雷帕霉素抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用及其机制北大核心CSCD

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人宫颈癌HeLa裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法裸鼠皮下接种HeLa细胞,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、RAPA低剂量组(1.5 mg/kg)、RAPA高剂量组(4.5 mg/kg)。RAPA治疗过程中,检测肿瘤的体积、质量,免疫组织化学法及RT-PCR法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 RAPA低剂量组、高剂量组肿瘤生长曲线均减缓;RAPA低剂量组及高剂量组裸鼠皮下移植瘤平均体积、重量与对照组比较显著减小(P<0.01);低剂量组与高剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA低剂量组及高剂量组VEGF蛋白、VEGF及HIF-1α含量、MVD与对照组比较显著减少(P均<0.01),低剂量与高剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAPA对裸鼠皮下移植瘤生长(体积、重量)具有明显的抑制作用,其可能机制是通过抑制HIF-1α的表达抑制VEGF的合成,进而抑制肿瘤组织的血管形成。     

姜黄素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤放射增敏的作用

背景与目的:姜黄素(curcumin)能有效增强放射线对肿瘤的作用,但其作用机制尚不清楚。该研究旨在探讨姜黄素是否对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤有放射增敏效应,并探讨其协同抑制效应的机制。方法:人乳腺癌裸鼠移植瘤模型建立成功后,将裸鼠随机分为4组:对照组、药物组、放射组和联合组(姜黄素+放射),每组6只;检测裸鼠移植瘤的体积及体质量,计算抑瘤率,并绘制移植瘤的生长曲线;免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)及缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)的蛋白表达。结果:联合组的抑瘤率[(71.62±6.11)%]显著高于放射组[(41.76±5.84)%](P<0.05)。免疫组化结果显示,单纯放射不能使VEGF表达下调(P>0.05),姜黄素联合放射能明显抑制VEGF的表达(P<0.01)。Western blot结果显示,姜黄素与放射均可抑制MMP-9的表达,两者联用较单纯放射效果更加显著(P<0.05);单纯放射不能抑制HIF-1α的表达(P>0.05),姜黄素联合放射HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:姜黄素可以增强乳腺癌裸鼠移植瘤的放射敏感性,其机制可能是通过下调VEGF、MMP-9和HIF-1α的蛋白表达而发挥作用。     

紫杉醇联合奈达铂对HeLa细胞移植瘤生长的影响

背景与目的:紫杉醇(TXL)联合顺铂(DDP)已成为治疗宫颈癌的常用化疗方案,但DDP毒性反应大.新一代铂类制剂奈达铂(NDP)对宫颈癌抗瘤活性高,毒性低.本实验通过与TXL DDP方案进行比较,研究TXL NDP对HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用以及毒副反应.方法:以HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤为研究对象,用抽签法将裸鼠随机分为6组(对照组,TXL组,NDP组,DDP组,TXL NDP组,TXL DDP组),观察肿瘤体积及体重变化.单药组评价用对照组(C)和治疗组(T)肿瘤体积比率T/C评价生长抑制,应用合用率评价联合用药,体重减轻超过20%为达到毒性范围.结果:TXL NDP与TXL或NDP相比,对HeLa细胞生长抑制作用明显[(172±60)mm3 vs(304±55)mm3,P＜0.001;(172±60)mm3 vs(356±67)mm3,P＜0.001],TXL与NDP合用呈协同作用(CR=0.76),而且最大体重减轻率为8.3%,未达到毒性范围.TXL DDP抗癌活性与TXL NDP基本等同[(198±77)mm3 vs (172±60)mm3,P＞0.05],但毒性反应增大,有4只裸鼠死亡.结论:TXL NDP对HeLa细胞抗癌活性与TXL DDP相似,但毒性反应小,有临床应用前景.     

miR-486-5p对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨miR-486-5P对裸鼠皮下人胃癌移植瘤生长的影响及其可能的作用机制.方法:建立胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型,经miR-486-5P过表达质粒处理后,观察裸鼠皮下移植瘤生长情况,采用Western blotting及免疫组织化学法检测miR-486-5p靶基因神经纤毛蛋白-2(NRP2)的表达水平.结果:成功构建胃癌SGC-7901细胞裸鼠皮下移植瘤模型;实验组移植瘤内miR-486-5p的表达水平明显高于对照组(P＜0.05),miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌移植瘤的生长;与阴性及空白对照组相比,实验组平均瘤体质量明显下降[(0.404±0.080) vs (0.748±0.122)、(0.788±0.176)g,均P＜0.05];移植瘤平均体积明显减小[(0.333 ±0.039) vs (0.597 ±0.175)、(0.594±0.216)cm3,均P＜0.05],实验组的抑瘤率达46.99％;实验组经miR-486-5p过表达质粒处理后,免疫组化检测结果显示,NRP2蛋白主要定位于胃癌细胞质内,呈棕黄色颗粒;实验组NRP2蛋白的IHS得分显著低于阴性及空白对照组[(2.2±0.84) vs (6.4±0.89),(6.2±1.48),均P＜0.01];阴性对照组与空白对照组的得分差异无统计学意义(P＞0.05);Western blotting检测结果显示,实验组移植瘤组织中NRP2蛋白的相对表达量显著低于阴性及空白对照组[(0.04±0.006) vs (0.70 ±0.03),(0.68±0.02),P＜0.01].阴性和空白对照组间的IHS得分值、抑瘤率及NRP2蛋白表达水平的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:miR-486-5p可明显抑制裸鼠皮下胃癌SGC-7901细胞移植瘤的生长,其作用机制可能与抑制NRP2的表达有关.     

过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立

目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。     

携带内皮抑素基因的腺病毒对HO-8910细胞裸鼠移植瘤的影响

[目的]探讨携带内皮抑素基因的腺病毒(pLP-Ad-ES)对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其作用机制。[方法]采用细胞培养、移植瘤模型建立、RT-PCR、免疫组化等方法观察pLP-Ad-ES、pLP-Ad-ES+顺铂(DDP)对裸鼠移植瘤的影响及VEGF、MMP-2、Endostatin的表达。[结果]pLP-Ad-ES、pLP-Ad-ES+DDP能够抑制裸鼠移植瘤的生长,有明显的抑瘤作用(P<0.05);经腺病毒作用后,裸鼠移植瘤中MMP-2、VEGF呈现低表达、Endostatin呈现高表达。[结论]pLP-Ad-ES能够抑制卵巢癌裸鼠移植瘤的生长;同时能够抑制VEGF、MMP-2的表达,增强Endostatin的表达,提示内皮抑素的作用机制可能与抑制血管生成和调节基质金属蛋白酶有关。     

PI-88抑制人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤血管新生及其机制

目的:探讨通过Matrigel与肿瘤细胞混合接种的方法构建裸鼠人食管癌Matrigel移植瘤模型的可能性,进一步研究抗肿瘤制剂PI-88对于人食管癌Matrigel移植瘤生长及血管新生的影响。方法:将食管鳞癌细胞株TE-13悬液与Matrigel胶混合,接种8只裸鼠,构建人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤模型,将其随机分为PI-88治疗组和对照组。治疗组按照20 mg/kg剂量皮下注射PI-88,1次/d(PI-88配成1 mg/ml溶液);对照组按照20 ml/kg注射生理盐水,1次/d,均连续给药2周。第2、6、10、14天记录裸鼠肿瘤体积,第15天进行增强CT扫描观察肿瘤区域显影情况。免疫组化染色观察肿瘤组织中乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果:8只裸鼠均在接种当天形成移植瘤,成功构建TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤模型。PI-88治疗第14天时,治疗组肿瘤体积明显小于对照组[(70.25±6.85)vs(143.13±17.18)mm3,P<0.05]。治疗第15天时,治疗组肿瘤区域CT值明显低于对照组(15.18±0.91vs 19.23±2.03,P<0.05)。治疗组肿瘤组织内HPSE与VEGF表达阳性细胞数显著低于对照组[HPSE:(28.70±6.39)vs(87.55±22.03)个,t=11.472,P<0.01;VEGF:(47.10±8.18)vs(94.40±14.47)个,t=12.727,P<0.01]。结论:Matrigel胶混合食管癌细胞接种裸鼠制备移植瘤方法可行,PI-88能够抑制人食管癌TE-13细胞Matrigel裸鼠移植瘤生长及血管新生,其作用机制可能与PI-88抑制移植瘤组织中HPSE和VEGF表达有关。     

IFN-α对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的:研究IFN-α对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法:28只人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型随机分为4组:对照组(皮下注射生理盐水)、顺铂对照组(腹腔注射)、IFN-α低剂量组(1.5×107u/kg,皮下注射)、IFN-α高剂量组(3.0×107u/kg,皮下注射),观察各组移植瘤生长情况,裸鼠体重变化,计算抑瘤率,FCM检测各组移植瘤细胞周期S+G2-M所占比例.结果:DDP组抑瘤率92.8%,IFN-α低剂量组抑瘤率为73.8%,IFN-α高剂量组抑瘤率为93.1%,三组分别与对照组(抑瘤率为0%)相比,差异均有极显著性(P＜0.01);IFN-α低剂量组与IFN-α高剂量组比较,差异有极显著性(P＜0.01).FCM检测发现DDP组S+G2-M(31.91%±4.14%)低于对照组(37.76%±3.86%),差异有显著性(P＜0.05),而IFN-α低剂量组(35.43%±7.76%)和IFN-α高剂量组(35.79%±3.95%)分别与对照组比较,差异无显著性.结论:IFN-α对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤有明显抑制作用;剂量效果与抑瘤有关;对移植瘤的增殖无明显抑制作用,其抑瘤作用可能是通过其他机制.     

YC-1对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的影响及其机制

目的探讨缺氧诱导因子抑制剂（YC-1）对人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤的影响及其相关机制。方法用人肝癌细胞株SMMC-7721建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,待肿瘤生长至约（100~150）mm3时,将荷瘤裸鼠随机分为两组：实验组和对照组,分别给予YC-1和二甲基亚砜,观察两组裸鼠肿瘤生长情况;应用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学方法检测移植瘤组织HIF-1α和VEGF表达。结果YC-1治疗组各时点肿瘤体积显著低于对照组(P<0. 05 );与对照组比较,实验组移植瘤组织HIF-1α mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而HIF-1α蛋白的表达显著降低 (P<0. 05 );移植瘤组织VEGFmRNA及蛋白表达均显著低于对照组 (P<0. 05 )。结论YC-1可能通过下调HIF-1α和VEGF的表达来抑制肝癌的生长。     

腺病毒介导PTEN过表达抑制人脑胶质瘤U251细胞裸鼠移植瘤的生长

目的:研究含第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homologue deleted on chromo-some 10,PTEN)基因的重组腺病毒(Ad-PTEN-GFP)对人胶质瘤U251细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:于裸鼠背部注射人脑胶质瘤U251细胞,建立胶质瘤裸鼠移植瘤模型。荷瘤裸鼠随机分为3组进行治疗:Ad-PTEN-GFP组,Ad-GFP组(空载体组)及PBS组(空白组),观察3组裸鼠移植瘤的生长,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,并观察荷瘤裸鼠的生存时间。采用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡的情况,采用免疫组化法检测移植瘤组织中PTEN及P65蛋白的表达。结果:与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP组移植瘤的生长受到抑制,肿瘤体积抑制率显著升高[(82.5±12.7)%vs(7.2±1.3)%,P<0.05],荷瘤裸鼠生存时间延长[(103±10)vs(58±8)d,P<0.01];TUNEL结果表明,Ad-PTEN-GFP组与Ad-GFP组相比,移植瘤细胞凋亡率明显增加[(46.4±8.3)%vs(4.6±1.0)%,P<0.01];免疫组化结果显示,Ad-PTEN-GFP组与Ad-GFP组相比,移植瘤组织中PTEN蛋白的阳性表达率增高(83.3%vs 0,P<0.01),P65蛋白阳性表达率下降(16.7%vs 66.7%,P<0.01)。结论:感染Ad-PTEN-GFP后人脑胶质瘤U251细胞裸鼠移植瘤的生长受到抑制,其机制可能与P65蛋白表达的下调有关。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。