〈0.01）;VD嗅球损毁模型组与VD模型组之差异无显著性意义（P〉0.05）。海马ChAT、AchE活性比较,VD模型组低于正常对照组（P〈0.05）;嗅三针组高于VD模型组和VD嗅球损毁模型组（P〈0.05）;VD模型组与VD嗅球损毁模型组之差异无显著性意义（P〉0.05）。结论：嗅三针能够显著增强血管性痴呆大鼠学习记忆功能,并且能提高海马ChAT和AchE活性,其治疗效应依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

胃旁路手术对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的影响

目的观察胃旁路手术对APP/PS1/Tau三转基因阿尔茨海默病模型小鼠(AD模型小鼠)认知功能的影响。方法 2018年2月—2019年3月在武汉大学人民医院中心实验室及动物实验中心进行实验,选取来自亲代APP/PS1/Tau三转基因型的子代小鼠(6月龄)随机分为AD胃旁路手术组(n=6)、AD模型组(n=6),另取相同月龄同窝生的C57小鼠随机分为WT正常对照组(n=6)、WT正常胃旁路手术组(n=6)。胃旁路手术2个月后进行APP/PS1/Tau三转基因小鼠的基因鉴定,鉴定后4组行Morris水迷宫实验检测认知功能,最后取4组小鼠海马部位组织用Western-blot方法检测P-Tau(Ser396)和P-Tau(Thr231)蛋白的表达,了解各组小鼠Tau蛋白磷酸化水平情况。结果AD模型组和AD胃旁路手术组的小鼠均携带APP、PS1及Tau 3种基因,即为APP/PS1/Tau三转基因小鼠,造模成功。在水迷宫定位航行实验中,AD胃旁路手术组小鼠较AD模型组平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),而与WT正常对照组比较,AD胃旁路手术组逃避潜伏期延长(P<0.05);空间探索实验中,AD胃旁路手术组较AD模型组跨越平台次数明显增加(t=3.376,P=0.007)。AD胃旁路手术组小鼠较AD模型组Tau蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.01)。结论胃旁路手术能明显改善阿尔茨海默病模型小鼠的认知功能。     

嗅三针治疗对阿茨海默病模型大鼠海马蛋白激酶A活性的影响

目的 通过观察嗅三针疗法对阿茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）大鼠的学习记忆能力与海马组织蛋白激酶A（protein kinase A,PKA）活性的影响,探讨嗅三针疗法治疗AD的作用机制。方法 将成年SD雄性大鼠50只随机分为正常对照组、AD模型组、AD＋嗅神经切断模型组、嗅三针组和嗅三针＋嗅神经切断组,每组10只。制作AD大鼠和AD嗅神经切断大鼠模型,嗅三针组和嗅三针＋嗅神经切断组均进行嗅三针治疗,通过嗅三针治疗,测试大鼠水迷宫学习记忆能力,并采用ELISA法测定海马组织PKA活性。结果 各组大鼠6d平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组、嗅三针组与嗅三针＋嗅神经切断组均显著短于AD模型组（P〈0.01,P〈0.05）;嗅三针组短于嗅三针＋嗅神经切断组（P〈0.05）;AD模型组与AD＋嗅神经切断组相比较,其差异无统计学意义（P〉0.05）。各组大鼠海马组织PKA活性比较,正常对照组、嗅三针组和嗅三针＋嗅神经切断组均明显高于AD模型组（P〈0.01）,嗅三针组高于嗅三针＋嗅神经切断组（P〈0.05）,AD模型组与AD＋嗅神经切断组相比较,其差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 嗅三针能够显著增强AD大鼠学习记忆功能、并且能提高海马组织PKA活性,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

NGF对Aβ1-40舶诱导海马神经元周期素A、B1异常表达的影响

目的研究NGF对Aβ1-40诱导海马神经元周期素（Cyclin）A、B1异常表达的影响。方法原代培养新生大鼠海马神经元7d后，分别在Aβ1-40作用前后加入神经生长因子（NGF），采用免疫组化法、免疫荧光法检测胆碱乙酰化转移酶（ChAT）活性和周期蛋白表达变化。结果①Cyclin A、B1免疫荧光检测：Aβ1-40组、NGF1组、NGF2组海马神经元内均出现蓝色颗粒（Cyclin A）和红色颗粒（Cyclin B1），但Aβ1-40组最多，NGF2组较NGF1组明显；对照组未出现上述颗粒。Cyclin A、B1免疫荧光阳性信号IA值：Aβ1-40组较对照组显著增高（P〈0．01），NGF1组较Aβ1-40组明显降低（P〈0．05），NGF2组与Aβ1-40组比较无明显降低。②ChAT免疫组化染色：Aβ1-40组仅见少量海马神经元内有棕褐色颗粒，而NGF1组、NGF2组及对照组可见较多含棕褐色颗粒的ChAT免疫阳性细胞，但对照组较NGF1组明显，NGF1组较NGF2组明显。ChAT免疫阳性信号IA值：Aβ1-40组较对照组显著降低（P〈0．01），NGF1组较Aβ1-40组明显增高（P〈0．05）；NGF2组与Aβ1-40组比较无明显增高。结论NGF能有效阻止Aβ1-40诱导海马神经元损伤，对Aβ引起大鼠海马神经元内异常表达细胞周期蛋白有一定的逆转作用，为阿尔茨海默病（AD）的防治提供了一定的实验依据。     

脂多糖侧脑室注射对大鼠海马tau蛋白磷酸化水平的影响

目的研究脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）对大鼠海马神经元细胞tau蛋白磷酸化的影响。方法大鼠侧脑室注射LPS（5μg和50μg）后2、4、8h提取海马神经元蛋白，利用免疫印迹法检测tau蛋白磷酸化的情况。结果①大鼠海马神经元细胞tau蛋白在LPS注射2h后出现异常过度磷酸化的表现，之后出现去磷酸化。②注射高剂量LPS后出现了tau蛋白表达总量增加。结论LPS能引起大鼠海马神经元细胞的tau蛋白异常过度磷酸化。