临床常用线性评价方案的应用比较

目的熟悉美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP6-A线性评价方案的应用；探讨美国临床病理学家协会设备委员会（CAP-IRC）法、EP6-P、EP6-A线性评价方案的区别及适用性。方法按照EP6-A对采用电化学发光法检测的甲胎蛋白（AFP）、速率法检测的尿素和丙氨酸转氨酶（ALT）、免疫比浊法检测的载脂蛋白B（apoB）和荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBVDNA）进行线性评估；以尿素为例建立检测线性范围；比较CAP—IRC法、EP6-P、EP6-A方案评价apoB线性结果的异同。结果按照EP6-A，AFP、ALT和HBVDNA（对数）可直接判断呈线性；尿素的真实线性范同为5．305～46．975mol／L。apoB目测法可判断呈线性；EP6-P判断呈非线性；CAP—IRC法判断呈非线性但在临床可接受范围；EP6-A判断旱非线性，但在一定范围内呈线性。结论推荐临床实验室使用EP6-A线件评价方案对各个检测项目进行线性评价保证检测结果的准确可靠。     

不同线性评价方法在临床化学测量中的应用

目的探讨不同的线性评价方法在临床化学测量中的应用。方法运用目测法、改良Doumas法、《临床化学设备线性评价指南》(以下简称卫生行业标准法)及美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP6-A文件(以下简称EP6-A法)对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、葡萄糖(Glu)、尿素(Urea)、尿酸(UA)等测定项目进行分析测量范围的建立。结果目测法显示各项目的预期值和测量均值基本在一条直线上。改良Doumas法评价CK为非线性,舍弃最后两点评价为线性;其余项目评价为线性。卫生行业标准法评价CK、Urea为非线性,但不能判断其非线性是否为临床可接受;其余项目评价为线性。EP6-A法直接判断ALT、Glu、UA为线性;CK、Urea评价为临床可接受线性,舍弃最高值后评价为线性。结论 EP6-A文件标准将线性评价与临床目标相结合,通过设定方法学偏移,在临床可接受范围内扩大对分析方法呈线性的认可范围,更具临床实用性。     

定量检测系统线性评价方法-EP6-A法

线性范围是分析方法的重要技术指标之一,目前评价分析方法线性范围的方法很多,如:目测法、EP6-P法、美国临床病理学家协会设备委员会(CAP-IRC)法、EP6-A法等.本文主要介绍了目前评价分析方法线性范围最好的方法即EP6-A法.     

三种线性评价方法的比较及在生化检验中的应用

目的 探讨CAP-IRC,EP6-A和改良的Doumas等三种线性评价方法的区别和适用性及在生化检验中的应用.方法 采用CAP-IRC,EP6-A,改良的Doumas等三种方法对33个临床化学检验项目进行线性评价,比较评价结果的异同.结果 在33个临床化学检验项目中,EP6-A方法有22个可直接判断为线性,7个为临床可接受线性,4个为非线性;CAP-IRC方法有14个为直接线性,18个为可接受线性,1个为非线性;改良的Doumas方法有18个为线性,15个为非线性.结论 EP6-A方法客观,更适用于临床,是目前较理想的线性评价方法.     

常规化学检测项目线性检验的实验室调查

目的对常规化学检测项目的检测作线性检验,评价实验室对常规化学检测项目的检测能力,试图提高实验室对该检测项目的检测质量。方法按照Kroll对EP6-A补充的方法对检测数据作精确度检验;利用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A线性判定指南推荐的多项式回归分析方法判断统计学标准的线性和非线性;利用Kroll对EP6-A补充的方法,对统计学标准的非线性作程度判断。结果测量数据的不精确度范围为0.17%~5.76%。在检测浓度范围内,实验室C、E、G、H、I和J通过了全部检测项目的线性检验;实验室A和F未通过葡萄糖检测项目的线性检验;实验室B和D分别未通过白蛋白和镁检测项目的线性检验。结论参加线性调查的10家实验室测量数据的不精确度低于设定值(9%),因此测量数据符合作线性检验的要求。10家实验室已具备了对常规化学检测项目的检测能力。     

免疫荧光分析仪测定CRP和hs-CRP性能评价

目的 验证和评价i-CHROMATM Reader免疫荧光分析仪测定C反应蛋白(CRP)和超敏CRP(hs-CRP)的分析性能.方法 根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件(EP15-A、EP6-A2、EP9-A2)的要求设计试验方案,分析i-CHROMATM Reader免疫荧光分析仪检测CRP和hs-CRP的精密度、准确度、线性范围等性能,比较全血和血清标本测定CRP和hs-CRP结果的差异.结果 CRP和hs-CRP测定精密度符合临床要求;i-CHROMATM Reader免疫荧光分析仪与罗氏Modular系统CRP检测性能相当,hs-CRP检测性能不相当.CRP和hs-CRP检测均呈一次线性(r2>0.95,P<0.05),CRP线性范围为5.0～200.0 mg/L,hs-CRP线性范围为0.1～5.0 mg/L,符合临床要求.全血和血清标本CRP和hs-CRP测定结果差异无统计学意义(P>0.05).结论 i-CHROMATM Reader免疫荧光分析仪测定CRP和hs-CRP的主要分析性能基本符合质量目标要求,可在临床实验室推广应用.     

多项式线性评价在自建生化检测系统中的初步应用

目的 考查该医院检验科自建生化检测系统中国产试剂的线性程度,探讨多项式线性评价在自建生化检测系统中的应用.方法 利用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS) EP6-A指南及EP6-A补充的方法推荐的多项式回归分析方法判断统计学标准的线性和非线性,考查自建生化检测系统中国产试剂的线性程度.结果 调查的14个项目精密度皆符合要求,线性分析为线性1的有8个,分别为ALT、AST、ALP、TG、Chol、BUN、Cr和UA;为线性2的有5个,分别为GGT、HDL-C、LDL-C、Glu和Mg;非线性的为CK-MB,CK-MB试剂不符合临床质量要求已经淘汰.结论 多项式回归评价线性科学、可靠,将线性评价和临床应用有机结合,提高了临床实验室对检测项目评价的实用性,有助于指导自建生化检测系统中国产试剂的使用.     

临床化学检测自建检测系统的性能验证

目的 以谷丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测项目为例,探讨由国产上海玉兰公司生产的ALT试剂盒／罗氏公司校准品c．f．a．s／日立7600—020全自动化生化分析仪组成的自建检测系统性能验证试验方法和评价方案。方法分别根据美国临床实验室标准化委员会（cI｜sI）标准文件EP5-A、EP6-A、EP9-A2对系统进行方法学比对、精密度、线性试验,并根据与本院临床科室沟通后Au报告范围,进行最大稀释倍数验证。结果方法学比对：与ROCHEALT试剂／ROCHE校准品／罗氏Cobas8000全自动生化分析仪组成的检测系统测定的结果相关系数r=0．993,在选定的医学决定水平,相对偏差〈3％;精密度：批内变异系数4．072％,总变异系数5．046％,二者均小于本实验室质量目标要求精密度。线性范围：在5—400U／L线性范围,线性方程Y=2．7＋0．99X,r2=0．9992,b值95％置信区间（0．982,1．008）;临床可报告范围：ALT检测项目在临床需求范围内通过最大稀释度验证。结论：自建检测系统ALT检测项目分析性能均能满足要求。评价方案可行性好,以此评价方案为例,可以对本实验室其他检测项目继续评价确保该科检测结果的准确性。     

常规化学检测项目线性检验的实验室调查

目的对常规化学检测项目的检测作线性检验，评价实验室对常规化学检测项目的检测能力，试图提高实验室对该检测项目的检测质量。方法按照Kroll对EP6-A补充的方法对检测数据作精确度检验；利用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP6-A线性判定指南推荐的多项式回归分析方法判断统计学标准的线性和非线性；利用Kroll对EP6-A补充的方法，对统计学标准的非线性作程度判断。结果测量数据的不精确度范围为0．17％～5．76％。在检测浓度范围内，实验室C、E、G、H、I和J通过了全部检测项目的线性检验；实验室A和F未通过葡萄糖检测项目的线性检验；实验室B和D分别未通过白蛋白和镁检测项目的线性检验。结论参加线性调查的10家实验室测量数据的不精确度低于设定值（9％），因此测量数据符合作线性检验的要求。10家实验室已具备了对常规化学检测项目的检测能力。     

罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标检测性能验证

目的验证罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)分析性能。方法根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)系列文件(EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2、EP7-A2、C28-A2)和其他相关文献的实验方案,对罗氏Modular全自动生化分析仪检测ALT、AST的精密度、准确度、线性、临床可报告范围、干扰和生物参考区间6大性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果精密度均符合罗氏性能标准;对卫生部5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚(SE%)在-3.94%~-9.09%之间,变异指数得分(VIS)均<50,室内质控(IQC)结果与罗氏全球质控系统(QCS)结果相对SE%在-3.70%~5.85%之间;ALT、AST检测均呈一次线性(r=0.999,P<0.05),线性范围分别为4~1 332 U/L、4~1 031 U/L;ALT、AST的临床可报告范围分别为0~133 200 U/L和0~206 200 U/L;血红蛋白(Hb)对AST检测有正干扰,Hb≤6.025 g/L的干扰效应剂量曲线呈一次线性(P<0.05);AL...     

干、湿生化分析仪部分测定值的比对分析和偏倚评估

目的根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2文件,对日立7600-020湿化学分析系统（以下简称7600-020系统）和美国强生Vitros-950干化学分析系统（以下简称Vitros-950系统）进行方法学比对、相关性分析和预期偏倚评估,为向临床解答2种生化分析系统测定结果差异的可接受性提供实验依据。方法按照NCCLS EP9-A2文件的要求,以7600-020系统为比较方法,以Vitros-950系统为实验方法,对患者样本的尿素（Urea）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）和血糖（Glu）4个较常用的项目进行方法学比对、相关性分析和预期偏倚评估,并判断偏倚是否可以接受。结果Urea、ALT、Glu和CK比对结果的相关系数（r）均高于EP9-A2文件规定的要求（r≥0.975）,有较好的相关性;除Urea测定在医学决定水平2.5和6.4 mmol/L处偏倚不可接受外,其余项目的测定结果预期偏倚均未超出要求范围。结论在做好质控的基础上,7600-020系统和Vitros-950系统对ALT、Glu、CK和高浓度的Urea的检测能得到一致的结果,两者无明显差异。     

精浆天门冬氨酸氨基转移酶活性检测及方法学评价

目的建立精浆天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性的检测方法及方法学评价。方法根据检测血清AST活性的方法建立检测精浆AST活性的方法。参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的EP5-A和EP6-A文件,观察其精密度、线性检测范围及不同技术人员检测结果之间的差异以评价方法的可接受性。结果低水平样本批内变异系数(CV)为1.93%,批间CV为2.77%,天间CV为3.45%,总CV为4.84%;高水平样本批内CV为0.48%,批间CV为0.53%,天间CV为0.53%,总CV为0.89%。线性检测范围达1 652 U/L。2位技术人员的检测结果差异无统计学意义(P=0.423)。结论通过血清AST检测方法可以建立可接受的精浆AST活性检测方法。     

ALT和AST参考方法的建立与性能评价

目的建立测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的参考方法,并评价其主要分析性能。方法按照国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）有关ALT和AST活性测定的要求建立参考方法,并优化其实验条件;根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）系列文件（EP5-A2、EP15-A、EP6-A）对建立的参考方法的精密度、准确度、线性范围等性能进行评价。结果紫外分光光度计、分析天平、pH计、电子温度计、移液器和容量瓶均检定合格,不确定度符合方法要求。温控器显示为37.2℃时,比色杯内溶液温度最接近37℃;比色杯内溶液180 s后可达到设定温度;移液器加样模式实验显示吸一档打两档,打时靠壁为精密度最佳的加样模式。ALT和AST参考方法的批内不精密度均〈1%,总不精密度均〈2%,符合精密度性能要求;日本临床化学会酶参考品及国际参考实验室外部质量评价计划样本检测结果的相对偏倚均符合设定目标;ALT和AST参考方法分析测量范围上限分别为335.8、363.6 U/L,均高于IFCC文献报道。结论ALT和AST参考方法已基本建立,精密度、准确度及线性范围等性能指标均符合方法要求,可应用于临床研究。     

罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标检测性能验证

目的验证罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）分析性能。方法根据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）系列文件（EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2、EP7-A2、C28-A2）和其他相关文献的实验方案,对罗氏Modular全自动生化分析仪检测A坍、AST的精密度、准确度、线性、临床可报告范围、干扰和生物参考区间6大性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果精密度均符合罗氏性能标准;对卫生部5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚（SE％）在-3．94％--9．09％之间,变异指数得分（VIS）均〈50,室内质控（IQC）结果与罗氏全球质控系统（Qcs）结果相对SE％在-3．70％～5．85％之间;ALT、AST检测均呈一次线性（r=0．999,P〈0．05）,线性范围分别为4～1332U／L、4～1031U／L;ALT、AST的临床可报告范围分别为0～133200U／L和0～206200U／L;血红蛋白（Hb）对AST检测有正干扰,Hb≤6．025g／L的干扰效应剂量曲线呈一次线性（P〈0．05）;ALT、AST生物参考区间验证结果均在本实验室给出的参考区间内。结论罗氏Modular生化分析仪ALT、AST检测的主要分析性能符合质量目标要求,CLSI实验评价方案具有可操作性和实用性。     

CA-1500全自动血凝仪的分析性能评价

目的对CA-1500全自动血凝仪的分析性能进行评价,判断其分析性能是否满足临床要求。方法按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP5-A标准,应用定值质控品,评价CA-1500全自动血凝仪凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIb）、出凝血10凝血因子Ⅶ活性水平（FⅧ：C）、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）及D-二聚体（D-dimer）的准确度、批内精密度和日间精密度、线性范围,以及检测下限、携带污染率、仪器抗干扰能力。结果PT、APTT、TT、FIb、FⅧ：C、AT-Ⅲ及D-dimer的批内精密度均小于1/4总允许误差（TEa）,日间精密度低于1/3;检验结果的准确度符合要求;Fib、FⅧ：C、AT-Ⅲ、D-dimer检测的线性良好;检测下限、携带污染率和抗干扰能力均符合临床要求。结论CA-1500全自动血凝仪的分析性能符合临床要求,可用于临床病人标本的检测。     

迈瑞BS-400全自动生化仪临床评估报告

目的评估深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司（以下简称迈瑞公司）BS-400全自动生化检测系统（以下简称BS-400）分析性能中的精密度、可报告范围、偏倚等三个指标。方法参照NCCLS（现已更名CLSI）的EP5-A2、EP6-A、EP9-A2文件，结合生化反应类型、检测波长等差异，选取AST、LDH、CK、TP、TG、TC、Urea、P、GLU共9个项目分别进行精密度、可报告范围、偏倚试验，其中偏倚试验是与美同德灵公司的Dimension Xpand全自动生化检测系统（以下简称Xpand）进行比对。结果9个项目的批内精密度均小于2％，总精密度均小于3.5％：AST、LDH、CK、TP、TG、TC、Urea、P、GLU的可报告范围依次为0-423（U／L）、47-961（U／L）、34-1097（U／L）、11-111（g／L）、0.16-9.22（mmol／L）、1.2-14.44（mmol／L）、0.2-33.12（mmol／L）、0.03-4.46（mmol／L）、0.06-21.45（mmol／L）：与美国德灵公司的Dimension Xpand全自动生化分析仪的相关系数（r）均〉0.99，两仪器测试结果总偏差符合CLIA’88要求。结论所选项目的精密度、可报告范围评价结果达到仪器与配套试剂所宣称的指标要求，符合NCCLS的相关规定。与Dimension Xpand对比测试结果符合CLIA’88要求。BS-400丁作速度为每小时400个测试，配套系统完善，适合中小规模医院检验科使用。     

胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察

目的对胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)进行初步方法学评价,为临床应用提供依据。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A及EP10-A2文件提供的方法,对胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ进行初步的评价。结果 PGⅡ的低值样本批内变异系数(CV)为2.05%、批间CV为1.60%、日间CV为3.92%、总CV为4.70%;高值样本批内CV为1.70%、批间CV为1.21%、日间CV为3.79%、总CV为4.32%。当PGⅡ浓度分别为9.6、24.7、39.8μg/L时,相对偏倚分别为-0.18、-0.47、-0.39μg/L,总不精密度分别为4.98%、2.39%、2.71%。测试间的携带污染差异无统计学意义(P>0.05)。线性回归方程为Y=0.975 7X-0.016 8,决定系数(R2)=0.998 7。结论胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ的精密度符合EP5-A文件标准,具有良好的重复性。线性、偏倚、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件标准,符合临床应用要求,适用于实验室常规测定。     

COBAS Taqman HBVDNA的方法学验证

目的 评估COBAS Taqman HBV DNA分析系统的性能及临床应用。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）制订的临床化学方法评价方案（evaluation protocols），通过精密度、携带率、线性评价、仪器间比对、参考范围确认等试验，对COBAS Taqman HBV DNA分析系统的性能参数进行了评估。结果COBAS Taqman分析系统批内变异6．9％～8．6％，批间变异10．5％～18．7％，总变异10．8％～20．2％，线性范围6．0～10^7IU／ml，回收率98．7％～104．5％。仪器间比对相关性较好（r^2=0．998）。结论COBAS Taqman HBV DNA分析系统性能指标符合要求，操作简便、快捷，动力学范围广，是目前理想的HBV DNA检测方法。通过此次验证，建立了一套简便的核酸检测方法学评价方案，有利于临床实验室标准化操作的实施。     

非均相免疫法测定氨基端前B型钠尿肽的分析性能验证

目的验证非均相免疫法(HIA)测定氨基端前B型钠尿肽(NT-proBNP)的各项性能参数及参考范围并初步应用于临床。方法连续测定10次NT-proBNP的0水平校准品和3次低水平血浆,计算功能灵敏度。采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A、EP15-A、EP7-P提供的方案对该方法的线性范围、精密度、干扰进行验证,并与电化学发光法进行比对及偏差评估。测定345名表面健康人及无相关疾病人群的NT-proB-NP,对参考范围进行验证。测定63例慢性心力衰竭患者及急性冠状动脉综合征患者的NT-proBNP水平并评价其分布。结果本方法功能灵敏度为22.3 ng/L;线性范围为45~28 150 ng/L,r=0.998 6;批内不精密度为3.3%~5.2%,总不精密度为5.4%~7.1%;胆红素、血红蛋白、乳糜在试剂说明书提供的浓度对测定均无明显干扰(平均差异均<10%);与电化学发光法比对,相关方程为Y=0.81X-72.9,r=0.999,平均百分偏差为-11.6%。NT-proBNP随年龄增加呈上升趋势,65岁以上各年龄组差异有统计学意义(P均<0.05);各年龄组女性显著高于男性(P=0.015)。结论HIA测定NT-proBNP的各项性能指标良好,符合临床需要。目前各年龄性别组参考范围接近国外人群,适用于本实验室。