脑组织中单胺类神经递质含量测定

脑组织中单胺类神经递质含量测定何美霞，可君，李志刚河南医科大学药理学教研室郑州４５００５２郑州市第六人民医院外科郑州４５００５２关键词脑，单胺，荧光分光光度法脑组织中单胺类神经递质的定量分析在神经生理、病理、药理、生化等方面应用较广，其测定方法虽有高...     

舒心安神膏对睡眠剥夺大鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响

目的：探讨舒心安神膏对睡眠剥夺大鼠脑组织单胺类神经递质含量的影响。方法35只雄性SD大鼠分为5组：模型组、药物对照组及舒心安神膏低、中、高剂量组,于实验当天分别灌服生理盐水、地西泮（4 mg／kg）及舒心安神膏（0．28、0．84、1．40 g／mL）,0．1 mL／10 g体重,给药1次／d,连续7 d。于给药的第5天通过大鼠腹腔注射对氯苯氨酸建立大鼠睡眠剥夺模型,高效液相色谱－电化学法测定各组大鼠脑组织中5－羟色胺（5－HT）、5－羟基吲哚乙酸（5－HIAA）、多巴胺（ DA）、去甲肾上腺素（ NE）含量变化。结果4种神经递质在9 min内完全洗脱,分离效果良好,在1～1000 ng／mL浓度范围有较好的线性关系,其相关系数不低于0．997,4种神经递质绝对回收率不低于95．56％;舒心安神膏低、中、高剂量组大鼠脑干、大脑皮质中5－HT、5－HIAA、NE的含量及药物对照组大鼠大脑皮质中5－HT、5－HIAA和NE的含量显著低于模型组（ P＜0．05）, DA含量差异无统计学意义（P＞0．05）。结论高效液相色谱－电化学法灵敏度高、重复性好,能有效分离检测大鼠脑组织中单胺类神经递质。舒心安神膏调治失眠作用可能与降低脑组织NE水平有关,通过调节5－HT、5－HIAA与NE等神经递质水平来恢复正常睡眠节律。     

急性重复性缺氧小鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质含量变化的研究

用高效液相-电化学检测器测定急性重复性缺氧小鼠脑组织中DOPA、DA、NE和Ep等儿茶酚胺类物质的含量。结果发现:与空白对照组(A组)比较,缺氧1次的实验对照组(B组)及急性重复缺氧4次实验组(C组),随缺氧次数增加,小鼠脑组织中的DA含量显着上升(P<0.01),NE、DOPA含量明显降低(P<0.05或<0.01);A组与急性重复4次缺氧后饲养2d的实验对照组(D组)小鼠脑组织中儿茶酚胺类含量接近,没有统计学意义(P=23.77).结果提示脑组织中儿茶酚胺类物质可能参与急性重复缺氧小鼠的耐缺氧能力的形成,而且是一个可逆的快反应。     

急性重复性缺氧小鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质含量变化的研究

用高效液相－电化学检测器测定急性重复性缺氧小鼠脑组织中ＤＯＰＡ、ＤＡ、ＮＥ和Ｅｐ等儿茶酚胺类物质的含量。结果发现：与空白对照组（Ａ组）比较，缺氧１次的实验对照组（Ｂ组）及急性重复缺氧４次实验组（Ｃ组），随缺氧次数增加，小鼠脑组织中的ＤＡ含量显著上升（Ｐ＜０．０１），ＮＥ、ＤＯＰＡ含量明显降低（Ｐ＜０．０５或＜０．０１）；Ａ组与急性重复４次缺氧后饲养２ｄ的实验对照组（Ｄ组）小鼠脑组织中儿茶酚胺类含量接近，没有统计学意义（Ｐ＝２３．７７）。结果提示脑组织中儿茶酚胺类物质可能参与急性重复缺氧小鼠的耐缺氧能力的形成，而且是一个可逆的快反应。     

衰老大鼠下丘脑单胺类神经递质含量的变化

目的:观察D-半乳糖衰老大鼠下丘脑单胺类神经递质含量的变化.方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠下丘脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果:D-半乳糖衰老大鼠下丘脑NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P＜0.01).结论:D-半乳糖衰老大鼠脑单胺类神经递质含量下降,这可能是D-半乳糖致衰老的作用机制之一.     

高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质

目的 建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法 .方法 采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱.结果方法 的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在87.8%～105.7%之间,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.4%以下.结论 该方法 具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值.     

小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较

目的 比较高效液相色谱(HPLC)-紫外光(UV)、HPIC-荧光(FLD)和HPLC-质谱(MS)3种检测方法测定小鼠不同脑组织中单胺类神经递质含量的优劣性,并应用最优方法测定血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质的含量.方法 分别采用HPLC仪器搭配UV、FLD和MS检测器建立小鼠不同脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量测定方法,并进行系统的方法学验证,采用HPLC-FLD法对血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质DA、NE和5-HT含量进行测定.结果 HPLC-UV法的定量限分别为DA 103.5 ng/mL、NE 107.5 ng/mL、5-HT 93.6 ng/mL;HPLC-FLD法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 10.75 ng/mL、5-HT9.36 ng/mL;HPLC-MS法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 32.25 ng/mL、5-HT 9.36 ng/mL.HPLC-FLD和HPLC-MS法对DA和5-HT的测定优于HPLC-UV法,HPLC-FLD法对于NE的测定优于HPLC-MS法,而HPLC-MS法存在较强的基质效应.HPLC-FLD法检测结果示血管性抑郁小鼠海马组织中DA含量最低,大脑皮质中5-HT含量最低,而不同脑组织中NE含量没有明显差别.结论 与HPLC-UV法和HPLC-MS法相比,HPLC-FLD法更适用于小鼠脑组织中单胺类神经递质(DA、NE、5-HT)的含量测定.DA和5-HT可以用作血管性抑郁症疾病的诊断标志物.     

衰老大鼠海马单胺类神经递质含量的变化

目的:观察D-半乳糖衰老大鼠学习记忆能力及海马单胺类神经递质含量的变化.方法:D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用Morris水迷宫检测各组大鼠的空间学习记忆能力、高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠海马单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果:D-半乳糖衰老大鼠空间学习记忆能力明显下降,模型大鼠在90秒内穿过原平台位置的次数和在原平台象限探索时间占总时间的百分比与正常大鼠相比明显下降(P＜0.01);衰老大鼠海马NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P＜0.01).结论:D-半乳糖衰老大鼠学习记忆能力及海马单胺类神经递质含量下降,这可能是D-半乳糖致衰老的作用机制之一.     

锰染毒大鼠的脑组织神经生化分析

目的　研究锰对单胺类递质的影响及可能的细胞保护机制。方法　大鼠经饮水染锰（ＭｎＣｌ２·４Ｈ２Ｏ２．５和０．５ｇ／Ｌ）９０ｄ后,取脑组织测定纹状体多巴胺（ＤＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）、３,４双羟苯乙酸（ＤＯＰＡＣ）,５羟色胺（５ＨＴ）、５羟吲哚乙酸（５ＨＩＡＡ）含量,以及脑组织丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果　高剂量组的５ＨＩＡＡ和ＨＶＡ含量明显低于对照组和低剂量组,ＳＯＤ活性随染毒剂量增加而增高,ＤＡ、ＤＯＰＡ含量与谷胱甘肽含量呈负相关,５ＨＩＡＡ、ＨＶＡ含量ＳＯＤ活性呈负相关。结论　锰可影响ＤＡ和５ＨＴ的代谢,而巯基和ＳＯＤ有一定的保护作用。     

急性脑缺氧癫痫并发症的实验病理研究

为观察急性脑缺氧与癫痫的关系,我们采用12只家兔造成急性脑缺氧的模型。结果表明癫痫的有无与脑缺氧的严重程度并不成正比。研究了不同部位脑组织的病理变化,主要改变为大脑皮层神经细胞呈局部缺血性改变,少数皮层下有软化坏死灶。本文对上述结果进行了讨论。     

精神分裂症氯氮平治疗前后中枢单胺递质含量的对比研究

目的 :观察氯氮平治疗精神分裂症对中枢单胺递质系统的影响。方法 :应用高效液相色谱测定 2 8例精神分裂症氯氮平治疗前后脑脊液NE、DA、5 -HT、MAPG、HVA、5 -HIAA的含量。结果 :治疗前后脑脊液中单胺神经递质及其代谢产物差异无显著性 ;应用中枢神经递质代谢产物MHPG/HVA、5 -HIAA/HVA、MHPG/ 5 -HIAA的比值作为两个中枢递质系统之间相互作用的功能态 ,发现精神分裂症治疗前MGPG/MVA明显低于治疗后 (P <0 .0 5 )。结论 :精神分裂症治疗前与治疗后相比 ,DA功能相对亢盛 ,NE功能相对低下 ,氯氮平可能是通过调整NE -DA系统的功能态而发挥治疗作用。     

巴戟天水提液对自然衰老小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响

目的 研究巴戟天水提液对自然衰老小鼠脑组织中多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）和5-羟色胺（5-HT）含量的影响,探讨巴戟天益脑的作用机制.方法 17个月龄昆明种小鼠连续给药15天后进行力竭性负重游泳实验,并采用高效液相-库伦阵列（HPLC-ECD）法检测小鼠脑组织中单胺类神经递质含量,比较分析各给药组与空白组的差异.结果 巴戟天水提液能提高小鼠负重游泳时间,与空白组相比,巴戟天水提液高、中、低剂量组脑组织中NE、E、DA的含量均升高,且E和DA的含量存在明显的量效关系,5-HT的含量则降低.结论 巴戟天水提液能明显提高大鼠脑中能提高记忆的NE、E、DA的含量,同时降低能阻抑记忆的5-HT的含量,表明巴戟天水提液可以通过改变脑内单胺类神经递质的含量而益脑.     

芪胶升白胶囊耐缺氧和抗疲劳作用研究

目的:研究芪胶升白胶囊对小鼠耐缺氧和抗疲劳的作用。方法:芪胶升白胶囊分别以2.0 g/kg、1.0 g/kg、0.5 g/kg剂量灌胃各组小白鼠,每日一次,连续给药7 d;进行常压耐缺氧实验和化学性缺氧实验,观察小鼠窒息死亡时间,负重游泳实验观察小鼠窒息死亡时间,检测血中血红蛋白浓度、血乳酸含量、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力。结果:芪胶升白胶囊高、中、低剂量组能明显增加小鼠常压耐缺氧时间、化学性缺氧时间、负重游泳时间,增加负重游泳后血中血红蛋白浓度、血乳酸含量,增强Ca2+-Mg2+-ATP酶活力。结论:芪胶升白胶囊具有明显的耐缺氧作用和一定的抗疲劳作用,其作用可能与升高血红蛋白浓度和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力以及降低血乳酸含量有关。     

不同氧浓度复苏对创伤性轴索损伤合并低氧血症后大鼠脑组织的影响

目的 在创伤性轴索损伤（traumatic axonal injury,TAI）合并低氧血症性二次脑损伤（secondary brain injury,SBI）大鼠模型基础上进一步探讨不同氧浓度复苏对大鼠脑组织病理学的影响.方法 应用自制TAI致伤装置,大鼠伤后给予10％浓度氧吸入30min制成低氧血症性SBI模型,随后给予大鼠不同氧浓度混合气体1h,复苏后不同时间点（24h、1周）进行免疫组化染色.结果 脑干ROI的β-APP免疫组化染色显示,24h时TAI合并缺氧组的阳性染色明显强于各复苏组,50％氧浓度时的阳性染色最弱;各组阳性染色随时间而减弱,1周时各组阳性染色明显弱于24h,此时TAI合并缺氧组的阳性染色仍明显强于各复苏组,50％氧浓度时的阳性染色最弱.染色阳性的神经轴索半定量分析显示,24h时TAI合并缺氧组明显高于各复苏组,50％氧浓度时的值最低;各组数值随时间而降低,1周时各组值明显低于24h,此时TAI合并缺氧组的值仍高于各复苏组,50％氧浓度的值仍为最低.结论 给氧治疗可以显著减低轴索损伤,起到神经保护作用;对于当前的TAI合并缺氧动物模型的最佳复苏氧浓度为50％.     

花粉延缓脑衰老的实验研究

目的：通过研究花粉对脑衰老模型大第马区超氧化物歧化酶（SOD）、氨基酸神经递质（AANT）和NO水平的影响，探讨花粉延缓脑衰老的机制。方法：采用D－半乳糖建立大鼠衰老模型，用生化方法检测对照组、衰老模型组和衰老模型花粉组大鼠海马区SOD活性、AANT和NO水平，并作统计分析。结果：花粉能明显提高脑衰老模型大鼠海马区SOD活性，降低NO水平，并增加兴奋性氨基酸谷氨酸（Glu)和天门冬氨酸（Asp)的含量，降低抑制性氨基酸γ－氨基丁酸（GABA）的含量。结论：花粉通过清除自由基，减少NO释放，升高兴奋性氨基酸，降低抑制性氨基酸等而发挥延缓脑衰老的作用。     

微波辐照对鼠脑MDA、NOS含量和LDH活性的影响

为研究手机微波对小鼠脑是否有损害 ,选用 4种不同频率和不同发射功率的微波照射小鼠 ,用TBA比色法、二硝基苯肼显色法 (DNPH显色法 )和吩嗪二甲脂比色法 (PMS显色法 )检测小鼠脑组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶 (LDH)和一氧化氮合酶 (NOS)。统计学分析显示 :2 45 0MHz微波辐射后MDA含量升高 (P <0 .0 0 1 ) ,LDH活性降低 (P <0 .0 5 ) ,NOS不变 (P >0 .0 5 ) ;870、45 0和 45MHz微波分别辐照后 ,MDA含量和LDH活性均变化不大 (P >0 .0 5 )。提示 :在强辐照条件下 (2 45 0MHz) ,微波通过使脑中自由基产生过量参与脑损伤 ;而在手机弱辐照条件下 (870、45 0、45MHz) ,微波辐照对脑基本无损伤 ,手机使用是安全的     

脑组织移植物中炎症反应的研究

作者将胎龄为15d的Wistar胎鼠大脑皮质全层移植到成年Wistar大鼠大脑皮质3,1,2区内,在21d的脑组织移植物中尚存在着明显的炎症反应:巨噬细胞浸润,小胶质细胞增生,在30d、60d和90d的移植物中神经细胞趋向集中血供较好的区域。移植物中有明显的畸变神经元。宿主脑组织和移植物交界区有成束的有髓神经纤维穿过。本文认为炎症反应与神经细胞发育的关系是:较轻的炎症反应可促进移植物神经元的分化发育,较重的炎症反应可使移值物神经元的迁移受阻、不分层,神经元出现畸变,甚至使整个移植物胶质化。