共查询到19条相似文献,搜索用时 140 毫秒
1.
双抗原夹心酶联免疫技术检测丙型肝炎病毒抗体 总被引:1,自引:1,他引:1
1993年3月,国家卫生部下发文件要求对献血员进行抗HCV抗体的检测,随后有10几家检测HCV抗体的ELISA试剂上市,并进行批批检定,但全是间接ELISA法。由于间接法技术自身的缺陷及各生产厂家的产品存在一定的质量问题,导致了一些误诊和漏检。为此,应从根本上解决试剂本身的质量问题,建立双抗原夹心ELISA技术检测抗HCV抗体可大大提高检测试剂的特异性和敏感性。目前双抗原夹心法大多用于检测抗HIV和Tp抗体。此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。而丙型肝炎病毒抗体的检测仍采用间接ELISA技术,目前已有快速金标试剂采用双抗原夹心法原理,通过免疫层析检测抗HCV抗体。但灵敏度较低,不能用于献血员的筛选。我们通过对基因工程抗原进行改造,以适应标记辣根过氧化物酶,建立双抗原夹心ELISA法检测抗HCV抗体。 相似文献
2.
目的:探讨应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测丙型肝炎病毒(HCV)抗原、抗体。方法将 HCV-RNA PCR法检测的50例标本分为阳性组(34例,HCV-RNA阳性)、阴性组(16例,HCV-RNA阴性),对所有标本应用ELISA法进行HCV抗原与抗体检测,对结果进行统计分析。结果阳性组 HCV 抗体阳性率、抗原阳性率均显著高于阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。阳性组中,HCV抗原及抗体联合检测与 HCV-RNA检测结果的符合率为94.12%(32/34),与 HCV抗原、抗体单独检测比较,差异有统计学意义(χ2=20.4424,P=0.0000)。结论 ELISA法检测HCV抗原与抗体,有助于临床准确诊断丙型病毒性肝炎。 相似文献
3.
目的 运用ELISA法分别检测HCV-Ag和HCV-Ab,并进行比较分析,探讨两者之间相关性及临床意义.方法 检测本院来自血液透析室及门诊住院的300例丙型肝炎肝病患者血清.同时设阴性、阳性对照.结果 HCV-Ag阳性20例,HCV-Ab阳性260例,两者均阳性10例,两者均阴性10例.结论 HCV-Ag、HCV-Ab... 相似文献
4.
目的探讨A、B和C三种不同国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)结果的差异性,并将检测结果与电化学发光法检测结果进行比较。方法随机挑选临床检测样本94例。所有样本再使用B、C和Roche电化学发光法试剂盒进行检测。ELISA试剂都使用各自的试剂盒S/CO值进行阴阳性判断,电化学发光检测结果判断以仪器的COI作为判断标准,结果〉1为检测有反应性。结果 A、B、C和电化学发光检测的阳性率分别为84.04%(79/94)、35.11%(33/94)、25.53%(24/94)和39.36%(37/94),A试剂显著高于电化学发光法,而C试剂显著低于电化学发光法。A、B、C和电化学发光检测的结果一致性分别为55.32%(52/94)、95.74%(90/94)和86.17%(81/94)。将A试剂盒检测的结果分为阴性组(〈1)、弱阳性组(1~8)、阳性组(〉8)三个组,阴性和阳性组四种试剂检测结果符合率较好,而弱阳性组符合率较低。结论 3种国产试剂对阴性和阳性标本与Roche电化学发光法检测符合率很高,弱阳性标本符合率则存在差异,对于弱阳性标本建议使用确诊试验。 相似文献
5.
酶联免疫吸附法与胶体金法抗-HCV检测对比分析 总被引:1,自引:0,他引:1
我们自 2 0 0 1~ 2 0 0 2年对漯河市无偿献血人员 16 82 8人 ,采用酶联免疫吸附 (EL ISA)法与胶体金法两种方法进行了抗 -HCV的检测比较 ,现将结果报告如下。1 对象和方法1.1 对象 来自漯河市三县一区无偿献血人员 ,人群分布为干部、职员、工人、农民、学生等 ,年龄在 2 5~ 5 5岁之间。1.2 试剂 EL ISA检测试剂 ,系上海实业科华生物技术有限公司及英科新创科技有限公司提供 ,胶体金法检测试剂 ,系艾康生物技术 (杭州 )有限公司提供 ,两种方法检测试剂均在有效期内使用。1.3 方法 两种方法都是常规静脉采血。EL ISA法 ,应… 相似文献
6.
ELISA检测丙型肝炎病毒核心抗原的临床应用价值 总被引:2,自引:0,他引:2
【目的】探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法的临床应用价值。【方法】采用HCV核心抗原ELISA试剂盒,对32例HCVRNA基因扩增试验检测为阳性的临床丙肝感染者血清进行检测,同时用抗-HCVELISA检测试剂盒作为对照进行比较。【结果】与HCVRNA PCR检测为对照,HCV抗原检测试剂盒的灵敏度为96.9%,特异性为96.7%。32例HCVRNAPCR检测阳性血清,用抗-HCV检测法进行检测,其中有5例阴性,将这5例阴性标本用HCV核心抗原检测法进行检测,其中4例为阳性。【结论】丙型肝炎核心抗原ELISA检测方法能缩短窗口期、敏感性高、特异性好、费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。 相似文献
7.
酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析 总被引:2,自引:0,他引:2
应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)目前已是血站、医院的常用检测方法,虽然该方法操作简单、灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗-HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,给临床诊断、治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗-HCV的因素较多,现就比较常见的影响因素进行分析总结。 相似文献
8.
目的研制灵敏、特异和稳定的可溶性人细胞分化抗原28(sCD28)酶联检测试剂盒,并探讨其临床应用意义。方法取识别不同抗原位点的单抗8G8和2D5分别作为包被单抗和检测单抗,建立双单抗夹心-sCD28酶联免疫检测法(sCD28-ELISA),并绘制标准工作曲线。同时,测定36名健康人、23例系统性红斑狼疮(SLE)、38例类风湿性关节炎(RA)和62例Grave病患者血清中sCD28含量。结果研制的sCD28试剂盒最低检测下限为0.3ng/ml,具有良好线性关系的检测范围是0.5~16.0ng/ml;8G8单抗包被测定板后置4℃冰箱保存180d,加入可溶性CD28-Ig重组蛋白的回收率在93%~109%之间。SLE、RA和Grave病患者血清中sCD28含量分别为0.9~7.3ng/ml、0.3~6.8ng/ml、0.2~3.5ng/ml,明显高于健康人(0~1.1ng/ml,P〈0.01)。结论自制的sCD28试剂盒,能准确测定样本中sCD28含量,可为sCD28分子基础研究和临床疾病辅助诊断、疗效评估及预后判断提供有价值的生物学参数,具有良好应用前景。 相似文献
9.
重组蛋白与合成肽抗原对戊型肝炎的诊断价值比较 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 比较重组蛋白与合成肽抗原建立的酶联免疫吸附试验 (ELISA)在戊型肝炎实验室诊断中的应用价值。方法 选择戊型肝炎病毒第二开放读码框架 (ORF2 ) ,分别采用重组蛋白及合成肽抗原 ,建立酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,同时检测 97份戊型肝炎急性期患者 ,4 7份甲、乙、丙、丁、庚型肝炎患者及 12 0份健康献血者的血清抗 HEV。结果 重组蛋白ELISA、合成肽ELISA与Genelabs重组抗原ELISA试剂盒检测结果的总符合率分别为 96 .9%和 92 % ;重组蛋白ELISA与合成肽ELISA的一致率为 91% ;合成肽ELISA对重组蛋白ELISA的灵敏度为 90 % ,特异度为 10 0 %。结论 戊型肝炎病毒相同表位的重组蛋白和合成肽抗原用于抗 HEVELISA检测有较好的一致性。 相似文献
10.
目的探讨比较酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测血清EB-VCA-IgA浓度与免疫酶法(IE)检测VCA-IgA滴度间的关系,并探讨ELISA法在鼻咽癌血清学诊断中的价值.方法分别采用ELISA法和IE法检测59例鼻咽癌患者和60例健康体检者血清中VCA-IgA.结果ELISA法检测血清VCA-IgA浓度与IE法滴度间有关联.ELISA法诊断鼻咽癌的敏感性为84.7%、特异性为98.3%;IE法为88.1%、90.0%,二者无显著性差异.ELISA法检测VCA-IgA浓度在25例(Ⅰ+Ⅱ)期和34例(Ⅲ+Ⅳ)期临床分期组间有显著性差异(P<0.05);在鼻咽癌患者有无转移组间无显著性差异.结论ELISA法检测血清VCA-IgA可以替代IE法,可更方便地获得精确可靠的定量结果. 相似文献
11.
时间分辨免疫荧光定量检测乙型肝炎病毒前S1抗原的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 建立时间分辨免疫荧光定量分析乙型肝炎病毒PreS1抗原的方法.方法 以基因重组的带有PreS1抗原的乙型肝炎表面抗原作标准品,应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs分别作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中含有PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测.结果 自制TRFIA试剂检测PreS1抗原,单侧95%参考范围为0~0.26 ng/ml;自制TRFIA试剂与ELISA试剂对乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法灵敏度高于ELISA方法,250份乙型肝炎患者血清标本中有3例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原;对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出.ELISA方法在一阳性标本1:4 096倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1:16 384倍稀释时仍为阳性;高、中、低三个浓度,批内和批间精密度测试变异系数(CV,%)均小于10%,平均回收率为103.3%;TRFIA方法检测PreS1抗原与HBsAg及HBeAg无交叉反应;50份我院正常体检者血清标本进行PreS1抗原的检测,结果均正常,特异性100%.结论 TRFIA方法定量检测PreS1抗原,灵敏度高,特异性强,能够准确及时敏感地反映患者体内乙型肝炎病毒的复制情况. 相似文献
12.
目的建立血清新喋呤的酶免疫测定方法,并确定血清新喋呤的正常范围。方法通过碳二亚胺将新喋呤分别与牛血清白蛋白、鸡白蛋白连接制成新喋呤蛋白质交联物,用新喋呤牛血清白蛋白交联物免疫Balb/c鼠,通过细胞融合筛选出产生抗新喋呤的单克隆抗体,并采用该单克隆抗体建立了血清新喋呤的酶联免疫吸附竞争抑制法。结果412例献血员(正常组)血清新喋呤为52±22μg/L(x±s),49例消化道恶性肿瘤为148±105μg/L(x±s),21例皮肌炎为163±114μg/L(x±s)。t检验表明,采用酶联免疫吸附法测定,消化道恶性肿瘤组、皮肌炎组的血清新喋呤与正常组比较P值均<0.001。本方法检测的批内变异系数(CV)为00363,批间CV为00917。结论本法操作简便、方法敏感、正常值范围明确、重复性好,可用于临床研究 相似文献
13.
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)检测技术筛查丙型肝炎的应用价值.方法 对门诊体检人群、无偿献血人群进行HCV抗体初检、复检,筛选HCV阳性血清标本、HCV可疑血清标本检测HCV-cAg;同时对单项丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高的标本和血液筛查合格的标本进行HCV-cAg的检测.对HCV-cAg阳性标本进... 相似文献
14.
电化学发光免疫分析定量检测血清抗HBs的临床意义 总被引:1,自引:1,他引:1
目的探讨电化学发光免疫分析技术(ECLIA)定量检测乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)的临床意义。方法用ECLIA和酶联免疫吸附法(ELISA)对质控品和680例临床血清标本同时进行测定,对两种方法的结果经Х^2检验,进行比较分析。结果ECLIA检测灵敏度为2.0mIU/ml,,ELISA法灵敏度为20mIU/mL,两种检测方法检测103例正规乙肝疫苗接种患者抗-HBs的阳性检出率分别为ECLIA 83.5%、ELISA 60.1%;对已确诊肝炎患者577例的标本检测,ELISA法漏俭率为4.3蟛;对溶血标本的测定ECLIA法优于ELISA法。结论ECLIA是目前较好的定量检测抗-HBs的新技术,在乙型肝炎的诊断、疗效观察和预后判断等方面有重要的临床意义。 相似文献
15.
目的 对时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物进行临床应用评价。方法 用TRFIA、微粒子酶免疫分析(MEIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)同时检测86例HBV感染者和50例正常人血清的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc,对三种方法的检测结果进行比较分析。结果 TRFIA法同MEIA法比较,五项标志物的Kappa值分别为1.000、0.847、0.934、0.698、0.877,均显示二者之间结果的高度一致性;TRFIA法同ELISA法比较,五项标志物的阳性检出数前者均高于后者。结论 TRFIA技术检测HBV血清标志物灵敏度高、特异性强,可替代MEIA和ELISA而成为一种常规检测方法。 相似文献
16.
目的研究我所发现的丙型肝炎病毒(HCV)1b基因型5’非编码区(5’NCR)-222位C—T变异的病毒株,是否为1型中的其他亚型。方法对64例HCV 1b型的样本进行5’NCR扩增后作BamH Ⅰ酶切,并从有此BamH Ⅰ位点的样品中随机选取了6例样品扩增5’NCR和NSSB区,测序后对5’NCR进行序列分析,NSSB区序列分别与GenBank中1型的各亚型序列以及38株来自世界不同地区的1b型参考序列构建遗传进化树。结果6例样本与GenBank中1型的各亚型NSSB区遗传进化树分析结果显示这6株都属于1b型,而非1型的其他亚型,6株变异株与38株来自世界不同地区的1b型参考序列NSSB区的进化树分析结果显示,6例样品并未形成1b型中的独立分支,在遗传进化上与其他38株HCV 1b型病毒株没有明显差异。结论本文的研究证实了我们所发现的HCV 1b型5’非编码区有BamHI位点的病毒株确为1b型的变异株,并非1型的其他亚型。而这种变异与干扰素耐药是否具有相关陛,尚有待于进一步研究。 相似文献
17.
Application of a new enzyme-linked immunosorbent assay for detection of total hepatitis C virus core antigen in blood donors 总被引:3,自引:0,他引:3
Recent studies have shown that total hepatitis C virus (HCV) core antigen, both free and antibody bound, is an accurate indirect marker of viral replication that can be used in clinical practice. The aim of the present study was to evaluate the performance of a new total HCV core antigen enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection and quantification of total core antigen in blood donors, testing positive for anti-HCV antibodies and for prospective low-risk population screening. A population comprising 257 samples, from blood donors detected reactive for anti-HCV antibodies [137 recombinant immunoblot assay (RIBA) positive and 120 RIBA indeterminate], were tested by using a new total HCV core antigen ELISA. HCV-RNA was quantified by using quantitative polymerase chain reaction (PCR) assays in all RIBA-positive samples and RIBA-indeterminate samples that were positive for the total core antigen. Specificity of the assay was studied in 1070 healthy blood donors negative for anti-HCV antibodies. Compared with quantitative PCR assays, the total HCV core antigen assay showed 97.37% sensitivity. The three HCV-RNA-positive samples, which tested negative for the total core antigen, had a low viral load (< 1.4 x 10(4) IU mL(-1)). All samples with more than 1.4 x 10(4) IU mL(-1) of viral RNA were positive for total core antigen, independent of the HCV genotype. Concentration of total core antigen correlated significantly with those of HCV-RNA (r = 0.614, P < 0.0001). Overall specificity in freshly collected blood donor specimens was 99.63%. Our data indicate that the total HCV core antigen ELISA has a sensitivity close to PCR assays in diagnosing HCV infection in blood donors with anti-HCV antibodies and shows an excellent specificity in volunteer donors. This assay, in combination with anti-HCV antibodies screening tests, could be an alternative to molecular assays for HCV infection screening in blood donors. 相似文献
18.
目的评价以丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白为包被抗原的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的准确性和可靠性。方法以基因工程重组HCV F抗原包被酶标微孔板,检测HCV感染者血清抗-F滴度,建立阳性判断值,计算HCV感染者血清抗-F阳性率。与某市售HCV ELISA试剂同时检测HCV感染者和非感染者抗-F阳性率,计算该ELISA的敏感性和特异性等技术指标。结果该间接ELISA检测的敏感性为66.7%,特异性为96.7%,正确指数为63.3%,一致率为81.7%,Kappa值为0.63,变异系数(CV)为6.23%。结论该间接ELISA初步评价指标符合准确性和可靠性要求,具有潜在补充检测HCV感染的扩展应用价值。 相似文献