原子力显微镜对泌尿系结石超微结构的研究

目的 研究和观察泌尿系结石的超微结构。方法 10枚结石分别做超薄切片(厚度小于3mm),打磨抛光处理,并收集粉末。先行原子力显微镜观察,再做成电镜标本观察分析。结石粉末均行X-线衍射检测。结果 得到肾盂结石和膀胱结石超微结构的AFM图像和电镜扫描图像,X-线衍射检测有7枚是草酸钙结石,3枚是磷酸钙结石。测得草酸钙结石和磷酸钙结石的微小晶粒尺寸。分析AFM的反转片信息,获得结石基质的空间构架图像。结论 应用原子力显微镜技术可以实现对泌尿系结石超微结构直接实时的观察分析。尿结石的超微结构形态与结石所处部位无关,而取决于结石晶体类型。草酸钙结石的晶体和基质的AFM图像与磷酸钙结石不尽相同,晶体尺寸有差异(P<0.05)。结石基质的空间构架为晶体的聚集提供了可能性。     

应用原子力显微镜观察脉冲电磁场对大鼠骨质疏松的治疗后骨组织表面超微结构的变化

目的观察实验性大鼠骨质疏松模型股骨颈超微结构的变化特点,并探讨利用原子力显微镜观察的可行性。方法清洁级雌性SD大鼠(鼠龄3个月)60只,体重(200±20)g。随机将其分成对照组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、阿伦膦酸钠治疗组(ALN组)、PEMFs治疗组(PEMFs组),每组大鼠15只。除Sham组外,对其他各组行双侧卵巢切除术,造模后第30天开始分组干预。ALN组给予阿伦膦酸钠灌胃,PEMFs组给予脉冲电磁场治疗。Sham组和OVX组手术后正常喂养,不予任何处理。治疗后30d取大鼠股骨头切片,通过AFM观察大鼠股骨颈的表面超微结构。结果 Sham组原子力显微镜扫描可显示骨组织的骨陷窝、骨小管及其表面的钙磷晶体沉积,骨组织表面粗糙度为(2.59±0.645)μm。OVX组可见骨陷窝的大小变化及其钙磷晶体的排列紊乱,模型组骨组织表面粗糙度明显高于对照组(P0.01),提示造模成功;ALN组表面粗糙度明显低于OVX组(P0.05),PEMFs组的表面粗糙度与OVX组相比,有明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);而PEMFs组与ALN组比较,其表面粗糙度无明显差异(P0.05)。结论通过原子力显微镜能清晰观察到脉冲电磁场对大鼠骨质疏松治疗后的骨组织表面超微结构的变化,其疗效与阿仑膦酸钠相当,为脉冲电磁场治疗骨质疏松提供了一定的理论依据。     

原子力显微镜对角质形成细胞与黑素细胞共培养模型的观察研究

目的：用原子力显微镜观察人表皮黑素细胞（MC）、角质形成细胞（KC）单独培养和共培养的表面形态以及α-促黑素（α-MSH）对细胞表面形态的影响。方法：分别纯化培养来自人包皮的表皮MC和KC,MC以自配的添加MC生长物质的MCDB153培养基培养,KC以KC无血清培养基（K-SFM）常规培养。传第2代后以1：10的比例将两细胞接种到3Cm×3Cm的小培养皿中,以K-SFM培养基继续培养,单独或混合培养的细胞经添加含或不含100nMα-MSH的培养基干预3天后,0．5％戊二醛固定10min,原子力显微镜常温常压下,触摸式扫描。结果：正常人表皮MC有3个树突,每个树突有明显的二级分枝,除主干和分支见到膨出的颗粒物质,我们在树突的侧缘底侧和顶端还发现有丝状伪足结构,经α-MSH刺激后树突明显变长、变细,主干和分支表面膨出颗粒物质更为密集,许多已脱离枝干,丝状伪足则未有明显变化。表皮KC表面可见许多片状或钩状突起。共培养后,KC与MC接触部位可见明显的丝状伪足样结构,未连接部位则未见到丝状伪足样结构,添加α-MSH后,两细胞连接处的丝状伪足样结构明显增多。结论：通过胞吐和丝状伪足输送可能是黑素小体从MC向KC传递的两种主要方式,α-MSH可能通过促进这两种结构的发生而发挥促黑素传递的作用。     

病原微生物的原子力显微镜研究进展

绝大多数微生物在演化过程中对环境和生态压力进行选择形成了具有轮廓清晰的细胞壁,是外部环境和原生质体间的界线,具有维持细胞形状、控制细胞生长和分裂、抗膨压、作为分子筛和介导分子识别细胞间的相互作用.     

草酸钙结石患者肾乳头Randall斑的超微结构特点

目的 探讨草酸钙结石患者肾乳头Randall斑与草酸钙结石形成的关系. 方法经结石化学成分分析确诊为草酸钙肾结石患者12例.于经皮肾镜取石术中直视卜获取肾乳头Randall斑活检标本,分别行HE染色和锇酸固定,光镜和透射电镜下观察其组织病理和超微结构特点.结果 12例患者共检查肾乳头72处,肾乳头表面有Randall斑形成63处(87.5%),7例部分肾乳头表面有小结石附着.12例Randall斑活检标本光镜下肾乳头组织内见成团钙盐样沉积.2例电镜下肾乳头结缔组织中散在分布大小不均簇状草酸盐团聚体,典型结晶体呈针状,晶体轮廓周边电子密度高,晶体中央呈电子透亮区. 结论草酸钙结石患者肾乳头Randall斑主要是草酸盐结晶沉积,在Randall斑基础上草酸盐结晶进一步沉积可能促使草酸钙结石的形成.     

原子力显微镜新应用:单细胞诊断肝癌

目的 运用原子力显微镜(AFM)分析正常肝细胞、肝硬化细胞、肝癌细胞膜表面微细结构;绘出细胞膜表面蛋白变化图,并以此图作为诊断肝癌的标准.方法 选取正常肝细胞、肝硬化细胞、肝癌细胞各40组,利用AFM对标本扫描,将细胞膜表面扫描图用分析软件进行分析.结果 正常肝细胞、肝硬化细胞、肝癌细胞的细胞膜表面结构存在明显的差异,从正常肝细胞到肝硬化细胞再到肝癌细胞是一个渐进的过程.每个细胞膜表面的蛋白微细结构分布并不均匀,从膜表面蛋白分析数据中可看到它们存在差异.结论 依据细胞膜表面分析数据做出三组图形,我们可以以此为肝癌的诊断标准,只要获得一个细胞,即可做出肝癌的诊断.根据细胞膜表面蛋白分布的不同,将细胞膜表面分为功能活跃区和功能不活跃区.     

应用原子力显微镜技术对人膀胱癌细胞株T24活细胞的成像研究

目的实现应用原子力显微镜(AFM)技术对人膀胱癌细胞株T24活细胞的成像,在原子级或纳米级水平上观测T24活细胞的超微结构。方法在生理条件下,使用AFM直接观测培养中的人膀胱癌T24细胞,对其超微结构动态成像。结果获得T24活细胞原子级或纳米级分辨率下的实时扫描图像,细胞胞膜和细胞骨架成像清晰。结论AFM技术可以用于对膀胱癌T24活细胞超微结构的成像研究,所获得的图像可反映其在生活状态下的动态变化。     

镁对草酸钙结石的作用

镁对含钙结石的形成可发挥重要的抑制作用,临床和实验室已对此进行了研究。体外试验中,镁可使草酸钙和磷酸钙结晶受抑。作者认为镁不仅阻止结晶生长率,而且抑制结晶过程。有关临床研究发现:结石病人的镁/钙比值较低,可能与镁分泌     

原子力显微镜检测兔面缝增龄性变化

目的研究兔的前颌缝、鼻额缝、颧颞缝、腭横缝的交错性及纳米弹性性能,及其缝的生物力学特性的增龄性变化,为缝牵引成骨技术的临床应用提供实验依据。方法选取3个月龄及6个月龄同种日本大耳白兔各8只,切取颧颞缝、鼻额缝、前颌缝及腭横缝组织,观察缝大体交错性,并应用原子力显微镜检测缝的微观形貌和生物力学特性,并比较不同年龄组动物之间的差异。结果两组动物的颧颞缝、鼻额缝、前颌缝及腭横缝组织及其相关矿化前缘具有明显不同的交错性、三维微观形貌和弹性材料性能。随年龄的增大、鼻额缝和前颌缝的交错性增加。6个月龄的兔颧颞缝、鼻额缝、前颌缝及腭横缝组织及其矿化前缘表面形貌较3个月龄平滑,而弹性模量则有所增加。结论面缝的微观形貌和弹性模量的增龄性变化提示,大龄上颌发育不全患者可以应用更大的力量进行缝牵引成骨治疗。     

运用原子力显微镜检测人类精子的超微病理结构

为研究病理精子的超微结构 ,尤其是精子表面的变化和检测导致不育精子的形态学改变 ,作者使用普通的原子力显微镜 (ａｔｏｍｉｃｆｏｒｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ,ＡＦＭ)以非接触模式 ,对少弱畸精子症、弱精子症病人以及正常生育男性精子进行了检测。主要的实验结果包括 :正常与病理精子的形态学特征 ,局部解剖学资料 ,精子头、颈、鞭毛的三维图像。获得的图像清晰地显示 :病理精子头、颈、鞭毛的形态发生了巨大的改变 ,甚至鞭毛顶部和顶体帽区域的超微结构也能清楚地区分。此次研究对证实病理精子的形态学改变和弄清形态学缺陷及其对不育…     

原子力显微镜下观察急性压力损伤后脊髓背根神经节神经元的结构变化

目的:利用脊髓背根神经节神经元细胞体外机械压力损伤模型,探计单纯机械压力因素对背根神经节神经元细胞的损伤效应,尤其是细胞膜骨架蛋白的变化情况。方法:新生SD大鼠脊髓背根神经节神经元体外原代培养,利用多功能全自动细胞压力仪(国家实用新型专利ZL 200820030390.7),将培养细胞分为A、B、C、D四组,其中A组为未施加机械压力损伤的对照组,B、C、D组分别给予0.3mPa、0.5mPa.、0.7mPa的压力损伤10min,每组观察细胞爬片6个,于加压后培养8h取细胞爬片固定,送原子力显微镜检测,观察神经元细胞的细胞膜骨架蛋白纳米级变化情况,获取并分析胞膜表面颗粒高度分布数据及原子力显微镜图片。结果:对照组细胞膜表面平滑,无明显粗糙颗粒;0.3mPa组细胞膜表面颗粒突起较对照组增多,膜颗粒总体高度增加,局部变粗糙,胞膜上蛋白高度分布直方图峰值右移;0.5mPa组较0.3mPa组胞膜粗糙度更加明显;0.7mPa组膜表面蛋白颗粒总体高度较0.3mPa及0.5mPa组降低,粗糙颗粒减少,但出现胞膜骨架蛋白解聚与构像变化,胞膜出现孔道样改变。胞膜颗粒高度分布峰值、分布宽度及最高颗粒值的单因素方差分析显示,压力损伤各组间及损伤组与对照组均有统计学差异(P<0.01)。结论:机械压力损伤因素可引起细胞膜骨架蛋白变化和表面颗粒高度变化,为压力损伤的细胞保护研究提供了实验数据。     

特发性草酸钙结石研究现状

草酸钙结石是最常见的泌尿系结石类型,约3／4的泌尿系结石含有草酸钙。除了极少数由单基因突变导致的遗传性草酸钙结石,以及继发性草酸钙结石(如胃肠道疾病所致),临床上草酸钙结石绝大多数为缺乏明确的遗传背景,有一定的家族聚集现象,找不到明显的致病原因的特发性草酸钙结石。特发性草酸钙结石病是一个复杂的、多病因的疾病,是环境和遗传因素共同作用的结果。     

尿液成分对草酸钙结石的影响

目的 探讨尿液成分对草酸钙尿结石形成的影响。方珐 应用红外光谱仪对50份尿结石标本进行成分检测；对16例一水草酸钙（COM）与10例二水草酸钙（COD）尿结石患者的24h尿液进行生化检测，并比较两组生化指标。结果 87．5％的c0M结石患者和90％的c0D结石患者24h尿量减少；COM结石患者尿钙（4．94±2．11）mmol／24h，COD结石患者尿钙（9．43±3．78）mmol／24h；差异有统计学意义（P〈0．01）；COM结石患者尿磷（20．50±8．76）mmol／24h，COD结石患者尿磷（28．38±10．21）mmol／24h，差异有统计学意义（P〈0．05）；87．5％的COM结石患者尿枸橼酸低于正常水平。结论 COD结石患者尿钙、尿磷高于COM结石患者，表明COD结石的形成与高钙尿和高磷尿有关；COM结石的形成可能与低尿枸橼酸有关。     

草酸钙结石形成的代谢性变化的研究

目的分析顺德勒流地区草酸钙结石患者的血生化及尿液代谢变化,探讨草酸钙结石形成的代谢性因素,为临床提供诊治的依据。方法对确诊为草酸钙结石的患者进行病例对照研究,并进行尿pH值、24h尿定量分析及血生化检测。结果 （1）85例草酸钙结石患者中出现低尿量者71例,高钠尿症38例,高钙尿症53例,高尿酸尿症15例,低枸橼酸尿症74例,高草酸尿症42例,高磷尿症3例,高pH值尿28例,而28例高pH值尿患者合并低枸橼酸尿症者25例;（2）草酸钙组与对照组的24h尿定量分析结果显示,草酸钙结石组尿量、尿枸橼酸均显著低于对照组（均P〈0.005）,而尿pH值、尿钠、尿钙及尿草酸明显高于对照组（均P〈0.005）,其他指标无显著统计学差异;（3）草酸钙组与对照组血生化指标比较,血钙、血钠浓度明显高于对照组,其他指标无统计学差异（均P〈0.005）。结论低尿量、低枸橼酸尿症、高钠尿症、高钙尿症、高草酸尿症、高血钙及高血钠是顺德勒流地区草酸钙结石形成的重要代谢因素。     

枸橼酸钾预防草酸钙结石形成的研究

本文通过体外和动物实验，研究枸橼酸钾在草酸钙结石形成过程中的作用。结果发现，在试管中加入枸橼酸钾后再给予草酸负荷，则草酸钙晶体形成明显减少，说明枸橼酸钾对草酸钙晶体形成有明显抑制作用。只给予致石药物的所有大鼠肾实质内都有中等量或大量草酸钙晶体颗粒形成，而同时给予枸橼酸钾组肾实质内晶体颗粒明显减少，湿肾中钙和草酸含量亦明显减少，说明枸橼酸钾有良好的防石效果。     

液压扩张对动脉作用的超微结构观察

静脉移植过程中 ,应用液压扩张的方法去克服静脉的痉挛 ,并使之与相吻合的血管匹配 ,同时便于寻找、结扎其细小的分支 ,已是成熟的方法[1 ] 。静脉液压扩张的张力若能控制在正常动脉压的范围则最佳 ,并且此技术在临床上较易应用。动脉液压扩张是临床上特别在显微外科手术中处理小动脉痉挛常用的 ,而且是有效的方法 ,本文将研究什么范围的压力 ,既能解决动脉的痉挛 ,而又不至于造成内膜 ,特别是内皮细胞的损伤。材料与方法一、动物分组选用健康成年新西兰大白兔 12只 ,体重 2 0 0 0～ 2 5 0 0 g,随机分为 4组 ,每组 3只。二、手术方法将动物…     

夏枯草提取物对尿草酸钙结石形成的抑制作用

中草药夏枯草水提取液在体外能明显抑制尿草酸钙晶体的生长和聚集。为了进一步明确夏枯草抑制尿草酸钙结石形成的活性成分及作用机制，我们对夏枯草提取物对尿草酸钙结石形成的影响进行了研究。