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维生素A缺乏兔干眼病模型角膜上皮细胞凋亡及相关蛋白表达的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨维生素A缺乏兔干眼病模型角膜上皮细胞凋亡与相关蛋白表达的关系.方法 制作维生素A缺乏兔干眼病模型,采用原位末端标记及免疫组织化学法,对兔模型组及对照组各12只24眼角膜上皮细胞中的凋亡细胞及Fas、FasL、Bax和bcl-2等相关蛋白的表达进行检测.结果 兔干眼病模型组每高倍视野角膜上皮细胞凋亡数为4.69±1.06,对照组为0.25±0.13,差异有统计学意义(P<0.01).模型组角膜上皮细胞中,每1 000个细胞阳性蛋白表达的细胞数分别为Fas 207.67±56.17、FasL 228.33 4±61.09、Bax 175.03±43.23,均明显高于对照组Fas 64.45±37.23、FasL68.35±35.88、Bax47.77±29.32(P<0.01),与凋亡细胞数呈正相关(r:0.87,0.94,0.90);bcl-2阳性表达的细胞数为56.19±36.67,明显低于对照组190.83±52.07(P<0.01),与凋亡细胞数呈负相关(r=-0.81).结论 维生素A缺乏兔角膜组织上皮细胞Fas、FasL及Bax增加及bcl-2的减少均可促进细胞凋亡. 相似文献
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目的 探讨暴露性干眼病大鼠模型结膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法 25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组。实验结束分别处死每组大鼠,取双眼结膜进行免疫组织化学染色观察结膜组织中凋亡相关基因bax及Bcl-2的表达情况。结果 各实验组大鼠结膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与正常组相比增加,而Bcl-2阳性表达细胞数较正常组减少,差异均有统计学意义(P〈0.05);结膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与暴露时间呈正线性相关(r=0.76,P〈0.05),而Bcl-2表达阳性细胞数与暴露时间呈负线性相关(r=-0.78,P〈0.05)。结论 暴露性干眼病结膜组织中上皮细胞凋亡可能是导致结膜上皮破坏进而功能丧失的原因之一,bax增加及Bcl-2减少与结膜上皮细胞凋亡有关。 相似文献
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为观察离体角膜上皮细胞经传代培养后细胞死亡的规律及确定其性质。本文应用流式细胞仪 ( FACStarplus)检测凋亡细胞的亚 2倍体 DNA以及细胞凋亡的形态学观察 ,对体外培养的每一代兔角膜缘上皮细胞的凋亡情况进行了观察及分析。结果显示 :角膜缘原代上皮细胞被检测出 7.0 0± 2 .2 3 %的凋亡细胞 ;从第 6代开始 ,角膜上皮细胞凋亡数目显著升高 ( P<0 .0 1) ;之后细胞凋亡数目急剧增加 ,第 8~ 9代后细胞出现集体“自杀”现象。透射电镜观察到这些细胞出现了核浓缩、胞膜发泡、凋亡小体等典型细胞凋亡的形态学改变。结论 :离体角膜缘上皮细胞因外部生长环境的改变 ,在培养到第 6代时出现了细胞凋亡现象。 相似文献
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暴露性干眼症大鼠模型角膜上皮细胞凋亡相关基因的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
目的探讨暴露性干眼症大鼠模型角膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组,每组5只。实验组通过睑缘缝线机械性阻止大鼠瞬目,充分暴露各组大鼠角膜0.5h、6h、24h及1周后,用角膜荧光素染色及SchirmerⅠ试验对实验组大鼠进行临床诊断;然后分别处死每组大鼠,取双眼角膜进行免疫组织化学染色,研究角膜组织中凋亡相关基因蛋白Bcl-2及Bax的表达。正常组大鼠不进行处理,处死后取双眼角膜标本按实验组同样步骤处理。结果不同实验组大鼠角膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与正常对照组相比增加,而Bcl-2表达阳性细胞数较对照组减少,且差异具有显著性(P<0.05);角膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与暴露时间呈正线性相关(r=0.76,P<0.05),而Bcl-2表达阳性细胞数与暴露时间呈负线性相关(r=-0.57,P<0.05)。结论暴露性干眼症角膜组织中上皮细胞凋亡可能是导致角膜上皮破坏进而功能丧失的原因之一,Bax增加及Bcl-2减少与角膜上皮细胞凋亡有关。 相似文献
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目的 研究辅酶Q10对紫外线所致角膜上皮细胞光损伤防护作用.方法 36只wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组与辅酶Q10治疗组.紫外线连续照射24 h建立角膜上皮紫外线光损伤模型.治疗组于光照前3周每天辅酶Q10灌胃.观察角膜组织病理学改变并用免疫组化染色观察凋亡相关基因蛋白Bcl-2、Bax、Fas和FasL的表达,进行细胞计数与统计学检验.结果 正常对照组角膜上皮可以见到Bcl-2、Fas和FasL的阳性表达,很少见到Bax的阳性表达.阳性对照组和辅酶Q10治疗组均可以见到Bcl-2、Bax、Fas和FasL的表达.与正常组比较,阳性组Bcl-2表达阳性的角膜上皮细胞数显著减少,Bax表达阳性的角膜上皮细胞数显著增多(P<0.01);治疗组Bcl-2、Bax表达阳性的细胞数与正常组相比无明显变化(P>0.05);而阳性组Fas和FasL表达阳性的角膜上皮细胞数明显增多(P<0.01),治疗组Fas和FasL表达阳性细胞数明显少于阳性组(P<0.05).结论 辅酶Q10通过上调Bcl-2的表达,下调Bax、Fas和FasL的表达,能够阻抑凋亡过程和细胞的死亡. 相似文献
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紫外线致大鼠角膜上皮细胞凋亡的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:探讨紫外线对角膜的损伤机制中是否有细胞亡的存在。方法:用400μw/cm^2的紫外线照射大鼠角膜,取下后迅速固定,作石蜡切片,然后用原位末端标记技术(ISEL)检测凋亡的细胞。结果:照射5min组与对照组无明显差异(P>0.05),而照射15min组与对照组及照射5min组均有明显差异(P<0.001)。结论:紫外线照射大鼠角膜,经过一定的潜伏期后,可以诱导其上皮细胞凋亡。 相似文献
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摘除主泪腺干眼病鼠泪液功能变化与凋亡相关基因蛋白的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立摘除主泪腺干眼病鼠动物模型,探讨动物模型眼表组织凋亡相关基因的表达与眼表干变及组织损伤的关系。方法选择健康成年Wistar大鼠20只,随机分为实验组和正常对照组,每组10只,制作摘除主泪腺干眼病动物模型鼠10只(实验组),于术前和术后3d,1、2、4及8周行SehirmerⅠ试验、泪膜破裂时间检测、角膜上皮荧光素染色检测;采用免疫组织化学方法对10只模型鼠和10只正常对照鼠角膜、结膜上皮细胞及睑板腺腺泡细胞中Bax和Bcl-2等相关基因蛋白的表达进行检测。结果实验组于术后1~2周起SchirmerⅠ试验、泪膜破裂时间明显小于手术前,且随观察时间的延长而更加缩短(P<0.05),角膜上皮荧光素染色实验后显示阳性。实验组角膜、结膜上皮及睑板腺腺泡细胞中,Bax阳性表达的细胞数[每1000个细胞中(503.47±343.73)、(586.36±296.47)、(436.61±246.96)个]均明显高于对照组[每1000个细胞中阳性数(241.71±130.12)、(311.03±142.33)、(202.16±109.29)个](P均<0.05);Bcl-2阳性表达的细胞数[每1000个细胞中(237.32±87.07)、(236.07±81.24)、(251.79±89.93)个]均明显低于对照组[每1000个细胞中阳性数(474.24±167.62)、(342.81±114.57)、(320.42±153.32)个](P均<0.05)。结论摘除主泪腺干眼病鼠角膜、结膜上皮及睑板腺腺泡细胞中均有凋亡的发生,细胞凋亡可能是干眼病鼠眼表组织破坏损伤的原因之一。 相似文献
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干眼病患者角膜表面规则性及人工泪液对角膜表面规则性的影响 总被引:14,自引:0,他引:14
目的 评价干眼病患者的角膜表面规则性及人工泪液对其角膜表面规则性的影响。方法 应用TMS 1角膜地形图仪检测正常人 33例 ( 6 4只眼 )及干眼病患者 2 2例 ( 42只眼 )的角膜表面规则指数 (surfaceregularityindex ,SRI)、表面不对称指数 (surfaceasymmetryindex ,SAI)及角膜预测视力(potentialvisualacuity ,PVA) ,并对干眼病患者应用人工泪液前后角膜表面规则性及PVA的变化进行观察。结果 干眼病患者的SRI、SAI及PVA值分别为 0 .31± 0 .2 2、0 .30± 0 .16及 2 0 /17.89± 2 0 /3.0 4;而正常人分别为 1.2 8± 0 .73、1.0 5± 1.17及 2 0 /33.45± 2 0 /13.99。干眼病患者的SRI和SAI值较正常人明显升高 ,PVA值则明显降低 ,各组间比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1)。干眼病患者的平均散光度( 2 .10± 1.96 )D明显较正常人 ( 1.13± 0 .5 3)D高 (P =0 .0 2 )。在干眼病患者中 ,SRI与SAI与角膜荧光素染色程度呈正相关 (SRI:P =0 .0 0 5 ;SAI:P =0 .0 16 ) ,而平均PVA与平均实际矫正视力比较差异无显著性。干眼病患者角膜地形图中对称蝴蝶结形所占的比例较正常人明显降低 ,而不规则形者所占比例则明显升高。干眼病患者在滴用人工泪液后 ,SRI、SAI和平均散光度均明显降低 (P值分别为<0 .0 0 1,<0 .0 0 相似文献
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维生素A缺乏干眼症兔泪腺凋亡及相关基因的表达 总被引:8,自引:3,他引:8
目的 探讨维生素A缺乏兔干眼症模型泪腺上皮细胞凋亡及相关基因表达与组织损伤的关系。方法 制作 6只维生素A缺乏兔干眼症模型 ,采用原位末端标记及免疫组织化学方法 ,对模型兔及 6只对照兔泪腺组织上皮细胞中的凋亡细胞及Fas、FasL、Bax和bcl 2等相关基因蛋白的表达进行检测。结果 干眼症模型兔泪腺上皮细胞凋亡数为每高倍视野 (18.17± 5 .33)个 ,对照兔为每高倍视野 (3.5 6± 1.18)个 ,P <0 .0 0 1。模型兔泪腺导管及腺泡上皮细胞中 ,Fas、FasL及Bax阳性表达的细胞数 [每 10 0 0个细胞(416 .33± 112 .0 9)个、(45 8.6 7± 12 0 .5 2 )个及 (32 8.74± 89.0 8)个 ]均明显高于对照组 [每10 0 0个细胞阳性数为 (98.83± 5 1.2 3)个、(12 6 .88± 5 4 .0 9)个及 (87.75± 4 3.33)个 ],P <0 .0 0 1,与凋亡细胞数呈正相关 (r =0 .86 ,0 .91,0 .88;P <0 .0 1)。bcl 2阳性表达的细胞数[每 10 0 0个细胞阳性数为 (113.37± 72 .4 5 )个 ],明显低于对照组 [每 10 0 0个细胞阳性数为 (396 .6 7± 98.73)个 ],P <0 .0 0 1,与凋亡细胞数呈负相关 (r =- 0 .73,P <0 .0 5 )。结论 维生素A缺乏兔泪腺组织中上皮细胞凋亡可能是导致腺体破坏进而功能丧失的原因之一 ;Fas、FasL及Bax增加及bcl 2的减少均与促进细胞 相似文献
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目的 探究槲寄生滴眼液治疗去势雄兔干眼症的效果。方法 取健康成年雄兔48只,体质量1.5~2.0kg,在无菌恒温条件下喂养。随机选取12只雄兔仅切开阴囊,不切除睾丸作为阴性对照组,眼部不给予任何处理。将其余36只雄兔行双侧睾丸切除术,切除辜丸及附辜,结扎输精管及精索静脉,制作去势雄兔模型。作去势雄兔模型后随机分成3组,仅行双侧睾丸切除术的阳性对照组、采用槲寄生滴眼液的槲寄生组、采用生理盐水滴眼液的生理盐水组。分别于治疗前及治疗后2周、4周、8周观察各组泪液分泌试验(SchirmerⅠ test,SⅠT)、角膜荧光素染色、泪液蛋白及角膜共聚焦显微镜下的情况。结果 治疗4周、8周后,槲寄生组SⅠT较治疗前均有不同程度改善,差异均有统计学意义(均为P<0.05);而生理盐水组治疗2周、4周、8周后SⅠT较治疗前明显恶化,差异均有统计学意义(均为P<0.05);治疗2周、4周、8周后槲寄生组与生理盐水组各时间点SⅠT相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。治疗2周、4周、8周后,槲寄生组各时间点荧光素染色评分较治疗前均有不同程度改善,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而生理盐水组荧光素染色评分较治疗前明显恶化,差异均有统计学意义(均为P<0.05);两组治疗后2周、4周、8周荧光素染色评分相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。槲寄生组与生理盐水组在治疗2周、4周、8周后泪液总蛋白量、乳铁蛋白、溶菌酶含量及淀粉酶活性相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。炎症细胞计数发现,经过8周治疗后,槲寄生组炎症细胞和上皮基底细胞密度分别为(75±12)mm-2和(2996±103)mm-2,而生理盐水组炎症细胞和上皮基底细胞密度分别为(234±26)mm-2和(4431±121)mm-2,两组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 槲寄生滴眼液可有效减轻去势雄兔干眼症的症状和体征,应用于治疗有一定的临床意义。 相似文献
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目的:比较2型糖尿病(2-DM)患者与非2-DM人群干眼的患病率差异,并分析影响干眼的2型糖尿病相关指标.方法:选取2014-03/2015-05于我院内分泌科就诊的2-DM者80例(观察组),门诊体检中心的正常体检者98例(对照组).参照WHO干眼诊断标准,统计分析两组患者干眼的患病率.将观察组患者分别依据糖尿病病程、年龄、性别以及血糖控制情况分组,组内分析其干眼患病率有无差别.结果:观察组患者干眼的患病率为49% (39/80),显著高于对照组(29%),差异有统计学意义(P<0.01).2-DM患者随年龄、病程以及血糖水平增加,其干眼患病率升高,差异有统计学意义(P<0.05).不同性别患者之间干眼患病率无统计学差异(P>0.05).结论:2-DM患者干眼患病率高于正常人群,且随患者年龄、病程及血糖水平增加而升高,但不同性别间其患病率无明显差异. 相似文献
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老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及相关基因蛋白的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨老年性白内障与晶状体上皮细胞凋亡的关系。方法透射电镜下观察老年性白内障晶状体上皮细胞的超微结构;Tunel法检测凋亡细胞百分率;并对其晶状体上皮细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳;免疫组化法检测P53、bcl-2在老年性白内障晶状体上皮细胞中的蛋白表达。结果 透射电镜下发现老年性白内障晶状体上皮细胞中有凋亡细胞;凋亡细胞百分率为8.4%~37.8%,琼脂糖凝胶电泳出现梯状条带;P53在老年白内障晶状体上皮细胞中蛋白表达率为16.9%~19.1%,bcl-2无蛋白表达。结论 老年性白内障的发生可能与其晶状体上皮细胞凋亡有关。 相似文献
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维生素A缺乏干眼症模型兔泪液分泌及泪膜稳定性的改变 总被引:2,自引:0,他引:2
目的观察维生素A缺乏干眼症模型兔眼表及泪膜的变化,评价其对泪液分泌及泪膜稳定性的影响。方法健康兔9只以维生素A完全缺乏饲料喂养,于实验前和实验后2个月、3个月、4个月、5个月、6个月行Schirmer试验、泪膜破裂时间及虎红染色检测。对照组9只兔喂以正常饲料。6个月后处死所有动物,取泪腺、角膜及结膜行病理学观察。结果实验组4个月起Schirmer试验滤纸浸湿长度为(17.8±2.7)mm,6个月后滤纸浸湿长度为(8.3±1.6)mm,明显短于对照组(25.6±4.2)mm,差异有显著性,并且随观察时间延长差异更加明显。实验组4个月后泪膜破裂时间为(14±7)s,6个月后泪膜破裂时间为(6±3)s,明显短于对照组(26±9)s,差异有显著性,并且随观察时间延长差异更加明显。虎红染色实验组呈阳性,对照组呈阴性。病理学观察,实验兔泪腺见多数萎缩的腺细胞,腺泡腔内分泌粘液明显减少,角膜上皮层次增加,排列紊乱,结膜杯状细胞几乎不见。结论维生素A缺乏兔泪腺上皮细胞萎缩,角膜上皮角化,结膜杯状细胞减少,导致泪液分泌的质和量改变及泪膜稳定性降低而发生干眼症。 相似文献
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Effects of estrogen replacement therapy on apoptosis and vascular endothelial growth factor expression in ocular surface epithelial cells: An experimental study 下载免费PDF全文
AIM: To investigate the effects of estrogen replacement therapy (ERT) on apoptosis and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in ocular surface in an experimental rat model.
METHODS: Forty female, Wistar rats were randomized in 4 groups in the study. Subcutaneous ERT (17β-estradiol, 10μg/kg/day) was administered to the first group without ovariectomy and to the second group with ovariectomy for three months. Third group had only ovariectomy and fourth group had sham operation. All rats were sacrificed in estrous cycles determined by vaginal smear test and their right eyes were enucleated at the end of the third month. Enucleated eyes were analyzed by immunohistochemical method for expressions of caspase-3, bcl-2, VEGF and TUNEL assay.
RESULTS: Caspase-3 expression of conjunctival epithelium was significantly higher in group 3 than group 1 (P=0.005), and group 2 (P=0.007). TUNEL score of conjunctival epithelium was significantly higher in group 3 than group1 (P=0.006). TUNEL score of corneal epithelium was significantly higher in group 3 than group 2 (P=0.012), and group 4 (P=0.002). There was no significant difference between groups in that bcl-2 and VEGF expressions.
CONCLUSION: We determined increased apoptosis in ocular surface epithelial cells in ovariectomized rats. ERT and endogen estrogen decreased the apoptosis, and did not result in difference in VEGF expression between the groups. Estrogen may be beneficial for the treatment of apoptosis-mediated ocular surface disorders such as dry eye. Further studies are needed on this subject for a better understanding of the role of estrogen and to provide a new insight for treatment and prevention of apoptosis-mediated ocular surface disorders. 相似文献
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晶状体上皮细胞凋亡是除先天性白内障以外的所有类型白内障形成的细胞学基础,是防治除先天性白内障以外的其它类型白内障的关键。凋亡相关基因调控的研究是解决晶状体上皮细胞凋亡机制的重要途径,我们综述了关于晶状体上皮细胞凋亡基因调控方面的研究进展。 相似文献
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背景急性应激反应可以诱发视网膜细胞凋亡,同时引起视网膜内源性降钙素基因相关肽(CGRP)表达量的增加,CGRP在应激反应诱发的视网膜凋亡过程中的作用尚不清楚。目的探讨内源性感觉神经递质CGRP对急性心肌缺血诱发应激反应引起的大鼠视网膜细胞凋亡的影响。方法取健康成年雄性sD大鼠12只24只眼,采用结扎大鼠冠状动脉左前降支3h法制备大鼠急性心肌缺血应激反应模型。按随机数字表法将实验动物分为CGRP8-37干预组和对照组,每组各6只12只眼。CGRP8-37干预组大鼠于造模前经尾静脉注射10μmol/LCGRP受体拮抗剂CGRP8-37,对照组注射等容量的生理盐水。采用TUNEL法和caspase-3活性检测法分别检测各组大鼠视网膜细胞凋亡情况。结果光学显微镜下结扎大鼠冠状动脉3h后,CGRP8-37干预组视网膜内外核层细胞排列较紊乱、神经节细胞层空泡变性较对照组明显,CGRP8-37干预组视网膜细胞的总凋亡指数为42.8%±2.8%,明显高于对照组的37.5%±2.9%,差异有统计学意义(t=-3.244,P〈0.01)。CGRP8-37干预组大鼠视网膜中caspase-3活性的吸光度值为11.3±3.1,明显高于对照组的4.9±1.2,差异有统计学意义(t=-4.603,P〈0.01)。结论CGRP8-37干预后视网膜应激性损伤加重,提示内源性CGRP对应激反应引起的视网膜细胞凋亡有保护作用。 相似文献
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目的 探讨针刺对干眼兔泪腺形态学及泪腺上皮细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响,分析针刺对干眼的作用机制.方法 取健康新西兰白兔18只随机分为空白组、模型组、针刺组,每组6只,空白组不作任何处理;模型组皮下注射氢溴酸东莨菪碱,每天4次,每次2 mg·kg-1共24 d;针刺组在与模型组同样处理的基础上进行针刺,每天1次,共14 d.不同时段观察各组泪液分泌试验检测泪液量的结果,光镜、电镜观察泪腺形态学变化,免疫组织化学检测泪腺组织中凋亡相关基因蛋白的表达.结果 泪液分泌试验检测泪液量结果显示在针刺第4、7、14天同时段针刺组与模型组相比明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);在针刺第14天时,针刺组与实验前相比,差异无统计学意义(P>0.05).光镜、电镜示针刺组泪腺上皮细胞胞浆丰富,排列紧密,活动良好,与空白组接近.免疫组织化学检测显示与模型组比较,针刺组泪腺导管及腺泡上皮细胞中Bax的阳性细胞半定量评分值明显低,差异有统计学意义(P <0.05);Bcl-2的阳性细胞半定量评分值亦低,但差异无统计学意义(P>0.05).与空白组相比,针刺组Bax、Bcl-2评分值差异均无统计学意义(均为P>0.05).与模型组比较,针刺组的泪腺导管及腺泡上皮细胞中Fas、FasL的阳性细胞半定量评分值明显低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与空白组相比,针刺组Fas、FasL评分值差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 针刺通过抑制干眼兔泪腺组织的细胞凋亡及腺体萎缩,促进兔干眼模型的泪腺代谢,从而达到增加泪液分泌的作用. 相似文献