维甲酸对人肺腺癌细胞系分化作用的实验研究

为阐明癌症发生的内在机制和探索肿瘤分化治疗与基因治疗的合适途径，作者应用１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸诱导人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２，观察到（１）细胞体外生长速度减慢，堆叠性生长消失，细胞出出现空泡，细胞逐渐衰老和死亡；（２）双层软琼脂中细胞集落形成爱到明显抑制；（３）细胞ＤＮＡ合成能力降低；（４）细胞周期出现向Ｇ１／Ｇ０期移行的特征性动力学改变；（５）细胞分化和凋亡的效应器因子－谷氨酰胺转移酶     

人源抗Peroxiredoxin Ⅰ肺腺癌噬菌体抗体的制备及鉴定

目的构建人源噬菌体抗体库,从中筛选出抗PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)肺腺癌人源单链抗体。方法提取肺癌患者癌旁淋巴结组织,通过RT-PCR扩增出重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),再经剪切-重叠-延伸PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接得到单链抗体(ScFv);将双酶切后的ScFv基因片段克隆入噬菌体表达载体pCANTAB5E,得到初级噬菌体抗体库。PCR检测TG1中ScFv基因插入率;1%琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;以肺腺癌细胞株D549及在肺癌中高表达的抗氧化蛋白PrxI为靶抗原对抗体库进行筛选富集。将阳性克隆用IPTG诱导表达。用SDS-PAGE及Westernblotting鉴定该抗体;用ELISA法、免疫细胞化学法鉴定该抗体与人肺腺癌细胞的结合特异性。结果成功构建噬菌体单链抗体库。ScFv基因插入率为77%,双酶切鉴定检测到目的条带。在亲和筛选过程中,肺癌单链抗体得到富集,收获率逐轮提高,第6轮为第1轮的180倍。随机选取10个克隆,通过ELISA法检测到其中6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率为60%。SDS-PAGE及Westernblottin...     

热诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究

我们以体外人肺腺癌细胞系SPC．AI为研究对象,观察温热对肺癌细胞的杀伤效应,并从细胞形态学和生化学两方面,着重探讨细胞凋亡在热杀伤体外Spe－AI细胞过程中的作用,期望进一步丰富和发展肺癌热疗的生物学机制,为肺癌热疗的临床应用提供新的理论依据。一、材料与方法1细胞培养：人肺腺癌细胞系Spe．AI引自中国科学院上海细胞库。常规用含质量分数为10％的灭活小牛血清的RPMI－lop培养液（pH7．2－74,Gibeo,USA）,单层培养于对℃、含体积分数为0．历的C02的培养箱中。以质量分数为0．石坑胰蛋白酶（D矗。。,1：250）和质量…     

中药KALⅠ号、Ⅱ号对T200荷瘤小鼠肿瘤抑制作用的研究

目的：探讨中药KALⅠ号、Ⅱ号对T200荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用。方法：本实验采用体内动物实验方法，建立T200荷瘤小鼠动物模型。通过观察给药14日后小鼠瘤重来考察中药KALⅠ号、Ⅱ号的抗肿瘤活性。结果：中药KALⅠ号在大、中、小剂量均具有明显的抑制肿瘤作用。抑瘤率分别为53．62％，49．39％，33．89％，其中大剂量组疗效最佳。大、中剂量与阳性药对照组之间亦无显差异。结论：中药KALⅡ号在大、中剂量时具有明显的抑制肿瘤作用。抑瘤率分别为44．13％，23.28％，其中大剂量组疗效更佳。大、中剂量与阳性药对照组之间亦无显差异。     

达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖作用的实验观察

目的：探讨达肝素钠抑制人肺腺癌细胞增殖的作用机制。方珐：采用流式细胞术检测达肝素钠处理后A549细胞的细胞周期变化。建立肺腺癌鼠模型后,将12只荷瘤鼠随机分为达肝素钠组和对照组,分别给予达肝素钠15001U／kg（0．2m1）皮下注射和0．9％氯化钠注射液0．2ml腹腔注射,1天1次,连续用药35d。定期测量瘤体最大及最小直径,计算瘤体积、绘制肿瘤生长曲线。第35天用戊苯巴比妥钠全身麻醉处死裸鼠,剥取瘤体称重、计算抑瘤率,并用免疫组织化学方法测瘤组织中细胞周期蛋白E（CyclinE）的表达。结果：肺腺癌细胞株A549处理48h后,与对照组比较,达肝素钠组G。／G,期细胞比例升高,S期细胞比例降低（P〈0．01）;与对照组比较,达肝素钠组瘤重明显减小（P〈0．05）;达肝素钠组抑瘤率为0．000％和64．081％;对照组及达肝素钠组瘤组织中CyclinE的表达阳性率为6／6、3／6,差异无统计学意义（P=0．182）;达肝素钠组主表现为低表达（5／6）,对照组为高表达（5／6）,差异无统计学意义（P=0．081）。结论：达肝素钠可阻滞人肺腺癌A549细胞于G。／G,期,使进入S期和M期的细胞减少,减少DNA的合成,抑制细胞增殖,此作用可能与其抑制细胞周期调控因子CyclinE的表达有关。     

高低转移性不同的人肺腺癌细胞膜脂肪酸分析

脂肪酸类是构成生物膜双脂层的非极性部分,在生物膜的功能方面起着重要作用。癌细胞的转移与膜的性质有关,如细胞的粘附、运动、变形等。以前,我们分析了人肺腺癌细胞的磷脂组成,现对该细胞系进行脂肪酸分析比较。     

体外比较三个人肺腺癌细胞系的侵袭特性

在器官培养中发现,3个不同来源的低分化人肺腺癌细胞系(LTEP-a_2、Anip、LGC-7910)在侵袭人的心、肝脏器官时表现了不同的生物学特性,包括侵袭形式、侵袭速度、变形能力和对靶器官破坏程度以及细胞的分裂繁殖等方面。本实验对其进行了较详细的观察。     

"采和Ⅰ、Ⅱ号"治疗冻伤的实验研究

“采和Ⅰ号、Ⅱ号”为纯中药制剂。本实验以兔为Ⅱ度冻伤的模型,用该药治疗4d,即可将基本治愈Ⅱ度冻伤,经病理切片证实;与对照组差异明显。“采和Ⅰ号”为煎剂、“采和Ⅱ号”为霜剂,后者在冬季治疗冻疮则更为方便。本实验结果与临床治疗效果一致,疗效确实。     

托瑞米芬联合吉西他滨对肺癌细胞株A549 生长和凋亡的影响

目的研究托瑞米芬（TOR）联合吉西他滨（GEM）对人肺癌株A549的影响，为肺癌的临床治疗提供新的方向。方法用MTT比色法检测各组药物对细胞生长的抑制作用，用HE染色观察用药后细胞形态，用细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。结果托瑞米芬能直接抑制肺腺癌细胞A549的生长，低剂量托瑞米芬（5、10μmol／L）与吉西他滨联用后的抑制率较单用吉西他滨明显提高，并且随药物浓度增高而增高。联合用药组较单用化疗药物组凋亡率提高，而单用托瑞米芬对细胞的凋亡率与对照组比无明显变化。结论托瑞米芬可抑制肺腺癌细胞A549的生长，但不能直接促进细胞凋亡；托瑞米芬与吉西他滨有明显的协同作用。     

活血清解灵对急性胆道感染肺损伤的保护作用*

[目的]观察胆管减压加中药对急性胆道感染肺损伤的保护作用。[方法]制造大鼠急性胆道感染模型，灌胃给中药汤剂后，检测肺毛细血管通透性，肺磷脂酶A2活性，血气分析和检测血清铁蛋白含量。[结果]急性胆道感染大鼠肺毛细血管通透性增加，肺组织中磷脂酶A2活性增强，动脉氧分压（PaO2）下降，动脉二氧化碳分压（PaCO2）上升，血清铁蛋白浓度升高。胆管减压加中药治疗可明显抑制毛细血管通透性增加，并抑制磷脂酶A2活性增强，使上升，PaCO2下降，血清铁蛋白浓度降低。[结论]胆管减压加中药治疗对急性胆道感染肺损伤有保护作用。     

活血清解灵对急性胆道感染肺损伤的保护作用

[目的]观察胆管减压加中药对急性胆道感染肺损伤的保护作用。[方法]制造大鼠急性胆道感染模型,灌胃给中药汤剂后,检测肺毛细血管通透性,肺磷脂酶A 2活性,血气分析和检测血清铁蛋白含量。[结果]急性胆道感染大鼠肺毛细血管通透性增加,肺组织中磷脂酶A2活性增强,动脉氧分压(PaO2)下降,动脉二氧化碳分压(PaCO2)上升,血清铁蛋白浓度升高。胆管减压加中药治疗可明显抑制毛细血管通透性增加,并抑制磷脂酶A 2活性增强,使上升,PaCO2下降,血清铁蛋白浓度降低。[结论]胆管减压加中药治疗对急性胆道感染肺损伤有保护作用。     

复方中药对小鼠肺癌细胞凋亡的影响

目的探讨扶正祛邪复方中药的抑癌、抗癌机制。方法复制小鼠Lewis肺癌模型,运用流式细胞仪、细胞凋亡原位末断标记及免疫组化等方法分析中药扶正祛邪复方对小鼠Lewis肺癌细胞周期及其细胞凋亡的影响。结果该中药复方能有效降低小鼠Lewis肺癌细胞bcl-2的表达,诱导细胞凋亡,影响细胞周期G1/S调控点,有效地将细胞周期阻滞于G0、G1期。结论复方中药对小鼠Lewis肺癌的细胞生长具有抑制作用,其机制可能是诱导肿瘤细胞凋亡及对肿瘤细胞增殖周期的影响,从而起到抑癌、抗癌的作用。     

提高中药疗效关键是剂型选择与给药途径

中药作为临床防治疾病使用时 ,必须制成不同的剂型 ,采用不同的给药途径才能发挥疗效 ,合理的药物剂型及给药途径是提高疗效的关键。     

二十碳五烯酸抑制肺腺癌A-549细胞株增殖

目的在体外细胞实验中,观察二十碳五烯酸（EPA）联合顺铂（DDP）对肺腺癌A-549细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用。方法选用A-549细胞株进行体外培养,用MTT比色法测定EPA对A-549细胞株的抗增殖作用。应用倒置显微镜、光学显微镜观察细胞凋亡形态学变化。应用TUNEL染色法检测细胞凋亡指数（AI）。结果实验结果表明,EPA在（60～120）μg／mL浓度范围内,于24、48、72、96h四个时间段对肺腺癌A-549细胞株均有抑制生长作用,且EPA与顺铂有协同抗癌作用,并表现出浓度、时间依赖性关系。当EPA浓度为60、80、100、120μg／mL时,细胞凋亡指数（AI）依次升高,分别为（81．52±1．96）％、（83．74±2．21）％、（85．30±2．38）％、（86．26±2．44）％,不同浓度组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论体外实验中,EPA对A-549细胞生长有抑制作用,呈明显的量效和时效关系,且与顺铂有协同作用。     

大黄素对AGZY-83A细胞内Ki-67抗原表达的影响

目的通过研究Ki-67抗原的表达探讨大黄素对人肺腺癌AGZY-83A细胞体外生长的抑制作用。方法采用免疫组化方法观察Ki-67在不同浓度大黄素作用后的AGZY-83A中的表达。结果Ki-67在细胞中的表达随大黄素浓度的增加明显降低。结论大黄素能有效抑制肺腺癌细胞AGZY-83A的增殖,并具有量效的关系,其可能机制是干扰了肿瘤细胞周期的进程。     

中药复方益肾蠲湿合剂抑制肾小球系膜细胞增殖及机理的研究

目的:观察自拟中药复方"益肾蠲湿合剂"对肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)增殖的影响,并进一步探讨其作用机理。方法:将1×10-3、1×10-2和1×10-1mg/mL的"益肾蠲湿合剂"提取液作用于体积分数10%血清的DMEM培养的GMC,分别用MTT和Western Blot方法检测细胞的增殖和磷酸化ERK1/2的表达。结果:1×10-2和1×10-1mg/mL"益肾蠲湿合剂"可显著抑制GMC的增殖,抑制率在12、24和36 h分别为13.4%、为9.6%。细胞总ERK的表达在各组间无明显差别。但不同浓度的"益肾蠲湿合剂"能显著地抑制血清所诱导的ERK1/2的磷酸化,最高抑制率达68%。结论:"益肾蠲湿合剂"可通过抑制ERK1/2的磷酸化来抑制GMC的增殖。     

增强原代培养鼠胚脊髓运动神经元活力的中药筛选

【目的】探讨单味中药对脊髓运动神经元活力的影响。【方法】以鼠胚脊髓运动神经元原代培养的实验模型，实验组分别加入单味中药提取物，用MTT法观察其对细胞活力的影响。【结果】葛根、当归、白术、黄芪、山药、红花、牛膝、天门冬、知母、香附、枳实、陈皮、厚朴均可增强培养鼠胚脊运动神经元活力。对脊髓运动神经元有保护作用。[结论]上述中药提取物对周围神经损伤的修复可能有促进作用。     

增强原代培养鼠胚脊髓运动神经元活力的中药筛选

[目的]探讨单味中药对脊髓运动神经元活力的影响.[方法]以鼠胚脊髓运动神经元原代培养的实验模型,实验组分别加入单味中药提取物,用MTT法观察其对细胞活力的影响.[结果]葛根、当归、白术、黄芪、山药、红花、牛膝、天门冬、知母、香附、枳实、陈皮、厚朴均可增强培养鼠胚脊运动神经元活力.对脊髓运动神经元有保护作用.[结论]上述中药提取物对周围神经损伤的修复可能有促进作用.