共刺激信号阻断对大鼠过敏性哮喘治疗作用的研究

在过敏性哮喘研究中发现 ,ＣＤ+ 4Ｔ细胞参与了慢性气道炎症的启动和持续过程 ,成为介导嗜酸细胞性炎症、气道高反应的主要炎性细胞。ＣＤ+ 4Ｔ细胞的激活需要识别信号和共刺激信号 ,识别信号由抗原递呈细胞 (ＡＰＣ)递呈的特异性抗原肽与Ｔ细胞表面的抗原受体交联后提供 ;共刺激信号是非抗原特异性的 ,由ＡＰＣ表面分子与Ｔ细胞表面相应的受体提供。最主要的共刺激信号为Ｂ7/ＣＤ2 8分子。因过敏性哮喘的致敏原很多 ,不同致敏原的抗原肽结构不同 ,因此提供的识别信号具有抗原特异性限制 ,通过阻断识别信号来阻止ＣＤ+ 4Ｔ细胞激活十分困难 …     

支气管哮喘患者血清可溶性CD86的测定及其意义

为检测支气管哮喘 (简称哮喘 )患者血清中可溶性CD86(sCD86)的水平 ,并分析sCD86与哮喘病情严重程度、肺功能、外周血白细胞计数和分类的关系 ,我们探索了sCD86在哮喘发病机制中的可能作用。对象与方法　按随机数字表法选择 2 0 0 1年 9月～ 2 0 0 2年 8月广西医科大学第一附属医院住院及门诊治疗的 5 2例哮喘患者进行研究。所有哮喘患者的诊断符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的诊断标准[1] 。均不吸烟、不合并其他肺部疾病、对非甾体类激素抗炎药物无过敏史。哮喘患者如果在过去 4周使用过口服或静脉注射糖皮质激素即被排除出…     

吸入过敏原前后支气管哮喘患者可溶性CD86的变化及意义

嗜酸粒细胞(EOS)可作为抗原提呈细胞参与过敏性支气管哮喘(简称哮喘)的发病过程，而EOS要提呈抗原必须表达Ⅱ类主要组织相容性复合体基因编码的蛋白分子和协同刺激分子。CD86是重要的协同刺激分子之一。体外实验已证实EOS可表达一定水平的CD86。本组研究中，我们观测了过敏性哮喘患者吸入过敏原前、后痰液和血清可溶性CD86(sCD86)水平的变化，探讨EOS在哮喘发病机制中可能的作用。     

过敏性哮喘患者细胞因子对IgE生成机制的探讨

对３０例过敏性哮喘患者发作期和缓解期及３０例健康成年人的外周血，采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，测定血清ＩｇＥ，可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和白细胞介素－４（ＩＬ－４）水平，生物学方法测定血清ＩＬ－２水平和３Ｈ－ＴｄＲ掺入法定量测定血清ＩＬ－６。结果：过敏性哮喘患者发作期血清ＩｇＥ、ｓＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－４和ＩＬ－６水平明显升高，与缓解期和对照组有明显差异（Ｐ＜０．０１），而发作期血清ＩＬ－２水平明显下降，与缓解期和对照组有明显差异（Ｐ＜０．０１），且血清ＩｇＥ分别与ｓＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－４水平有明显正相关（Ｐ均＜０．０１），与ＩＬ－２水平有明显负相关（Ｐ＜０．０１）。说明ＩｇＥ合成增加是过敏性哮喘的关键，细胞因子有促进Ｂ细胞合成ＩｇＥ的作用，并且直接参与过敏性哮喘气道炎症的形成。     

支气管哮喘患者外周血巨噬细胞移动抑制因子的表达及意义

目的观察巨噬细胞移动抑制因子（macrophagemigrationinhibitoryfactor,MIF）在支气管哮喘（简称哮喘）患者外周血中的表达水平及其意义。方法应用酶联免疫吸附试验法和荧光定量PCR技术,测定56例哮喘患者（哮喘组）和34名健康对照者（对照组）外周血MIF的表达水平。根据临床症状和肺功能检查将哮喘患者分为发作期、缓解期两组,其中发作期32例,缓解期24例,并对结果进行统计学处理。结果血浆MIF的浓度和外周血单个核细胞MIFmRNA的表达水平：哮喘组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;哮喘发作期组高于缓解期组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但缓解期组与正常之间差异无统计学意义。结论MIF可能参与哮喘的病理过程并发挥重要作用,哮喘患者发作期血MIFmRNA表达及血MIF水平显著增高,其变化可反映疾病的活动性。     

支气管哮喘患者外周血巨噬细胞移动抑制因子的表达及意义

目的 观察巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)在支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血中的表达水平及其意义.方法 应用酶联免疫吸附试验法和荧光定量PCR技术,测定56例哮喘患者(哮喘组)和34名健康对照者(正常对照组)外周血MIF的表达水平.根据临床症状和肺功能检查将哮喘患者分为发作期组和缓解期组,其中发作期组32例,缓解期组24例,并对结果进行统计学处理.结果 血浆MIF的浓度和外周血单个核细胞MIF mRNA的表达水平:哮喘组高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);哮喘发作期组高于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.05);但缓解期组与正常对照组之间差异无统计学意义.结论 MIF可能参与哮喘的病理过程并发挥重要作用,哮喘患者发作期组血MIF mRNA表达及血MIF水平显著增高,其变化可反映疾病的活动性.     

奥马珠单抗对过敏性哮喘患者血清细胞因子谱的影响

目的 ：探讨奥马珠单抗对过敏性哮喘患者血清细胞因子谱的影响。方法 ：纳入2019年1月至2021年1月在上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸与危重症医学科就诊并接受奥马珠单抗治疗的过敏性哮喘患者20例。收集奥马珠单抗治疗前及治疗4个月后患者肺功能数据,评估肺功能改善状况;采用电化学发光免疫分析法测定奥马珠单抗治疗前后患者血清中29个细胞因子水平,并比较其治疗前后的变化;采用哮喘控制测试（asthma control test,ACT）问卷评估哮喘控制改善状况;采用全球治疗有效性评估（global evaluation of treatment effectiveness,GETE）评分评估治疗有效性。结果：20例患者接受奥马珠单抗治疗4个月后,肺功能中平均用力呼出50%肺活量呼气流速（maximal expiratory flow at 50%of forced vital capacity,MEF50%）显著改善（P<0.05）;血清中辅助性T17细胞（helper T17 cell, Th17细胞）相关因子白细胞介素（interleukin,IL）-17A及IL-23水平显著上...     

支气管哮喘患者痰白细胞介素16的测定及其意义

目的探讨白细胞介素１６（ＩＬ１６）在支气管哮喘发病机制中的作用。方法收集１２例过敏性哮喘患者、８例非过敏性哮喘患者、１０例过敏性体质患者和１０名正常对照者的痰液,以酶联免疫吸附测定法测定痰中ＩＬ１６的含量,并以免疫染色技术检测ＣＤ＋４细胞和活化嗜酸细胞（ＥＧ２细胞）数。结果哮喘患者无论是过敏性还是非过敏性,痰液中ＩＬ１６水平与过敏体质但无哮喘的患者和正常组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。急性发作期哮喘患者经治疗后ＩＬ１６水平能达缓解期水平。此外,痰液中ＣＤ＋４细胞和ＩＬ１６水平比较呈显著正相关（ｒ＝０．７６,Ｐ＜０．０１）,痰液中ＥＧ２细胞数与ＩＬ１６水平呈显著正相关（ｒ＝０．６１,Ｐ＜０．０１）。结论ＩＬ１６参与了哮喘的发病过程,其机制可能是通过募集ＣＤ＋４Ｔ细胞从而在ＣＤ＋４Ｔ细胞所介导的哮喘气道嗜酸细胞炎症反应中发挥作用。     

共刺激分子4-1BBL在过敏性支气管哮喘患者外周血的表达及其意义

目的 4-1BBL(CD137L)为肿瘤坏死因子超家族成员,4-1BBL与其受体4-1BB结合为T细胞活化提供共刺激信号.有研究证实激动性4-1BBL抗体能降低过敏性哮喘小鼠的气道高反应性,减少气道炎症细胞浸润.但4-1BBL在过敏性哮喘患者中的作用尚不清楚.方法 我们比较了过敏性哮喘患者和健康对照组外周血单个核细胞中...     

共刺激分子4-1BBL在过敏性支气管哮喘患者外周血的表达及其意义

目的 4-1BBL(CD137L)为肿瘤坏死因子超家族成员,4-1BBL与其受体4-1BB结合为T细胞活化提供共刺激信号.有研究证实激动性4-1BBL抗体能降低过敏性哮喘小鼠的气道高反应性,减少气道炎症细胞浸润.但4-1BBL在过敏性哮喘患者中的作用尚不清楚.方法 我们比较了过敏性哮喘患者和健康对照组外周血单个核细胞中...     

哮喘患者痰液中炎症介质和细胞因子与气道重塑的关系研究

目的　以支气管粘膜网状基底膜厚度作为气道重塑的指标 ,探讨哮喘患者气道重塑与痰液中细胞因子和炎症介质的关系。方法　对 2 0例哮喘患者和 10名正常对照者经纤维支气管镜行(纤支镜 )支气管粘膜活检 ,测量支气管粘膜网状基底膜厚度 ,用荧光酶联免疫方法测定痰液中的嗜酸细胞阳离子蛋白 (ECP) ,酶联免疫法测定白细胞介素 5 (IL 5 )、肿瘤坏死因子 (TNF α)的水平 ;采用SPSS8 0统计软件作等级相关分析 ,探讨哮喘患者痰液中ECP、IL 5、TNF α水平与支气管粘膜厚度的关系。结果　缓解期哮喘患者支气管粘膜网状基底膜厚度为 (10 1± 2 6 ) μm ,与正常对照组 [(4 4± 1 2 )μm]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 0 5 ) ;哮喘组痰液中ECP水平为 (14 4± 80 ) μg/L、IL 5为 (17± 4 ) μg/L、TNF α为 (14 6± 79) μg/L ,与正常对照组 [(81± 4 4 ) μg/L、(14± 4 ) μg/L、(5 3± 36 ) μg/L]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 0 5 ) ;两组痰液中ECP、IL 5与支气管粘膜厚度呈明显正相关 (r =0 5 6 9、0 4 6 6 ,P均 <0 0 0 5 ) ;两组痰液中TNF α水平与粘膜厚度无明显相关 (r=0 2 5 4 ,P >0 0 5 )。结论　缓解期哮喘患者支气管粘膜网状基底膜厚度均存在不同程度增厚 ;而痰液ECP和IL 5水平与支气管粘膜厚度呈     

Expression of interleukin-35 and type 2 cytokines in children with acute allergic asthma

Background: Allergic asthma is believed to be a T helper 2 cell (Th2) preponderant response caused by airway hyper-responsiveness. Interleukin-35 (IL-35) is a newly discovered anti-inflammatory cytokine. Objective: To determine whether the expression of IL-35 is associated with type-2 inflammation in children with asthma exacerbations. Methods: Thirty children (6-12 years old) with acute allergic asthma and twenty healthy controls were enrolled. Sputum was collected from lower airways. IL-35 and type 2 cytokines expression from serum and sputum were measured at mRNA and protein level by real-time PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), respectively. The sampling and the test were repeated eight weeks after the asthma exacerbation. Results: At the time of exacerbation, IL-35 expression decreased significantly in induced sputum and serum than in the controls. The expression of IL-35 was negatively correlated with IL-4, IL-5 and IL-13 expression. The IL-35 from induced sputum increased significantly, whereas type-2 cytokines decreased significantly eight weeks after the exacerbation. Conclusion: Our results showed that decreased IL-35 was associated with type-2 cytokines in asthma exacerbations in children, suggesting that IL-35 may be a potential future drug target for asthma exacerbations.     

布地奈德联合沙丁胺醇雾化吸入对急性哮喘发作患儿诱导痰液炎性细胞和细胞因子的影响

目的 布地奈德（普米克令舒）联合沙丁胺醇雾化吸入治疗儿童哮喘急性发作前后气道炎性细胞、白介素6（IL-6）、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的变化，探讨其影响机制。方法 对急性哮喘发作患儿采用上述联合治疗1周，共对34例急性发作期、24例缓解期患儿和15例正常儿童的诱导痰液进行炎性细胞计数和分类，测定其中IL-6、IL-8、TNF-α水平。结果 急性组的总白细胞数，嗜酸粒细胞、中性粒细胞单核细胞比例及IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于正常对照组。缓解组除嗜酸粒细胞及淋巴细胞比例明显高于正常对照组外，其余上述炎性细胞比例及细胞因子水平均降至正常。结论 普米克令舒联合沙丁胺醇雾化吸入可显著降低急性哮喘发作患儿气道分泌物内嗜酸粒细胞、中性粒细胞和单核细胞数量及IL-6、IL-8、TNF-α水平。     

支气管哮喘患者血清sCD86水平及联合吸入治疗对其影响的研究

目的通过观测慢性持续期过敏性支气管哮喘（简称哮喘）患者外周血sCD86、白介素4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、嗜酸粒细胞（EOS）水平及其吸入沙美特罗替卡松治疗后的变化情况,探讨sCD86在哮喘发病机制中的作用。方法 23例未经过规范化治疗的慢性持续期过敏性哮喘患者给予吸入沙美特罗替卡松治疗,分别于治疗前、治疗1周、治疗1个月时检测肺功能、抽取外周静脉血检测EOS计数、测定血清sCD86、IL-4、IFN-γ,治疗前后进行上述指标的比较;12名正常组检测上述指标并与哮喘相比较。结果①哮喘组血清sCD86水平高于正常组[（0.5657±0.1239）IU/L比（0.4575±0.0748）IU/L,P〈0.05）],给予吸入沙美特罗替卡松治疗明显下降（P〈0.05）;②哮喘组外周血IL-4水平高于正常组（P〈0.01）,而IFN-γ则明显低于正常组（P〈0.01）,治疗后两者与正常组差异均无统计学意义;③哮喘组治疗前外周血EOS计数高于正常组（P〈0.01）,治疗后持续下降;④相关分析示sCD86与IL-4、EOS呈正相关。结论慢性持续期过敏性哮喘患者外周血sCD86水平和EOS计数明显升高,并存在IL-4/IFN-γ细胞因子失衡状态;给予沙美特罗替卡松吸入治疗后sCD86和EOS可下降并纠正IL-4/IFN-γ细胞因子失衡;慢性持续期过敏性哮喘患者外周血sCD86水平与EOS、IL-4密切相关,提示sCD86参与哮喘的发病。     

支气管哮喘患者血清sCD86水平及联合吸入治疗对其影响的研究

目的 通过观测慢性持续期过敏性支气管哮喘(简称哮喘)患者外周血sCD86、白介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、嗜酸粒细胞(EOS)水平及其吸入沙美特罗替卡松治疗后的变化情况,探讨sCD86在哮喘发病机制中的作用.方法 23例未经过规范化治疗的慢性持续期过敏性哮喘患者给予吸入沙美特罗替卡松治疗,分别于治疗前、治疗1周、治疗1个月时检测肺功能、抽取外周静脉血检测EOS计数、测定血清sCD86、IL-4、IFN-γ,治疗前后进行上述指标的比较;12名正常组检测上述指标并与哮喘相比较.结果 ①哮喘组血清sCD86水平高于正常组[(0.565 7土0.123 9)IU/L比(0.457 5±0.074 8)IU/L,P＜0.05)],给予吸入沙美特罗替卡松治疗明显下降(P＜0.05);②哮喘组外周血 IL-4水平高于正常组(P＜0.01),而IFN-γ则明显低于正常组(P＜0.01),治疗后两者与正常组差异均无统计学意义;③哮喘组治疗前外周血EOS计数高于正常组(P＜0.01),治疗后持续下降;④相关分析示sCD86与IL-4、EOS呈正相关.结论 慢性持续期过敏性哮喘患者外周血sCD86水平和EOS计数明显升高,并存在IL-4/IFN-γ细胞因子失衡状态;给予沙美特罗替卡松吸入治疗后sCD86和EOS可下降并纠正IL-4/IFN-γ细胞因子失衡;慢性持续期过敏性哮喘患者外周血sCD86水平与EOS、IL-4密切相关,提示sCD86参与哮喘的发病.     

The effects of an anti-CD4 monoclonal antibody, keliximab, on peripheral blood CD4+ T-cells in asthma.

CD4+ T-cells are likely to be involved as a source of pro-inflammatory cytokines in asthma. This study assessed the effects of an infusion of keliximab (IDEC CE9.1), an anti-CD4+ monoclonal antibody, on peripheral blood CD4+ T-cells in corticosteroid-dependent asthmatics. Three cohorts of patients (termed C0.5: n=6, C1.5: n=5, and C3.0: n=5) received a single infusion of 0.5, 1.5 or 3.0 mg x kg(-1), respectively, with a fourth receiving placebo (Cpl: n=6), and were followed-up for 4 weeks. By flow cytometry in peripheral blood, pre- and postinfusion assessment was made of: a) CD4 and CD8 counts and mean fluorescence; b) CD25, human leukocyte antigen-DR (HLA-DR), CD45RO and CD45RA expression on CD4+ T-cells; and c) interferon (IFN)-gamma, interleukin (IL)-4 and IL-5 expression in CD4+ T-cells. Keliximab's in vitro effects on allergen-specific peripheral blood mononuclear cells (PBMC) proliferation in atopic asthmatics were also evaluated. There was a significant increase in lung function (peak expiratory flow rate) in the C3.0 group. Following infusion in C0.5, C1.5 and C3.0 but not Cpl: 1) the CD4, but not CD8 count was significantly decreased; 2) there was total loss of Leu3a staining; 3) there were significant reductions in the mean fluorescence of OKT4 binding; and 4) there were significant reductions in the numbers of CD25, HLA-DR, CD45RO and CD45RA/CD4+ cells. There were no changes in CD4+ cell expression of IFN-gamma, IL-4 or IL-5. Keliximab caused a significant reduction in T-cell proliferation as compared to a control monoclonal antibody. Keliximab, as an anti-CD4 monoclonal antibody, leads to a transient reduction in the number of CD4+ T-cells and modulation of CD4+ receptor expression in severe asthmatics. The effects of keliximab may be mediated through a decrease in CD4+ surface expression and T-lymphocyte numbers, in addition to a reduction in allergen-induced proliferation.     

IL-13单克隆抗体治疗支气管哮喘

IL-13是Th2细胞因子的-种,是免疫炎症反应主要的调节因子,在支气管哮喘（简称哮喘）的发生发展中起重要的作用。本文将对IL-13在哮喘病理生理中的作用进行概括,并对近年来IL-13单克隆抗体（IL-13单抗）治疗哮喘的研究进行总结,重点对IL-13单抗的作用机制、有效性、安全性及目标人群进行概括和总结。     

JNK信号通路介导机械牵张引发的肺泡巨噬细胞炎性因子表达

目的 观察不同机械牵张应力对大鼠肺泡巨噬细胞白介素-6(IL-6)和巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)的影响,并探讨C-JUN氨基末端激酶(JNK)对机械牵张诱导的大鼠肺泡巨噬细胞IL-6和MIP-2表达的调控作用.方法 采用支气管肺泡灌洗的方法取得大鼠肺泡巨噬细胞,并建立体外大鼠肺泡巨噬细胞梯度应力的机械牵张模型,应用RT-PCR和Western印迹方法观察IL-6和MIP-2的表达.进一步应用JNK特异性抑制剂SP600125,p38特异性抑制剂SB203580,及ERK特异性抑制剂PD98059给予同期干预,检测干预效果.结果 随着机械牵张应力的增大,肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA和其蛋白的表达递增(均P<0.05).给予SP600125干预组大鼠肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA 和蛋白表达较机械牵张处理组明显降低.SB203580干预组及PD98059干预组的肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA和蛋白水平较对照组明显升高,而与机械牵张处理组相比无明显变化.而IL-6 mRNA及其蛋白水平在上述各组中均无明显变化.结论 大鼠巨噬细胞MIP-2的表达与机械牵张应力呈强度依赖性,JNK信号通路在周期性牵张诱导肺泡巨噬细胞表达释放MIP-2过程中起重要作用.     

树突细胞在抗原呈递和支气管哮喘发病机制中的作用

目的　通过对支气管哮喘 (简称哮喘 )患者和哮喘模型大鼠研究 ,探讨树突细胞 (DC)在哮喘发病机制中的作用。方法　初治未经糖皮质激素治疗的中、重度急性加重期组 (A组 )哮喘患者2 0例、缓解期组 (B组 )患者 15例、正常对照组 (C组 ) 10名 ,对哮喘患者外周血单个核细胞体外诱导培养DC ,通过流式细胞技术检测DC吞噬卵白蛋白 (OVA)的能力 ;检测细胞表面的标记物和共刺激分子 (MHC ⅡCD80 及CD86)及同种混合T淋巴细胞反应。建立哮喘气道炎症大鼠模型 ,检测大鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中DC呈递功能及糖皮质激素对其影响。 2 4只SD大鼠按随机数字表法分为实验组 (D组 ,16只 )和对照组 (E组 ,8只 ) ,根据实验需要又将D组 16只大鼠分为OVA致敏激发组 (D1组 )、激发前激素预处理组 (D2 组 ) ,每组 8只。采用流式细胞技术测定D1组 (大鼠模型 )和D2组 (给予地塞米松腹腔注射 10mg/kg)和E组大鼠BALF中DC的CD80 、CD86和MHC Ⅱ的表达。结果　 (1)A组患者外周血DC吞噬OVA的能力、DC细胞表达CD80 、MHC Ⅱ分别为 (41± 12 ) %、(32± 13) %、(44± 15 ) % ,B组分别为 (2 9± 10 ) %、(18± 10 ) %、(2 2± 10 ) % ,C组分别为 (2 9± 10 ) %、(14± 7) %、(18± 12 ) % ,三组间比较差异有统计学意义 (P均 <0 0 1) ;DC     

结核分支杆菌感染巨噬细胞后氮氧化物的产生及细胞因子表达的研究

目的 探讨巨噬细胞在感染结核分支杆菌后氮氧化物(NO)的产生和细胞因子表达的差异，了解结核感染的免疫应答过程，探讨死菌苗作为新的结核候选疫苗的可行性。方法 用ELISA和RT-PCR方法比较研究巨噬细胞在感染结核分支杆菌后NO的产生和细胞因子表达的差异。结果 活的结核分支杆菌H37Rv能显诱导巨噬细胞产生NO、IL-1、IL-12、IL-18、TNF-α以及iNOS的表达。细菌数对NO的产生和细胞因子的表达也有很大的影响。结论 活的结核分支杆菌H37Rv能显诱导巨噬细胞产生。NO和细胞因子，而产生有利于宿主的免疫应答。同样量的死结核分支杆菌H37Rv不能显诱导巨噬细胞产生NO和细胞因子，不宜作为新的结核候选疫苗。