芍红消结颗粒对子宫内膜异位症大鼠异位组织MMP-2 mRNA表达的影响

 目的 观察芍红消结颗粒对子宫内膜异位症大鼠异位组织基质金属酶（MMP-2 mRNA的影响,探讨其治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法 半定量逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR检测EMs大鼠模型的异位组织中MMP-2 mRNA的表达。结果 芍红消结颗粒小剂量组抑制异位内膜体积增长(P<0.05,降低异位内膜质量(P<0.01,减少异位组织MMP-2 mRNA的表达(P<0.01。结论 芍红消结颗粒可通过降低EMs大鼠异位组织MMP-2 mRNA的表达,达到治疗EMs的作用。     

COX-2、NFP在子宫内膜异位症不同证候的表达研究＊

目的 探讨神经丝蛋白（NFP）及环氧化酶2（COX-2）在子宫内膜异位症（EMT）及其两种中医证候（气滞血瘀证、肾虚血瘀证）中的表达，以及二者在EMT子宫内膜中表达的相关性。方法 取气滞血瘀证、肾虚血瘀证各6例EMT患者的在位和异位子宫内膜及6例正常妇女的在位子宫内膜，共5组，30例标本。使用免疫组织化学S-p法观察各组标本中NFP、COX-2的表达情况。结果 ①NFP在气滞血瘀证在位内膜组和肾虚血瘀证在位内膜组的表达与对照组比较，有显著性差异（P < 0.01）；在气滞血瘀证异位内膜组和肾虚血瘀证异位内膜组的表达与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）；两证候组在位内膜组间比较，有显著性差异（P < 0.01）；两证候组异位内膜组间比较，结果无统计学差异（P > 0.05）。②COX-2在气滞血瘀证在位内膜组和肾虚血瘀证在位、异位内膜组的表达与对照组相比，均有显著性差异（P < 0.01）；气滞血瘀证异位内膜组的表达与对照组相比，差异有统计学意义（P < 0.05）；两证候组在位内膜组间比较及异位内膜组间比较，均无统计学差异（P > 0.05）。③NFP和COX-2在所有EMT患者在位内膜组的表达相关性检验，无统计学意义（P > 0.05）；在所有异位内膜组的表达相关性检验，无统计学意义（P > 0.05）。结论 NFP及COX-2在EMT的发生、发展中起到了一定作用，可能成为EMT的诊断标志物，为其治疗提供了潜在的新靶点。其中NFP在EMT不同证候在位内膜组的表达差异具有显著性，可能作为EMT不同证候的特异性蛋白。NFP和COX-2在EMT患者内膜组织中的表达无相关性。     

养血化瘀消癥汤对大鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用和机制

目的:研究养血化瘀消癥汤对大鼠子宫内膜异位病灶的抑制作用及作用机制。方法:取雌性SD大鼠,除正常组10只大鼠外,采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,造模成功的大鼠随机分为模型组,养血化瘀消癥汤高、中、低剂量组(12,8,4 g·kg^-1)和孕三烯酮组(0.05 g·kg^-1),每组10只。分别ig给药28 d后,采集病灶组织标本,观察养血化瘀消癥汤对大鼠子宫内膜异位组织体积的抑制作用;RT-qPCR和Western blot检测各组大鼠异位组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠子宫内膜异位组织VEGF,VEGFR-1 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,药物组大鼠的子宫内膜异位组织较模型组明显抑制,各给药组大鼠的子宫内膜异位组织VEGF和VEGFR-1 mRNA及蛋白表达表达均明显低于模型组(P<0.05)。结论:养血化瘀消癥汤能明显抑制模型大鼠子宫内膜异位组织的发展,这种抑制作用可能与其抑制VEGF/VEGFR信号通路调控病灶血管生成有关。     

桂枝茯苓丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成的作用及机制

目的：探讨桂枝茯苓丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成的作用及机制。方法：采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,分为模型对照组（阴性对照）、桂枝茯苓丸低、高剂量组（4.13,8.26 g·kg^-1）、孕三烯酮组（阳性对照,0.23 g·kg^-1）。另设假手术对照组。连续给药28 d后处死大鼠,免疫组化法检测异位内膜中的增殖细胞核抗原（PCNA）和血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）的表达,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测腹腔液中血管内皮生长因子（VEGF）的水平,RT-qPCR检测异位内膜中VEGF和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达。结果：桂枝茯苓丸显著抑制异位内膜中PCNA,CD31的表达,降低腹腔液中VEGF的水平（P<0.05）以及异位病灶中VEGF、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的mRNA表达水平（P<0.01）。结论：桂枝茯苓丸显著抑制大鼠子宫内膜异位症的血管生成作用,其作用机制与抑制VEGF和HIF-1α的表达有关。     

莪术油对大鼠子宫内膜异位症基质细胞衍生因子-1及其受体表达的影响

目的:观察莪术油对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜组织中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其趋化因子受体4(CXCR4)表达的影响。方法:采用自体移植法建立非动情期SD大鼠子宫内膜异位症模型,将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、莪术油(低、中、高剂量)组,每组8只,另设8只健康大鼠作为空白组;连续给药28天后观察异位内膜生长情况,切取在位及异位内膜组织,行PCR法检测大鼠在位、异位内膜组织及正常在位子宫内膜组织SDF-1和CXCR4的mRNA表达情况,对比莪术油各剂量组与模型组异位内膜组织中SDF-1 mRNA,CXCR4 mRNA的表达差异。结果:大鼠异位内膜组织的SDF-1 mRNA和CXCR4 mRNA高度表达,与在位内膜组织及正常子宫内膜组织比较差异有统计学意义(P0.05);莪术油各剂量组异位内膜组织SDF-1mRNA表达均有不同程度下降,且各剂量组间比较差异有统计学意义(P0.05);莪术油各剂量组CXCR4 mRNA表达亦有下降趋势,各剂量组间比较差异有统计学意义(P0.05);莪术油各剂量组SDF-1 mRNA和CXCR4 mRNA的表达均显著低于模型组。结论:SDF-1/CXCR4轴可能参与了子宫内膜异位症的发展过程;莪术油可明显降低异位内膜组织中SDF-1、CXCR4表达,对子宫内膜异位症起一定的治疗作用。     

SDF-1、CXCR4、MMP-9及VEGF在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体-4(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中的表达情况及意义。方法取50例子宫肌瘤患者正常子宫内膜组织标本作为正常组,50例子宫内膜异位症患者在位内膜组织和异位内膜组织标本分别作为在位组和异位组。采用免疫组化法及PCR技术检测SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在各组的表达情况。结果 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF在子宫内膜异位症患者异位内膜组织、在位内膜组织及正常子宫内膜组织腺上皮细胞和间质细胞中均有表达,以腺上皮表达为著。异位组SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF平均光密度值和SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA、MMP-9 mRNA、VEGF mRNA表达量均明显高于在位组和正常组(P均0.05),而在位组高于正常组(P均0.05)。结论 SDF-1、CXCR4、MMP-9、VEGF的高表达与子宫内膜异位症发病相关,推测SDF-1、CXCR4高表达可能直接或通过其他相关通路影响MMP-9及VEGF的表达而参与子宫内膜异位症的侵袭和血管形成过程,为子宫内膜异位症的发病机制及诊治提供了更深入的靶点。     

基于Rho/Rock通路的三七茜草有效组分宫腔给药对IUD模型大鼠子宫血管平滑肌细胞表型转化机制研究＊

目的 通过三七茜草有效组分宫腔给药对IUD（Intrauterine device）模型大鼠进行干预，观察相关指标以探讨其对子宫血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell，VSMC）的表型转化影响的机制。方法 选用40只SPF级SD雌性已生育大鼠，随机分为空白对照组（空白组）、宫内节育器组（IUD组）、三七茜草有效组分宫腔给药组（SQ-IUD组）、宫宁颗粒灌胃组（宫宁颗粒组）各10只，观察大鼠精神活动状态、子宫炎症水肿情况，电镜下观察子宫内膜形态学改变，ELISA检测宫腔冲洗液血小板源性生长因子（Platelet-derived growth factor，PDGF）含量，免疫组化法检测RhoA蛋白表达水平，PCR法检测RhoA，Rho激酶Ⅱ（ROCKⅡ）、平滑肌22 alpha（SM22α）的mRNA含量。结果 在大鼠造模后状态方面，宫宁颗粒组与SQ-IUD组一般状态与空白组无差别，子宫炎症水肿情况较IUD组轻；在PDGF方面，SQ-IUD组含量显著低于IUD组（P < 0.05）；在免疫组化方面，SQ-IUD组RhoA蛋白表达显著低于IUD组、宫宁颗粒组（P < 0.01）；在RhoA mRNA方面，SQ-IUD组含量显著低于IUD组、宫宁颗粒组（P < 0.01）；在RockⅡ mRNA方面，SQ-IUD组含量显著低于IUD组（P < 0.05），但与宫宁颗粒组差异无统计学意义（P > 0.05）；在SM22α mRNA方面，SQ-IUD组含量显著高于IUD组、宫宁颗粒组（P < 0.05）。结论 三七茜草有效组分宫腔给药可明显减轻IUD放置后引起的炎症反应，可能通过抑制Rho/Rock信号通路激活减少子宫VSMC的表型转化，从而起到防治IUD出血不良反应。     

基于PI3K/Akt/NF-κB途径探究补肾活血方治疗子宫内膜异位症的作用机制研究

目的 探究补肾活血方（BSHXR）治疗子宫内膜异位症（EMS）的作用机制。方法 采用自体子宫内膜移植术建立EMS大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、BSHXR高、中、低剂量组、LY294002（PI3K抑制剂）组,每组10只。给药28 d后,测定大鼠异位子宫内膜病灶体积,苏木精-伊红（HE）染色观察异位子宫内膜组织病理变化,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的水平,免疫组化染色检测异位子宫内膜组织血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）表达,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测异位子宫内膜组织血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA水平,Western blot法检测异位内膜组织磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/核因子κB（NF-κB）通路蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,EMS大鼠异位子宫内膜病灶体积显著增加,血清炎症因子水平升高,CD31阳性细胞数量增加,VEGF、MMP-9 mRNA水平升高,PI3K/Akt/NF-κB信号通路被活化（P＜0.05）。与模型组比较,BSHXR可缩小大鼠异位子宫内膜病灶体积,降低血清炎症因子水平,减少CD31阳性细胞数量,降低VEGF、MMP-9 mRNA表达水平,抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化,其作用呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论 BSHXR对大鼠EMS具有治疗作用,其作用机制与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化有关。     

温经汤加味对EM肾虚血瘀证大鼠局部微环境Caspase-8，MMP-9， E-cadherin， N-cadherin的影响

目的 探讨温经汤加味对子宫内膜异位症（EM）肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法 SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组,其余大鼠采用“冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法”进行肾虚血瘀证造模,造模结束后,仅开腹不进行内膜移植大鼠,设为假手术组,其余大鼠以自体内膜移植法进行EM造模,EM肾虚血瘀证造模成功大鼠随机分为阳性药组及温经汤加味（中药）低、中、高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以5,10,20 g·kg^-1灌胃,每日给药1次,连续4周;阳性药选取达那唑63 mg·kg^-1灌胃,每日给药1次,连续4周。4周后,取各组大鼠内膜组织（异位、在位）进行苏木素-伊红（HE）染色,观察其组织病理学变化;免疫组化（IHC）法、蛋白质免疫印迹（Western blot）法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）及神经钙黏蛋白（N-cadherin）蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin mRNA表达。结果 经IHC法和Western blot法,与假手术组比较,EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,达那唑组、中药低、中、高剂量组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白明显降低（P<0.05,P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。经Real-time PCR法检测,与假手术组大鼠比较,模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin mRNA表达显著升高（P<0.01）,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组大鼠在位内膜比较,达那唑组、中药高、中剂量组在位、异位内膜组织MMP-9,N-cadherin mRNA表达明显降低,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 温经汤加味能够通过调节Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin等因子水平异常表达,改善EM肾虚血瘀证大鼠免疫抑制、阻断微血管新生,从而起到治疗EM的作用;以上微观指标的变化有望成为体现疾病（EM）,证候（肾虚血瘀证）及病理机制（免疫抑制、微血管新生）的重要标志物。     

内异方对子宫内膜异位症大鼠的治疗作用以及对异位内膜VEGF、HIF-1α、NF-κB和PTEN表达的影响＊

目的 本研究通过观察内异方对子宫内膜异位症（endometriosis,EM）大鼠的治疗作用，并进一步阐明可能的作用机制。方法 清洁级雌性成年（9-10周龄）未孕SD大鼠，体重190-210 g，随机分为假手术组、模型组、内异方治疗组和阳性对照组，每组最终纳入10只大鼠。大鼠在第3个动情期时采用子宫内膜自体移植法建立EM大鼠模型。造模成功后，内异方治疗组给予内异方水煎剂灌胃，阳性对照组给予达那唑溶液灌胃，假手术组和模型组大鼠给予同体积生理盐水灌胃，各组连续给药4周。治疗结束后，解剖异位内膜，采用HE染色观察异位内膜的病理形态学改变情况；采用Western blot检测异位内膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)与核转录因子-Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示，内异方改善EM大鼠的异位内膜病理学结构改变。Western blot结果显示，内异方抑制EM大鼠的异位内膜组织的VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达水平，但促进PTEN蛋白表达水平。结论 内异方具有改善大鼠EM的作用，这种作用可能与抑制异位内膜组织中VEGF、HIF-1α和NF-κB蛋白表达并促进PTEN蛋白表达相关。     

Wnt/PCP信号通路中RhoA mRNA与AECOPD中医证型的相关性

目的:探讨平面细胞极性(Wnt/PCP)信号通路中Ras homolog gene family member A(RhoA) mRNA与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)中医证型的相关性,尝试为AECOPD中医证型诊断提供客观标准。方法:收集AECOPD患者100例,分为痰浊壅肺证、痰热郁肺证、痰蒙神窍证、肺肾气虚证、阳虚水泛证5个组别,每组20例。正常组15例。所有入选患者空腹抽取静脉血,血液总RNA的提取采用试剂盒,按说明书进行操作,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测RhoA基因在AECOPD中医证型患者血液中mRNA的表达量,并探讨其相关性。结果:痰热郁肺组和痰蒙神窍组比较无差异;与正常组比较,痰浊壅肺组、痰热郁肺组、痰蒙神窍组、肺肾气虚组和阳虚水泛组中RhoA mRNA表达量明显增高(P 0. 01); 5组证型间RhoA mRNA表达量,痰浊壅肺组痰热郁肺组/痰蒙神窍组肺肾气虚组阳虚水泛组。RhoA mRNA相对表达量与AECOPD 5组中医证型之间存在直线线性相关关系,且呈正性相关。结论:Wnt/PCP信号通路中RhoA mRNA的相对表达量在5组中医证型中存在显著差异,可能给AECOPD中医证型诊断提供一定的客观标准,并揭示其疾病严重程度。     

补阳还五汤对动脉粥样硬化模型主动脉Rho激酶,PAl-1及eNOSmRNA表达的影响

目的:通过运用益气活血法的代表方剂补阳还五汤对动脉粥样硬化模型的干预,观察主动脉组织Rho激酶,纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)及内皮型一氧化氮合酶(e NOS)mRNA的表达、血脂等指标的变化,揭示该方药抗动脉粥样硬化作用的新靶点和新途径。方法:60只大鼠随机分为正常组,模型组,补阳还五汤低、高剂量组(10,20 g·kg-1),辛伐他汀组(0.6 mg·kg-1),补阳还五汤预防组(10 g·kg-1),除正常组外,其余各组维生素D3加高脂饮食诱导大鼠动脉粥样硬化模型,分别ig给予相应药物,补阳还五汤预防组给药的同时造模,造模成功后干预28 d,检测主动脉Rho激酶,PAl-1及e NOS mRNA表达,血脂水平总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。结果:与正常组比较,模型组大鼠Rho激酶,PAl-1 mRNA表达量水平明显升高,e NOS mRNA表达量水平明显降低及血脂TC,TG,LDL,ox-LDL水平明显升高(P0.01),HDL水平明显降低,均具有明显统计学差异(P0.01),补阳还五汤低、高剂量治疗组、辛伐他汀组、补阳还五汤预防组明显降低大鼠Rho激酶,PAl-1 mRNA表达量水平,明显升高e NOS mRNA表达量水平,明显降低血脂TC,TG,LDL,ox-LDL水平,明显升高HDL水平,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:补阳还五汤可以下调Rho激酶,PAl-1 mRNA的表达,同时,上调e NOS mRNA的表达水平、降低血脂,具有抗动脉粥样硬化作用,抑制Rho激酶mRNA,PAl-1 mRNA表达及上调e NOS mRNA表达水平可能是其作用机制之一。     

复健片对MCAO大鼠脑梗死周围组织RhoA表达的影响

[目的]观察复健片对脑梗死大鼠脑组织RhoA表达的影响,探讨其促进神经发生的作用机制。[方法]60只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和药物组共4个组。用改良的Longa EZ法制备大脑中动脉阻塞大鼠模型,药物组灌胃给予复健片水溶液,余各组分别灌胃给予同剂量的蒸馏水。用免疫组织化学法观察模型大鼠梗死周边区脑组织RhoA的表达。[结果]药物组与模型组比较显示,药物组大鼠脑组织中RhoA表达虽然较正常对照组增多,但较模型组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]复健片可抑制RhoA在脑梗死后的表达,从而促进神经发生。     

基于RhoA/ROCK-1通路研究针刺干预SHR脑保护作用机制

[目的]明确自发性高血压大鼠(SHR)脑损害与RhoA、ROCK-1的相关性,探讨针刺干预SHR脑保护的Rho通路机制。[方法]将SHR随机分为模型对照组、太冲穴组,WKY大鼠设为正常对照组。太冲穴组针刺干预4周,其余两组在干预期内给予相同程度、相同时长的抓取。观测各组大鼠收缩压、舒张压、平均动脉压的改变;苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织形态学改变;蛋白免疫印迹(Western blot)法测定各组大鼠脑组织中RhoA、ROCK-1的表达水平。[结果]在干预周期内,正常对照组收缩压、舒张压、平均压均处于正常血压范围内。与正常对照组比较,模型对照组收缩压、舒张压、平均压均较高,且有随着周龄增加而增高的趋势。与模型对照组相比,太冲穴组可有效降低收缩压,有降低舒张压、平均压的趋势。模型对照组较正常对照组脑组织细胞排列紊乱,细胞坏死及间质水肿程度加重,RhoA、ROCK-1表达升高;太冲穴组与模型对照组比较,脑细胞排列规则,细胞坏死及间质水肿消失,RhoA、ROCK-1表达下降。[结论]针刺太冲穴能有效降低SHR血压,改善脑损害,其机制可能与抑制RhoA/ROCK-1信号通路表达相关。     

黄芪多糖调控多胺介导的Ca~(2+)-RhoA通路促进小肠上皮细胞迁移研究

目的考察黄芪多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及迁移过程细胞内多胺水平、细胞质游离钙离子([Ca2+]cyto)的量、细胞骨架蛋白Rho A表达的影响,探讨黄芪修复胃肠黏膜损伤的疗效机制。方法黄芪药材经水提醇沉、Sevage法去蛋白后得到黄芪粗多糖,运用DEAE纤维素柱分离得到黄芪多糖I、II、III、IV,黄芪多糖I以Sephadex LH-20凝胶柱色谱得到黄芪多糖V。Tips划痕法建立IEC-6细胞损伤迁移模型,柱前衍生高效液相色谱法测定多胺的量,流式细胞仪检测[Ca2+]cyto水平,Western blotting法检测Rho A蛋白表达。考察黄芪多糖对正常IEC-6细胞[未加α-二氟甲基鸟氨酸(DFMO)]和多胺耗竭IEC-6细胞(加入DFMO)迁移、多胺水平、[Ca2+]cyto的量及Rho A蛋白表达的影响。结果黄芪粗多糖、黄芪多糖I、黄芪多糖V(50、100、200 mg/L)均能促进IEC-6细胞迁移(P0.01),并且可逆转多胺合成抑制剂DFMO所致的细胞迁移抑制效果(P0.01);在正常(未加DFMO)或多胺耗竭情况(加DFMO),黄芪多糖V均可提高迁移过程细胞内多胺的量(P0.01);黄芪多糖V可提高细胞迁移过程[Ca2+]cyto水平(P0.01),并且可逆转DFMO所致的[Ca2+]cyto水平下降(P0.01);黄芪多糖V(100、200 mg/L)可明显提高Rho A蛋白表达,同时可逆转DFMO所导致的Rho A蛋白表达抑制作用。结论黄芪多糖可加速胃肠黏膜损伤早期修复过程,其机制可能与增加黏膜上皮细胞多胺的量,提升[Ca2+]cyto,从而提高Rho A蛋白表达,进而促进胃肠黏膜上皮细胞迁移有关。     

蠲痛饮对子宫内膜异位症大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的影响

目的:探讨蠲痛饮对子宫内膜异位症(EMS)大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶分子(mTOR)信号通路蛋白的影响。方法:采用自体子宫内膜移植法建立EMS大鼠模型,随机将48只大鼠分为正常组、模型组、蠲痛饮低、中、高剂量组、通路阻滞剂组(LY294002) 6组,分别给予蠲痛饮高、中、低剂量(42. 9,14. 3,4. 8 g·kg~(-1))灌胃,通路阻滞剂组予PI3K通路阻滞剂LY294002(0. 04 g·kg~(-1))腹腔注射,正常组及模型组每天按照10 mL·kg~(-1)给予生理盐水灌胃,各组持续用药28 d。应用透射电镜观察大鼠异位内膜组织超微结构,免疫组化法检测异位内膜组织PI3K,Akt,mTOR蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测核糖体蛋白S6激酶(p70S6K) mRNA相对含量。结果:与正常组比较,模型组异位内膜PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达都明显升高(P 0. 05);与模型组比较,蠲痛饮中、高剂量、通路阻滞剂组干预后PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达明显降低(P 0. 05)。透射电镜下可见蠲痛饮低、中、高剂量组和通路阻滞剂组均能促进腺上皮细胞萎缩或欠整齐,微绒毛减少或消失,胞核固缩,胞内线粒体肿胀或减少,间质细胞凋亡。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子宫内膜异位症发生;蠲痛饮可能通过下调PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达及p70S6K mRNA表达,从而抑制上皮间质细胞活性,促进细胞凋亡,治疗子宫内膜异位症。     

止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织EOS凋亡及Fas,Bcl-2基因表达的影响

目的:观察止哮平喘方对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡及Fas,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bc1-2)mRNA表达的影响,探讨止哮平喘方影响哮喘大鼠肺组织EOS凋亡的机制.方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组(1 mg·kg-1·d-1)、止哮平喘方低、中、高剂量组(11,22,44 g·kg-1·d-1),每组10只.采用卵蛋白(OVA)致敏和激发复制哮喘大鼠模型,共治疗14 d.取右中肺组织4％多聚甲醛固定,石蜡切片,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肺组织EOS凋亡,原位杂交检测Fas,Bcl-2 mRNA的表达.结果:与正常组比较,哮喘模型组大鼠肺组织中EOS的数量较多,EOS凋亡减少,同时FasmRNA表达明显降低、Bcl-2 mRNA的表达明显增加(P＜0.01).药物干预后,各治疗组EOS凋亡增加,Fas mRNA表达增加、Bcl-2 mRNA表达降低(P＜0.01或P＜0.05).Fas mRNA表达与EOS凋亡呈正相关(P＜0.01),Bcl-2 mRNA表达与EOS凋亡呈负相关(P＜0.01).结论:止哮平喘方可促进肺组织Fas mRNA表达、抑制Bcl-2 mRNA的表达,促进肺组织EOS凋亡,减轻气道炎症,从而发挥平喘作用.     

Moxibustion pretreatment inhibits RhoA/ROCK signaling to prevent lung inflammation in asthmatic rats: 艾灸预处理降低RhoA/ROCK信号表达预防哮喘大鼠肺炎

Objective: To determine whether pretreatment moxibustion prevents asthma by down-regulating the lung RhoA/ROCK pathway in rats with bronchial asthma and benignly mediating the lung inflammatory response.Methods: Twenty Sprague Dawley (SD) rats were randomly divided into normal control group (C), asthma model group (M), suspended moxibustion 40 min +asthma group (SM40), and suspended moxibustion 10 min +asthma group (SM10). Ovalbumin was used as a sensitizer. The two moxibustion groups completed moxibustion treatment lasted 40 min or 10 min respectively 30 min before modeling onset, and was repeated five times in each modeling cycle, for a total of 15 times. Samples were harvested on day 30.Results: Lung impairment was significant in the M group, whereas pretreatment with SM10 and SM40 dramatically attenuated the injury. After modeling, mRNA expression of RhoA and ROCK2 in the lung tissue was significantly higher than that in C group (both P < 0.001), resulting in significant increase in protein levels of IL-17A (P < 0.001). Significant decrease in RhoA and ROCK2 mRNA expression was seen in the SM10 (P<0.001, P<0.01) and SM40 (both P<0.001) groups compared to that with M rats. The differential trend in the SM40 group was more evident than that in the SM10 group. Regarding IL-10 or IL-17A protein concentration, an upregulation or down-regulation was observed in both SM10 (P<0.05, P < 0.01) and SM40 groups (both P < 0.001) compared to that with the M group.Conclusions: Moxibustion pretreatment significantly prevented pulmonary inflammation in asthmatic rats, potentially via inhibition of the RhoA/ROCK pathway. The efficacty of moxibustion appeared to be significantly associated with the duration of intervention with moxibustion.     

左归丸对去卵巢大鼠股骨中核心结合因子α1 mRNA表达的影响

目的:观察左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠股骨中核心结合因子α1 mRNA表达的影响,探讨其对骨质疏松的防治机制.方法:280只SPF级SD雌性大鼠,分为3组:正常组40只、假手术组40只、其余采取双侧背部卵巢切除术进行绝经后骨质疏松症造模.21 d后,随机分为5组:模型组、尼尔雌醇组、左归丸高、中、低剂量组.左归丸高、中、低剂量组分别给予ig6.4,3.2,1.6 g·kg-1剂量的左归丸混悬液,1次/d;尼尔雌醇组ig尼尔雌醇混悬液0.21 mg·kg-1,每周1次.于连续给药60,120,180 d,分别取大鼠左后肢股骨近端1/3部分,采用RT-PCR方法测定核心结合因子α1的mRNA表达水平.结果:与正常组比较,模型组股骨中核心结合因子α1 mRNA水平明显降低(P＜0.01);和模型组比较,给药60,120,180 d的左归丸各剂量组,股骨中核心结合因子α1 mRNA水平显著升高(P＜0.05).结论:骨组织中核心结合因子α1 mRNA表达水平的下调可能是PMOP发生的重要机制之一,左归丸能够上调骨组织中核心结合因子α1 mRNA表达,从而有效防治骨质疏松.