不同浓度CCl4对小鼠肝纤维化模型建立及IL-6和TGF-β1表达的影响

目的 探索一种稳定可靠的建立小鼠肝纤维化模型的方法.方法 46只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,模型组分别给予浓度为15％、30％和45％的四氯化碳（CCl4）腹腔注射,每周2次,共12周;对照组给予同等剂量的橄榄油.最后一次注射结束3d后处死小鼠,评估肝纤维化程度;血清生化检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和白蛋白（Alb）; Western blotting检测肝内IL-6、TGF-β1蛋白水平.结果 模型组小鼠肝脏逐渐出现纤维化,其中45％组已有肝硬化表现.15％、30％和45％组的小鼠死亡率和建模成功率分别为8.3％、16.7％、41.7％和27.3％、80.0％、57.1％.与对照组此,随注射浓度增高,模型组血清ALT、AST含量逐渐升高（P＜0.01）,Alb逐渐降低（P＜ 0.01）;IL-6和TGF-β1含量也逐渐升高（P＜0.05）.结论 注射30％ CCl4 12周能够诱导明显的肝纤维化形成,建模成功率较高,且死亡率较低,是一种较理想的制作肝纤维化模型的方法,为研究肝纤维化的发病机制奠定了基础.     

转化生长因子β对肝纤维化大鼠肝部分切除术后肝功能及肝脏再生的作用及机制

背景与目的:肝脏纤维化是肝脏内一系列纤维组织增生的病理反应,肝纤维化可能导致肝切除后出现肝脏再生不足或未再生。本研究探讨肝纤维化动物肝部分切除术后转化生长因子β(TGF-β)通路对肝功能及肝脏再生的作用和机制。方法:将40只SD大鼠用腹膜内注射CCl4方法构建肝纤维化模型后,将其中32只行70%肝切除手术,并分别在术后第1、3、5、7天,每个时间点取8只大鼠检测血清肝功能指标、肝组织TGF-β和Smad的m RNA和蛋白表达水平,另外8只大鼠行假手术作为对照组。此外,以相同的造模方法,观察TGF-β/Smad通路抑制剂(术前腹膜内注射GW788388)对肝纤维化大鼠部分肝切除后肝功能与肝再生能力的影响。结果:与假手术组比较,部分肝切除术组大鼠术后第1天天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶水平明显升高,此后随时间逐渐降低(均P<0.05);肝组织TGF-β和Smad的m RNA与蛋白水平明显升高,均在术后第3天达到峰值(均P<0.05),而后降低,并在术后第7天降低至假手术组水平(P>0.05)。肝切除术前注射GW788388的大鼠与单纯行肝切除术的大鼠比较,AST和ALT水平升高更为明显,且肝组织细胞增殖标志物Ki-67与干细胞标志物LGR5表达均明显减少(均P<0.05)。结论:TGF-β/Smad信号在通路在肝纤维化大鼠肝部分切除术后保护肝功能、促进肝再生方面起了重要作用,机制可能与该通路调节细胞增殖及干细胞的分化有关。     

氨溴索对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨氨溴索对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（I/RI）的保护作用及其机制。方法：18只雄性Wistar大鼠被随机均分为假手术组、肝I/RI模型组（模型组）、氨溴索预处理+肝I/RI模型组（氨溴索预处理组）。肝I/RI模型采用阻断入肝血流30 min后再灌注方法诱导,氨溴索预处理组于缺血前20 min尾静脉注射氨溴索（100 mg/kg）,而模型组给予等体积生理盐水。术后6 h处死大鼠,检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平和肝组织病理学改变,同时检测肝组织超氧化物岐化酶（SOD）,谷胱甘肽（GSH）,丙二醛（MDA）含量,caspase-3的活化水平。结果：与假手术组比较,模型组与氨溴索预处理组血清ALT和AST水平明显升高（均P<0.05）;肝组织出现明显的病理学改变;肝组织SOD和GSH含量明显下降,而MDA水平明显升高（均P<0.05）;肝组织caspase-3活化水平明显升高（均P<0.05）。与模型组比较,氨溴索预处理组以上各项指标的变化均明显减弱（均P<0.05）。结论：氨溴索预处理能减轻大鼠肝脏I/RI,机制可能与其调控抗氧化和抗凋亡信号通路有关。     

乌司他丁逆转大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨乌司他丁对大鼠肝纤维化过程的影响.方法 18只TAA诱导的肝纤维化模型大鼠分为3组:正常大鼠为A组(3只),模型鼠+生理盐水为B组(9只),模型鼠+乌司他丁为C组(9只)并干预3周.对比干预前后大鼠血清中的丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、透明质酸(hyaluronic acid、HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)水平变化.病理学检查及免疫组化观察各组大鼠肝形态学变化及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、caspase-3蛋白表达.结果 C组干预后大鼠肝脏弹性数值及SSS评分与干预前相比显著降低,差异有统计学意义(t=2.472,P＜0.05).C组的ALT、AST、SOD、MDA、HA、LN生化指标均有不同程度的好转(分别F=3.862、5.774、3.442、4.157、4.173、3.674,均P＜0.05).HE及Masson染色可见干预后C组大鼠肝组织有少量炎性细胞浸润,肝细胞坏死灶并未增多,胶原纤维略有增生.C组TGF-β1、caspase-3阳性细胞率明显低于B组大鼠. 结论 乌司他丁对大鼠肝纤维化具有逆转作用,使大鼠肝脏纤维化程度逐渐减轻,减少胶原纤维的沉积,抑制肝细胞炎症.     

人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡增强纤维化肝脏再生能力

目的 探讨人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡（h UC-MSC-EV）在纤维化肝脏再生中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常肝脏70%肝切除组（Oil+PHx组）、肝纤维化70%肝切除组（CCl4+PHx组）、肝纤维化70%肝切除+间充质干细胞来源的细胞外囊泡（MSC-EV）治疗组（CCl4+PHx+MSC-EV组）,每组8只。将LX-2细胞分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、转化生长因子（TGF）-β组、TGF-β+MSC-EV组。检测各组小鼠肝部分切除术后丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）水平,分析各组小鼠肝组织纤维化及增殖相关指标的表达情况。检测各组LX-2细胞表皮细胞生长因子（EGF）、成纤维母细胞生长因子（FGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、肝细胞生长因子（HGF）信使RNA(m RNA)的表达水平。观察对小鼠肝脏HGF表达的影响。结果 与Oil+PHx组比较,CCl4+PHx组小鼠血清AST、ALT、LDH水平升高,纤维化程度较高,天狼星红及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）染色阳性区域面积增大,α-SMA蛋白表达水平升高;与CCl4...     

牛磺酸对大鼠小肠缺血再灌注后肝、肾损伤的保护作用

摘要：目的:研究牛磺酸对大鼠小肠I/R后肝、肾损伤的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为3组：假手术对照组（S组）、生理盐水对照组（I/R组）和牛磺酸保护组（T组）。T组术前30min经鼠阴茎背静脉注射2%的牛磺酸200mg/kg。采用肠系膜上动脉根部阻断1h后复流行再灌注的方法制作肠I/R模型。除S组外，其余2组分别于再灌注1.5,3,6,12h抽血测定ALT,AST,BUN及Cr值，评定肝、肾功能。肝、肾切片行HE染色，比较组织病理学差异。用原位末端标记（TUNEL）法测定肝、肾细胞凋亡百分率，评定平均光密度值。结果:I/R组与S组相比，血清ALT,AST,BUN及Cr值均明显升高（P<0.05 ），3h最高，以后开始下降，12h仍高于S组；肝、肾病理损伤I/R组也相应严重，肝、肾细胞TUNEL阳性表达率、平均光密度值明显增加 （P<0.05）。T组与I/R组相比，前者血清ALT,AST,BUN及Cr水平明显减低 (P<0.05)，病理损伤也相应较轻；肝、肾细胞TUNEL阳性表达率、平均光密度值明显减少(P<0.05)。结论:牛磺酸对大鼠小肠I/R后肝、肾损伤具有明显的保护作用。     

白花丹提取物对CCl4肝纤维化动物模型的影响

目的观察白花丹提取物与复方丹参滴丸对大鼠实验性肝纤维化的治疗效果,并进行比较。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、白花丹组、复方丹参滴丸组。除空白对照组外,其余均用四氯化碳油剂皮下注射诱发大鼠肝纤维化,第8周处死动物,以测定血清谷丙氨酸转换酶、谷草氨基酸转换酶活性、透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、总胆红素的含量作为指标观察白花丹提取物和复方丹参滴丸对慢性肝脏损害和抗肝纤维化的治疗作用。结果检测表明白花丹提取物和复方丹参滴丸均能不同程度降低血清中ALT、AST、TBIL、HA、LN、CIV、PCⅢ的含量,与模型组存在显著性差异（P〈0.05）。白花丹组与复方丹参滴丸组相比有统计学意义（P〈0.05）。结论复方丹参滴丸和白花丹提取物都有减轻大鼠实验性肝纤维化作用,增强实验性大鼠抵抗CCl4致慢性肝损伤能力和抗肝纤维化能力,其中白花丹提取物的作用更显著。     

急性出血坏死性胰腺炎肝损伤中TLR2/4mRNA的表达及氯喹的干预效应

目的： 研究急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肝损伤中Toll-样受体(TLR)2/4mRNA表达的变化及氯喹的干预效应。 方法：采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠（TAC）注射造成大鼠AHNP肝损伤动物模型。动物分为假手术组（S组）、胰腺炎组和氯喹（CQ）治疗组。后2组于术后3，6，12 h分批剖杀，S组于术后6 h剖杀。观察血清淀粉酶、ALT和AST及肝组织NO和TNF-α的变化，RT-PCR方法检测各组不同时点肝组织TLR2和TLR4mRNA的表达。 结果：相对于S组，胰腺炎组大鼠3 h肝组织TLR2和TLR4mRNA表达开始增高，术后6～12 h肝组织TLR2和TLR4mRNA表达迅速达到峰值（P<0.05），肝损伤加重，血清淀粉酶升高，肝组织TNF-α浓度升高，NO浓度逐渐降低（P<0.05）；相对胰腺炎组，CQ治疗组TLR2/4mRNA表达降低（P<0.05），肝损伤程度减轻，血清淀粉酶降低，肝组织TNF-α浓度降低，NO浓度显著升高（P<0.05）。 结论：AHNP大鼠肝组织内TLR2和TLR4的基因表达上调；其表达增高可能在AHNP肝损伤的发生、发展中起重要作用。氯喹对大鼠AHNP过程中肝损伤可能有保护作用。     

姜黄素抑制大鼠肝纤维化的研究

目的：探讨姜黄素抑制肝纤维化的效应及其分子机制。方法：培养大鼠肝星状细胞(HSC)并以刀豆蛋白(ConA)激活,再用不同剂量姜黄素处理;建立大鼠四氯化碳(CCl4)肝纤维化模型,以不同剂量姜黄素处理各模型动物,检测其血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅵ型胶原(Ⅵ.C)水平,检测肝组织纤维化程度和肝组织及HSC基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果：CCl4成功诱导肝纤维化大鼠模型。与模型组比较,姜黄素治疗后能降低血清肝纤维化各项指标(HA,LN,PCⅢ及Ⅵ.C)的表达（P<0.05）,肝组织纤维化评分明显降低（P<0.05）。姜黄素处理后,纤维化大鼠肝组织MMP-2呈剂量依赖性减少（P<0.05）,活化肝星状细胞MMP-2的表达呈剂量依赖性减少（P<0.05）。结论：姜黄素可通过减少MMP-2表达抑制大鼠肝纤维化。     

缺血预处理对大鼠缺血再灌注肝组织NF-κB表达、炎症及氧化应激反应的影响

目的：探讨缺血预处理（IP）减轻大鼠肝缺血再灌注（I/R）损伤的作用及机制。
　　方法：将15只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、I/R组、IP+I/R组,采用Pringle法制作肝I/R模型（缺血30min+再灌注3h）,IP采用I/R前肝缺血10min+再灌注10min诱导。各组大鼠于再灌注3h后处死取材,行肝组织病理学、血请谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）检测,同时检测肝组织NF-κB蛋白的表达,以及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α与氧化应激指标丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）水平。
　　结果：除假手术组外,I/R组与IP+I/R组大鼠肝组织均出现肝损伤是病理学改变,IP+I/R组的损伤程度明显轻于I/R组;与假手术组比较,I/R组与IP+I/R组大鼠血清AST、ALT水平明显升高,肝组织NF-κB蛋白表达、IL-1β与TNF-α水平、MDA与MPO浓度均明显升高（均P<0.05）,但IP+I/R组的各指标的升高幅度均明显小于I/R组（均P<0.05）。
　　结论：IP减轻大鼠肝I/R损伤的作用与抑制NF-κB活性,从而减轻炎症与氧化应激反应有关。     

根据细胞周期序贯应用免疫抑制剂治疗大鼠阿霉素肾病

目的 观察3种根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的治疗效果.方法 以两次注射的方法制备阿霉素肾病大鼠模型,设正常对照组(8只)、肾病组(8只)、甲基泼尼龙(MP)+环孢素A(CsA)+霉酚酸酯(MMF)治疗组(8只)、MP+CsA+环磷酰胺(CTX)治疗组(8只)和MP+他克莫司(FK506)+雷帕霉素(Rapa)治疗组(8只).检测24 h尿蛋白量和血清总蛋白(TP)、白蛋白( Alb)、胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);观察肾组织病理变化;Western印迹法检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达;免疫组化和实时荧光定量PCR法检测nephrin和podocin的表达.结果 (1)2周末、4周末、8周末、12周末肾病组24 h尿蛋白量均显著高于对照组(均P＜0.01),治疗组大鼠24 h尿蛋白量在8周末、12周末均显著低于肾病组(均P＜ 0.05),治疗组之间差异无统计学意义.(2)肾病组TP、Alb显著低于对照组(均P＜0.01),TG、Chol显著高于对照组(均P＜0.01),治疗组TP、Alb显著高于肾病组(均P＜ 0.05),TG、Chol显著低于肾病组(均P＜0.05),治疗组之间各生化指标差异均无统计学意义.(3)3组治疗方案均可抑制CTGF蛋白的表达,其中尤其以MP+FK506+Rapa组合方案效果显著.(4)相比对照组,肾病组大鼠nephrin和podocin蛋白及其mRNA的表达均显著减少(均P＜0.01);治疗组nephrin、podoein的表达和分布均有所恢复.结论根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的病理损伤均有显著改善,可以有效减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白量;升高TP和Alb,减少TG和Chol;可以恢复nephrin、podocin在阿霉素肾病大鼠肾脏中的表达;并抑制CTGF蛋白的表达,明显改善肾脏纤维化.     

Protective effect of interferon-alpha on carbon tetrachloride-induced nephrotoxicity

BACKGROUND: The aim of this study was to investigate the effect of chronic administration of interferon-alpha 2b for the prevention of carbon tetrachloride (CCl4)-induced oxidative stress and nephrotoxicity. METHODS: Thirty rats were divided into three groups: control, CCl4+placebo (CCl4+P) and CCl4+interferon-alpha 2b (CCl4+INF). Control rats were treated with pure olive oil. The other rats were treated for seven weeks with subcutaneous injections of CCl4 (0.15 mL /kg) in pure olive oil three times a week. Rats were killed at the end of the seventh week and renal histopathological examinations were done: specimens of renal tissue were obtained for investigating oxidative stress parameters, including malondialdehyde (MDA) and glutathione peroxidase (GSH-Px). RESULTS: Tubular changes, glomerular hypercellularity, and capillary obliteration were significantly less in the CCl4+INF group than with CCl4+P (p<0.05) and the interstitial fibrosis score for the CCl4+INF group was similar to the control group. However, the interstitial inflammation score was higher in the CCl4+INF group than the control group (p<0.05). No change was observed in the CCl4+P group. Renal MDA levels in the control and CCl4+INF groups were significantly lower than the CCl4+P group, while GSH-Px was significantly higher (p<0.001). There was no difference between the control and CCl4+INF groups in oxidative stress markers (p>0.05). CONCLUSIONS: Administration of interferon-alpha 2b to CCl4-treated rats prevented interstitial fibrosis, probably as a result of its antifibrogenic effect. It also reduced intrarenal oxidative stress in rats with CCl4-induced nephrotoxicity.     

MG132可增强糖尿病大鼠肾脏抗氧化能力

目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病肾病（DN）大鼠的治疗作用及其机制。 方法 72只大鼠随机分为正常对照组（NC）、DN组和MG132治疗组（DN+MG132）,每组各24只。在治疗第4、8和12周末检测各组大鼠24 h尿蛋白排泄率（UPER）、24 h尿量和尿丙二醛（MDA）含量、肾组织26S蛋白酶体、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肾组织SOD、GSH-PX和p47phox mRNA的表达变化;Western印迹检测p47phox的蛋白表达变化。 结果 与NC组大鼠比较,在4、8和12周时,DN大鼠的UPER显著增高（均P < 0.05）;12周时病理显示DN组大鼠肾小球系膜显著增生和系膜基质积聚增多。与同期DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠的UPER显著降低（均P < 0.05）,肾小球系膜增生和基质积聚均减少。在4、8和12周,DN组大鼠肾组织26S蛋白酶体活性比NC组分别增高了2.14倍、2.66倍和3.68倍（均P < 0.05）。与DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠26S蛋白酶体活性显著下降（均P < 0.05）。与NC组大鼠相比,DN组大鼠肾组织p47phox mRNA表达分别升高了155%、149%和120%（均P < 0.05）;p47phox蛋白表达分别升高了139%、152%和186%（均P < 0.05）;尿MDA含量分别升高了1.95倍、2.04倍和2.62倍（均P < 0.05）;而DN大鼠肾组织SOD活性分别下降23.09%、33.59%和53.31%（均P < 0.05）;GSH-PX的活性分别下降28.57%、33.06%和48.76%（均P < 0.05）;SOD mRNA表达分别下降38.09%、61.44%和76.53%（均P < 0.05）,GSH-PX mRNA表达分别下降29.16%、37.26%和62.40%（均P < 0.05）。与DN组大鼠比较,MG132治疗组大鼠肾组织p47phox mRNA和蛋白表达以及尿MDA含量则显著下降（均P < 0.05）,而SOD和GSH-PX的活性和mRNA均显著升高（均P < 0.05）。 结论 MG132对DN大鼠肾脏有显著的保护作用,其机制可能与增强肾组织抗氧化能力有关。     

糖尿病大鼠肾实质小动脉内膜/中膜厚度比与炎性因子的关系

目的 通过观察糖尿病大鼠肾小动脉内膜/中膜厚度比变化,初步探讨其与炎性因子的相关关系及对糖尿病肾病（DN）血管病变的影响。 方法 70只健康大鼠被随机分为DN组（n=40）和正常对照组（N,n=30）。DN大鼠模型采用链脲菌素（STZ）腹腔注射诱导,成功35只,N组予同等剂量柠檬酸缓冲液。分别于4、12、24周处死动物,取大鼠股静脉血查生化指标。用免疫荧光方法检测肾小动脉内膜/中膜厚度比。用免疫组化及原位杂交方法检测各时间点肾小动脉中单核细胞趋化因子1（MCP-1）的蛋白和mRNA表达变化。 结果 生化结果显示DN组各时间点血糖及尿蛋白量（24 h）均显著高于N组（P < 0.05）,自第12周开始,DN组血肌酐、BUN、血磷显著高于N组（P < 0.05）。免疫组化及原位杂交显示DN组肾小动脉4周时已有MCP-1蛋白及mRNA表达,随时间延长表达逐渐增强,24周表达最强,各时间点均显著高于N组（均P < 0.05）。免疫荧光结果显示,第4周时DN组内膜/中膜厚度比与N组差异无统计学意义,12周时高于N组（P > 0.05）,24周时显著高于N组（P < 0.05）。DN组小动脉内膜/中膜厚度比与MCP-1表达、胆固醇、三酰甘油、血磷水平均呈正相关（r = 0.742, P < 0.01;r = 0.740,P < 0.01;r = 0.829,P < 0.01;r = 0.580,P < 0.01）。 结论 DN早期小动脉内膜/中膜厚度比与MCP-1呈正相关。MCP-1可能参与了DN血管病变。     

脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达及血清PDGF-BB水平的影响

目的 研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达和血清PDGF-BB水平的影响,探讨脾切除在肝纤维化治疗中的作用.方法 大鼠皮下注射CCl4,建立65只肝纤维化大鼠模型.于建模开始、肝纤维化期以及肝硬化期三组切除大鼠睥脏,并设立同期假手术组作为对照组.第一、二组及其对照组于建模后第10周,第三组及其对照组于建模后12周分别取大鼠肝脏和血液标本.用免疫组化SABC法测定肝脏PIGF-B的表达.HE染色检测肝纤维化,用双抗体夹心ELISA法测定血清PIGF-BB水平.结果 各切脾组PDGF-B阳性细胞A值(光密度值)明显低于其对照组;各切脾组血清PDGF-BB含量明显低于其对照组.根据HE染色,建模开始时切脾再行肝纤维化诱导,肝纤维化进程缓慢;建模第5周切脾后,肝脏病理状态比对照组明显缓解;肝硬化期切脾后,肝脏炎性改变和纤维化程度有一定减轻.结论 早期脾脏切除对实验性肝纤维化有一定延缓作用.脾切除后PDGF水平的下降可能是造成该延缓的机制之一.

Abstract：

Objective To explore the effects of splenectomy on hepatic fibrosis and on the expression of PDGF-B in the liver and PDGF-BB in the serum of rats with hepatic fibrosis. Methods By hypodermic injection CCl4, we established 65 rat models with hepatic fibrosis, splenectomies were performed in the three groups at different phases: before hypodermic injection CCl4 (A group), five weeks after hypodermic injection CCl4 (B group), and ten weeks hypodermic injection CCl4 (C group). The control groups were established at the same time, with samples of the livers and serum of the rats taken in different phases. The expressions of PDGF in the liver were detected by immunohistochemistry technique and the degree of hepatic fibrosis was detected by HE staining. The serum levels of PDGF-BB were analyzed by ELISA technique. Results Absorbance values of PDGF-B in the experimental group were significantly lower than the control groups (P＜0. 05). Serum levels of PDGF-BB of the rats after splenectomy were significantly lower than those in the control groups (P＜0.05). HE and Masson's staining showed that the progression of Hepatic fibrosis was slow in the A group. Hepatic pathologic state was significantly relieved in the B group and the inflammation and fibrosis was relieved in the C group. Conclusion Earlier period splenectomy could delay the proceeding of experimental hepatic fibrosis. After splenectomy the decline in the level of PDGF may be one of the mechanisms causing the delay.     

粉防己碱对胆汁性肝纤维化保护作用的实验研究

目的　探讨粉防己碱（Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ,Ｔｅｔ） 对胆汁性肝纤维化的保护作用及其保护机理。方法　复制大鼠胆汁性肝纤维化模型,灌胃给予Ｔｅｔ３０ｍｇ／ｋｇ 体重,每天１ 次;在胆道梗阻后１０、２０、３０天,重复检测肝细胞线粒体钙含量,肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物岐化酶（ＳＯＤ） 含量,血清白蛋白（ＡＬＢ）及透明质酸（ＨＡ）含量变化;并观察肝脏显微及超微结构改变。结果　各Ｔｅｔ 治疗组与同时相的单纯梗阻组比较,血清ＨＡ水平下降,Ｐ＜ ０．０５;ＡＬＢ升高,Ｐ＜ ０ ．０５;肝细胞线粒体钙超载程度明显减轻,Ｐ＜０．０１ ;肝组织ＭＤＡ含量减少,Ｐ＜ ０．０１,ＳＯＤ含量升高,Ｐ＜ ０．０５。光镜及透射电镜下,肝纤维化程度明显减轻。结论　Ｔｅｔ 对胆汁性肝纤维化有明显的保护作用,其保护机理可能与其钙拮抗和抗脂质过氧化损伤作用有关。     

当归对兔肝纤维化肝癌介入治疗后肝纤维化的作用

目的 建立兔肝纤维化肝癌模型,观察当归对其行化疗栓塞(TACE)术后加重肝纤维化的预防作用,探讨当归预防肝纤维化的作用机制.方法 将55只新西兰大白兔随机表法分为对照组(n=10)、模型组(n=15)、介入组(n=15)和预防组(n=15).造模时给予腹腔注射纯CCl4剂量0.1 ml/kg,每周1次,共注射10周,同时给予5%的乙醇饮水,在第10周末于肝左叶种植VX2瘤.其中模型组:在第12周末经肝动脉注入生理盐水2ml;介入组:在行TACE术时注入平阳霉素1mg+碘油0.2ml;预防组:在行TACE术时注入平阳霉素1mg+碘油0.2ml+当归注射液6ml/kg.对照组:以相同剂量生理盐水注射.各组于第16周末检测透明质酸酶(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ),并进行肝组织苏木素咿红(HE)染色、胶原纤维(VG)染色和转化生长因子(TGF)-β1免疫组织化学染色.结果 模型组(7/10)和预防组(6/10)的肝纤维化病理分期主要处于肝纤维化Ⅱ期(P>0.05),介入组(7/9)主要处于肝纤维化Ⅲ期,与模型组(3/10)和预防组(4/10)分期比较差异有统计学意义(P<0.05);模型组、介入组和预防组血清HA、LN、PCⅢ和CⅣ明显高于对照组(P<0.05),预防组低于介入组(P<0.05),与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组肝组织TGF-β1呈阴性表达,介入组肝组织TGF-β1表达明显增强,模型组和预防组TGF-β1表达较介入组减少.结论 用CCl4诱发兔肝纤维化后并种植VX2瘤,可以建立兔肝纤维化肝癌模型,行TACE术后可加重其肝纤维化的程度,当归对其有延缓作用,TGF-β1参与其调控机制.     

内皮祖细胞移植对大鼠肝硬化作用的研究

目的 探讨内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的大鼠肝硬化的作用.方法 本组38只SD大鼠中8只大鼠为正常对照,其余30只采用25%的CCl4/橄榄油灌胃制备肝硬化模型.再将肝硬化大鼠分为3组,每组10只.12周后直接处死的为肝硬化模型组,门静脉输入大鼠EPCs为EPCs移植组,经门脉输入生理盐水为移植对照组.移植4周后检测移植组和移植对照组大鼠肝组织胶原Ⅲ(collagen Ⅲ,COL Ⅲ)、平滑肌动蛋白(smooth muscle actin α,α-SMA)和Ki67的表达,检测外周血肝功能和血凝分析.结果 肝硬化模型组大鼠肝脏体积增至正常时的2倍.EPCs移植组大鼠与肝硬化模型组比较,肝组织学活动指数(histological activity index,HAI)(F=75.062,P<0.01),丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)(F=29.942,P<0.05),门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)(F=16.618,P<0.05)和总胆红素(total bilirubin,TBIL)(F=9.911,P<0.05)水平降低,白蛋白(albumin,Alb)(F=4.944,P<0.05)和Ki67(F=45.966,P<0.01)水平升高,纤维化面积(F=25.025,P<0.05)减少,α-SMA(F=7.86,P<0.05)和COL Ⅲ(F=135.787,P<0.01)表达降低;与正常肝脏相比,移植对照组HAI,ALT,AST和TBIL水平升高,Alb和Ki67水平降低,纤维化面积增加,α-SMA和COL Ⅲ表达升高(P<0.05).移植对照组大鼠凝血酶原时间延长,差异有统计学意义(P<0.05). 结论移植EPCs可以促进大鼠肝硬化的肝细胞增生,减轻肝纤维化程度.     

骨髓单个核细胞经门静脉移植对大鼠肝纤维化的减轻作用

目的 对比研究骨髓单个核细胞经门静脉移植治疗大鼠肝硬化的疗效,为临床应用提供依据.方法 采用四氯化碳(CCl4)综合法制作Wisrar大鼠肝硬化模型,8周后经病理检查证实成模者共20只进入实验.随机分为治疗组和对照组,每组10只,两组大鼠分别经门静脉注入骨髓单个核细胞和等体积的肝素生理盐水.各组大鼠继续皮下注射CCl4(CCl4使用方法与前述造模方法相同),在原环境下继续饲养4周后处死.切取肝组织分别作HE及Masson染色.疗效评价指标包括:①一般情况;②肝脏羟脯氨酸和胶原纤维含量;③肝纤维化病理学分级.结果 (1)治疗组大鼠一般情况改善;对照组无明显改变.(2)治疗组与对照组中肝脏羟脯氨酸含量分别为(0.50±0.12)g、(0.59±0.34)g;胶原纤维含量百分数分别为(3.75±0.98)%、(5.02±0.44)%.两组之间各指标均有统计学差异(P<0.05).(3)治疗组肝纤维化病理分级也有下降,治疗前后差异明显(P<0.05),而对照组无明显变化.表明治疗组行骨髓单个核细胞移植后大鼠肝纤维化程度减轻.结论 骨髓单个核细胞肝内移植能改善大鼠肝纤维化程度,为临床肝硬化的治疗带来了新的手段.