缺氧缺血性脑损伤对新生大鼠发育期间额叶皮质突触质量的影响

目的探讨缺氧缺血性脑损伤(hypoxia ishemia brain damage,HIBD)对新生大鼠发育期间额叶皮质突触质量的影响.方法取7日龄Wistar仔鼠80只,采用抽签法将每窝仔鼠随机分成实验组(E组)和假手术组(对照组C组).实验组鼠在乙醚麻醉下行颈前正中切口,分离右侧颈总动脉,1号手术线结扎,保温2 h后,放入含8%氧气的氮氧混合气体的容器内2 h,制成HIBD模型.假手术组只分离该血管,不结扎也不低氧处理.从生后7 d到2个月(成年)分8个时段对额叶皮质的发育,采用形态学和形态计量法的方法进行长期跟踪研究.结果实验组6 h～7 d各组可见神经元、胶质细胞及毛细血管间隙变大,神经元胞质内出现空泡,线粒体肿胀、嵴模糊,RER肿胀脱颗粒,核皱缩不规则甚至溶解,神经元突起比假手术组稀疏.脑损伤后仔鼠额叶皮质神经元及神经纤维的密度显著降低(P＜0.05,P＜0.01),突触的体视学参数,表面积密度和面数密度降低,突触后膜致密层变薄(P＜0.05,P＜0.01).结论缺氧缺血性脑损伤对新生大鼠发育期间额叶皮质中突触的质量,神经元及神经纤维密度的影响,是影响智力发育的重要因素.     

早期刺激和环境干预对子宫内缺氧缺血新生大鼠学习记忆能力的影响

目的：探讨早期刺激和环境干预对子宫内缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)新生大鼠脑功能的影响及其机制。方法：选用孕21dSD大鼠16只。结扎SD孕鼠的一侧子宫角血管。建立宫内HIBD模型，分为HIBD干预组与HIBD非干预组；另一侧子宫角血管不进行结扎。其胎鼠选为正常非干预组与正常干预组。采用早期刺激和丰富环境对干预组进行早期干预各14d，干预结束后对4组实验鼠进行“Y”臂迷宫和闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测。并在额皮质和海马CA2区、CA3区进行苏木精-伊红染色比较存活神经元数目。结果：学习分辨能力、记忆保持率、F-VEP主波P1潜伏期正常组好于HIBD组，干预组优于非干预组(P&;lt;0.01)；HIBD干预组学习记忆能力改善明显，两因素交互作用有显著性意义(P&;lt;0.05)。额皮质和海马CA2区、CA3区存活神经元总数，正常组多于HIBD组。干预组多于非干预组(P均&;lt;0．01)，两因素交互作用有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：早期干预可显著改善宫内HIBD新生大鼠学习记忆能力，机制与额皮质及海马CA2区、CA3区神经元存活率提高，突触联系和脑神经纤维髓鞘发育改善有关。     

经鼻给予胰岛素样生长因子1对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响

目的：胰岛素样生长因子1具有非选择性神经营养作用，选择经鼻外源性中枢给药方式，观察其对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制。方法：实验于2000—01／03在南京医科大学儿科研究所实验室完成。取28只7日龄新生大鼠随机分为对照组，给药组和假手术组3组。给药组于缺氧后经鼻腔滴入胰岛素样生长因子12．5μg(溶于生理盐水0．1mL中)；对照组于缺氧缺血性脑损伤后给予等量的生理盐水经鼻腔滴入；假手术组仅分离颈总动脉，不结扎不缺氧。24h后处死动物取脑组织，应用组织学方法检查损伤部位变性神经细胞计数，应用免疫组化法检查脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达，评估胰岛素样生长因子1的脑保护作用。结果：脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达水平：假手术组个别皮质区域有少量表达。与对照组(7．27&;#177;0．48)相比，用药组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(2．03&;#177;0．64)表达减少(P&;lt;0．01)，神经细胞总数增加(P&;lt;0．01)，变性／坏死神经细胞数减少(P&;lt;0．01)。结论：鼻腔滴入胰岛素样生长因子1可能通过降低缺氧缺血性脑损伤脑组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达，从而对缺氧缺血性脑损伤脑组织损伤产生保护作用。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时血红素氧化酶-1mRNA及其蛋白的表达

探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemia brain damage。HIBD)后海马区血红素氧化酶-1(heine oxygenase-1，HO-1)mRNA和蛋白表达的变化及作用。方法：7d龄sD仔鼠72只，完全随机分为HIBD组和假手术对照组。用原位杂交及免疫组化观测两组在不同时间点海马区HO-1mRNA及蛋白阳性细胞数量的变化。结果：HIBD组右侧海马HO-1mRNA表达4h开始升高(42．8&;#177;6．1，t=25，P&;lt;0．05)，12h达高峰(85．7&;#177;6．4)，48h开始略有下降(67．7&;#177;6．1)，72h后(52．3&;#177;5．2)仍高于对照组(25．0&;#177;5．1，t=9．2，P&;lt;0．01)。HO-1蛋白的表达与HO-1 mRNA表达变化规律相一致。结论：HO-l mRNA及其蛋白表达的增加在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的发病机制中有重要作用。     

电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区突触结构的影响

目的：探讨针刺对缺血性脑损伤后的突触可塑性促进作用的机制。方法：36只SD大鼠分为假手术2、5周，缺血2、5周，缺血+针刺2、5周共6个组，采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型．研究缺血2和5周后缺血区皮质突触超微结构的变化规律和针刺对其影响。结果：造模后突触的面数密度(Nv)、突触连接带面密度(Sv)和突触后膜致密物质(PSD)显著下降。缺血5周组大鼠缺血脑区Nv．Sv为(0．8．79&;#177;0．104)个／μm^3，(0．082&;#177;0．003)μm^2／μm^3，均多于缺血2周组(0．489&;#177;0．122)，(0．038&;#177;0.002)μm^2／μm^3；其中Sv和PSD在电针治疗2和5周时均显著上升，而Nv，在电针治疗5周时才显著增加(P&;lt;0.05)；造模后突触的体密度和突触界面曲率数值都会显著减少(P&;lt;0．05)，电针似不能提高这两个指标的数值。结论：提示电针可以保护与改善脑缺血模型大鼠皮质的神经突触结构，为电针促进缺血性脑损伤后的恢复提供了有力的物质形态学基础。     

氦氖激光对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后海马齿状回细胞增殖的影响

目的：氦氖激光照射致新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage，HIBD)，观察其对海马齿状回细胞增殖的影响，为临床治疗HIBD提供新思路。方法：7d健康Wistar大鼠56只随机分为假手术组，缺血缺氧组，缺血缺氧激光非穴位照射组，缺血缺氧激光穴位照射组。常规苏木精-伊红、Nissl染色以及采用抗Brdu抗体进行免疫组织化学染色。结果：激光穴位照射组与其他组相比海马神经元变性坏死减轻，胞体内Nissl体丢失较少，海马齿状回Brdu标记阳性细胞的表达量明显增加24．06&;#177;3．55，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：激光穴位照射对海马神经元有保护作用，促进了海马齿状回细胞的增殖。     

缺氧缺血脑损伤大鼠脑神经结构与突触素表达的变化

目的 研究大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后脑神经结构与突触素表达的变化.方法 将7日龄SD大鼠分为HIBD组和假手术对照组.采用单侧颈总动脉结扎术建立缺氧缺血性脑损伤大鼠模型,于脑缺氧缺血后1,4,7,14,28 d采集脑组织标本,进行HE染色和透射电镜观察其组织病理学及神经超微结构变化,并用免疫组化技术检测大鼠脑皮质及海马CA1区突触素的表达.结果 HIBD组脑损伤后神经元突起呈灶性坏死,突触数量减少、结构破坏;同时突触素的表达逐渐增高,至7 d达到高峰;而后开始下降,至28 d明显低于相应对照组（P〈0.001）.假手术对照组突触素表达水平则随日龄增加逐渐增高（P〈0.001）.结论 缺氧缺血性脑损伤可影响发育期脑组织神经结构与突触素的表达,损伤后两周内脑神经具有较强的突触可塑性.     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织结构和功能的改变及AMPA受体拮抗剂的干预效应

目的：谷氨酸浓度过度升高和谷氨酸受体过度活化引起的兴奋毒性是缺氧缺血性脑损伤(hypoxic—ischemic brain damage，HIBD)发生发展的重要环节，α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(aloha-amino-3-hvdroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid，AMPA)型谷氨酸受体起重要作用。研究选择性AMPA受体拮抗剂GYKI-52466对新生鼠HIBD的保护作用及机制。方法：实验于2003-04／2004-03在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室完成。7日龄Wistar大鼠27只，随机分为4组：正常对照组；假手术组；缺氧缺血组；GYKI-52466干预组。正常对照组用于观察脑组织髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)在正常新生鼠的表达情况；干预组在缺氧缺血后即刻开始予GYKI-52466 10mg／kg腹腔注射，1次／h，共4次；假手术组予等量生理盐水腹腔注射。缺血缺氧后l周取脑，免疫组化、图像分析法测双侧脑半球横截面积之比，检测脑组织。MBP、NF表达及积分吸光度值。结果：缺血缺氧后患侧脑组织横截面积下降。缺血缺氧后1周，缺氧缺血组患侧与对侧脑半球横截面积之比(L：RAREA)为(0．680&;#177;0.043)，较假手术组(0．985&;#177;0．023)明显降低(P&;lt;0．001)；GYKI-52466干预组L：RAREA值为(0．804&;#177;0.031)，明显高于缺氧缺血组(P&;lt;0.001)。MBP第8天无显著表达。生后第11天嗅束、纹状体、胼胝体、内囊、外囊染色阳性，可见少许突起延伸至皮层。生后第14天上诉部位表达更加丰富，前联合出现染色阳性。缺血缺氧后1周，缺氧缺血组患侧与对侧脑组织。MBP积分光密度之比(左侧：右侧，L：R MBP)为0．328，明显低于假手术组的0．986(P&;lt;0．02)，干预组L:R MBP值为0．544，高于缺氧缺血组(P&;lt;0．05)。结论：AMPA受体拮抗剂GYKI-52466可以减轻脑萎缩和MBP表达下降程度，对新生鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。     

纳洛酮对缺氧大鼠皮质神经元的保护作用

背景：纳洛酮对脑缺血再灌注损伤细胞的保护作用机制尚不明确。选择体外培养皮质神经元研究纳洛酮疗效可排除多重因素干扰。目的：观察缺氧对体外培养大鼠皮质神经元的影响及纳洛酮的保护机制。设计：重复测量设计。地点和对象：实验地点：军事医学科学院神经生物学研究室。研究对象：体外培养12d的Wistar大鼠皮质神经元。干预：取体外培养12d的Wistar大鼠皮质神经元，随机分为正常对照组、缺氧组、纳洛酮组(缺氧前24h加纳洛酮预处理)；缺氧6h后在常氧下继续培养24h。主要观察指标：观察各种条件下神经元的存活率和形态学的改变，测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果：缺氧后可见神经元胞体肿胀、细胞死亡，LDH渗出量增多[6h：正常对照组为(78．68&;#177;7．34)％，缺氧组为(194．38&;#177;22．32)％；12h：正常对照组为(77．98&;#177;8．85)％，缺氧组为(331．66&;#177;36．12)％]，细胞存活率减少[6h：正常对照组为(91．82&;#177;2．89)％，缺氧组为(66．96&;#177;4．98)％；12h：正常对照组为(90．84&;#177;2．61)％，缺氧组为(32．02&;#177;6．34)％]，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。经纳洛酮预处理的神经元，缺氧后神经元胞体肿胀、细胞死亡程度轻于缺氧组，LDH渗出[6h：(159．86&;#177;34．03)％；12h：(256．28&;#177;28．29)％]显著低于缺氧组(P&;lt;0．01)，而存活率[6h：(78．08&;#177;4．15)％：12h：(53．68&;#177;4．32)％]明显高于缺氧组，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：对缺氧诱导的皮质神经元的损伤，纳洛酮具有明显的保护作用。     

神经生长因子对缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的影响

背景：细胞凋亡是脑缺氧缺血神经细胞死亡的一种方式，体外试验表明神经生长因子(nerve gzowth factor，NGF)缺乏可诱导神经细胞凋亡。目的：探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damageHIBD)与细胞凋亡之间的关系，研究NGF对HIBD的保护作用，为用NGF治疗新生儿HIBD提供理论依据。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点与材料：7dSD大鼠40只来源于南京医科大学实验动物中心，体质量约14～18g，雌雄不拘，饲养于屏障环境的SPF级实验动物。干预：4JD只大鼠制成HIBD动物模型，随机分成两组：HIBD模型对照组20只，NGF治疗组在大鼠缺氧缺血后即刻腹腔注射NGF。主要观察指标：观察NGF对HIBD模型的新生大鼠体质量增长情况、死亡率、左右脑质量影响，并用原位缺口末梢标记(in situ nick end labeling，TUNEL)法检测NGF对缺氧缺血后脑细胞凋亡的影响。结果：HIBD模型NGF治疗组体质量增长明显高于对照组(P&;lt;0．01)；治疗组实验过程中死亡率明显低于对照组；HIBD模型NGF治疗组与对照组健侧(右侧)脑质量相近，但治疗组患侧(左侧)脑质量[(0．57&;#177;0．02)g]明显重与对照组[(0．42&;#177;0．1)g，P&;lt;0．01]；治疗组左右脑质量无显著差异，而对照组左右脑质量差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；TUNEL染色所见阳性凋亡细胞，其凋亡特征为胞体缩小、核固缩、核碎裂、凋亡小体形成。NGF治疗组阳性细胞均数明显低于对照组(P&;lt;0．01)。结论：NGF治疗减轻了缺氧缺血后脑萎缩和细胞凋亡。     

新生大鼠脑缺氧缺血后热休克蛋白表达与KATP通道开放剂的脑保护作用

目的：观察KATP通道开放剂克罗吗啉对新生大鼠脑缺氧缺血后热休克蛋白70表达、病理学损伤变化的影响。从基础水平探讨KATP通道开放剂保护脑的作用机制，为其在实际应用上寻求依据。方法：实验选用72只7日龄新生大鼠，随机分为4组，分别为缺氧缺血组&;lt;结扎左颈总动脉后予8％氧2h)，给药组(缺氧缺血前给予克罗吗啉)，正常对照组，假手术组。每组再分为24，48，72h3个亚组，共12组，每组6只。每组分别在24，48，72h用免疫组织化学及苏木精一伊红染色方法检测缺氧缺血和克罗吗啉干预后不同时间点脑皮质热休克蛋白阳性细胞数表达情况及病理学改变。结果：干预后24，48，72h给药组大鼠脑皮质中热休克蛋白70阳性细胞数[(40．87&;#177;7．97)，(82．25&;#177;8．50)(77．75&;#177;10．35)个／视野]明显多于缺氧缺血组[(17．25&;#177;2．30)，(51．75&;#177;9．00)(44．37&;#177;6．14)个／视野](P&;lt;0．05)。干预后24，48，72h缺氧缺血组大鼠脑皮质中热休克蛋白70阳性细胞数明显多于正常组(P&;lt;0．01)。结论：KATP通道开放剂对缺氧缺血后脑损伤有保护作用，可能与其诱导神经元热休克蛋白70合成的增加，阻滞了细胞凋亡有关。     

缺氧缺血性脑病大鼠脑内多巴胺含量的动态变化及组织病理学观察

目的：探讨多巴胺在缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)中的变化规律，揭示HIBD中细胞形态变化及其死亡形式，为缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)的发病机制的研究及康复措施的介入提供实验和理论依据。方法：实验选用7d龄SD大鼠99只，按随机抽签法分为对照组(n=9)、假手术组(n=9)和实验组(n=81)，用高效液相-电化学检测法测定脑损伤后0，0．5，1，3，6，9，12，24，48h皮质、纹状体、脑干多巴胺含量的动态变化。光镜下观察组织的病理改变。结果：动物缺氧缺血后多巴胺在0．5h即有明显上升[左侧皮质，纹状体分别为(25．21&;#177;1．29)，(63．17&;#177;2．02)μg／g]，纹状体和皮质、脑干内多巴胺含量分别在缺氧缺血后6，9h达高峰，之后缓慢下降。细胞病理改变：缺氧缺血后3h时水肿，6h时有局灶性坏死，12，24及48h出现大量坏死的神经细胞。凋亡出现在细胞坏死之前，缺氧缺血后3h凋亡细胞出现，6h后凋亡细胞明显增加。结论：新生鼠缺氧缺血后早期脑细胞内多巴胺含量即增高，脑细胞损伤与多巴胺含量有关；缺氧缺血后脑细胞死亡有凋亡和坏死两种形式。     

AMPA受体拮抗剂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤自由基的影响

目的：探讨α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid，AMPA)受体拮抗剂GYKI-52466对缺氧缺血新生鼠脑组织自由基的影响。方法：选用7日龄Wistar大鼠30只．随机分为3组，假手术组，缺氧缺血组和治疗组。治疗组在缺氧缺血后即刻开始予GYKI-5246610mg／kg腹腔注射，每小时注射1次，共4次。缺氧缺血组予等量生理盐水腹腔注射。于处置后24h检测脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase SOD)、谷胱甘肽、丙二醛水平。结果：缺氧缺血组脑组织SOD，GSH水平分别为(1．47&;#177;0．15)mkat、(75．03&;#177;5．22)mg／g，明显低于假手术组(2．51&;#177;0．16)mkat、(88．66&;#177;4．50)mg／g(t=3．237-15．573，P均&;lt;0．001)；MDA含量为(8．03&;#177;0．64)pmol／g，较假手术组(5．12&;#177;0．57)pmol／g显著升高(t=6．253～15．373，P&;lt;0．001)。而治疗组脑组织SOD、谷胱甘肽水平分别为(2．73&;#177;0．21)mkat、(83．47&;#177;6．38)mg／g，明显高于缺氧缺血组(P&;lt;0．001；P&;lt;0．005)；丙二醛含量为(6.07&;#177;0．68)pmol／g，较缺氧缺血组显著下降(P&;lt;0．001)。结论：AMPA拮抗剂可通过拮抗氧自由基发挥对缺氧缺血性脑损伤时脑的保护作用。     

局灶性缺血预处理对脑缺血耐受大鼠神经营养因子表达的影响

目的：观察局灶性缺血预处理对脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的表达影响，探讨神经营养因子与缺血耐受的关系及其在内源性保护机制中的作用。方法：实验选用30只SD大鼠，随机将30只大鼠分为实验组、假手术组、对照组，每组10只。利用线栓法建立局灶性脑缺血耐受的动物模型。实验组预缺血10min，3d后给于缺血2h，再灌注22h处死。假手术组暴露解剖结构10min，3d后同实验组；对照组两次均为假手术。运用对脑梗死体积的测定、光镜下组织病理改变及免疫组织化学染色和图像分析比较各组BDNF的表达变化。结果：假手术组梗死体积【(126．0&;#177;22．4)mm^3】与预缺血组【(102．0&;#177;24．2)mm^3】比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。假手术组病理改变最为明显，实验组病理改变明显轻于假手术组，仍可见皮质和基底核神经细胞溶解，核皱缩，但可见尚存的大脑皮质的正常神经元排列结构。对照组未见明显的病理改变。本实验中BDNF蛋白阳性细胞表达定位于胞浆呈棕黄色。假手术组阳性细胞的平均吸光度(A值)与对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。实验组阳性细胞的平均A值与假手术组、对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：局灶性缺血预处理对随后的脑梗死有明显的保护作用，能够诱导缺血耐受的产生，其可能的机制是通过上调BDNF的表达。     

氦氖激光对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠学习记忆能力的影响

目的：研究氦氖激光穴位照射疗法对缺氧缺血性脑损伤(hypoxia ischemia brain damage，HIBD)新生大鼠学习记忆和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的影响。方法：实验于2003-12／2004-05在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。7日龄Wistar大鼠56只随机分为假手术组、HIBD组、HIBD激光穴位照射组、HIBD激光非穴位照射组。用Y型迷宫检测新生大鼠HIBD后学习记忆能力以及取左脑进行BDNF免疫组织化学染色。结果：HIBD激光穴位照射组大鼠与HIBD组和HIBD激光非穴位照射组相比学习和记忆能力明显提高，BDNF免疫阳性细胞明显增加(35．67&;#177;4．32)个／视野，差异具有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：激光穴位照射提高HIBD新生大鼠学习记忆能力。     

缺氧预处理对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经干细胞增殖的影响

目的探讨缺氧预处理（HPC）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠神经干细胞增殖的影响,为HPC的保护机制提供依据。方法48只7d龄新生SD大鼠,随机分成4组：缺氧缺血组、HPC＋缺氧缺血组、假手术组、正常对照组,每组12只。缺氧缺血组在当天先行左侧颈总动脉结扎术,然后放入缺氧装置吸入8％氧气和92％氮气的混合气体2．5h,建立HIBD动物模型。HPC＋缺氧缺血组在术前1d先行HPC,即将大鼠放人密闭容器中通人8％氧气和92％氮气混合气体3h,第二天再依次同法建立HIBD动物模型。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,也不做HPC。正常对照组未做任何处理。在建立动物模型后48h将全部动物同时处死。对各组新生大鼠脑皮质、室管膜下区、海马区的神经干细胞增殖的标记物一巢蛋白（nestin）的表达进行观察。结果HPC＋缺氧缺血组在皮质、室管膜下区、海马区nestin阳性细胞数量明显多于其他3组（P〈0．01或P〈0．05）,缺氧缺血组nestin阳性细胞数量也多于对照组与假手术组（P均〈0．05）,对照组nestin阳性细胞数量与假手术组比较无统计学差异（P〉0．05）。结论HPC对HIBD具有保护作用,可增加HIBD新生大鼠神经于细胞的增殖,以增加脑损伤的康复能力。     

人参银杏复方制剂对缺氧复氧后大鼠海马CA1区Fos表达的影响

目的：观察人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧后不同时段Fos表达时程变化的影响，探讨人参银杏复方制剂抗缺氧复氧性脑损伤机制。方法：35只清洁级SD大鼠随机分为常氧对照组，缺氧复氧实验组和人参银杏复方制剂给药组。应用低压氧舱仿海拔8000m高空缺氧模型，采用Nissl染色、Fos免疫组化方法结合图像分析技术，观察预防性应用人参银杏复方制剂对缺氧24h复氧0，24，72h不同时段海马CA1区锥体细胞层神经元形态及Fos免疫反应阳性神经元的影响。结果：全脑缺氧24h复氧72h后，海马CA1区锥体细胞层神经元数量锐减，Fos免疫反应阳性神经元数量在缺氧24h复氧0h时为(9．3&;#177;3．8)个，较常氧对照组(16．6&;#177;4．8)个减少，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，复氧24h时显著减少甚至消失为(2．0&;#177;1．8)个，复氧72h为(13．7&;#177;5．1)个，时接近常氧对照组水平差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。预防性应用人参银杏复方制剂后缺氧24h复氧72h时海马CA1区锥体细胞层神经元数量未见明显减少，在缺氧24h复氧0，24，72h时段CA1区Fos免疫反应阳性神经元数量分别较缺氧复氧实验组相应时段增加，以复氧0h时增加最为显著，为(39．0&;#177;5．8)个，与常氧对照组比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：人参银杏复方制剂对缺氧复氧后海马CA1区神经元具有保护作用，其保护作用可能与增加缺氧复氧后海马CA1区Foa表达有关。     

缺氧缺血性脑损伤鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的表达及其意义

目的研究新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)mRNA的表达及其意义.方法将112只新生7 d Wistar大鼠随机分为假手术对照组以及HIBD后3、8、24 h以及3、6和14 d组,每组16只.其中8只应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测病变侧脑皮质caspase1 mRNA的表达情况;另外8只进行脑组织苏木素-伊红(HE)染色,在光镜下观察脑组织病理变化.结果假手术对照组中有少量caspase-1 mRNA表达,HIBD 24 h组其表达水平开始增加(与假手术对照组比较P<0.01),6 d达高峰(与其余各组比较P均<0.01),14 d时其表达下降,但仍高于假手术对照组(P<0.01).组织病理学检查发现,HIBD后24 h～6 d神经元大量变性、坏死、丢失,同时胶质细胞显著增生.结论 HIBD后caspase-1 mRNA的表达增加,其变化规律与光镜观察到的脑损伤进展时间完全吻合,提示caspase-1可能参与了新生鼠HIBD的病理损伤过程.     

刺五加皂甙对缺氧复氧性神经元损伤的保护作用

目的：从细胞分子水平研究刺五加皂甙(acanthopanax senticosus saponins，ASS)对培养神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法：取孕13～15d ICR胎鼠大脑皮质神经元进行原代分离培养，建立缺氧复氧诱导的皮质神经元损伤模型。随机分成正常对照组、缺氧复氧组及ASS组；用MTT法测定神经元存活率，用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)的含量，用流式细胞仪检测神经元凋亡率。结果：神经元缺氧2，4，6，8h复氧24h后，存活率分别为(0．604&;#177;0．022)％，(0．592&;#177;0．017)％，(0．543&;#177;0．037)％，(0．534&;#177;0．021)％；缺氧8h复氧24h后，神经元凋亡率由(4．13&;#177;0．87)％增加至(31．34&;#177;0．85)％，NOS含量由(5．23&;#177;0．28)μmoL／L增加至(11．39&;#177;0．21)μmoL／L(P&;lt;0．01)；ASS组神经元存活率、神经元凋亡率、NOS含量分别为(0．636&;#177;0．021)，(16．37&;#177;0．66)％，(8．02&;#177;0．18)μmoL／L，与缺氧8h复氧24h比较差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：ASS对缺氧复氧引起的神经元损伤有保护作用；ASS可能是通过抑制一氧化氮的释放、抑制神经元凋亡来拮抗神经元损伤。     

蒲金口服液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠一氧化氮合酶的影响

目的：通过蒲金口服液对缺氧缺血性新生大鼠脑组织一氧化氮合酶(nitric oxido synthase，NOS)的影响，探讨缺氧缺血性脑病的发病机制和化痰活瘀治疗的作用机制。方法：采用7日龄SD大鼠结扎右侧颈总动脉和置入低氧环境中诱发的缺氧缺血性脑损伤模型，于造模后即刻、2，4，6，8和10h，将1日药量共分为6次灌胃[1．25mg／(kg&;#183;d)]；假手术组术后给予生理盐水灌胃；缺氧缺血性脑损伤模型术后给予生理盐水灌胃；银杏叶提取物组术后给予银杏叶提取物混悬药液灌胃[40mg／(kg&;#183;d)]，造模后24h处死大鼠，取右侧顶枕区脑组织制成10％脑组织匀浆，用可见光分光光度计通过比色法测定NOS含量。结果：蒲金口服液高剂量组NOS含量为(37．60&;#177;5．47)μkat／L，与缺氧缺血性脑损伤模型组NOS含量为(49．97&;#177;5．53)μkat／L相比较，差异有极显著性意义(P&;lt;0．01)；蒲金口服液高剂量组与银杏叶提取物组NOS含量为(42．92&;#177;2．70)μkat／L相比较，差异有显著性意义(F=10．22，P&;lt;0．05)。结论：蒲金口服液高剂量组能显著降低缺氧缺血性脑损伤大鼠NOS含量，且效果优于银杏叶提取物组。