体外胰岛素样生长因子结合蛋白-1对人血管内皮细胞生长的抑制作用

目的 观察胰岛素样生长因子结合蛋白-1对人血管内皮细胞的影响及其对胰岛素样生长因子的调节作用。方法 MTT比色法观察IGFBP-1及与IGF-1预混后对脐静脉内皮细胞(ECV304细胞株)生长影响。结果 IGFBP-1对内皮细胞ECV304的生长具有抑制作用且与剂量成正比；预混后各组IGF-1促细胞生长作用明显被抑制。结论 IGFBP-1既可以直接也可以通过调节IGF-1抑制血管内皮细胞生长。     

血清胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3与2型糖尿病肾病的关系

目的:测定血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGF-BP3)水平,探讨其与2型糖尿病肾病的关系。方法:选择2型糖尿病患者86例,根据其尿微量白蛋白排泄率(UAER)结果分为单纯糖尿病组(SDM组)33例、早期糖尿病肾病组(EDN组)28例和临床期肾病组(CDN组)25例。检测IGF-1、IGF-BP3、UAER等指标,分析IGF-1、IGF-BP3与糖尿病肾病的发病和病情轻重的关系。结果:CDN组血清IGF-1、IGF-BP3和UAER均明显高于SDM与EDN组(P <0.01),CDN组血清IGF-1、IGF-BP3和UAER亦均明显高于EDN组(P <0.01)。 IGF-1与肌酐、尿素氮、UAER和IGF-BP3均呈正相关关系(P <0.01),与年龄和糖化血红蛋白均无相关关系(P >0.05),而与空腹血糖呈负相关关系(P <0.01)。结论:血清IGF-1、IGF-BP3水平与2型糖尿病肾病的发生发展有相关性,可作为糖尿病肾病早期的诊断指标之一。     

胰岛素样生长因子-1与胰岛素样生长因子结合蛋白-1在妇产科临床应用的研究进展

1概述 胰岛素样生长因子系统(IGFs)包括IGF多肽(IGF-1、IGF-2)、两种IGF受体、6种胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP1～6)以及一组胰岛素样生长因子结合蛋白酶。IGF通过与其受体结合发挥其生物学效应，与IGFBP结合成无活性复合物存在，IGFBP具有延长循环水平的IGF、半衰期和稳定IGF血浓度的作用。IGFs中的IGF-1及IGFBP-1与妇产科的关系密切。     

乳腺癌血清胰岛素样生长因子-1结合蛋白-3的临床分析

目的 了解乳腺癌患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的浓度的临床意义.方法 前瞻性地收集了一组接受根治性手术的乳腺癌患者(n=121)及健康对照(n=50)外周血血清,使用ELISA法检测血清中IGF-1和IGFBP-3浓度,比较两组人群平均水平的差异,并了解其与患者临床病理特征的相关性.结果 乳腺癌患者外周血IGF-1和IGFBP-3浓度均显著高于对照组(P值均＜0.001).乳腺癌患者中,血清IGF-1和IGFBP-3浓度与肿瘤直径、TNM分期和淋巴结转移相关正相关,IGFBP-3浓度的肿瘤组织雌激素受体阳性率负相关.结论 乳腺癌患者出现IGF-1信号转导通路上调,且该信号通络与肿瘤进展相关.     

消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平测定

目的:检测消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3),并探讨2者与肿瘤化疗疗效的关系.方法:应用ELISA方法检测27例化疗有效的消化道肿瘤患者及20例化疗无效肿瘤患者化疗前后血IGF-1、IGFBP-3水平,并选择42例正常人作为对照.结果:化疗有效组及无效组化疗前血IGF-1、IGFBP-3水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05);2组2个指标化疗后水平与化疗前比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).有效组与无效组化疗后2个指标比较,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论:血IGF-1、IGFBP-3水平与消化道肿瘤化疗疗效有关,可作为预测化疗疗效的指标之一.     

急性脑出血患者血浆胰岛素样生长因子-1及其结合蛋白3的含量变化

1　对象和方法1.1　对象　确诊的急性高血压性脑出血 (AHIH)患者 2 3(男14,女 9)例 ,年龄 (5 5～ 73)岁 ,平均 6 5岁 ,经头颅 CT证实为基底节出血 ,病程在 2 d以内 ;均有高血压病史 .出血量≥ 40m L者为大出血组 9例 ,<40 m L为中小出血组者 14例 ;无糖尿病、甲状腺功能亢进等内分泌疾病 ,无肝、肾功能损害 .正常对照组系 2 0名健康体检者 ,男 13例 ,女 7例 ,年龄 (5 5～70 )岁 ,平均 6 3岁 .1.2　方法　受检者于入院次日 0 7∶ 0 0空腹抽取静脉血 4m L分别置于含 10 0 g· L- 1 EDTA- Na2 3 0μL ,抑肽酶 40μL的试管中混匀 ,4℃ 30…     

胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1在硫代乙酰胺诱导的肝纤维化小鼠中的作用

目的：我们的前期研究发现胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1（IGFBPrP1）可以激活体外培养的肝星状细胞分泌细胞外基质（ECM）。为了明确IGFBPrP1在肝纤维化小鼠中的作用和机制,设计了本实验。 方法：采用经典的腹腔注射硫代乙酰胺（TAA）的方法制备小鼠肝纤维化模型,同时腹腔给予抗IGFBPrP1抗体。取肝组织,分别对肝组织石蜡切片做HE染色和Masson染色观察肝组织病理学变化及胶原纤维形成情况;通过免疫组织化学染色和Western blotting观察肝组织IGFBPrP1、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、ECM以及转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad3表达的变化。 结果：Masson染色结果显示：TAA5周组较正常对照组胶原纤维形成增多（P<0.01）,TAA5周+抗IGFBPrP1抗体组胶原纤维的形成少于TAA5周组（P<0.01）。与正常对照组相比,TAA5周组肝组织IGFBPrP1、α-SMA、TGF-β1和Smad3、Collagen I、纤维连接蛋白（FN）表达显著增强（P<0.01）,抗IGFBPrP1抗体的使用可以减轻上述改变（P<0.01）。 结论：IGFBPrP1在肝纤维化的发展过程中起重要作用;抗IGFBPrP1抗体通过抑制肝纤维化小鼠肝星状细胞的活化、减少ECM的主要成分Collagen I与FN的合成等途径发挥抗纤维化作用,其作用机制可能与TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

过敏性紫癜患儿血清胰岛素样生长因子-Ⅰ及胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平变化及其意义研究

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平的变化及其临床意义。方法选取2009年3月—2011年9月就诊于我院明确诊断为HSP的患儿44例,另选取同时期健康体检正常的儿童26例为对照组。检测两组的血清IGF-Ⅰ及IGFBP-3、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、补体(C3、C4)、免疫球蛋白(IgA、IgG及IgM)水平,尿常规、便常规,计算IgA/C3。结果 HSP组较对照组血清IGF-Ⅰ、IGFBP-3、WBC、PLT、FIB、CRP、ESR、C3、C4、IgA、IgG、IgM水平及IgA/C3均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。伴蛋白尿组较不伴蛋白尿组HSP患儿血清IGF-Ⅰ、IGFBP-3水平均升高,CRP水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。伴血尿组较不伴血尿组HSP患儿血清IGF-Ⅰ、IGFBP-3、ESR水平及IgA/C3均升高,CRP水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。伴大便潜血阳性组较不伴大便潜血阳性组HSP患儿血清IGFBP-3、WBC、PLT、FIB、ESR、IgA、IgM水平及IgA/C3均升高,CRP水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。HSP患儿血清IGF-Ⅰ、IG-FBP-3水平与尿蛋白均呈正相关(r值分别为0.341和0.212,P<0.05)。结论 HSP患儿血清中IGF-Ⅰ和IGFBP-3水平升高,IGF-Ⅰ和IGFBP-3水平可能将作为HSP累及肾脏的新指标。     

宫内发育迟缓儿脐血胰岛素样生长因子1、胰岛素样生长因子结合蛋白3、胰岛素及瘦素的关系

目的探讨宫内发育迟缓(IUGR)儿出生后脐血胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、胰岛素(Ins)及瘦素(Lep)的变化。方法选择141例IUGR儿为IUGR组,以同期出生的足月、适于胎龄儿30例作为对照组,比较两组出生后脐血IGF-1、IGFBP3、Ins和Lep的浓度。结果IUGR组IGF-1、IGFBP3、Ins和Lep的浓度均明显低于对照组(P值分别＜0．01、0．05)。IUGR组IGF-1与IGFBP3(r= 0．6434)和Ins(r=0．4367)、Ins与Lep(r=0．3461)均呈正相关(P值均＜0．01),IGF-1与Lep、IGFBP3与Ins和Lep均不相关(P值均＞0．05)。结论IGF-1、IGFBP3、Ins及Lep低下是导致IUGR的原因, Ins-IGF-1-IGFBP3及Ins-Lep轴各自调控胎儿的生长发育。     

Effects of insulin-like growth factor binding protein-related protein 1 in mice with hepatic fibrosis induced by thioacetamide

Background Insulin-like growth factor binding protein-related protein 1 （IGFBPrP1） can activate hepatic stellate cells and increase extracellular matrix （ECM） in vitro. However, the effects of IGFBPrP1 in mice with hepatic fibrosis, and the mechanisms of these effects, are currently unknown. We aim to address these issues in this study. Methods Intraperitoneal injection of thioacetamide （TAA） is a classic method for establishing a mouse model of hepatic fibrosis. Using this model, we administered anti-IGFBPrP1 antibody, again via intraperitoneal injection. The morphological changes of liver fibrosis were observed with both HE and Masson stainning. The immunohistochemical assays and Western blotting were used to measure changes in IGFBPrP1, a-smooth muscle actin （a-SMA） and ECM in liver tissues, and the expression of transforming growth factor-β1 （TGF-β1） and Smad3. Data were statistically analyzed using one-way analysis of variance （ANOVA）, the SNK-q test for inter-group differences. Results The Masson staining analysis showed that compared with normal control group, content of collagen fiber in TAA5w group was significantly increased （P 〈0.01）, and it was significantly decreased in TAA5w/alGFBPrP1 group compared with in TAA5w group （P 〈0.01）. The expression of hepatic IGFBPrP1, a-SMA, TGF-β1, Smad3, collagen 1 and fibronectin （FN） was significantly up-regulated in the TAA5w group （P 〈0.01）. Anti-IGFBPrP1 treatment reversed these changes （P 〈0.01）. Conclusions IGFBPrP1 plays an important role in the development of hepatic fibrosis. Anti-IGFBPrP1 prevents fibrosis in mice by suppressing the activation of hepatic stellate cells, inhibiting the synthesis of major components of the ECM （namely, collagen I and FN）. The mechanism for this suppression of fibrosis is associated with the TGF-β1/Smad3 signaling pathways.     

脑梗死模型大鼠缺血脑组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3表达水平及其与血管新生的关系

目的：探讨脑梗死大鼠缺血脑组织中胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）表达水平及其与血管新生的关系,阐明IGFBP-3在脑梗死血管新生中的作用。方法：将SD大鼠随机分为对照组和模型组,模型组大鼠又分为模型1d组、模型3d组和模型7d组3个亚组。采用线栓法建立大脑中动脉栓塞缺血大鼠模型。采用神经行为学评分评估大鼠神经行为,2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察脑梗死情况,HE染色观察脑组织病理形态表现,免疫组织化学染色检测大鼠脑组织中IGFBP-3和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF mRNA表达水平,免疫荧光染色检测大鼠脑组织中缺血半暗区微血管密度。结果：对照组大鼠无神经功能缺损和脑梗死灶;模型组大鼠24h神经行为学评分为（1.86±0.73）分,脑梗死体积为（28.34±3.57）%。HE染色,对照组大鼠脑组织正常,模型1d组大鼠脑组织出现水肿,模型3d组大鼠脑组织水肿和坏死明显,模型7d组大鼠脑组织水肿和坏死减轻。与对照组比较,各模型组大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF蛋白及mRNA表达水平和缺血半暗区微血管密度均明显升高（P<0.01）,模型3d组大鼠脑组织上述各指标最高,模型7d组大鼠脑组织中IGFBP-3和VEGF蛋白及mRNA表达水平和缺血半暗区微血管密度降低。大鼠脑组织中IGFBP-3 mRNA表达水平与VEGF mRNA表达水平和微血管密度均呈正相关关系（r=0.563,P<0.05;r=0.612,P<0.05）。结论：脑梗死大鼠缺血脑组织中IGFBP-3表达水平升高可能促进脑梗死缺血后血管新生。     

原发性甲状腺功能减退症患者血清胰岛素样生长因子-1及其结合蛋白-3的变化

目的:探讨原发性甲状腺功能减退症(甲减)患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平的变化.方法:采用放射免疫分析法(RIA)检测20例经左旋甲状腺素治疗前后甲减患者和20名健康人(对照组)血清IGF-1和IGFBP-3水平.结果:甲减治疗前,血清IGF-1水平(123.1±36.4)ng/ml,IGFBP-3水平(1898±630)ng/ml明显低于对照组[IGF-1水平(270.7±50.1)ng/ml、IGBP-3水平(3425±935)ng/ml],差异有显著性(P＜0.01);甲减治疗后,大多数甲减缓解患者血清IGF-1和IGFBP-3水平得到恢复,IGF-1水平(239.4±45.6)ng/ml、IGFBP-3水平(3167±866)ng/ml明显高于治疗前(P＜0.01),而且与对照组比较,差异无显著性(P＞0.05).结论:甲减患者血清IGF-1和IGFBP-3水平明显下降,两者的正常调节均可能受甲状腺激素变化的影响.     

胰岛素样生长因子结合蛋白7基因在胃癌细胞中的表达及甲基化调控

目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）mRNA在胃癌细胞中的表达及其甲基化调控。方法 分别培养胃癌细胞株高分化MKN-28、中分化SGC-7901和AGS、低分化MKN-45以及胃黏膜正常上皮细胞（GES-1）。提取细胞RNA,采用RT-PCR法检测IGFBP7 mRNA在各细胞株中的表达。提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后采用甲基特异性PCR（MSP）分析其CpG岛甲基化状态。采用不同浓度去甲基化药物5'-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶（5-aza-dc）处理细胞株后,经Real-time PCR定量药物处理前后各细胞株IGFBP7 mRNA的相对表达量。结果 各肿瘤细胞株中IGFBP7 mRNA表达较GES-1降低或消失。MSP检测IGFBP7 mRNA表达降低和消失的细胞株均有CpG岛不同程度的甲基化。不同浓度5-aza-dc处理细胞后,IGFBP7 mRNA的表达量呈剂量依赖性增高。结论 IGFBP7 mRNA在胃癌细胞株中低表达或不表达,其表达下调与其CpG岛甲基化有关。5-aza-dc可使IGFBP7 mRNA表达降低的胃癌细胞株重新表达IGFBP7 mRNA,提示IGFBP7基因CpG岛甲基化可能是IGFBP7在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制。     

胰岛素样生长因子结合蛋白4转基因小鼠脑内细胞分化的研究

目的 研究神经元特异性启动子血小板源性生长因子-β（platelet derived growth factor-β, PDGF-β）介导的胰岛素样生长因子结合蛋白4（insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP4）转基因小鼠脑内神经元和神经胶质细胞分化情况。方法 PCR扩增并测序鉴定PDGF-β启动子和IGFBP4 cDNA表达框的整合,Isotropic Fractionator细胞计数法分析海马少突胶质前体细胞比例,Western blotting法分析生后28 d小鼠海马等部位神经元和神经胶质细胞的分化、胰岛素样生长因子-1（insulin-like factor-1, IGF-1）受体通路激活以及细胞存活相关分子表达, Rotarod实验观察小鼠运动能力。结果 IGFBP4 cDNA稳定整合于小鼠基因组,转基因小鼠海马少突胶质前体细胞数目和成熟细胞髓磷脂碱性蛋白（myelin basic protein, MBP）均明显增多,神经元和星形胶质细胞标志物NeuN和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达改变不明显;Erk1, 2和Akt磷酸化升高,p38的激活不明显;Caspase-3表达下调,β-catenin和Bcl-2表达无明显改变,12月龄小鼠Rotarod运动能力明显增强,其小脑和皮质NeuN表达增多。结论 神经元过表达IGFBP4促进小鼠脑少突胶质细胞和神经元的分化。     

Association of sterol regulatory element binding protein 2 and insulin-like growth factor binding protein 3 genetic polymorphisms with avascular necrosis of the femoral head

Background  Sterol regulatory element binding protein (SREBP)-2 plays a key role in lipid homeostasis by stimulating gene expression of cholesterol biosynthetic pathways. The insulin-like growth factor binding protein (IGFBP) family regulates growth and metabolism, especially bone cell metabolism, and correlates with osteonecrosis. However, association of their gene polymorphisms with risk of avascular necrosis of the femoral head (ANFH) has rarely been reported. We determined whether SREBP-2 and IGFBP-3 gene polymorphisms were associated with increased ANFH risk in the Chinese population.

Methods  Two single nucleotide polymorphisms of SREBP2 gene, rs2267439 and rs2267443, and one of IGFBP-3 gene, rs2453839, were selected and genotyped in 49 ANFH patients and 42 control individuals by direct sequencing assay.

Results  The frequencies of rs2267439 TT and rs2267443 GA of SREBP2 and rs2453839 TT and CT of IGFBP-3 in the ANFH group showed increased and decreased tendencies (against normal control group), respectively. Interaction analysis of genes revealed that the frequency of carrying rs2267439 TT and rs2267443 GA genotypes of SREBF-2 in ANFH patients was significantly higher than in the control group (P <0.05). Association analysis between polymorphisms and clinical phenotype demonstrated that the disease course in ANFH patients with the rs2453839 TT genotype of IGFBP-3 was significantly shorter than that of CT+CC carriers (P <0.01). CT+CC genotype frequency in patients with stage III/IV bilateral hip lesions was significantly higher than in those with stage III/IV unilateral lesions and stage II/III bilateral lesions (P <0.05–0.02).

Conclusions  Our results suggested that interaction of SREBP-2 gene polymorphisms and the relationship between the polymorphisms and clinical phenotype of IGFBP-3 were closely related to increased ANFH risk in the Chinese population. The most significant finding was that the CT+CC genotype carriers of IGFBP-3 rs2453839 were highly associated with the development of ANFH.

     

胰岛素样生长因子-1对高胆固醇血症患者内皮的保护作用及机制

目的:探讨血清胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1, IGF-1) 对高胆固醇血症血管内皮的保护作用及机制。方法:观察高胆固醇血症患者和正常对照( 各25 例) 肱动脉血流介导的血管舒张功能(flow-mediatedarterial diastolic function, FMD), 并检测血清中IGF-1、非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS) 以及一氧化氮(NO) 水平;将培养的人脐静脉内皮细胞分为3 组:正常对照组、氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL) 损伤组和IGF-1 干预组, 培养24 h 后, 检测各组细胞培养液中ADMA, NOS, NO 水平, 细胞裂解液中二甲基精氨酸二甲胺水解酶(dimethylarginine dimethylamine hydrolase, DDAH) 活性, 并进行β- 半乳糖苷酶染色, 计算细胞衰老率。结果:临床实验中, 高胆固醇血症患者FMD 显著下降;伴随血清IGF-1, NOS 以及NO 水平的下降, ADMA 水平升高。多元线性回归分析显示IGF-1 与FMD 呈正相关, ADMA 与FMD 呈负相关。细胞实验中, ox-LDL 处理24 h 后, 细胞裂解液DDAH 活性下降;伴随上清液中ADMA 水平升高, NOS 和NO 水平下降和细胞衰老率增加, 给予IGF-1 干预能部分逆转上述作用。结论:血液中IGF-1 水平下降可能是高胆固醇血症患者血管内皮舒张功能受损的重要原因之一;IGF-1 具有抗内皮细胞衰老作用, 其机制可能涉及对DDAH/ADMA 途径的调节。