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相似文献
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1.
目的:应用PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术,分析20对不同龋状况母子口腔唾液中微生物群落组成的多样性。方法:分别采集20名不同龋状况儿童及母亲的唾液样本,提取细菌总DNA,进行16SrDNA的PCR扩增及DGGE,克隆测序分析。结果:母子口腔唾液中分别检出42、48个菌种,其共同菌种为37个,归属于16个菌属,同时,检出新菌种Megasphaeraspp.,且在无龋儿童及高龋母亲唾液中分别检出Abiotrophiaspp.和Olsenellaspp.两个特异菌属。无龋组母子唾液中嗜血菌属的相对数量显著高于高龋组(P〈0.001);无龋儿童携带的放线菌属相对数量也多于高龋组(P〈0.001);而链球菌属,奈瑟菌属低于高龋组(P〈0.001),而高龋组母亲口腔微生物中相对数量最多的为乳杆菌属,其次为放线菌属,奈瑟菌属,与无龋组比较差异显著(P〈0.001)。结论:母子口腔唾液菌群组成具有多样性,且随龋状况不同而有所差异。  相似文献   

2.
 目的    用16S rDNA测序技术,探讨不同龋患程度儿童乳牙龈上菌斑微生物多样性及差异。方法    选择3岁龄儿童为研究对象,高龋组(dmft ≥ 5)和无龋组(dmft = 0)各12名,采集光滑面龈上菌斑,基于Ion S5TMXL平台(Thermo Fisher,美国)进行16S V4区域测序并对比分析。结果    通过与SILVA132数据库比对,可注释到14个菌门、21个菌纲、53个菌目、93个菌科、150个菌属、159个菌种。Alpha多样性分析提示高龋组物种丰富度和均匀度低于无龋组。Beta多样性分析显示高龋和无龋样本群落结构相似,组间无显著分离。两组中,优势菌门为放线菌门、变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、梭杆菌门等;优势菌属为放线菌属、棒状杆菌属、奈瑟菌属、罗氏菌属、链球菌属、二氧化碳嗜纤维菌属等。LEfSe分析显示,高龋组显著丰富的微生物菌群有罗氏菌属、嗜血杆菌属、金氏菌属、龋齿罗氏菌、奈瑟杆菌等(P < 0.05);无龋组显著丰富的微生物菌群有梭杆菌门、纤毛菌属、Leptotrichia_sp_oral_clone_IK040、颗粒二氧化碳嗜纤维菌等(P < 0.05)。变形链球菌的相对丰度在两组之间不存在显著差异(P > 0.05)。远缘链球菌仅在高龋组中被检出。此外,两组微生物样本中均存在低丰度的未曾定义新物种。PICRUSt分析显示,高龋组的微生物物质代谢与能量代谢等较无龋组更为丰富。结论    3岁儿童乳牙龈上菌斑微生物群落呈现多样性,不同龋患程度儿童口腔微生物群落在不同分类和功能水平上呈现显著差异,为乳牙龋的微生物因素研究提供了新数据。  相似文献   

3.
目的    用16S rDNA测序技术,探讨不同龋患程度儿童乳牙龈上菌斑微生物多样性及差异。方法    选择3岁龄儿童为研究对象,高龋组(dmft ≥ 5)和无龋组(dmft = 0)各12名,采集光滑面龈上菌斑,基于Ion S5TMXL平台(Thermo Fisher,美国)进行16S V4区域测序并对比分析。结果    通过与SILVA132数据库比对,可注释到14个菌门、21个菌纲、53个菌目、93个菌科、150个菌属、159个菌种。Alpha多样性分析提示高龋组物种丰富度和均匀度低于无龋组。Beta多样性分析显示高龋和无龋样本群落结构相似,组间无显著分离。两组中,优势菌门为放线菌门、变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、梭杆菌门等;优势菌属为放线菌属、棒状杆菌属、奈瑟菌属、罗氏菌属、链球菌属、二氧化碳嗜纤维菌属等。LEfSe分析显示,高龋组显著丰富的微生物菌群有罗氏菌属、嗜血杆菌属、金氏菌属、龋齿罗氏菌、奈瑟杆菌等(P < 0.05);无龋组显著丰富的微生物菌群有梭杆菌门、纤毛菌属、Leptotrichia_sp_oral_clone_IK040、颗粒二氧化碳嗜纤维菌等(P < 0.05)。变形链球菌的相对丰度在两组之间不存在显著差异(P > 0.05)。远缘链球菌仅在高龋组中被检出。此外,两组微生物样本中均存在低丰度的未曾定义新物种。PICRUSt分析显示,高龋组的微生物物质代谢与能量代谢等较无龋组更为丰富。结论    3岁儿童乳牙龈上菌斑微生物群落呈现多样性,不同龋患程度儿童口腔微生物群落在不同分类和功能水平上呈现显著差异,为乳牙龋的微生物因素研究提供了新数据。  相似文献   

4.
目的:通过宏基因组学方法结合Pacbio SMRT高通量测序技术探究孤独症谱系障碍(ASD)儿童中口腔健康和罹患龋齿者的唾液微生物菌群的组成及其差异。方法:收集42名ASD儿童唾液样本,其中无龋组22名,高龋组20名,提取DNA进行聚合酶链式反应扩增,利用PacBio SMRT高通量测序技术对16S rRNA全长进行测序,进行口腔菌群结构和组成的分析比较。结果:两组间唾液菌群结构差异有统计学意义(P<0.05),且高龋组的菌落结构更为相似和保守(P<0.05)。在种水平上,无龋组高表达有伯杰氏杆菌、南锡普氏菌、金黄色葡萄球菌三个健康相关微生物(P<0.05),高龋组高表达有变形链球菌、口普氏菌、浑浊戴阿利斯特杆菌、具核梭杆菌四个龋病相关微生物(P<0.05)。结论:ASD儿童的龋齿唾液菌群有整体菌群结构和特定物种组成的改变,为ASD儿童的龋齿预防和诊断提供新策略。  相似文献   

5.
目的探究涎腺导管结石患者是否存在导管内或口腔菌群失调,探讨细菌与涎石病发生的相关性。方法收集20例涎腺导管结石(1例腮腺结石,19例下颌下腺结石)患者的导管结石样本、导管内唾液及口腔内唾液样本作为实验组,收集20例健康志愿者导管内唾液及口腔内唾液样本作为对照组。提取样品的细菌DNA采用酶链聚合反应进行扩增。采用Roche高通量454焦磷酸测序技术对细菌16S rRNA V1~V3可变区的PCR扩增子进行测序,进一步利用生物信息学分析方法对测序数据进行挖掘,明确样本中细菌组分、群落结构,比较实验组与对照组间差异性。结果成功对唾液及结石样本进行了DNA测序分析,样本稀疏曲线显示测序深度充分,测序覆盖深度(Coverage指数)满足实验要求。实验组与对照组的导管内唾液及口腔内菌群的生物多样性无差异,结石样本与导管内菌群生物多样性无差异(P>0.05)。唾液腺导管内菌群的生物多样性指标香农指数、Chao指数、ACE指数均大于口腔内菌群(P<0.05)。导管内菌群结构比较显示:细菌门水平,梭杆菌门在实验组中显著高于对照组(P<0.05);细菌属水平,普氏菌属、卟啉单胞菌属及奈瑟氏菌属在实验组中均显著减少(P<0.05)。口腔内菌群结构比较显示:在细菌门水平,变形菌门在实验组中显著高于对照组(P<0.05);细菌属水平,普氏菌属、链球菌属及韦永氏球菌属在实验组中均显著低于对照组(P<0.05)。结论结石样本中的微生物菌群结构及多样性与唾液腺导管内相似,唾液腺导管内微生物多样性显著高于口腔内。涎石病患者与健康对照人群的口腔及唾液腺导管微生物群落结构存在显著差异。涎石病患者的口腔及唾液腺导管内存在菌群失调情况。  相似文献   

6.
目的通过高通量测序技术研究重症低龄儿童龋病和健康者唾液的菌群结构及其差异。方法 在青岛市崂山区儿童中,经口腔检查选取健康(H组)和重症低龄龋病(C组)儿童各24名,采取唾液样本,提取其DNA进行聚合酶链式反应扩增,利用454测序平台对16S rRNA V1—V3区进行双端测序,对细菌群落结构及多样性进行差异分析。结果 C组唾液菌群物种丰度高于H组(P<0.05),两组唾液菌群结构的差异有统计学意义(P<0.01),且C组的群落结构更为相似和保守(P<0.001);鉴别出C组高表达的可疑致龋微生物(P<0.1)及H组高表达的健康相关微生物(P<0.1);基于唾液菌属图谱建立的龋病风险评估模型区分健康和龋病者的准确率可高达70%以上。结论 唾液菌群和特定细菌种类,如比例升高的Prevotella菌属有助于评估和筛选低龄儿童龋病风险。  相似文献   

7.
目的 探讨涎腺腺样囊性癌(SACC)患者口腔微生物的多样性和群落差异。方法 采集13例SACC患者与10例健康人的唾液样本,提取其口腔菌群的总DNA,经通用引物扩增16s rRNA基因,利用高通量测序平台进行细菌16S rRNA基因(V3-V4)区高通量测序分析后,利用Mothur软件分析微生物的多样性和群落结构。结果 SACC组优势种群有16种(相对丰度>1%),依次是:链球菌属(36.68%),奈瑟菌属(8.55%),普雷沃菌属_7(7.53%),韦荣球菌属(6.37%)等。对照组优势种群有15种,依次有:链球菌属(18.41%),奈瑟菌属(18.20%),普雷沃菌属_7(8.89%),卟啉单胞菌属(6.20%),梭杆菌属(5.86%),韦荣球菌属(5.82%)等。2组间有统计学差异的菌门包括厚壁菌门、变形菌门、梭杆菌门(P<0.05)。有统计学差异的菌属包括链球菌属、奈瑟菌属和卟啉单胞菌属(P<0.05),而嗜二氧化碳噬细胞菌属仅在SACC患者中检出。结论 SACC患者的唾液微生物与健康人群唾液微生物的种群结构存在明显差异。  相似文献   

8.
目的 探讨涎腺腺样囊性癌(SACC)患者口腔微生物的多样性和群落差异。方法 采集13例SACC患者与10例健康人的唾液样本,提取其口腔菌群的总DNA,经通用引物扩增16s rRNA基因,利用高通量测序平台进行细菌16S rRNA基因(V3-V4)区高通量测序分析后,利用Mothur软件分析微生物的多样性和群落结构。结果 SACC组优势种群有16种(相对丰度>1%),依次是:链球菌属(36.68%),奈瑟菌属(8.55%),普雷沃菌属_7(7.53%),韦荣球菌属(6.37%)等。对照组优势种群有15种,依次有:链球菌属(18.41%),奈瑟菌属(18.20%),普雷沃菌属_7(8.89%),卟啉单胞菌属(6.20%),梭杆菌属(5.86%),韦荣球菌属(5.82%)等。2组间有统计学差异的菌门包括厚壁菌门、变形菌门、梭杆菌门(P<0.05)。有统计学差异的菌属包括链球菌属、奈瑟菌属和卟啉单胞菌属(P<0.05),而嗜二氧化碳噬细胞菌属仅在SACC患者中检出。结论 SACC患者的唾液微生物与健康人群唾液微生物的种群结构存在明显差异。  相似文献   

9.
目的:通过16S rRNA高通量测序研究有龋和无龋者唾液的微生物群落结构及其差异。方法:在甘肃省康乐县景古镇居民口腔检查中随机选取14位汉族居民,其中,7例有龋(caries-active, CA组,DMFT≥4)、7例无龋(caries-free,CF组)。采取唾液样本,提DNA,PCR扩增,利用Illumina Miseq测序平台对16S rRNA V4区进行双端测序;利用Mothur、MEGAN4、Cluster 3.0和Java Treeview等软件进行细菌群落结构及多样性的差异分析。结果:共得到118151条优质序列,发现5738个OTUs,2795个物种,归属27个门,218个属。CA组和CF组唾液微生物群落结构有差异,其中,门水平上,Firmicutes和SR1在CA组显著低于CF组(P<0.05)。属水平上, Rothia、 Alistipes和Catonella 在CA组显著低于CF组(P<0.05),Scardovia在CA组显著高于CF组(P<0.05);CA组和CF组OTUs分别为(550.2±26.48),(597.4±66.07),CA组和CF组Simpson多样性指数分别为(0.73±0.03),(0.49±0.01),均无统计学差异。结论:人类口腔唾液有复杂的微生物群落结构;在门水平和属水平上,有龋者的微生物种类较无龋者稍有减少;Firmicutes和SR1菌门,Rothia、Alistipes和Catonella 菌属的存在与龋病呈负相关;相反地,Scardovia等菌属的存在与龋病呈正相关。  相似文献   

10.
目的: 探讨不同龋病状况患者龈上菌斑及龋损组织微生物的组成特点及多样性差异。方法: 随机双盲法选择2019年1月—12月于西安医学院第一附属医院口腔科确诊的龋病患者33例(轻度、中度、重度各11例),无龋病健康者10例。收集龈上牙菌斑和龋损组织,采用细菌DNA测序方法对细菌16S rRNA-cDNA高可变区进行测序,比较各组微生态种属和相对丰度。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 与无龋组相比,龋病组龈上菌斑、龋损组织中微生物含量和丰富度均显著降低(P<0.05)。轻、中、重度组患者龋损组织微生物主要为拟杆菌门、螺旋体门、变形菌门、梭杆菌门、厚壁菌门、放线菌门,各组菌属比例有显著差异(P<0.05)。轻、中、重度组患者龈上菌斑微生物主要有21种,其中,梭杆菌、科里亚细菌、奈瑟菌目、放线菌目、乳杆菌目占比高,其他均小于1%,各组5种菌属比例无显著差异(P>0.05)。结论: 龋病的发生由多菌种所致,且为多种细菌的共同作用。不同龋病状况患者龈上菌斑及龋损组织微生物丰度有显著差异,随着龋病的发生,微生物的多样性下降。  相似文献   

11.
目的:16S rRNA高通量测序技术分析口腔健康儿童与成人唾液微生物多样性的差异。方法:选择11位受检者(5例口腔健康成人(AJ组),6例口腔健康儿童(CJ组))的唾液样本进行细菌DNA提取,后利用Illumina MiSeq测序平台对11例样本DNA的16S rRNA V4-V5区进行测序,并分析两组唾液样本间菌群多样性。结果:11个样本总获得 474119 条序列,共9223OTUs,归属于26个门,374个属;PcoA检测显示两组微生物群落结构有明显差异;T-检验显示两组间差异菌属为:纤毛菌属(Leptotrichia)、卟啉单胞菌属(Porphyromona)、密螺旋体属(Treponema)、孪生球菌属(Gemella)、颗粒链菌属(Granulicatella);其中,卟啉单胞菌属、密螺旋体属、纤毛菌属在AJ组的相对丰度高于CJ组,孪生球菌属、颗粒链菌属在CJ组相对丰度高于AJ组。结论:健康成人与健康儿童口腔唾液微生物群落结构在种类上相似,而在丰度上存在差异,差异提示:健康成人较健康儿童更倾向患牙周病;健康儿童较健康成人更倾向于患龋病。  相似文献   

12.
不同龋敏感青少年口腔细菌多样性分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 通过聚合酶链反应(PCR)-变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析无龋及高龋青少年的唾液细菌多样性的差异。方法 随机选择20名12~18岁青少年分为无龋组(n=10)和高龋组(n=10),收集其非刺激性唾液,提取细菌全基因组DNA,采用通用引物进行PCR扩增,采用Quantity One软件对扩增产物DGGE指纹图谱进行分析。结果 DGGE图谱分析表明:唾液细菌的组成具有个体差异性;唾液样本中检测到的条带数无龋组为32.5±3.7,高龋组为27.3±3.4,差异有统计学意义(P=0.008)。高龋组和无龋组的Shannon-Wiener’s指数分别为2.5±0.2和2.6±0.2,二者之间的差异无统计学意义(P=0.405)。聚类分析发现,同组内大部分样本聚类位置相近,群落结构表现出较高的相似性;不同组的大部分样本未聚类在一起,群落结构呈现出一定的差异。结论 无龋青少年唾液细菌的多样性显著高于高龋青少年,唾液细菌的多样性在龋病发展过程中有减少的趋势。  相似文献   

13.
目的: 讨论汉族人群中高龋和无龋人群口腔唾液微生物结构的差异。方法: 采集符合WHO采样标准的唾液样本6例,其中高龋组(CA组)3例,无龋组(CF组)3例,提取细菌总DNA,构建16S rRNA克隆文库,挑取阳性克隆子进行测序,并用MOTHUR等软件对结果进行分析,MEGA4.0软件构建系统发育树。结果: 共获得80个OTUs,归属于5个门,9个纲,10个目,14个科,19个属,其中有13个优势属;CA组优势属为:链球菌属(53.16%)、普氏菌属(28.77%)、颗粒链球菌属(9.34%);CF组优势菌为:链球菌属(46.12%)、普氏菌属(23.41%)、奈瑟菌属(14.35%)。结论: 16S rRNA克隆文库法已成熟,可用于口腔微生物群落结构的研究,当地汉族人群中高龋和无龋人群口腔微生物群落结构存在一定的差异,高龋组中优势菌(链球菌属、普氏菌属、颗粒链球菌属)对龋病发生发展的作用还有待进一步的研究。  相似文献   

14.
本文以33名18~33岁青年人(无龋组、冠龋组)和52名47~74岁中、老年人(无龋组、冠龋组、根龋组)为检测对象,对唾液内主要致龋菌(变链菌、放线菌、乳杆菌)及免疫活性物质(SIgA、IgG、IgA、IgM、C3和C4)进行了测定。结果表明,龋患者唾液内变链菌(MS、20%蔗糖)计数显著高于无龋者,而放线菌(CFAT)、乳杆菌(Rogosa)在两者之间无显著差异。龋患者唾液SIgA高于无龋者,且在青年人中存在显著差异。中老年龋患者IgG和IgM显著增高,可能与代偿平衡有关。  相似文献   

15.
目的: 探讨南京市1~6岁儿童口腔微生物与肠道菌群的构成差异。方法: 选择860名符合纳入标准的1~6岁儿童,采集唾液和粪便标本各860份,采用PCR扩增和高通量测序,对细菌的遗传物质进行分析,对结果进行生物信息学分析,比较口腔和肠道微生物菌群的构成差异。采用SPSS 20.0软件包对结果进行统计学分析。结果: 在门水平上,口腔中占比超过10%的微生物包括拟杆菌门(39.98%)、变形菌门(25.32%)和厚壁菌门(21.78%);而在肠道微生物中,占比超过10%的菌种为厚壁菌门(45.21%)和拟杆菌门(37.21%)。在属水平上,口腔中排名前三位的微生物分别为普雷沃菌属(26.11%)、奈瑟菌属(12.39%)和卟啉单胞菌(10.13%)。肠道微生物中,占比最高的为拟杆菌属(20.11%),其次为普雷沃菌属(9.13%)和栖粪杆菌属(5.13%)。口腔和肠道微生物多样性存在显著的α和β差异。结论: 拟杆菌门和变形菌门在口腔中占比较高,而厚壁菌门和拟杆菌门在肠道中占比较高。口腔和肠道微生物在构成种属和丰度上存在显著差异。  相似文献   

16.
本文以33名18 ̄33岁青年人(无龋组、冠龋组)和52名47 ̄74岁中、老年人(无龋组、冠龋组、根龋组)为检测对象,对唾液内主要致龋菌(变链菌、放线菌、乳杆菌)及免疫活性物质(SIgA、IgA、IgM、C3和C4)进行了测定。结果表明,龋患者液内变链菌(MS、20%蔗糖)计数显著高于无龋者,而放线菌(CFAT)、乳杆菌(Rogosa)在两者之间无显著差异。龋患者唾液SIgA高于无龋者,且在青年人中  相似文献   

17.
目的 从微生物角度探究重度低龄儿童龋(severe early childhood caries,S-ECC)患儿一次完成龋病治疗前、治疗后3个月内菌斑微生物群落构成和多样性的变化及治疗对于远期无龋状态维持的作用。方法S-ECC患儿在全身麻醉下一次完成龋病治疗,采集治疗前(C)、术后7 d(C-7D)、1个月(C-1M)、3个月(C-3M)无龋牙面集合菌斑,并纳入无龋儿童(CF)为对照组,分析治疗前后菌斑微生物群落短期内的动态改建过程。结果 S-ECC组和CF组菌斑群落组成高度相似;组间α多样性指数差异无统计学意义(P>0.05);从相对丰度值分析,纤毛菌属、聚集杆菌属等在治疗后较术前下降(P<0.05),C-7D组血链球菌较C组上升并在3个月内逐渐下降;治疗前韦荣菌属、放线菌属、拟普雷沃菌属、二氧化碳嗜纤维菌属、变异链球菌在C组和CF组间存在显著差异(P<0.05),其中变异链球菌经治疗后的C-7D、C-1M组与CF组未存在显著差异,而C-3M组较CF组出现上升(P<0.01)。结论 S-ECC患儿在接受治疗后菌群结构的迅速改变,并在治疗后1~3个月逐渐开始建...  相似文献   

18.
龋患者唾液流率和无机成份测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文以33名18-33岁青年人(无龋组,冠龋组)和52名47-74岁中,老年人(无龋组,冠龋组,根龋组)为检测对象,分析无龋者和龋患者(冠龋,根龋)之间口腔卫生唾液流率及无机成分含量的差别,结果表明,无龋者唾液高于龋患者(冠龋,根龋)但无显著性差异;龋患者OHIs高于无龋者,但仅在青年人员有非常显著性差异,中老年人根龋组的唾液钙含量显著高于无龋线,除此之外,龋患者唾液无机成分含量并不低于无龋者,可  相似文献   

19.
目的建立检测内氏放线菌(Actinomyces naeslundii,An)与龋齿放线菌(Actinomyces odontolyticus,Ao)的实时荧光定量PCR(RT-PCR)。方法探讨An和Ao在唾液中的定植数量与乳牙龋失补牙面指数(dmfs)的关系。方法分别采集59名不同患龋状况儿童唾液样本,其中无龋组(dmfs=0)19名、中龋组(dmfs=4~6)21名和高龋组(dmfs﹥8)19名。提取细菌总基因组DNA,应用SYBR GreenⅡ模式的实时荧光定量PCR技术,对唾液中的内氏放线菌及龋齿放线菌进行定量检测,所得数据应用SAS9.2统计软件进行统计学分析。结果内氏放线菌占总菌的比例在三组中有显著差异(P〈0.05),在高龋组中显著高于中龋组(P〈0.0001),在中龋组与无龋组间无显著差异(P〉0.05);龋齿放线菌占总菌的比例在三组中无显著差异(P〉0.05)。结论儿童唾液中内氏放线菌的数量与龋病的发生发展过程有明显相关性;龋齿放线菌与儿童龋病的发生发展无明显相关性。  相似文献   

20.
目的 研究实验室培养对口腔唾液菌群结构及其多样性的影响。方法 本实验选取6个健康且符合纳入排除标准的志愿者,采集口腔唾液菌群样本并进行实验室培养。基于Illumina Hiseq测序平台,我们利用16S rDNA高通量测序技术,研究实验室培养对人体口腔唾液细菌的影响,分析了培养前后的菌群物种丰度和菌群结构差异。结果 高通量测序一共得到618个OTUs,测序分析显示人体口腔唾液菌群在实验室培养前后,菌群生物多样性的差异无统计学意义(P>0.05),菌群构成的差异无统计学意义(P>0.05)。OTUs Venn图显示实验室培养前后,人体口腔唾液菌群拥有大约78.4%相同物种。结论 16S rDNA高通量测序分析显示,人体口腔唾液菌群在实验室培养前后具有相似性。  相似文献   

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