全反式维甲酸对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及作用途径.方法:在人乳腺癌细胞株MCF-7培养基中加入一定浓度ATRA和PKC-δ的专一抑制剂rottlerin(RO)并分组,通过SubG1assay by FACS、琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA ladder来观察ATRA对MCF-7的影响.结果:在浓度为5μM的ATRA作用下,MCF-7的凋亡率显著高于其它各组(P＜0.01),并可观察到明显梯状DNA.结论:ATRA能够诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡,但受PKC-δ的专一抑制剂RO的抑制.     

IL-8通过上调Bcl-2的表达和下调caspase-3的表达抑制MCF-7乳腺癌细胞凋亡

目的探讨白细胞介素8(IL-8)对乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响及其机制。方法 Western blot法检测MCF-7细胞IL-8受体CXC趋化因子受体1(CXCR1)、CXCR2的表达;反转录PCR、Western blot法检测(0、20、40、80、160)ng/mL IL-8对MCF-7细胞Bcl-2、caspase-3表达的影响;CCK-8法检测(0、40、80)ng/mL IL-8对MCF-7细胞增殖的影响;相差显微镜下观察80ng/mL IL-8处理MCF-7后细胞形态的变化;Western blot法检测80ng/mL IL-8联合信号通路抑制剂10μmol/L PD980590、10μmol/L LY294002或50μmol/L AG490[分别为丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)、磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号通路抑制剂],共同处理MCF-7细胞后,细胞内Bcl-2蛋白表达的变化;Western blot法检测(0、20、40、80、160)ng/mL IL-8对MCF-7细胞磷酸化p-AKT表达的影响;流式细胞术、反转录PCR以及Western blot法分别检测80ng/mL IL-8联合10μmol/L LY294002共同处理MCF-7细胞后,细胞凋亡以及细胞内Bcl-2、caspase-3表达的变化。结果 IL-8受体CXCR1、CXCR2在MCF-7细胞中均有表达;在IL-8的作用下,MCF-7细胞Bcl-2表达升高,caspase-3表达下降,抗凋亡能力明显增强;IL-8能显著上调MCF-7细胞中p-AKT的表达;PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002能显著抑制IL-8抗MCF-7细胞凋亡的作用,且减少Bcl-2并增加caspase-3的表达。结论 IL-8可显著抑制MCF-7细胞的凋亡,其机制可能与IL-8激活PI3K/AKT信号通路而上调Bcl-2、下调caspase-3的表达有关。     

DMSO诱导MCF-7细胞凋亡的研究

目的研究二甲基亚砜(DMSO)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。方法用不同浓度DMSO处理体外培养的MCF-7细胞,应用倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用MTT比色法检测细胞存活率;Hoechst33258/PI荧光染色,用荧光显微镜分析凋亡细胞比率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带。结果在倒置光学显微镜下观察1%DMSO处理细胞12h后细胞形态发生变化。约有50%以上的细胞变圆,细胞内有多泡小体形成。随DMSO浓度增加和作用时间的延长,细胞存活率明显下降,经MTT检测其IC_(50)值为1%;荧光显微镜下可见60%以上细胞核染色质凝集,核碎裂等凋亡细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带(DNA ladder)。结论适当浓度的DMSO能够抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

光动力疗法对人乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡的影响

目的 研究光动力疗法（PDT）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响和诱导凋亡的作用.方法 癌光啉（PSD-007）与细胞共同孵育2h后,以不同能量635 nm激光照射,通过噻唑蓝（MTT）比色法测定PDT后不同时间（0.5、1、3、6、12、24h）细胞的光密度（0D）值及存活率.DAPI染色观察PDT后不同时间细胞凋亡中细胞核形态学的改变.Annexin-V/PI双染法结合流式细胞术分析细胞凋亡率的变化.结果 PDT对MCF-7细胞的增殖有抑制作用,且随着PDT光照能量的提高而增强,PDT作用后细胞存活率随时间延长而逐渐降低.细胞形态学观察结果表明,MCF-7细胞呈典型的凋亡形态特征.Annexin-V/PI双染也证实PDT可以诱导细胞凋亡,且凋亡率随PDT作用后时间的延长而升高.结论 PDT能显著抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡,且其诱导肿瘤细胞的凋亡是一渐进性的过程,具有光照剂量和时间效应关系.     

褐藻糖胶对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究褐藻糖胶对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响，并探讨其凋亡机制。方法:不同浓度(100 mg/L、300 mg/L、500 mg/L、1 000 mg/L)褐藻糖胶处理MCF-7细胞48h后，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖；Hoechst 33258染色、琼脂糖凝胶电泳法观察细胞的凋亡的形态学及生化改变；逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹分别测定细胞〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗和bax mRNA及其蛋白的表达。结果:不同实验浓度(100 mg/L、300 mg/L、500 mg/L、1 000 mg/L)的褐藻糖胶均能抑制MCF-7细胞的增殖（P<0.01），抑制率呈浓度依赖性增大；褐藻糖胶诱导MCF-7细胞凋亡数增加，且可见明显的、凋亡特有的DNA梯形条带；在褐藻糖胶存在下，〖STBX〗 bcl-2〖STBZ〗 mRNA和蛋白表达减少，而bax mRNA和蛋白表达增加，Bcl-2/Bax比值下降（P<0.05）。结论:褐藻糖胶可抑制MCF-7细胞增殖，且诱导其凋亡，其凋亡机制是下调Bcl-2和上调Bax蛋白的表达。     

低频超声联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究低频超声和紫杉醇联合应用对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响以及其可能机制。方法培养乳腺癌MCF-7细胞,随机分为4组:对照组、低频超声组、紫杉醇组和低频超声+紫杉醇组。低2频超声组为超声840k Hz,0.75W/cm×3min辐照;紫杉醇组为药物浓度为10nmol/L培养24h;联合组叠加处理因素。应用CCK-8检测细胞增殖,应用流式细胞仪和凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡,应用流式细胞仪和ROS试剂盒检测各组细胞ROS水平,应用Western Blot实验检测凋亡相关蛋白表达。结果单独应用低频超声或紫杉醇均能抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡,升高细胞内活性氧水平,增加凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、cleaved caspase-2、Bax)的表达水平,降低Bcl-2的表达水平。与单独应用组相比,低频超声和紫杉醇联合,显著增强了上述作用。结论低频超声和紫杉醇联合作用,极大增强了抑制MCF-7细胞增殖,诱发其凋亡的作用,其作用可能和线粒体凋亡途径相关。     

WNT5B过表达对人乳腺癌MCF-7细胞活力及凋亡的影响

目的:检测WNT5B在人正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞株中的表达,及过表达WNT5B后对人乳腺癌MCF-7细胞活力及凋亡的影响,探讨WNT5B在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用RT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中WNT5B的mRNA表达水平,将WNT5B的表达载体pc DNA3.1/WNT5B和空白对照载体pc DNA3.1分别瞬时转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过real-time PCR和Western blotting法分别在mRNA和蛋白水平验证WNT5B的表达效率;并通过CCK-8的方法检测WNT5B过表达对人乳腺癌MCF-7细胞活力的影响,通过流式细胞术分别检测过表达WNT5B对MCF-7细胞周期分布及凋亡比例的影响。结果:与正常乳腺上皮细胞相比,WNT5B在乳腺癌细胞中低表达;在乳腺癌细胞MCF-7中转染WNT5B表达质粒后,WNT5B表达上调,差异有统计学显著性(P0.05);与对照组相比,过表达WNT5B后,MCF7细胞的活力明显降低,处于S期细胞的量明显增加,G1和G2/M期细胞明显减少,且细胞凋亡比例明显增加,差异均有统计学显著性(P0.05)。结论:WNT5B在乳腺癌细胞中低表达,过表达WNT5B可使人乳腺癌细胞MCF-7阻滞在S期,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

小干扰RNA抑制RUNX2对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡与侵袭的影响

目的探讨小干扰RNA抑制人RUNT相关转录因子2(RUNX2)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法应用化学合成小干扰RNA技术沉默人乳腺癌MCF-7细胞中RUNX2基因的表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验验证基因沉默效率。应用MTT方法检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力变化。结果设计的siRNA能够明显抑制人乳腺癌MCF-7细胞RUNX2的表达。RUNX2基因沉默后,人乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力降低,细胞凋亡率明显提高,侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论RUNX2基因是治疗人乳腺癌MCF-7细胞的潜在靶点。     

Claudin-1在TNF-α诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡中的调控作用

目的旨在探讨claudin-1在TNF-α诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡中的调控作用。方法应用梯度浓度的TNF-α处理MCF-7,用TUNELassay检测肿瘤细胞凋亡,通过Westernblot检测凋亡相关指标ADP核糖聚合酶(PARP)和caspase-8裂解产物的变化以寻找诱导凋亡的合适处理浓度,同时检测claudin-1,-4,-7的表达变化。在对照组和TNF-α处理组中分别敲除claudin-1,通过TUNELassay检测敲除claudin-1对凋亡的影响,并通过Westernblot检测凋亡相关因子的表达变化,同时应用免疫荧光,观察TNF-α及敲除claudin-1处理后,对Wnt信号通路相关蛋白β-catenin和E-cadherin定位的影响。通过核浆分离实验,检测胞核及胞浆中β-catenin和E-cadherin的表达情况,同时检测β-catenin下游基因cyclinD1的表达变化。结果 TNF-α在诱导凋亡的同时,可以上调claudin-1的表达,而对claudin-4,claudin-7的表达无影响。在对照组和TNF-α处理组中分别敲除claudin-1后,均导致凋亡增加,并且caspase-8及PARP裂解产物的数目也明显增多。另外,TNF-α处理后,可以激活Wnt信号通路,导致β-catenin的胞核表达。而敲除claudin-1可以稳定β-catenin的膜定位,抑制由TNF-α激活的Wnt通路,下调cyclinD1,诱发凋亡。结论 claudin-1在TNF-α诱导的乳腺癌的凋亡中起抑制作用。     

选择性环氧合酶2抑制剂塞来昔布对人子宫内膜癌细胞的凋亡诱导

目的 研究环氧合酶2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布诱导人子宫内膜癌细胞凋亡作用.方法 体外培养的人子宫内膜癌细胞HEC-1-B经塞来昔布处理后,采用Giemsa染色、流式细胞术和DNA Ladder观察HEC-1-B细胞凋亡变化;通过半定量RT-PCR方法检测HEC-1-B细胞COX-2及凋亡相关基因Fas、survivin的表达.结果 20 μmol/L塞来昔布处理HEC-1-B细胞后,Giemsa染色即可见细胞核固缩、碎裂,出现凋亡小体等细胞凋亡形态变化;流式细胞学检测示50 μmol/L塞来昔布可使HEC-1-B细胞凋亡率达46.9%,PI荧光直方图出现凋亡细胞峰,DNA电泳可见典型的细胞凋亡梯形条带.塞来昔布处理HEC-1-B细胞后,COX-2 mRNA表达下降,细胞凋亡相关基因Fas表达增加,细胞凋亡抑制基因surviyin表达下降,50 μmol/L塞来昔布可使survivin表达难以检出.结论 塞来昔布对HEC-1-B细胞有明显的凋亡诱导作用,通过抑制COX-2表达进而使Fas表达上调,survivin表达下调可能是其诱导细胞凋亡机制之一.     

选择性环氧合酶2抑制剂塞来昔布对人子宫内膜癌细胞的凋亡诱导

Objective To investigate the apoptosis- inductive effects of celecoxib, a selective inhibitor of cyclooxygenase-2 (COX-2), on human endometrial carcinoma cells. Methods After treating human endometrial carcinoma cell HEC-1-B with celecoxib in vitro, apoptosis of HEC-1-B cells was observed by Giemsa staining, flow cytometry and DNA ladder. Semi-quantitative RT-PCR was used to test the expression of COX-2, apoptosis-related Fas and survivin in HEC-1-B. Results Apoptotic morphological changes such as karyopyknosis, nuclear fragmentation and appearance of apoptotic bodies were noted by Giemsa staining after treating HEC-1-B cells with 20 μmol/L celecoxib. Flow cytometry analysis indicated apoptotic rate of HEC-1-B cells was as high as 46.9% after treated with 50 μmol/L celecoxib. Apoptotic peak was found in PI fluorescence histogram. Genome DNA electrophoresis further confirmed the formation of typical apoptotic DNA ladder. After HEC-1-B cells treated with celecoxib, the expression of COX-2 mRNA and apoptosis- related suppressor gene survivin declined, and expression of apoptosis- related gene Fas increased. 50 μmol/L celecoxib impeded detection of survivin expression. Conclusions Celecoxib induces apoptosis of HEC- 1B cells. By inhibiting COX-2 activity, the expression of Fas increases and survivin expression decreases, which may be one of the mechanisms of apoptosis induction.     

阿霉素联合塞来昔布诱导胃癌细胞凋亡的作用研究

目的:研究环氧化酶-2 (COX-2) 抑制剂塞来昔布联合阿霉素对胃癌MGC-803细胞株的凋亡诱导作用，并探讨其相互作用的可能的分子机制。方法:用MTT法检测MGC-803的增殖情况。用荧光显微镜、流式细胞术和DNA梯度电泳检测肿瘤细胞凋亡的情况。结果:随着阿霉素剂量的增加，MGC-803细胞的数量明显减少。细胞大部分静止于G₀/G₁期，S期细胞明显减少。 阿霉素（5 mg/L）联合塞来昔布（25 μmol/L）明显抑制MGC-803细胞的生长。肿瘤细胞经阿霉素或塞来昔布处理后荧光显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态变化。与两者单独用药相比，联合用药后的DNA梯度变化更为明显。联合用药 48 h 后MGC-803细胞堆积在G₀/G₁，而S期减少的细胞数量比两者分别用药时更为显著。结论：塞来昔布和阿霉素具有协调的诱导凋亡的作用，这对于将COX-2抑制剂用于肿瘤的临床辅助化疗具有重要意义。     

蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的影响

目的：研究蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响，为天然药物蛴螬的开发提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性；通过倒置显微镜、HE染色、吖碇橙（AO）/溴化乙啶（EB）荧光染色方法观察肿瘤细胞的形态学改变；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化；应用免疫细胞化学技术（S-P法）检测用药前后凋亡通路中Bcl-2、Fas、caspase-9、caspase-3的表达改变，探讨蛴螬提取物对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明，蛴螬提取物在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株有明显的抑制增殖作用，实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异（P<0.01），而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性；(2)倒置显微镜观察表明，实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化；(3)HE染色表明实验组胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色、核染色质浓缩、呈碎块状，有凋亡小体形成；(4)经AO／EB荧光染色观察结果表明，实验组出现凋亡细胞；(5)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加，呈时间依赖性；(6)免疫细胞化学染色结果表明，实验组 Bcl-2表达下调，Fas、caspase-3、caspase-9表达均上调，与对照组比差异显著（P<0.01）。结论:①蛴螬提取物在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖；②蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过下调Bcl-2，上调Fas、caspase-3 、caspase-9的蛋白表达而起作用，是经由细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径来完成凋亡的启动和执行。     

碱性螺旋-环-螺旋转录因子DEC2在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用

目的探讨DEC2(Differentiated embryonic chondrocyte express gene2,又称BHLHE41或Sharp1)在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用,及其在他莫昔芬(Tamoxifen)药物抵抗中的意义。方法应用siRNA下调内源性DEC2后,通过TUNEL assay和Hoechst33258染色,观察肿瘤细胞的凋亡有无明显改变,并通过Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关因子(Fas,caspase-8,ADP核糖聚合酶(PARP)和(Bax)在mRNA和蛋白水平的改变。应用Tamoxifen处理MCF-7,寻找诱导凋亡的合适处理浓度,并观察DEC2的表达变化。联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理MCF-7,通过Western blot检测凋亡相关因子的表达变化。结果通过siRNA下调内源性DEC2后,凋亡相关因子(Fas和Bax)以及caspase-8和PARP的裂解产物均显著上调,并促进肿瘤细胞的凋亡。Tamoxifen可以上调DEC2的表达,联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理与单一使用DEC2siRNA处理MCF-7相比,PARP和caspase-8的裂解产物明显上调,同时明显促进凋亡。相反,联合应用Tamoxifen与DEC2过表达质粒处理MCF-7后,PARP和caspase-8的裂解产物明显下调,同时明显抑制凋亡。结论 DEC2具有抑制乳腺癌细胞凋亡的作用,并能抑制由Tamoxifen诱导的乳腺癌细胞MCF-7的凋亡。     

青蒿琥酯对乳腺癌MCF-7细胞抗失巢凋亡的影响

目的：探讨青蒿琥酯对乳腺癌细胞抗失巢凋亡的影响。 方法： 采用不同浓度的青蒿琥酯处理乳腺癌MCF-7细胞，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)法检测乳腺癌细胞抗失巢凋亡，采用软琼脂集落形成试验检测细胞的生长增殖。 结果： 青蒿琥酯能有效地抑制乳腺癌MCF-7细胞锚着不依赖性增殖，且呈浓度依赖性。乳腺癌细胞经青蒿琥酯处理后，可促进失巢凋亡，且与时间和浓度相关。 结论： 青蒿琥酯可有效地抑制乳腺癌细胞锚着不依赖性增殖，其机制可能与促进失巢凋亡有关。     

CISD2在乳腺癌组织中的表达及其对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的影响

目的检测CDGSH铁硫结构域2 (CDGSH iron sulfur domain 2, CISD2)在乳腺癌组织中的表达及其对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的影响。方法选取46乳腺癌组织及10例对应的癌旁正常组织,免疫组织化学方法与Western blot方法检测乳腺癌和癌旁组织中CISD2蛋白的表达。应用化学合成小干扰RNA技术沉默人乳腺癌MCF-7细胞中CISD2基因的表达,Western blot实验验证基因沉默效率。采用CCK-8和克隆形成实验检测转染后MCF-7细胞的增殖和侵袭情况。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中CISD2蛋白表达的平均光密度值明显上调, siRNA能够明显抑制人乳腺癌MCF-7细胞CISD2的表达。CISD2基因沉默后,人乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力和侵袭能力显著降低,P0.01。结论 CISD2可能是治疗乳腺癌的潜在靶点。     

cyclin G2在乳腺病变组织中表达及其对MCF-7细胞的作用

目的 研究细胞周期蛋白G2(cyclin G2)在乳腺病变中的表达及意义,探讨cyclin G2对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响.方法 用免疫组化SP法检测cyclin G2在人乳腺不同病变中的蛋白表达,并进行显微图像分析;利用阳离子介导的脂质体法转染pDsRed2-cyclin G2融合基因至人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中,流式细胞术检测MCF-7细胞的凋亡率.结果 (1)cyclin G2在乳腺增生症中的阳性表达率及表达强度与正常乳腺组织相当,而在导管原位癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)以及浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中表达逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05).(2)转染了重组质粒pDsRed2-cyclin G2的MCF-7细胞凋亡率明显增高(P<0.01).结论 cyclin G2蛋白表达随着乳腺疾病恶性程度增加而降低,外源性转染cyclin G2至MCF-7细胞中可促进其凋亡,抑制细胞增殖.     

阿司匹林对血小板诱导的乳腺癌MCF-7细胞上皮间质转化和迁移侵袭能力的影响

目的　探讨阿司匹林对血小板诱导人乳腺癌MCF-7细胞（MCF-7humanbreast cancercells）上皮间质转化和迁移侵袭能力的影响。 方法　以未经干预的MCF-7细胞为对照组,分别用不同浓度（0.5、2.0 mmol/L）的阿司匹林、花生四烯酸激活的血小板及不同浓度阿司匹林预处理花生四烯酸激活的血小板分别干预MCF-7细胞,采用细胞划痕及Transwell实验检测肿瘤细胞迁移侵袭能力的变化。Western Blot检测肿瘤细胞上皮间质转化标记蛋白E-cadherin及Vimentin的表达。 结果　活化的血小板处理后与对照组相比MCF-7细胞迁移侵袭能力显著增强（P<0.05）,Western Blot显示E-cadherin表达显著减少（P<0.01）,Vimentin的表达显著增加（P<0.01）。阿司匹林预处理血小板活化后干预MCF-7细胞,其迁移侵袭能力较活化血小板组显著降低（P<0.05）,E-cadherin表达显著增高（P<0.01）,Vimentin的表达显著减少（P<0.05）。阿司匹林单独处理后的MCF-7细胞迁移及侵袭能力较对照组无显著变化(P>0.05),E-cadherin及Vimentin的表达亦无显著改变(P>0.05)。 结论　体外实验结果表明,阿司匹林可通过抗血小板活化,抑制血小板诱导的乳腺癌MCF-7细胞上皮间质转化和迁移侵袭能力。     

SHP-1对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭的影响及机制初步探讨

目的探讨SHP-1对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响。方法 MCF-7细胞株分别瞬时转染SHP-1的特异性siRNA干扰序列;然后分别通过RT-PCR和Western-blot检测MCF-7细胞干扰前后SHP-1基因和蛋白表达变化,并通过RT-PCR检测干扰前后MMP-9基因变化;通过Transwell小室实验检测干扰SHP-1对细胞侵袭能力的影响。结果 RT-PCR和Western-blot证实SHP-1在人乳腺癌细胞株MCF-7中有表达以及SHP-1SiRNA的干扰效率;干扰SHP-1后,MMP-9的表达量上调;Transwell小室实验证实,与MCF-7阴性干扰对照及空白对照细胞相比,siRNA组的侵袭能力显著增强（P〈0.001）。结论乳腺癌MCF-7中SHP-1的表达水平高低和该细胞侵袭能力高低呈负相关,其侵袭可能和MMP-9的表达呈正相关。