新疆阿魏蘑菇提取物抗肿瘤实验研究

目的 :　探讨新疆阿魏蘑菇提取物对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用及其有效成分。方法 :　采用肿瘤细胞体外培养技术 ,观察阿魏蘑菇不同剂量的水提物和醇提物 ( 1 0 -1、1 0 -2 、1 0 -3 、1 0 -4、1 0 -5、1 0 -6kg/L)对体外培养的人肝癌细胞株 ( Q3 )、人胃癌细胞株 ( MGC- 80 3)、人宫颈癌细胞株 ( Hela)、小鼠肺腺瘤细胞株 ( SPC- A- 1 )细胞存活及蛋白合成的影响。以大鼠肝细胞( BRL)为正常对照细胞株 ,同时设立空白对照、阴性对照及溶剂对照。受试物与细胞共培养 2 4 h,观察细胞存活量及活细胞蛋白含量的变化 ;采用系统定性测试方法 ,对阿魏蘑菇中可能存在的抗肿瘤有效成分进行测定。结果 :　阿魏蘑菇水提物、醇提物 1 0 -1kg/L剂量对各类型肿瘤细胞的生长及蛋白合成均有明显抑制作用 ;醇提物不同剂量组对肿瘤细胞生长及蛋白合成可产生不同程度的影响 ,对正常肝细胞的存活量无影响 ,且可促进肝细胞的蛋白合成。阿魏蘑菇中可能有糖类、皂甙、蛋白质、多肽、氨基酸、有机酸、生物碱、挥发油、三萜或甾醇、带双键的萜类等有效成分。结论 :　阿魏蘑菇提取物的抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞生长及蛋白合成有关 ,阿魏蘑菇中确切的功效成分及其与抗肿瘤作用之间的关系有待进一步探讨。     

宫颈癌中突变型p53和野生型p53的表达

目的:探讨突变型p53(mt-p53)蛋白和野生型p53(wt-p53)在宫颈癌的发生发展中的作用。方法:对51例标本应用免疫组织化学染色检测mt-p53蛋白表达,应用原位杂交法检测wt-p53 mRNA。结果:随着宫颈癌分化程度降低,突变型p53蛋白表达有升高趋势,在各级间比较均有统计学差异,随着癌前病变的发展,宫颈癌的分化程度降低,野生型wt-p53表达程度明显降低,均有统计学差异(P<0.05)。结论:在宫颈的癌前状态到癌性增殖过程中,mt-p53蛋白在逐渐积累,造成肿瘤的恶性程度逐渐增高,wt-p53具有抑制肿瘤细胞的作用,wt-p53表达程度越低,肿瘤的恶性度越高。而mt-p53表达水平越高,wt-p53表达水平就越低。     

新疆阿魏菇提取物对不同肿瘤细胞p53、fas基因表达的调节

目的 从细胞凋亡角度探讨新疆阿魏菇提取物抗肿瘤机制。方法 采用肿瘤细胞体外培养技术及RT—PCR技术，观察阿魏菇不同剂量的水提物及醇提物对体外培养的四种肿瘤细胞p53及fas基因表达的影响。结果 以β—actin的表达及表达量作为内对照，四种类型肿瘤细胞均出现不同程度的p53基因、fas基因表达水平的上调。结论 受试物可能通过诱导促进肿瘤细胞凋亡基因(p53基因、fas基因)的转录及表达，从而发挥抗肿瘤作用。     

阿魏蘑菇对氢化可的松处理大鼠免疫调节作用的研究

[目的]研究阿魏蘑菇对大鼠免疫功能调节的效应,并初步探讨其机制。[方法]2003年2~8月运用氢化可的松制备免疫低下大鼠模型,50只SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、阿魏蘑菇高剂量组、阿魏蘑菇中剂量组、阿魏蘑菇低剂量组,每组大鼠10只,不同剂量阿魏蘑菇提取物干预14 d,测定几项免疫指标。[结果]阿魏蘑菇提取物高中低剂量组大鼠外周血白细胞数目分别为(6.08±0.64)、(4.86±0.77)、(5.02±0.52)×107/ml,明显高于模型组(3.24±0.51)×107/ml(P<0.01),提示阿魏蘑菇提取物可以升高免疫低下大鼠外周血白细胞数目;模型组大鼠半数溶血值(200.29±44.44)明显低于高中低剂量组(270.23±35.54)、(284.93±81.85)、(243.10±50.99);阿魏蘑菇提取物中低剂量组淋巴细胞增殖能力(0.071±0.016)(、0.053±0.018)高于模型组(0.038±0.017);阿魏蘑菇提取物高中低剂量组抗体分泌细胞功能(0.89±0.06)、(0.98±0.08)(、1.04±0.11)明显强于模型组(0.52±0.16);阿魏蘑菇提取物高中低剂量组大鼠血清白介素-1水平分别为(0.06±0.03)、(0.18±0.07)、(0.09±0.03),明显高于模型组(0.02±0.01)(P<0.01)。[结论]阿魏蘑菇提取物有增强免疫低下大鼠体液免疫应答和淋巴细胞增殖能力的作用,其机制与提高免疫低下大鼠IL-1分泌水平有关。     

挥发性有机化合物对p53、rasp21、p16表达影响

目的探讨苯、甲醛混合物对NIH/3T3细胞中p53、rasp21、p16表达的影响。方法采用免疫组化法(SABC)观察甲醛、苯混合物致NIH/3T3细胞p53、rasp21、p16的表达情况。结果经苯、甲醛混合物处理后的第9~15d,p53、rasp21、p16表达阳性率分别为26%~45%,50%~60%,阳性率远远高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);p16的阳性率为64%~40%,阳性率低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论(VOCs)可使突变型的p53蛋白表达率增高;上调ras癌基因家族的表达产物rasp21;下调肿瘤抑制基因p16的表达。这可能是VOCs致癌的原因之一。     

姜黄素对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的作用的研究以及p53表达的影响

目的：主要探讨姜黄素对人类宫颈癌Hela细胞中增殖作用的影响,以及细胞p53蛋白表达的影响。方法：本文通过不同浓度姜黄素干预人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测药物对Hela细胞的增殖抑制率;RT—PCR和Westernblot检测细胞凋亡相关蛋白p53表达。结果：MTT发现姜黄素对人宫颈癌Hela细胞有一定的抑制作用,并呈时间一剂量依赖性;RT—PCR结果显示p53mRNA的表达增加;westernboltting显示p53蛋白的表达增加。结论：姜黄素可一直Hela细胞增殖,其机制可能是通过增加p53基因的表达而实现。     

氟对人胚肝细胞DNA损伤及p53蛋白表达影响

过量氟不仅可引起大鼠肝、脑细胞DNA损伤^[1-2],而且可以诱导细胞凋亡^[3]。为探讨过量氟可导致人胚肝细胞(L-02细胞)DNA损伤及影响p53表达,本研究采用不同浓度的氟化钠对L-02细胞进行体外染毒,观察过量氟对L-02细胞DNA的损伤作用及其对p53表达的影响,并探讨DNA损伤与p53表达之间的关系。     

胆囊癌及胆囊腺瘤中p53蛋白异常表达的研究

Objective To inviestigate the expression of gall bladder cancer and its relationship with eaneeration. Methods Immunohistoehemistry techniques are used to detect the expression of p53 protein in 36 eases of gall bladder cancer and 23 adenoma. Results p53 protein were founded positive in 19 cases (52.78%) of gall blodder cancer, in 5 cases (21.74%) of adenoma. Conclusion There is close relationship between the over expression and the cancemtion of gall bladder, p53 gene mutation and over expression are in the early stage of gall bladder cancer, and play an important role in the cancemtion of adenoma.     

p53、p63、p73在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的 探讨p53、p63和p73在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及临床意义.方法 用免疫组织化学方法检测p53、p63和p73在56例鼻咽癌组织、15例鼻咽黏膜慢性炎症组织中的表达情况.结果 p53、p63和p73蛋白均表达于细胞核内.p53和p63在鼻咽癌组织中的阳性表达率明显高于慢性炎症组织,且差异有统计学意义(P＜0.01),p53和p63在鼻咽癌组织中表达的高低存在正相关性(P＜0.05).p73在鼻咽癌、慢性炎症组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).p53、p63、p73蛋白表达水平与鼻咽癌患者的性别、发病年龄及颈淋巴结转移均无关(P＞0.05),p63、p73蛋白表达水平与NPC临床分期相关(P＜0.05).结论 通过检测p53、p63、p73蛋白在鼻咽癌组织中的表达情况,可能在鼻咽癌的发生发展过程中其发挥着重要作用.     

变异型p53蛋白表达对乳腺癌手术前阿霉素化疗疗效的影响

目的　探讨变异型p5 3蛋白表达对人乳腺癌细胞阿霉素抗性及乳腺癌手术前阿霉素化疗疗效的影响。方法　应用免疫组化和图像定量分析技术检测 9例乳腺癌组织中变异型p5 3蛋白含量 ;同时应用琼脂培养MTT法测定乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性 ,观察阿霉素化疗对乳腺癌手术前疗效。结果　⑴ 9例人乳腺癌组织 7例变异型p5 3阳性表达 (阳性率为 77% )。⑵变异型p5 3蛋白表达量 (阳性面积相对比 )与人乳腺癌细胞阿霉素抗药指数 (IC5 0值与 1/10血浆峰值浓度的比值 )呈正相关 (r=0 795 6 ,P <0 0 1)。⑶变异型p5 3蛋白表达量与乳腺癌患者手术前阿霉素化疗疗效积分呈负相关 (r=- 0 86 37,P <0 0 1)。结论　变异型p5 3蛋白表达与乳腺癌细胞对阿霉素抗性及临床化疗疗效相关。     

氡致小鼠肺损伤及对肺上皮细胞凋亡和p53蛋白表达影响

目的 现察氡吸入染毒小鼠肺及支气管组织的病理学改变、肺细胞凋亡及p53蛋白表达的变化.方法 建立氡染毒小鼠模型,观察吸入不同剂量即30和60个工作水平月(WLM)和不同时间段(24 h、30 d、90 d和180 d )氡小鼠肺组织的病理变化;采用TUNEL法检测小鼠肺上皮细胞调亡程度;用Westem-blot技术测定小鼠肺及支气管组织神3蛋白的表达水平.结果 病理学结果显示,染毒后肺组织的病理表现存在多样性和时相性,早期为急性损伤性反应,后期演变为上皮细胞及肺间质成纤维细胞的增生及组织的纤维化;随着染毒剂量的增加和染毒后随着时间的延续,小鼠肺组织中的肺上皮细胞凋亡指数及p53蛋白表达量比对照组明显升高.结论　氡吸入染毒可对小鼠肺造成不同类型的病理损伤,p53在氡吸入导致的肺上皮细胞凋亡过程中可能起到了一定的作用.     

骨肉瘤中抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白的表达及相关性研究

目的检测抑癌基因PTEN、Rb、p53蛋白在骨肉瘤中的表达并探讨其相关性。方法采用免疫组化SP法检测人骨肉瘤组织中PTEN、Rb、p53蛋白的表达情况。结果60例骨肉瘤组织中,PTEN的失表达率为21.7%(13/60),在血管扩张型及复发型骨肉瘤中,PTEN失表达有增高趋势。Rb的失表达率为60%(36/60)。p53阳性率为23.3%(14/60)。PTEN与Rb、p53之间比较,P>0.05,缺乏相关性。结论PTEN的失表达可能为骨肉瘤细胞生长活跃和复发的机制之一。PTEN与Rb、p53之间可能通过不同的途径参与骨肉瘤细胞生长的调控。     

子宫内膜样腺癌survivin与p53表达的意义

目的 探讨survivin和p53蛋白在子宫内膜样腺癌发生、发展中的作用。方法 通过免疫组化SP法检测49 例子宫内膜样腺癌石腊标本的survivin和p53蛋白表达。结果 子宫内膜样腺癌组和对照组survivin表达率分别为96％和 2.9％(P<0.01)。p53蛋白在对照组无表达,在子宫内膜样腺癌组13例表达阳性(26.5％),p53阳性率及表达强度与细胞 分化不良相关。结论 survivin表达与子宫内膜样腺癌发生有关,p53过表达提示细胞的恶性程度高和预后不良。     

卵巢上皮性肿瘤中VEGF-C与p53的表达关系的相关研究

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中VEGF-C和p53蛋白表达及与临床病理因素、预后的相关性。方法:应用S-P免疫组织化学染色法检测上皮性卵巢癌32例、交界上皮性卵巢瘤10例、良性上皮性卵巢瘤14例及正常卵巢上皮组织10例VEGF-C和p53蛋白的表达。结果:恶性及交界性卵巢组织中VEGF-C和p53中-高度阳性表达率分别为71.86%(23/32)和59.38%(19/32)、20.00%(2/10)和60.00%(6/10),而良性上皮性卵巢肿瘤和正常卵巢上皮组织中均无VEGF-C和p53中-高度阳性表达。VEGF-C与p53蛋白表达呈正相关。结论:VEGF-C和p53中-高度阳性表达与卵巢癌患者腹水量、盆腹腔种植、淋巴结与远处转移相关。VEGF-C和p53蛋白中-高度表达可作为判断卵巢上皮癌预后的有价值指标。     

GST-π与p53在大肠癌和肠道异型增生病变中的表达及临床意义

目的探讨谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)与p53在大肠癌和肠道异型增生病变中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测30例大肠癌、40例肠道异型增生、20例正常肠道黏膜组织中GST-π与p53的表达情况。结果30例大肠癌、40例肠道异型增生病变、20例正常肠道黏膜组织中GST-π的阳性表达率分别为86.7%、52.5%和15.0%,各组相比差异有统计学意义(P<0.05);p53的阳性表达率分别为80.0%、47.5%和0,各组相比差异有统计学意义(P<0.05),p53阳性者GST-π阳性率高于p53阴性者。结论肠道病变由正常黏膜、异型增生向恶性变化的过程中,组织内GST-π与p53也逐渐升高,说明GST-π与p53和肠道病变的发生、发展有关,可作为大肠癌及癌前病变的标志物之一。     

cdk5、p35和p53基因在砷诱导的神经细胞凋亡中的改变

目的 研究cdk5、p35和p53基因表达量在As2O3诱导的神经细胞凋亡中的改变,为探讨As2O3神经毒性的机制提供基础资料.方法 将原代培养的大鼠神经元分为未处理对照组,DMSO溶剂对照组,1、5、10 μmol/L As2O3染毒组,分别用1、5、10 μmol/L As2O3溶液染毒,未处理对照组只加入培养液.染毒8h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测神经细胞活力,用流式细胞仪检测神经细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测cdk5、p35、p53基因的表达.结果 1、5、10 μmol/L As2O3染毒组神经细胞活力抑制率分别为16.77％、19.72％、27.81％.与未处理对照组和溶剂对照组相比,5和10μmol/L As2O3染毒组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).各染毒组cdk5、p35、p53基因的表达量随着染毒剂量的增加而升高,各组间p35基因表达量的差异无统计学意义(P＞0.05);cdk5和p53基因表达量的组间差异有统计学意义(P＜0.05),5和10 μmol/L As2O3染毒组cdk5基因表达量明显高于未处理对照组和溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);1、5和10 μmol/L As2O3染毒组p53表达量明显高于未处理对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);其中10 μmol/L As2O3染毒组p53基因表达量明显高于DMSO溶剂对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 cdk5、p35和p53可能参与了As2O3诱导的神经细胞凋亡过程.     

n-6/n-3 PUFA对乳腺癌大鼠ER及p53表达影响

目的 探讨不同比例的n-6/n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)对N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导的乳腺癌大鼠乳腺组织中雌激素受体(ER)和p53表达的影响。方法 雌性SD大鼠随机分为n-6 PUFA、10:1 n-6/n-3、5:1n-6/n-3、1:1 n-6/n-3和正常对照5组,前4组以50mg/(kg·bw)MNU单次腹腔注射诱导乳腺肿瘤发生,正常对照组注射等体积无菌生理盐水。给药后立即分组喂养不同饲料,在8和18周时处死动物,RT-PCR和蛋白印迹(Western blot)技术检测各组大鼠乳腺组织ER和p53表达。结果 4组乳腺癌大鼠乳腺组织中ER和p53的表达均较正常对照组((0.73±0.11),(0.08±0.01))有所升高,其中n-6组最高((1.32±0.18),(1.43±0.56)),其余各组随n-6/n-3比值减小而下降,1:1 n-6/n-3组((0.95±0.12),(0.12±0.06))显著低于n-6组(P<0.05)。结论 不同比例n-6/n-3多不饱和脂肪酸对MNU诱导的乳腺癌大鼠乳腺组织ER和p53的表达具有不同影响,1:1 n-6/n-3膳食脂肪酸构成能有效抑制乳腺癌大鼠乳腺组织ER和p53表达的升高。     

氟致人胎肝细胞DNA损伤及其对细胞凋亡和p53蛋白表达的影响

目的　研究氟对L 0 2细胞DNA的损伤作用及其对细胞凋亡和p5 3表达的影响 ,并探讨p5 3表达与细胞凋亡之间的关系。方法　体外培养的L 0 2细胞分别接触 0、4 0、80、1 6 0 μg ml氟化钠 (对照组、A、B、C组 ) 2 4h后 ,检测L 0 2细胞DNA损伤率、细胞凋亡百分率和p5 3蛋白表达水平。结果　染氟各组细胞DNA损伤率均明显高于对照组 (P <0 0 5 )。与对照组相比 ,B组和C组细胞凋亡百分率明显升高 (P <0 0 5 )。B组和C组细胞p5 3蛋白表达量均显著高于对照组 (P <0 0 1 )。结论　氟可导致L 0 2细胞DNA损伤率上升 ,诱导细胞凋亡和p5 3表达 ,并且随着氟浓度的升高 ,细胞凋亡率和p5 3蛋白的表达量均随之升高