人卵巢癌组织EGFR基因突变的分析

目的：研究卵巢癌组织中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因突变的情况,为卵巢癌的靶向治疗提供实验依据。方法：收集南昌大学第二附属医院与江西省肿瘤医院70例卵巢癌组织标本,采用多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）及多聚酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCRrestriction fragment length polymorphism,PCRRFLP）分别检测卵巢癌组织EGFR基因是否有第19外显子的缺失及第21外显子的L858R点突变。结果：在70例卵巢癌组织中,PCR未检测到EGFR基因第19外显子缺失突变,PCRRFLP未检测到第21外显子的L858R点突变。结论：卵巢癌组织EGFR基因中未检测到第19外显子缺失突变和第21外显子的L858R点突变。     

子宫内膜癌中E-cad PTEN蛋白表达及其临床意义

目的:探讨上皮型钙粘素(E-cad)和PTEN在子宫内膜癌中的蛋白表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法,检测37例正常子宫内膜(NE),40例非典型增生内膜(AHE)和72例癌性内膜(CE)中E-cad、PTEN的蛋白表达,并结合临床指标、预后进行分析.结果:在NE、AHE和CE中E-cad表达阳性率为100%(37/37)、70.00%(28/40)和47.22%(34/72);PTEN表达阳性率为100%(37/37)、77.50%(31/40)和48.61%(35/72).E-cad的表达与内膜癌患者临床分期、浸润深度和病理分级相关.临床Ⅰ Ⅱ期和浸润深度≤1/2的E-cad表达阳性率高(P＜0.05),病理分级G1、G2、G3表达逐渐下降(P＜0.05).E-cad高表达组5年生存率比低表达组高(P＜0.05).PTEN的表达与临床分期和病理分级相关,Ⅰ Ⅱ期组的PTEN表达阳性率低于Ⅲ Ⅳ期;随着肿瘤细胞的去分化,PTEN表达降低(P＜0.05);PTEN高表达组的5年生存率高于低表达组(P＜0.05).结论:PTEN和E-cad均在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用,与预后密切相关.     

子宫内膜癌组织HER2表达水平与患者临床病理特征的关系探讨

目的 探讨子宫内膜癌组织中人表皮生长因子受体2(HER2)的表达水平及其临床意义.方法 选取84例子宫内膜癌组织标本为病例组,30例正常子宫内膜组织标本为对照组,采用免疫组化染色方法检测两组标本中HER2蛋白的表达水平,分析HER2蛋白表达水平与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系.结果 病例组组织标本中HER2蛋白的阳性表达率为55.95％,高于对照组的26.67％,差异有统计学意义(P﹥0.05);肌层浸润深度﹥1/2、Ⅲ期和Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移、肿瘤累及宫颈组织的子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中HER2蛋白阳性表达率高于肌层浸润深度≤1/2、Ⅰ期和Ⅱ期、高分化和中分化、未发生淋巴结转移、肿瘤未累及宫颈组织的子宫内膜癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 子宫内膜癌组织中HER2蛋白的表达上调,并且与肿瘤浸润深度、临床分期、分化程度、淋巴结转移及是否累及宫颈组织有关.     

辽宁沈阳地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的:探讨辽宁沈阳地区非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况及其与临床病理特征的关系。方法:采用扩增耐突变系统（Amplification Refractory Mutation System,ARMS）检测辽宁沈阳地区471例NSCLC患者EGFR基因第18,19,20及21外显子突变情况。结果:471例NSCLC患者共检出EGFR突变253例（53.7%）,其中19缺失和L858R突变占总突变数的42.3%,51.8%。女性患者突变率67.9%明显高于男性（37.4%）,两者之间差异有统计学意义（P=0.000）。腺癌患者突变率57.2%明显高于非腺癌患者（18.6%）,差异有统计学意义（P=0.000）。结论:辽宁沈阳地区NSCLC患者EGFR突变多见于女性,腺癌患者,突变类型以19缺失和21外显子的L858R突变为主。     

VEGF、bFGF和ER在子宫内膜癌的表达

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达与子宫内膜癌临床病理参数和预后的关系,以及其与雌激素受体（ER）和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测66例子宫内膜癌和19例正常子宫内膜的石蜡切片VEGF、ER和bFGF的表达。结果子宫内膜癌VEGF的阳性表达率为80.3%,其表达与组织学分级呈正相关(r=0.4021,P＜0.01);ER表达与组织学分级呈负相关(r=-0.2455,P＜0.05);VEGF与bFGF的表达呈正相关（r=0.2939,P＜0.05）。ER阴性表达比ER阳性表达的患者预后差（P＜0.05）。ER表达与VEGF和bFGF的表达无显著相关性。结论VEGF是子宫内膜癌重要的血管生成因子,ER表达与子宫内膜癌的预后有关,但与bFGF和VEGF的表达无关。     

KDR mRNA在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的研究KDRmRNA的表达与子宫内膜癌发生、发展及生物学行为的关系。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)技术检测子宫内膜癌45例、子宫内膜不典型增生15例和正常子宫内膜15例组织中的KDRmRNA表达情况。结果KDRmRNA在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织中的表达率分别为73.34%(33/45)、26.67%(4/15)和20.00%(3/15),相对含量分别为118.08±15.68、97.59±10.08和80.25±21.38。子宫内膜癌组的KDRmRNA相对含量高于其他两组,P值分别为0.009和0.007;不典型增生组高于正常内膜组,但经比较差异无统计学意义,P=0.431。手术病理分期Ⅲ、Ⅳ期及有淋巴结转移、低分化组的子宫内膜癌KDRmRNA相对含量高于手术病理分期Ⅰ期、无淋巴结转移和高分化组,P值分别为0.012、0.039和0.912;而与肌层浸润深度及病理类型无关,P值分别为0.889和0.912。结论KDRmRNA的过表达在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用,并与子宫内膜癌的生物学行为密切相关,可作为对子宫内膜癌进行治疗的靶位点。     

晚期非小细胞肺癌EGFR蛋白磷酸化、基因突变与EGFR-TKI疗效相关性的研究

背景与目的：近年来以吉非替尼和厄洛替尼为代表的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKI),因其在晚期非小细胞肺癌(advanced non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中独特的临床疗效和较低的不良反应而备受关注。尽管EGFR基因突变是目前认为最确切的预测EGFR-TKI疗效的指标,但与临床疗效间并非“全或无”的关系,提示仍有其他机制参与其中。本研究旨在探讨晚期NSCLC组织标本中EGFR磷酸化酪氨酸1068(EGFR-pTyr1068)、1173(EGFR-pTyr1173)表达与EGFR基因突变的关系,及其在EGFR-TKI治疗中的疗效预测价值。方法：采用变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)检测205例晚期NSCLC患者组织中EGFR基因突变(19、21外显子突变)情况;并采用免疫组化方法检测其EGFR-pTyr1068、EGFRpTyr1173表达。结果：晚期NSCLC患者组织中EGFR-pTyr1068和1173表达阳性率分别为80.0%(164/205)、57.6%(95/165);其表达与临床病理特征(年龄、性别、病理类型、吸烟状态、疾病分期)无相关性。全组EGFR基因突变率为44.9%(92/205),与吸烟状态有关(P=0.024),而与其他临床病理特征(性别、年龄、病理类型、疾病分期)无关。EGFR基因突变与EGFR-pTyr1068表达呈弱相关性(P<0.001),与EGFR-pTyr1173无相关性(P=0.297)。EGFR基因突变型患者EGFR-TKI治疗的客观缓解率(objective response rate,ORR)、疾病控制率(disease control rate,DCR)和中位无进展生存期(progress free survival,PFS)分别为48.3%(43/89)、80.9%(72/89)和8.8个月(95%CI：6.11~11.42),均明显高于EGFR基因野生型患者［16.2%(17/105)、56.2%(59/105)和2.1个月,95%CI：0.89~3.24］,差异有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P=0.024);EGFR-pTyr1068表达阳性患者ORR和DCR分别为37.7%(58/154)和74.7%(115/154),均明显高于表达阴性患者［5.0%(2/40)和40.0%(16/40)］,差异有统计学意义(P<0.001)。EGFR-pTyr1068表达阳性患者中位PFS为7.0个月,较表达阴性患者(1.2个月)明显延长,差异有统计学意义(P<0.001)。而EGFR-pTyr1173表达与EGFR-TKI疗效呈负相关性,EGFR-pTyr1173阳性者ORR、DCR和PFS分别为27.8%(25/90)、64.4%(58/90)和4.8个月,显著低于阴性患者［37.9%(25/66)、83.3%(55/66)和7.7个月,P=0.123,P=0.007,P=0.016］。以EGFR基因突变状态分层进行亚组分析显示,在EGFR基因野生型患者中,EGFR-pTyr1068表达阳性率为69.0%(69/100),EGFR-pTyr1068表达阳性和阴性患者ORR分别为23.2%(16/69)和3.2%(1/31),DCR分别为69.6%(48/69)和35.5%(11/31),差异均有统计学意义(P=0.010,P=0.001);EGFR-pTyr1068表达阳性患者中位PFS为3.6个月,较表达阴性患者(1.2个月)明显延长,差异有统计学意义(P<0.001)。16例EGFR-pTyr1068阳性表达且对EGFRTKI有效患者,中位PFS为15.6个月(95%CI：7.28~23.9)。多因素分析显示,EGFR-pTyr1068是EGFR基因野生型患者EGFR-TKI治疗的独立疗效预测因子(OR=0.24,95%CI：0.16~0.37,P<0.001)。结论：EGFR-pTyr1068可作为晚期NSCLC患者接受EGFR-TKI治疗的有效预测因子,尤其对从EGFR基因野生型患者中筛选EGFR-TKI治疗有效者具有重要作用。     

广西南宁地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的:分析广西南宁地区非小细胞肺癌(NSCLCs)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况。方法:采用突变特异性扩增系统(Amplification Refractory Mutation System,ARMS)检测604例NSCLCs EGFR基因第18-21号外显子的突变,同时分析其突变与临床特征的关系。结果:604例NSCLCs共检出242例EGFR基因突变（40.1％）,其中外显子19和21 L858R突变各占突变总数的 50.0％（121/242）和45.5%（110/242）;腺癌和腺鳞癌基因突变率分别为46.0%（203/441）和49.1%(26/53);女性EGFR基因突变率（53.1%,119/224）显著高于男性(32.4%,123/380）。结论:广西南宁地区NSCLCs患者EGFR基因突变主要见于女性、腺癌和腺鳞癌,突变类型以外显子19的缺失突变和外显子21的L858R突变为主。     

食管癌组织中EGFR和PTEN蛋白的表达

目的 探讨食管癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)和PTEN蛋白表达及意义.方法 选择食管癌组织标本60例和正常食管组织60例,对所有标本采用免疫组化方法进行EGFR和PTEN蛋白检测.结果 EGFR在食管癌组织中表达阳性率为56.67％,高于在癌旁正常食管组织中的11.37％ (P ＜0.05);PTEN在食管癌组织中表达阳性率为46.67％,低于癌旁正常食管组织中的96.67％ (P ＜0.05).EGFR和PTEN蛋白的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P＜0.05),而与患者年龄、性别无关(P＞0.05).食管癌组织中EGFR与PTEN的蛋白表达呈负相关(r=-0.616,P＜0.05).结论 EGFR蛋白的高表达和PTEN蛋白的低表达可能参与了食管癌的发生、发展过程,在食管癌的侵袭和转移过程中发挥了重要作用,可作为预测食管癌预后的重要指标.     

子宫内膜癌PTEN基因突变、mRNA和蛋白表达的探讨

PTEN 基因是1997 年由Steck 等三个研究小组分别发现并命名的第一个具有磷酸酯酶活性的抑癌基因, 又称MMAC1 /TEP1^[1] , 现已在多种肿瘤中发现该基因不同形式的异常, 但关于子宫内膜癌组织中PTEN 基因的改变缺乏系统研究。     

子宫内膜癌组织中PTEN基因突变、PTEN蛋白及雌激素受体亚型的表达及意义

目的:检测子宫内膜癌组织中PTEN基因的突变、蛋白表达及雌激素受体亚型(ERα、ERβ)mRNA表达并探讨其意义。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测36例子宫内膜癌、20例正常子宫内膜组织中PTEN基因第5和第8外显子的突变;免疫组织化学法检测PTEN蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增ERα和ERβ片段检测其mRNA的相对表达水平。结果:子宫内膜癌组织中PTEN基因突变率和蛋白缺失率分别为30.6%和61.1%,高于正常子宫内膜组织(0)(P<0.05)。PTEN蛋白表达完全缺失在G2、G3级肿瘤高于G1级(P<0.05),PTEN基因突变率和蛋白缺失率均与肌层浸润、淋巴结转移及手术-病理分期无明显关系(P>0.05)。ERαmRNA、ERβmRNA在PTEN表达缺失的肿瘤中低于PTEN表达阳性者(P<0.05)。结论:PTEN基因突变与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与ERαmRNA、ERβmRNA表达水平有关。     

肺腺癌患者EGFR和KRAS基因突变与预后的相关性研究

目的 探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)和KRAS基因突变与预后的相关性.方法 选取134例肺腺癌患者的肺腺癌组织标本,应用探针扩增阻滞突变系统在PCR仪上进行EGFR和KRAS基因突变检测,分析EGFR和KRAS基因突变与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系.结果 134例患者中,EGFR基因突变53例,突变率为39.55%,KRAS基因突变6例,突变率为4.48%.肺腺癌患者EGFR基因突变率与年龄、吸烟史有关(P﹤0.01).EGFR基因突变型患者的KRAS基因突变率低于EGFR基因野生型患者(P﹤0.05).EGFR基因突变型患者的无进展生存期(PFS)长于EGFR基因野生型患者(P﹤0.05),KRAS基因野生型患者的PFS长于KRAS基因突变型患者(P﹤0.05).结论 EGFR基因突变的肺腺癌患者KRAS基因更倾向于野生型,EGFR基因突变型或KRAS基因野生型的肺腺癌患者PFS更长.     

NSCLC中EGFR基因突变与表达关系研究

目的 研究非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和蛋白表达的相关性.方法 随机选择北京协和医院胸外科2009年6月至2011年5月收治的非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)患者的石蜡包埋肺癌组织标本71例,分别以直接测序法和免疫组织化学染色法取得表皮生长因子受...     

非小细胞肺癌组织中 EGFR 基因突变与 ERCC1 mRNA 表达的关系

目的：探讨非小细胞肺癌中EGFR基因突变与ERCC1 mRNA 表达之间的关系。 方法：收集NSCLC患者病例样本41例,应用ARMS方法检测EGFR基因突变,采用RT-PCR方法检测ERCC1 mRNA 表达,应用Spearman相关检验对EGFR突变状态与ERCC1 mRNA 的表达进行相关性分析。 结果：在41例患者中,EGFR突变21例,ERCC1 mRNA 高、中、低表达率分别为19.1%(4/21)、57.1%(12/21)和23.8%(5/21),EGFR基因突变与ERCC1 mRNA 表达显著相关(P < 0.001)。 结论: NSCLC EGFR基因突变与ERCC1 mRNA 表达具有显著相关性。     

原发性肺鳞癌中EGFR和ALK基因突变的临床研究北大核心

目的:探讨赣南地区原发性肺鳞癌患者EGFR和ALK基因突变的特点,科学指导此类患者优选靶向用药。方法:入组73例原发性肺鳞癌病例,采用ARMS-PNA技术检测EGFR基因第18、19、20、21外显子突变,应用不平衡法检测其中60例病例的ALK融合基因,回顾性分析EGFR和ALK基因突变患者的临床病理特征。结果:EGFR基因突变8例,阳性率为10.96%(8/73),4例为L858R突变,3例为19del突变,1例为G719X突变。女性患者突变率(66.67%,2/3)明显高于男性患者(8.57%,6/70)(P=0.030),EGFR基因突变在高龄(≥60岁)、进展期(N_(1-3)、Ⅲ+Ⅳ期)患者中相对较高,但差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变与吸烟史、T分期以及肿瘤分布位置均无相关性(P>0.05);ALK融合基因表达2例,阳性率3.33%(2/60),与患者性别、年龄、吸烟史、TNM分期及肿瘤分布类型等各临床病理特征均无相关性(P>0.05);未发现EGFR和ALK基因共存突变病例。结论:赣南地区原发性肺鳞癌患者EGFR和ALK基因突变率相对不高,EGFR基因突变以L858R和19del突变为主,且好发于女性患者,可能是患者病情进展的预测因子之一。     

肝癌血浆EGFR水平与放疗效果关系研究

目的:观察肝癌患者放疗前后血浆表皮生长因子受体(EGFR)水平与放射治疗效果之间的关系。方法:ELISA法检测114例非手术肝癌患者放疗前1天、放疗开始后7天及1个月时血浆EGFR含量。按治疗前血浆EGFR含量分为高水平组与低水平组,分析近期疗效、中位生存时间和1年生存率与EGFR水平间的关系。结果:血浆EGFR高水平组近期有效率(CR+PR)为29.6%,血浆EGFR低水平组近期有效率(CR+PR)为63.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。血浆EGFR高、低水平组中位生存时间分别为7、15个月,差异有统计学意义(P<0.05),血浆EGFR高、低水平组1年生存率分别为32.4%、63.9%(P<0.05)。结论:肝癌患者血浆EGFR水平可作为放疗效果预测指标。     

肺腺癌患者新鲜细胞学标本EGFR基因突变检测及意义

目的：研究采用新鲜细胞学标本检测肺腺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况,用于辅助判断阳性患者服用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）的预后。方法：收集河北医科大学第四医院癌检中心的肺腺癌患者淋巴结针吸标本和胸腔积液标本313例,经HE染色、免疫细胞化学染色后由两位细胞病理医师确诊为肺腺癌后,采用ARMS法进行EGFR基因外显子18~21突变的检测,观察突变情况;对比EGFR基因突变阳性患者采用口服TKI药物靶向治疗或化疗的客观有效率（ORR）和无进展生存期（PFS）。结果：313例标本中确诊为肺腺癌293例,其中288例提取DNA成功并得到检测,提取成功率为98.1%（288/293）,检测出130例突变,突变率为45.1%。肺腺癌患者的EGFR突变主要发生在女性、不吸烟患者中,与年龄无明显相关。EGFR基因外显子18~21突变阳性患者靶向治疗组和化疗组之间的ORR差异有统计学意义（P < 0.01）,靶向治疗组的疗效和生存期都优于化疗组。新鲜细胞学标本检测的EGFR基因突变结果以及所测阳性患者的预后与以往文献均一致。结论：新鲜细胞学标本检测的EGFR突变结果准确,可以作为肿瘤组织的代替标本。     

子宫内膜癌p16基因突变及蛋白表达异常的分子学探讨

目的　研究 p16基因的突变及蛋白表达异常在人子宫内膜癌发生中的作用。方法　应用 PCR- SSCP、DNA测序及免疫组化对 4 1例子宫内膜癌中 p16基因第二外显子进行检测 ,研究 p16基因的蛋白表达情况。结果　4 1例子宫内膜癌中 12例存在 p16基因第二外显子 5 2 2 bp的纯合缺失 ,10例存在点突变 (二个突变位点相同 ) ,突变位点之一为第 12 6密码子碱基 GTC→ AAT(错义突变 ) ,另一突变点为 12 7密码子 GCA→ GCG(同义突变 )。缺失及突变共占 5 3.7%。 12例第二外显子缺失标本全部呈现 p16蛋白表达阴性 ,10例点突变标本有 9例出现 p16蛋白表达积分下降呈弱阳性 ,p16蛋白表达异常占 5 6 .0 %。结论　 p16基因的突变及蛋白表达异常与子宫内膜癌的发生有明显相关性