真空负压LSAB免疫组化法在相关抗原检测中的应用

同时用常规ＬＳＡＢ和真空负压ＬＳＡＢ法对ＥＴ 1(内皮素 1)抗原的表达进行对照研究。方法 :①制片 :线栓法建立大鼠局部脑缺血模型。于缺血后 12ｈ、1ｄ、3ｄ、7ｄ及 14ｄ灌注取脑、液氮冷冻及冷冻切片 ,片厚 16微米。每个时间点切片2 0张 ,冷丙酮固定 ,分常规法和真空负压法 2组进行ＬＳＡＢ染色。②真空负压ＬＳＡＢ法 :脑切片 0 0 1ｍｏｌ/ＬＰＢＳ冲洗 5ｍｉｎ 3次 ,加入 10 %正常羊封闭血清后 ,将切片放入真空负压干燥冷冻机内 ,持续抽气直至负压达 6 6 6 6ｋＰａ(5 0 0ｍｍＨｇ)后 ,持续 5ｍｉｎ ;切片ＰＢＳ冲洗后 ,加入兔抗人Ｅ…     

真空负压,微波辐射和电炉三种不同处理方法对抗原修…

本实验选用了真空负压、微波辐射和电炉３种不同的加热方法，进行了抗原的应用比较。实验证明：真空负压干燥箱加热法均匀恒定，不会使抗原修复液被煮沸，避免了切片的脱落；不受条件限制，方法简单，实验效果好，阳性物颜色鲜艳，背景清晰。微波辐射加热法使用方便，操作简单，实验效果与上法基本一样；不足的是温度不恒定，不好控制，抗原修复液常被煮沸；由于常可导致切片的松动和脱落，用小容器装抗原修复液时，容易被蒸发干；而     

真空负压、微波辐射和电炉三种不同处理方法对抗原修复的比较研究

本实验选用了真空负压、微波辐射和电炉３种不同的加热方法，进行了抗原修复的应用比较。实验证明：真空负压干燥箱加热法均匀恒定，不会使抗原修复液被煮沸，避免了切片的脱落；不受条件限制，方法简单，实验效果好，阳性物颜色鲜艳，背景清晰。微波辐射加热法使用方便，操作简单，实验效果与上法基本一样；不足的是温度不恒定，不好控制，抗原修复液常被煮沸；由于常可导致切片的松动和脱落，用小容器装抗原修复液时，容易被蒸发干；而且受条件的限制，金属染色架装的载片不能使用。电炉加热法使用也很方便，但温度不恒定，离不开人；实验效果也比上述两种方法差。     

子宫内膜ER、PR检测技术

前几年国内大多采用亲和组化法和多克隆抗体的免疫组化方法测定组织中ＥＲ和ＰＲ,其结论一直存在争论。近几年也开始应单克隆抗体测定冰冻切片中的ＥＲ、ＰＲ,但应用常规的免疫组化法测定石蜡标本中ＥＲ和ＰＲ不能获得满意的结果。本研究设计不同实验条件下,在石蜡切片...     

挖空细胞的本质及尖锐湿疣病理诊断

目的 从分子生物学角度，寻找尖锐湿疣比较确切可行的病理诊断标准。方法 采用HE、HPV-CAg免疫组化、HPV-DNA原位杂交组化染色和超薄切片等方法检测50例尖锐湿疣；用原位末端标记TUNEL染色，对20例尖锐湿疣进行观察。结果 鳞状上皮呈尖细的乳头状增生，角化不全和乳头纤维轴索中毛细血管丛状增生，棘层中上部和颗粒层有多少不等的挖空细胞，单个散在、成群或广泛分布，胞质空亮，核皱缩成星形或毛虫样，无炎细胞反应。原位杂交组化HPV-DNA的阳性细胞比免疫组化HPV-CAg阳性细胞明显增多。原位末端标记TUNEL染色及光镜、电镜观察，显示所有的挖空细胞均呈现细胞凋亡变化。结论 尖锐湿疣挖空细胞是由HPV所引起的凋亡细胞。从形态学上确认其凋亡特征即可确定尖锐湿疣的诊断，角化不全和乳头间质血管丛状增生可作佐证。难以确认挖空细胞的疑难病例，可采用原位杂交组化技术。     

微波应用在石蜡切片中检测p53蛋白的体会

微波应用在石蜡切片中检测ｐ５３蛋白的体会孙保存赵秀兰惠京张乃鑫ｐ５３蛋白易受固定液影响，在福尔马林固定、石蜡包埋切片上进行免疫组化检测常难以获得较高的阳性率。本文应用微波抗原修复方法在乳腺癌和大肠癌石蜡切片上进行了ｐ５３蛋白的免疫组化检测，获得了较高...     

自制阻水剂在免疫组化染色中的应用

<正>常规免疫组化染色过程中为防止试剂外溢,许多单位会使用商品化的组化笔。商品化的组化笔虽然使用方便,阻水效果好,但使用周期较短,价格高,额外增加了成本。本科室在参考相关文献经验~([1-3])的基础上,在实践中通过反复实验,自制一款阻水剂应用于日常免疫组化实验过程中,效果良好,现介绍如下。1材料与方法1. 1材料切片石蜡10 g,蜂蜡10 g,石蜡油10 g,空白唇     

双染技术在腺鳞癌鉴别诊断中的应用

近年来,应用免疫酶组化双标法在同一切片上显示两种或两种以上抗原的新技术报道甚多。本文介绍一种在同一切片上应用免疫组化中PAP法显示腺鳞癌组织中鳞癌细胞内细胞角蛋白抗原;和应用组织化学AB法(Alcain blue),粘液卡红法,PAS反应及AB—PAS染色显示腺     

McAb SC13A ER和PR在乳癌中反应性的观察比较

本文应用单克隆抗体(McAb)SC13A雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)对97例乳癌进行标记研究,McAb SC13A用石蜡切片,免疫组化PAP方法进行。ER、PR检测用冰冻切片亲和组化法进行。结果SC13A在97例乳癌中的阳性反应为85.6％,其中强阳     

真空负压吸引与绑鞋带技术修复小腿骨筋膜间室综合征:减张效果的比较

背景:目前认为负压吸引技术是治疗骨筋膜间室综合征切开减压切口较安全、有效的方法,但是治疗后创面往往不能自行闭合,需要植皮造成副损伤。有研究表明应用绑鞋带技术治疗小腿骨筋膜间室综合征减张切口取得良好的效果,但国内至今少有报道。目的:比较真空负压吸引技术与绑鞋带技术治疗小腿骨筋膜间室综合征切开减张切口的疗效。方法:将36例小腿骨筋膜室综合征患者患者(46个减张切口)随机分为负压吸引组和绑鞋带组,每组各23个减张切口,负压吸引组骨折复位后外固定架固定,切开减张后即行负压封闭引流治疗;绑鞋带组骨折患者复位后外固定架固定,切开减张治疗后创面敷贴负压封闭吸引材料-聚乙烯乙醇水化海藻盐泡沫,皮缘用皮肤吻合器作扣环采用硅橡胶袢充当缚带采用切口绑鞋带治疗技术。治疗后1个月比较两组患者切口大小、切口完全闭合切口所需时间、感染情况、需进一步干预的需求、日常治疗费用等情况。结果与结论:绑鞋带组切口闭合所需时间显著优于负压吸引组(P0.05)。负压吸引组中有8个减张切口需行进一步植皮,绑鞋带组无需行植皮;绑鞋带组中5个减张切口需要更换硅橡胶袢。两组中创面感染率比较差异无显著性意义,也均未出现治疗后筋膜间室压力增高及皮缘坏死等现象。结果提示,真空负压吸引技术和绑鞋带技术均为治疗小腿骨筋膜间室综合征切开减张切口安全、有效的治疗技术,其疗效可靠,已被临床使用;与真空负压吸引技术相比,绑鞋带技术伤口闭合时间短、创伤小、疗效更优。     

免疫电镜技术运用过程中电子染色方法的选用

目的探究免疫电镜不同染色方法对免疫组化阳性实验结果影响的关系。方法组织切片经常规免疫组化（雌激素受体GPR30）并行DAB-硫酸镍铵显色后进行电镜切片，然后分为双氧铀-柠檬酸铅双染、双氧铀单染与未染色3组，以便对不同电子染色结果进行比较。结果GPR30免疫阳性产物位于细胞核外的膜性结构上，在铀-铅双染组显示很高的电子密度，但是背景染色也很深，在铀单染组的反差比较好，而未染色组的反差更好。结论免疫电镜技术中针对不同的免疫阳性反应选用不同的电子染色方法，有利于阳性结果的判断与鉴别。     

再谈封闭负压技术治疗急慢性创面有关的几个问题

封闭负压疗法（vacum-assisted closure,VAC）或负压创面疗法（negative pressure wound therapy,NPWT）是一种促进创面愈合的方法。早在1954年Redon等人就提出了真空负压伤口引流技术,1959年Redom等推广真空负压创口引流装置,     

巧用真空采血针弥补真空管负压不足

随着医疗技术与设备的不断更新，真空采血系统以其操作简便、安全、无污染等优点逐渐取代传统的开放式采血方法。我院自2000年使用真空采血系统以来，时有发生因真空管负压不足至采血量不足，检验结果受到影响，更甚者因采血量过少至不能出具检验结果而重复穿刺给病员带来痛苦。我科自2010年1月开始采用暴露连接真空管端的针尖，使血液自行流至尾端再连接真空采血管，以弥补真空采血管负压不足，取得了较好的效果，现将体会报道如下。1资料与方法     

免疫组化与特染结合的双染法及应用

免疫组化与特染结合的双染法及应用侯景辉，程嘉骧，赵美卿免疫组化染色和特殊染色是病理诊断中重要辅助手段之一，每种方法有其特异性和适用性，通常这两种方法只能在不同切片上分别进行染色。现介绍Ⅷ因子免疫组化染色和肥大细胞特染相结合的双重染色方法如下。１材料和...     

真空负压引流在乳腺癌改良根治术中的应用

目的:研究真空负压引流装置在乳腺癌改良根治术中的应用效果.方法:收集江苏省苏州市立医院东区乳腺癌患者140例,随机分为实验组和对照组,各组70例.实验组应用真空负压引流装置,对照组使用传统的负压引流.对比两组皮下积液、皮瓣坏死、切口感染情况及拔管时间.结果:实验组皮下积液及切口感染发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组拔管时间早于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:乳腺癌改良根治术后使用真空负压引流装置可减少术后并发症的发生率,提高患者的舒适度,值得推广.     

基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值

目的探讨基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。方法收集手术中送检的甲状腺良性病变组织、乳头状癌组织各30例,采用直接免疫组化染色法、石蜡切片免疫组化染色法检测CK19、Galectin-3的表达,对比两种染色法的时间、质量、阳性率及诊断准确率。结果直接免疫组化染色法耗时15 min,石蜡切片免疫组化染色法耗时280 min,前者大幅缩短了时间。两种染色结果显示,CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的阳性率基本一致,直接免疫组化法的质量稍差。在诊断甲状腺前哨淋巴结转移癌中,冷冻切片的直接免疫组化染色法正确诊断率为100%,单纯HE染色正确诊断率为60.00%,诊断准确性显著提高。结论基于冷冻切片的直接免疫组化染色法较石蜡切片免疫组化染色法大幅缩短了染色时间,染色质量近似,阳性率一致,在判断甲状腺不典型病变性质及甲状腺前哨淋巴结转移癌中具有重要价值。     

微波快速免疫组化双重、多重标记方法的研究

免疫组化的双重和多重标记及原位杂交和免疫组化相结合的双重和多重标记已有文献报道,尤其是癌基因产物的抗体化,使得多重标记方法的应用更为重要,但因其染色流程过长,切片长时间浸泡,易发生脱片、组织结构破坏等问题.本研究应用微波辐射进行免疫组化多重标记及原位杂交(ISH)与免疫组化相结合进行的多重标记,乳腺肿瘤、结肠癌及肺癌(各选10例标本)组织切片上12种癌基因蛋白和3种基因探针组合的多重标记.结果利用微波辐射不仅可缩短多重标记的时间,而且克服组织切片的脱片、组织结构破坏等缺点,避免了可能发生的交叉反应.     

免疫组化双染技术在非小细胞肺癌中的应用

<正>本文应用免疫组化双重染色(简称免疫组化双染)检测TTF-1和CK5/6以及p40和Napsin A两组抗体,其可以分别在一张切片中同时观察到肺腺癌和肺鳞癌的表达,根据这些表达的细胞分布和构型,有利于对肿瘤组织学结构的判读,从而更容易做出肺癌类型诊断。本实验应用全自动免疫组化染色仪进行,操作简单,染色结果理想,染色后切片保存方便,是一种值得推荐的方法。     

细胞滤片在骨肿瘤细胞学诊断中应用

手术中骨肿瘤的冷冻切片常因为送检标本含骨质多而无法进行检查。曾有人用新鲜组织制成细胞印片，但在实际工作中大多数送检的骨肿瘤组织也因含骨质多而致印片中细胞很少，不足以起诊断之用，更不用说满足特染、组化或免疫组化的需要。笔者根据细胞过滤原理，将送检标本先放在PBS中浸泡片刻，然后取出组织块，将液体过滤．细胞将被留     

在一张玻片上连续附片标记多种抗体的方法

随着对肿瘤生物学本质的认识及免疫组化技术的发展 ,越来越多的抗体被推广应用。科研工作中对同一病例的组织研究 ,使用单一或几种抗体已不能满足要求 ,往往需一组抗体 ,这样便增加了免疫组化检查的实际操作。针对此现象 ,我们摸索了这套在一张载玻片置放数张切片 ,各自标记不同抗体的方法 ,报道如下。1　材料和方法1.1　自制防溢画蜡笔 ,包埋用石蜡 ,临床待检的石蜡组织和防脱处理的载玻片 ,待标记的免疫组化试剂。1.2　 (1)常规连续切片 ,每张玻片上据蜡片的大小 ,彼此相隔适当距离 (0 3～ 0 5ｃｍ左右即可 )后连续置放切片 (一般可置放…