基于JAK2/STAT3信号通路探讨升清降浊制动颗粒对多发性抽动症模型大鼠的作用及机制

[目的]基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路探讨升清降浊制动颗粒对多发性抽动症(TS)模型大鼠的作用及机制。[方法]将SD大鼠分为对照组、TS组、升清降浊制动颗粒低剂量组(0.645 mg/kg)、升清降浊制动颗粒高剂量组(2.58 mg/kg)、氟哌啶醇组(200μg/kg)、Coumermycin A1(JAK2通路激活剂)组(4 mg/kg)、升清降浊制动颗粒高剂量+Coumermycin A1组(2.58 mg/kg+4 mg/kg),每组12只。除对照组外,其他组大鼠均需构建TS模型。建模成功后,进行给药处理,给药每日1次,持续21 d。检测大鼠运动行为评分、刻板行为评分变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6水平及纹状体中多巴胺(DA)、多巴胺转运蛋白(DAT)、多巴胺D2受体(DRD2)含量;DNA缺口末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠纹状体中神经元凋亡;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠纹状体中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。[结果]与对照组比较,TS组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、p-JAK2、pSTAT3蛋白表达升高,DA、DAT含量降低(P＜0.05)。与TS组比较,升清降浊制动颗粒低剂量组、升清降浊制动颗粒高剂量组、氟哌啶醇组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、pJAK2、p-STAT3蛋白表达降低,DA、DAT含量升高(P＜0.05)。与TS组比较,Coumermycin A1组大鼠运动行为评分、刻板行为评分、IL-1β、TNF-α、IL-6水平、DRD2含量、神经元凋亡率、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高,DA、DAT含量降低(P＜0.05)。Coumermycin A1减弱了高剂量升清降浊制动颗粒对TS模型大鼠的保护作用。[结论]升清降浊制动颗粒可抑制TS大鼠神经炎症、神经元凋亡及促进DA平衡,该机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

基于JAK 2/STAT 3信号通路探讨三棱莪术及配伍干预大鼠子宫内膜异位症的配伍研究

目的:基于Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3(JAK 2/STAT 3)信号通路,探讨三棱莪术配伍抗炎、促进内膜细胞凋亡,干预大鼠实验性子宫内膜异位症(EMS)的配伍机制。方法:通过自体子宫移植建立大鼠EMS模型,B超检测异位病灶体积。将造模成功的大鼠,按照病灶体积均衡分为模型对照组、三棱20 g/kg组、莪术20 g/kg组、配伍组(三棱莪术等比配伍,20 g生药/kg)和阳性组(AG490 4 mg/kg),每组10只。另设10只大鼠为假手术对照组。给药4 w后,分别以B超和卡尺测量病灶体积,吸取腹腔液后,取异位内膜组织,苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态;酶联免疫吸附(Elisa)法测定腹腔液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real Time-PCR)技术检测内膜组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase 3)、Bax和Bcl 2的mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western blot)法测定内膜组织中JAK 2和STAT 3蛋白的磷酸化表达。结果:造模成功后,B超检测腹壁下方可见子宫内膜异位病灶,HE染色显示异位内膜形态与正常子宫内膜相似。与假手术对照组大鼠相比,模型对照组大鼠腹腔液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著升高(P<0.01),内膜组织中JAK 2和STAT 3蛋白的磷酸化表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组大鼠相比,AG490 4 mg/kg、三棱、莪术以及配伍组异位病灶体积均显著减小(P<0.01),异位内膜组织萎缩,腹腔液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显降低(P<0.05或P<0.01),内膜组织中Caspase 3和Bax的mRNA表达显著上调(P<0.01),Bcl 2的mRNA表达显著下调(P<0.01),莪术组和配伍组的JAK 2和STAT 3蛋白的磷酸化表达明显下调(P<0.01)。结论:三棱莪术配伍能够通过抗炎、促进细胞凋亡,使EMS大鼠病灶缩小,其作用与抑制JAK 2/STAT 3信号通路有关。     

灯盏细辛注射液通过调节JAK2/STAT3信号通路抗脑卒中大鼠神经损伤的研究

[目的] 探讨灯盏细辛注射液（EBI）对脑卒中大鼠的神经保护作用及在该过程中对Janus激酶2（JAK2）/信号转导子和转录激活子3（STAT3）信号通路的调节机制。[方法] 通过大脑中动脉闭塞（MCAO）建立缺血性脑卒中大鼠模型,然后将造模成功的大鼠随机分为模型组、尼莫地平组、EBI组、JAK2抑制剂组（AG490组）和EBI+JAK2激动剂组（EBI+CA1组）,每组20只,另外选取20只大鼠只暴露颈动脉不进行结扎作为假手术组。利用神经功能缺损评分评估大鼠神经功能;2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测大鼠脑梗死面积;苏木精-伊红（HE）和尼氏（Nissl）染色检测大鼠脑组织的病理性形态;TUNEL染色检测大鼠脑组织中神经细胞凋亡情况;酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）的水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠脑组织中Bax、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）及JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白的表达。[结果] 与假手术组相比,模型组大鼠脑梗死面积增大,神经元细胞凋亡率增加,神经缺损评分、MDA水平、Bax蛋白表达及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均升高（P＜0.05）,同时脑组织中神经元退化,神经元数量减少,SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白表达降低（P＜0.05）;与模型组相比,EBI组、尼莫地平组和AG490组大鼠脑梗死面积减小,神经元细胞凋亡率减少,神经缺损评分、MDA水平、Bax蛋白表达及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均降低（P＜0.05）,同时脑组织中神经元损伤减轻,神经元数量增加,SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白表达升高（P＜0.05）;进一步利用JAK2激动剂进行回补实验发现,EBI对大鼠神经损伤的保护作用被逆转（P＜0.05）。[结论] EBI能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻脑卒中大鼠的神经损伤。     

基于JAK/STAT通路的中医药干预溃疡性结肠炎研究进展

溃疡性结肠炎（UC）是以结直肠黏膜慢性持续性炎症为表现的疾患,该病病理机制复杂,与免疫炎症及凋亡活性增强等有关。Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子（STAT）是调控机体生理功能的重要分子通路,可调控肠道促炎因子的释放和诱导细胞凋亡,造成结肠组织损伤。UC状态下,JAK与STAT的生物活性及表达水平均上升,组织炎症反应及凋亡率增加,促使肠黏膜组织遭受破坏。目前,UC的治疗主要使用糖皮质激素、免疫抑制剂等减轻肠道炎症,虽然可以在一定程度上阻遏UC的进展,但不良反应较大。大量研究表明,中医药防治UC具有明显的优势,可显著降低该病复发率。近年来,中医药界开展了大量研究探索中医药通过调控JAK/STAT通路治疗UC的作用,结果表明JAK/STAT通路是中医药治疗UC的关键靶通路。基于虚实夹杂的病因病机,中医药以清热燥湿、凉血活血、健脾温肾和攻补兼施等法调控JAK/STAT通路,维持促炎因子与抗炎因子平衡,削弱结肠炎症反应,抑制细胞凋亡,起到治疗UC的作用。该文总结和分析了中医药靶向JAK/STAT信号通路干预UC的机制和作用,并将不同细胞因子如白细胞介素（IL）-6、IL...     

基于JAK/STAT通路研究没食子酸抗结肠癌作用机制

目的:探讨没食子酸(GA)对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响讨论其作用机制.方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.0...     

温胆汤对肥胖痰湿证大鼠相关炎症因子及JAK2/STAT3通路关键分子STAT3表达的影响

目的:观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL)-6,IL~(-1)7,IL-22等相关炎症因子以及下丘脑组织Janus激酶2/信号传导子及转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路关键分子STAT3 mRNA和蛋白表达的影响,探讨温胆汤干预肥胖痰湿证的内在作用机制。方法:将100只大鼠随机分成2组(空白组30只和造模组70只),空白组采用基础饲料喂养,造模组采用高脂饲料喂养,共6周,制作肥胖痰湿证动物模型。造模成功后,视体质量情况,按顺序淘汰体质量过轻者,遴选出16只肥胖大鼠,并随机分成模型组和温胆汤干预组,每组8只;另在空白组大鼠中随机选取8只设为正常组。温胆汤干预组按剂量15 g·kg~(-1)(以生药量计算)进行灌胃,模型组和正常组均给予等量蒸馏水进行灌胃,每天1次,共6周。麻醉处理前12 h禁食不禁水,麻醉后进行样本取材,检测并计算大鼠体质量,Lee's指数和肥胖率,根据试剂盒要求采用全自动生化分析仪检测大鼠总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠外周血血清中相关细胞因子TNF-α,IL~(-1)7,IL-22,IL-6的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测大鼠下丘脑组织中STAT3 mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠下丘脑组织中STAT3蛋白的表达。结果:高脂饲料喂养成功复制了肥胖大鼠模型,造模组大鼠肥胖率 20%,且与空白组比较,造模组体质量和Lee's指数显著升高(P 0. 05,P 0. 01)。与正常组比较,模型组大鼠体质量显著升高(P 0. 01),血脂水平显著改变(P 0. 01),相关炎性因子(TNF-α,IL-6,IL~(-1)7和IL-22)的水平显著升高(P 0. 01),下丘脑组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,温胆汤干预组大鼠体质量和Lee's指数显著下降(P 0. 05,P 0. 01),血脂水平显著变化(P 0. 01),相关炎性因子(TNF-α,IL-6,IL~(-1)7和IL-22)的水平显著下降(P 0. 01),下丘脑组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达显著下降(P 0. 01)。结论:温胆汤可改善肥胖大鼠痰湿病理状态,其作用机制可能与调节JAK2/STAT3信号通路进而改善机体的慢性炎症状态有关,为温胆汤干预肥胖痰湿证提供了实验依据。     

一贯煎对肝癌JAK1/STAT1信号通路及其下游凋亡相关蛋白表达的影响

目的:观察一贯煎对肝癌细胞增殖和Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录活化蛋白(JAK1/STAT1)信号通路及其下游凋亡相关蛋白原癌基因(C-myc),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),p53表达的影响。方法:雄性昆明小鼠50只,随机均分为模型组,环磷酰胺[CTX,50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,一贯煎高、中、低剂量(46,23,11.5 g·kg-1·d-1)组。腋下注射H22细胞建立小鼠荷瘤模型,一贯煎高、中、低剂量组造模前两周开始用药,CTX组造模后开始给药,模型组造模后灌胃等体积生理盐水,造模后继续给药2周。处死各组小鼠,取瘤组织称重,免疫组织化学法检测肿瘤组织JAK1,STAT1蛋白磷酸化水平,蛋白电泳法检测C-myc,Bcl-2,p53蛋白的表达。结果:与模型组比较,一贯煎(46,23,11.5 g·kg-1·d-1)及CTX均具有显著的抑瘤作用(P0.01);一贯煎高、中剂量均可明显降低JAK1蛋白磷酸化水平(P0.05),明显提高STAT1蛋白磷酸化水平(P0.05);一贯煎高剂量可明显降低C-myc蛋白表达,并促进p53蛋白表达,一贯煎高、中剂量可明显降低Bcl-2蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:一贯煎能抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与控JAK1/STAT1磷酸化,促进其下游p53蛋白表达,抑制其下游Cmyc,Bcl-2蛋白表达,从而促进肝癌细胞凋亡有关。     

电针抑制AT1 介导JAK/STAT 通路治疗高血压左室肥厚大鼠实验研究

目的：探讨电针治疗自发性高血压左室肥厚大鼠的信号传导机制。方法：自发性高血压大鼠（SHR） 随机分为高血压左室肥厚组、电针穴位组、电针非穴组、AT1-R siRNA 组及STAT siRNA 组,以血压正常Wistar-Kyoto 大鼠作为对照组,每组20 只。观察大鼠治疗前后的血压、心脏结构改变、心肌纤维化情况、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ） 浓度、血管紧张素受体1（AT1） mRNA、Janus 激酶及转录的信号转导子及激活子（JAK/STAT） 蛋白表达的情况。结果：电针穴位组治疗后大鼠收缩压下降,而高血压左室肥厚组、电针非穴组、AT1-R siRNA 组和STAT siRNA 组大鼠治疗后收缩压无明显下降,与电针穴位组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。电针穴位组大鼠的左心室质量指数（LVMI） 小于高血压左室肥厚组、电针非穴组、AT1-RsiRNA 组和STAT siRNA 组,差异有统计学意义（P＜0.05）。电针穴位组大鼠的左室短轴缩短率（LVFS） 高于高血压左室肥厚组、电针非穴组、AT1-R siRNA 组和STAT siRNA 组,差异有统计学意义（P＜0.05）。HE 染色切片可观察到：电针穴位组大鼠的心脏较高血压左室肥厚组大鼠心脏体积和心肌细胞横截面积缩小。电针穴位组大鼠心肌组织AngⅡ水平、血清血清型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA） 水平均低于高血压左室肥厚组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。电针穴位组大鼠心肌组织AT1mRNA 水平低于高血压左室肥厚组,差异有统计学意义（P＜0.05）。高血压左室肥厚组、电针非穴组、AT1-R siRNA 组JAK1、STAT3高表达,而电针穴位组JAK1、STAT3 表达减少,两者差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：电针治疗可能是通过抑制AT1 介导的JAK/STAT 信号通路,抑制相关细胞因子和蛋白的表达,达到逆转大鼠左室肥厚的作用。     

STAT家族与乳腺癌的关联特点及中药的干预作用

随着社会节奏增快及生活方式的改变,乳腺癌的发病率和死亡率持续上升。目前靶向疗法在乳腺癌的治疗中前景良好,已发现多种蛋白靶点在乳腺癌的发生发展中扮演重要角色,其中信号转导和转录激活蛋白(STAT)是一组信号转导和转录激活蛋白,是传导细胞转录信息的重要靶点,该靶点可通过对下游细胞增殖、凋亡、细胞迁移、侵袭及血管生成因子等进行调节,进而影响乳腺癌的进展。STAT家族与肿瘤炎症反应密切相关,在肿瘤的发生发展及诊断、预后中发挥标志性作用。“炎-癌”转化指非可控性炎症导致的炎性微环境促进正常细胞癌变的过程,中医理论认为“癌毒”中的“热毒”与肿瘤发展密切的炎症相对应,因而炎症是导致肿瘤发生的重要因素。作为与炎症反应相关的主要环节,STAT家族对多种肿瘤的发生发展及治疗有一定的作用且前景良好,但其对乳腺癌的相关研究虽有但并未深入。中医药在乳腺癌的防治中已有较好疗效,当前有研究表明,中药有效成分、复方对乳腺癌相关的STAT蛋白有一定的干预作用,但尚未有系统综述。为更好梳理总结中药基于STAT家族干预乳腺癌的作用研究,该文对近年来作用于STAT家族的中药研究进行综述,旨在为乳腺癌的临床应用提供新的思路,也...     

基于JAK2/STAT3信号通路探讨红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠作用机制

目的：观察红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法：将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、红芪多糖高、中、低剂量组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg^-1蒸馏水,厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg^-1厄贝沙坦悬溶液,红芪多糖高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg^-1红芪多糖悬溶液,6组小鼠每日灌胃1次,连续给药12周。检测各组小鼠尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),过碘酸雪夫反应(PAS)、马松(Masson)染色观察肾脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾脏中JAK2、STAT3、细胞信号转导抑制因子3(SOCS3)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白及mRNA的表达水平。结果：治疗12周后,与正常组比较,模型组小鼠肾脏组织病理超微结构病变显著,其UA、...     

理气活血方调控MCP-1/JAK2/STAT3信号通路对慢性下肢缺血大鼠血管病变的影响

目的 基于趋化活化蛋白因子-1(MCP-1)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨理气活血方对球囊损伤糖尿病股动脉慢性下肢缺血大鼠的干预作用。方法 选取清洁级雄性SD大鼠50只，随机取10只作为假手术组，给予普通饲料喂养和血管内导丝穿刺操作，不损伤股动脉；余40只大鼠通过高脂高糖饲料喂食和链脲佐菌素(STZ)腹腔注射方法构建糖尿病模型，然后在糖尿病模型基础上，应用血管内球囊损伤股动脉及髂动脉缩缝方法建立慢性下肢缺血模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、理气活血方高剂量组、理气活血方低剂量组，每组10只。辛伐他汀组给予辛伐他汀片1.80 mg/kg灌胃，理气活血方高、低剂量组分别给予理气活血方8.10 g生药/kg和4.05 g生药/kg灌胃，假手术组和模型组给予等容积纯净水灌胃，均1次/d,连续4周。全自动生化分析仪检测血糖、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，HE染色观察血管病理形态，电镜下观察股动脉内...     

基于STAT3通路探讨补肾活血方抑制骨细胞凋亡

目的探讨补肾活血方通过信号转导与转录激活子3(STAT3)通路抑制骨细胞的凋亡对骨质疏松的治疗作用。方法选取SPF级健康雌性C57BL/6小鼠75只,随机分为正常对照组11只及造模组64只。造模组采用去势法建立骨质疏松症模型,正常对照组仅暴露双侧卵巢而不切除。将造模成功的小鼠随机分为模型组、补肾活血方低、中、高剂量组及阳性对照组,各12只。模型组和正常对照组分别灌胃给予蒸馏水5 mL·kg^-1,1次/d;补肾活血方低、中、高剂量组分别灌胃给予1.79、3.57、7.14 g·mL^-1补肾活血方药液5 mL·kg^-1,1次/d;阳性对照组灌胃给予0.14 mg·mL^-1尼尔雌醇混悬液5 mL·kg^-1,1次/d。各组小鼠均治疗12周。检测比较各组骨形态参数,骨细胞凋亡指数(AI),以及骨组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Janus激酶2(JAK2)、STAT3表达水平。结果与模型组比较,各组小鼠骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、...     

中医药调控JAK/STAT经典信号通路辨治银屑病的研究进展

银屑病的发病机制十分复杂,涉及多基因、多细胞、多因子,这些因素通过一系列级联反应将信号进行逐层传递,从而形成了疾病发生的众多生物学通路,对于银屑病相关信号通路的研究已经成为疾病机制探索和药物干预的核心方式。在银屑病相关的所有信号通路中,以Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子（STAT）信号通路最为经典,JAK/STAT信号通路在长期的细胞信号传递进化过程中被选择和放大,以其通路的简洁性、稳定性,参与疾病炎症、免疫调控等环节,将JAK/STAT信号通路作为切入点和突破口的研究,有助于重新梳理和发现银屑病微观机制下的上、下游相关靶点调控方式,不断延伸银屑病机制的探索和认识。该文整理了具有清、消、补功效作用的中药复方制剂及麻黄、靛玉红、厚朴酚、人参皂苷CK、紫草素、芍药苷、丹皮酚、雷公藤多苷等中药单体和成分参与下的JAK/STAT信号通路靶位的相关研究,并将其成果整合,提炼出不同诱导因子如白细胞介素（IL）-6、IL-21、IL-22、IL-23、γ干扰素（IFN-γ）、细胞因子信号转导抑制因子1/3（SOCS1/3）等作用下的JAK/STAT信号通路家族亚型,同时,以JAK/STAT信号通路为特异性参照手段,探讨了其在银屑病血分分型和地域性患者群体中表达的差异,从而为银屑病的机制深入探索和临床靶向诊治提供一定的参考和依据。     

重楼醇提取物通过 JAK/STAT 信号通路对神经胶质瘤 U251 细胞增殖及凋亡影响的研究

目的:探讨重楼醇提取物通过酪氨酸激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号通路对人神经胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响。方法:用重楼醇提取物溶液干预人神经胶质瘤细胞U251细胞,然后采用MTT法检测重楼醇提取物对U251细胞生长增殖的影响。使用AnnexinⅤ-FITC/PI染色检测重楼醇提取物对U251细胞周期及凋亡的影响。Western blot及RT-PCR法检测重楼醇提取物对U251细胞磷酸化酪氨酸激酶2 (p-JAK2)、磷酸化信号传导及转录激活因子3 (p-STAT3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白及JAK2、STAT3、Cyclin D1、Bcl-2 mRNA表达的影响。结果:与空白组比较,重楼醇提取物各剂量组细胞抑制率、24 h后细胞凋亡率显著增加(P0.05),且随着剂量的增加而增加(P0.05,P0.01); p-JAK2、p-STAT3、Cyclin D1及Bcl-2蛋白及JAK2、STAT3、Cyclin D1、Bcl-2 mRNA表达量均显著降低(P0.05),且均随着剂量的增加而降低(P0.05,P0.01)。结论:重楼醇提取物可明显抑制人神经胶质瘤U251细胞的增殖,促进其凋亡,且其作用机制可能与重楼醇提取物阻滞JAK/STAT信号通路的信号传导,抑制通路蛋白及mRNA合成有关。     

健脾滋肾泻火方通过LMP2/JAK/STAT信号通路改善原发免疫性血小板减少症的机制研究

目的:基于LMP2/JAK/STAT信号通路探讨健脾滋肾泻火方治疗原发免疫性血小板减少症(ITP)的可能作用机制。方法:收集脾肾亏虚、火伤血络证ITP患者及正常者外周血单个核细胞(PBMC),将细胞分为正常对照组、模型对照组、强的松5 mg/kg组、健脾滋肾泻火方20 g/kg组。给予相应的药物干预后,收集细胞采用CCK8法检测不同浓度含药血清对细胞活力的影响,RT-PCR法检测Janus激酶/信号转导与转录激活因子(Jak/Stat)信号通路、免疫蛋白酶体亚单位β1i(Lmp2)、干扰素-γ(Ifnγ)、白细胞介素-4(Il4)mRNA的表达,Western blot法检测JAK1、STAT1蛋白表达。结果:与5%、10%含药血清组相比,20%含药血清组的细胞活力明显减低(P<0.05或P<0.01);与正常对照组比较,模型对照组PBMC中Ifnγ mRNA表达显著上调,Il4 mRNA表达显著下调(P<0.01);Lmp2、Jak1、Stat1 mRNA及JAK1、STAT1蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,5 mg/kg强的松10%含药血...     

基于JAK1/STAT1信号通路研究流感“肺脑传变”的分子机制及麻杏石甘汤干预作用

目的 基于Janus酪氨酸蛋白激酶1/信号转导和转录激活因子1（JAK1/STAT1）信号通路研究流感“肺脑传变”的分子机制,并进一步探讨麻杏石甘汤（MXSGT）的干预作用。方法 SPF级BALB/c小鼠100只,随机分为正常组、模型组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组和MXSGT组,每组20只。除正常组常规饲养外,其余4组以A型流感病毒（IAV）滴鼻感染构建小鼠IAV肺炎模型,造模24 h后,各药物治疗组分别予以奥司他韦（21.63 mg·kg^-1·d^-1）、抗病毒颗粒（3.9 g·kg^-1·d^-1）、MXSGT（6.05 g·kg^-1·d^-1）灌胃,正常组和模型组以等量生理盐水灌胃,每天1次,连续给药3、7 d。苏木素-伊红（HE）染色观察肺、脑组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺、脑组织中IAV核蛋白（NP）及JAK1、STAT1 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺、脑组织中JAK1、STAT1蛋白表达水平;免疫组化法检测肺、脑组织中磷酸化（p）-STAT1表达水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-10（IL-10）的水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠肺组织及大脑皮质出现明显病理变化;肺部IAV NP mRNA相对表达量显著增加（P<0.01）;肺组织和脑组织中JAK1、STAT1 mRNA和蛋白表达水平明显增加（P<0.05,P<0.01）;肺组织和大脑皮质中p-STAT1表达水平明显增加（P<0.05,P<0.01）;血清中IL-1β表达量明显增加（P<0.05）。与模型组比较,MXSGT组小鼠肺组织及大脑皮质病理损伤减轻;肺组织IAV NP mRNA相对表达量显著降低（P<0.01）;肺组织和脑组织中JAK1、STAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;血清中IL-10水平显著增加（P<0.01）。结论 JAK1/STAT1信号通路异常活化可能是流感“肺脑传变”的分子机制之一,MXSGT作为有效的抗流感病毒中药复方,可通过调控该通路介导的细胞因子水平的变化缓解IAV肺部感染小鼠的脑组织病理损伤。     

清肺化痰汤通过抑制JAK2/STAT3通路上调CFTR的表达治疗COPD

目的:探索清肺化痰汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗作用及其机制研究。方法:应用烟雾吸入联合脂多糖(LPS)灌肺复合素的方法,建立COPD大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为6组,分别为正常组,COPD模型组,清肺化痰汤低、中、高剂量组和氨溴索组。造模28 d后开始给药,清肺化痰汤低、中、高剂量7.5,15,30 g·kg~(-1),氨溴索35 mg·kg~(-1),连续给药14 d。免疫组化和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)蛋白和mRNA的表达。应用LPS诱导NCI-H292细胞建立黏液高分泌模型,实验分为8组,分别为空白组,LPS组,LPS+10%胎牛血清,LPS+生理血清,LPS+5%含药血清,LPS+10%含药血清,LPS+20%含药血清,LPS+AG490组。免疫荧光、蛋白免疫印迹法(Western blot)和Real-time PCR观察LPS刺激后的NCI-H292细胞中CFTR蛋白和mRNA的表达,Western blot检测LPS刺激后的NCI-H292细胞中Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路表达。结果:正常组大鼠肺组织管腔周围有大量棕褐色颗粒,COPD表达升高,与正常组比较,模型组大鼠肺组织管腔周围的棕褐色颗粒极少,COPD表达较低。与正常组比较,COPD模型组大鼠肺组织中CFTR mRNA和蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,清肺化痰汤低、中、高剂量组明显升高大鼠肺组织CFTR mRNA和蛋白表达水平(P0.05)。与空白组比较,LPS组NCI-H292细胞CFTR mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01),p-JAK2,p-STAT3蛋白表达明显升高(P0.05);与模型组比较,清肺化痰汤5%,10%,20%含药血清组明显升高CFTR mRNA和蛋白表达,明显降低p-JAK2,p-STAT3蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:清肺化痰汤通过抑制JAK2/STAT3通路来上调CFTR治疗COPD。     

基于JAK/STAT信号通路探究中医药改善继发性脊髓损伤后微循环障碍的研究进展

Janus激酶信号传导及转录激活因子（JAK/STAT）作为近年来重点关注的细胞内信号传递途径,在改善脊髓损伤后微环境具有重要作用。中医药治疗脊髓损伤发挥了中医整体观念的优势,通过多路径、多层次和多靶位的作用机制,可改善脊髓组织的微环境,促进脊髓损伤后微环境的修复。现综述了JAK/STAT信号通路、中医药与脊髓损伤相关性及基于中医药干预JAK/STAT信号通路的相关研究,总结了中医药改善脊髓损伤后微环境多因素、多靶点、多系统、多类别的优势,拓宽了脊髓损伤的治疗思维,为中医药治疗脊髓损伤提供新的理论及机制研究方向。